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ANÁLISES BROMATOLÓGICAS PROF.A DRA. ANA PAULA MARGIOTO TESTON Reitor: Prof. Me. Ricardo Benedito de Oliveira Pró-reitor: Prof. Me. Ney Stival Gestão Educacional: Prof.a Ma. Daniela Ferreira Correa PRODUÇÃO DE MATERIAIS Diagramação: Alan Michel Bariani Thiago Bruno Peraro Revisão Textual: Felipe Veiga da Fonseca Letícia Toniete Izeppe Bisconcim Luana Ramos Rocha Produção Audiovisual: Eudes Wilter Pitta Paião Márcio Alexandre Júnior Lara Marcus Vinicius Pellegrini Osmar da Conceição Calisto Gestão de Produção: Kamila Ayumi Costa Yoshimura Fotos: Shutterstock © Direitos reservados à UNINGÁ - Reprodução Proibida. - Rodovia PR 317 (Av. Morangueira), n° 6114 Prezado (a) Acadêmico (a), bem-vindo (a) à UNINGÁ – Centro Universitário Ingá. Primeiramente, deixo uma frase de Só- crates para reflexão: “a vida sem desafios não vale a pena ser vivida.” Cada um de nós tem uma grande res- ponsabilidade sobre as escolhas que fazemos, e essas nos guiarão por toda a vida acadêmica e profissional, refletindo diretamente em nossa vida pessoal e em nossas relações com a socie- dade. Hoje em dia, essa sociedade é exigente e busca por tecnologia, informação e conheci- mento advindos de profissionais que possuam novas habilidades para liderança e sobrevivên- cia no mercado de trabalho. De fato, a tecnologia e a comunicação têm nos aproximado cada vez mais de pessoas, diminuindo distâncias, rompendo fronteiras e nos proporcionando momentos inesquecíveis. Assim, a UNINGÁ se dispõe, através do Ensino a Distância, a proporcionar um ensino de quali- dade, capaz de formar cidadãos integrantes de uma sociedade justa, preparados para o mer- cado de trabalho, como planejadores e líderes atuantes. Que esta nova caminhada lhes traga muita experiência, conhecimento e sucesso. Prof. Me. Ricardo Benedito de Oliveira REITOR 33WWW.UNINGA.BR UNIDADE 01 SUMÁRIO DA UNIDADE INTRODUÇÃO ............................................................................................................................................................. 5 1 - DEFINIÇÃO ............................................................................................................................................................ 6 1.1. DEFINIÇÕES EM ALIMENTOS ........................................................................................................................... 6 1.1.1. ALIMENTO ......................................................................................................................................................... 6 1.1.2. ALIMENTO SIMPLES ....................................................................................................................................... 6 1.1.3. METABÓLITOS .................................................................................................................................................. 6 1.1.4. ALIMENTO COMPOSTO ..................................................................................................................................7 1.1.5. ALIMENTOS APTOS PARA O CONSUMO ........................................................................................................7 1.1.6. ALIMENTOS NÃO APTOS PARA O CONSUMO ...............................................................................................7 2 - ANÁLISE DE ALIMENTOS E SUA IMPORTÂNCIA ............................................................................................. 8 2.1. ANÁLISE DE ALIMENTOS: ................................................................................................................................ 8 INTRODUÇÃO ÀS ANALISES BROMATOLÓGICAS PROF.A DRA. ANA PAULA MARGIOTO TESTON ENSINO A DISTÂNCIA DISCIPLINA: ANÁLISES BROMATOLÓGICAS 4WWW.UNINGA.BR 2.1.1. APLICAÇÃO ....................................................................................................................................................... 8 2.2. AMOSTRAGEM ................................................................................................................................................... 8 2.2.1. DEFINIÇÕES ..................................................................................................................................................... 9 3 - COLETA, TRANSPORTE E ARMAZENAMENTO DAS AMOSTRAS ....................................................................10 4 - PRÉ-TRATAMENTO DA AMOSTRA ..................................................................................................................... 11 4.1. PREPARAÇÃO DA AMOSTRA (BRUTA) DO LABORATÓRIO ........................................................................... 11 4.2. COLETA DE AMOSTRAS ....................................................................................................................................13 4.3. ANALISE CENTESIMAL ....................................................................................................................................13 4.4. DETERMINAÇÃO DE UMIDADE, CINZAS E FIBRAS NOS ALIMENTOS .........................................................14 4.4.1. DETERMINAÇÃO DA UMIDADE ......................................................................................................................14 5 - DETERMINAÇÃO DE RESÍDUO MINERAL FIXO (RMF) OU DETERMINAÇÃO DE CINZAS ...................14 6 - DETERMINAÇÃO DE FIBRAS ALIMENTARES ...................................................................................................16 6.1. LEGISLAÇÃO DE ALIMENTOS ............................................................................................................................16 5WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA INTRODUÇÃO A Bromatologia é a ciência que estuda os alimentos. Consiste em uma área interdisciplinar que exige conhecimentos em diversa subáreas, como química, bioquímica, biologia, microbiologia e engenharia, em que todas mantêm uma relação direta com os sistemas alimentares. Para facilitar e dinamizar o estudo das análises bromatológicas, as subáreas são mostradas separadamente, no entanto, na prática isso não é possível. Nesta Unidade serão abordados conceitos e de� nições de Bromatologia, métodos de obtenção de amostras e análise centesimal de alguns componentes essenciais à identi� cação da composição natural e adulterante dos alimentos. Também trabalharemos a parte legislativa das análises de alimentos. 6WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA 1 - DEFINIÇÃO Bromatologia é a ciência que estuda os alimentos. Tem derivação grega, sendo Broma ou Bromatos correspondente a alimentos ou dos alimentos, e Logos que quer dizer ciência. Esta ciência estuda os alimentos em todos os seus aspectos, desde seus componentes químicos, sua ação biológica no organismo que o ingere, seu conteúdo calórico e nutricional, suas propriedades toxicológicas e físicas, assim como todos os processos que acontecem desde a obtenção da matéria-prima, transporte, processamento e armazenamento, no que diz respeito ao controle de qualidade do alimento produzido e comercializado, seja industrializado ou in natura. Veri� ca se os padrões legislativos estão sendo seguidos ou se há fraudes, adulterações ou adição de compostos não permitidos. Avalia os níveis de contaminação microbiológicas ou, até mesmo, pelos componentes de rótulos e embalagens. Permite fazer uma avaliação geral do alimento, permitindo julgar sua qualidade. A Análise bromatológica, também conhecida por química dos alimentos, é uma subárea dentro da bromatologia que avalia a composição química do alimento, permitindo veri� car se ele está apto para o consumo. O maior objetivo das analises bromatológicas é conhecer a composição centesimal dos alimentos, pois através delas podem ser estabelecidas técnicas e métodos para determinar a qualidade do alimento. A composiçãocentesimal é representada pelas frações lipídicas, glicídicas, proteicas, � bra, água e sais minerais. 1.1. Definições em Alimentos 1.1.1. Alimento É considerada toda e qualquer substância ou mistura dela que, utilizada na alimentação de seres humanos, fornece nutrientes necessários ao desenvolvimento, manutenção ou formação do organismo. 1.1.2. Alimento simples Podem ser considerados alimentos simples: as frações lipídicas, proteicas e glicídicas, pois são aquelas que, após ingeridas, passam pelo processo digestivo e fornecem nutrientes ao organismo. 1.1.3. Metabólitos Aqueles originados após o processo digestivo das moléculas maiores, depois de metabolizados e absorvidos. Por exemplo: água, monossacarídeos, ácidos graxos, aminoácidos etc. 7WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA 1.1.4. Alimento composto Pode ser de origem vegetal ou animal, consiste no alimento formado pela combinação de vários compostos químicos ou de vários alimentos simples. Exemplo: carne, leite, frutas etc. 1.1.5. Alimentos aptos para o consumo São alimentos que estão de acordo com as legislações em alimentos, não foram adulterados, nem fraudados, ou seja, devem ser alimentos originais (genuínos). Alimentos naturais são aqueles consumidos sem processamento, ou seja, in natura. Exemplo: maçã, remove-se apenas a casca ou nem isso. Alimentos genuínos diferem de alimentos naturais, uma vez que genuínos são alimentos dentro das legislações em alimentos. Alimentos naturais podem ser genuínos se estiverem dentro das normativas legais, mas também podem não ser genuínos, quando, por exemplo, uma fruta estiver muito madura para o consumo. 1.1.6. Alimentos não aptos para o consumo Alimentos que não estejam dentro dos padrões exigidos por lei. São classi� cados em: a) Alimentos contaminados: são aqueles que contêm substâncias estranhas ou microrganismos acima do permitido em lei. Por exemplo, que contenha bactérias, parasitos, vírus ou agrotóxicos, metais pesados ou outras substancias tóxicas ou não. b) Alimentos alterados: alimentos que sofreram alterações naturais de um procedimento de tratamento inadequado, que geram alterações nas características organolépticas por deterioração, alterando o valor nutricional. Por exemplo, suco de laranja natural sem conservantes que fermentou e produziu gases, latas estufadas, cheiro de carne podre etc. c) Alimentos falsi� cados: são alimentos que foram fabricados como genuínos, recebem a denominação como produto original, mas não são. São fabricados sem os padrões normativos por fabricantes. Considerado um alimento não apto para o consumo, mesmo que não sejam veri� cadas alterações na sua qualidade, pois a ausência de padrões normativos con� gura falsi� cação. d) Alimentos adulterados: alimentos que sofrem alteração na formulação original, seja de forma parcial ou completa dos componentes do alimento genuíno. A inclusão de qualquer componente estranho ao alimento genuíno também é considerada adulteração, especialmente se o objetivo for esconder, dissimular qualquer de� ciência no produto original ou da qualidade da matéria-prima. Exemplo: adição de substancias neutralizantes, como soda cáustica, no leite para burlar o controle de qualidade que avalia a acidez e é indicativo de deterioração bacteriológica. 8WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA 2 - ANÁLISE DE ALIMENTOS E SUA IMPORTÂNCIA Nas indústrias, as análises de alimentos estão diretamente ligadas ao controle de qualidade do produto elaborado, mas também servem para avaliar a qualidade da matéria-prima recebida, das embalagens utilizadas, da água utilizada, do prazo de validade do produto � nal etc. Nas universidade e centros de pesquisa, as análises bromatológicas permitem desenvolver novas metodologias, controlar processos de pesquisa ou, até mesmo, na prestação de serviços à comunidade etc. Nos órgãos governamentais, as analises bromatológicas têm suma importância, uma vez que as regulamentações precisam ser seguidas e, para tal, as � scalizações precisam dos resultados das análises para aplicar as penalidades cabíveis. Outros exemplos são os registros de produtos novos, � scalização da comercialização, da distribuição etc. 2.1. Análise de Alimentos: 2.1.1. Aplicação As análises bromatológicas podem ser aplicadas em: a) Controle de qualidade de rotina: intimamente relacionado à rotina de uma indústria alimentícia. Serve para conferir se a matéria-prima está de acordo com o esperado, se o produto acabado está apto ao consumo, para controlar os processos de fabricação. Normalmente, utiliza-se de métodos instrumentais por serem mais rápidos. b) Fiscalização: veri� ca se a legislação está sendo cumprida. Utiliza-se de métodos o� ciais, podendo ser instrumentais ou convencionais, desde que sejam exatos e precisos. c) Pesquisa: usada para criar novas metodologias ou melhorar os métodos que já existem, para torná-los mais precisos, exatos, rápidos, sensíveis, e� cientes e de menor custo possível. 2.2. Amostragem Consiste em operações seguindo normativas que devem ser executadas para assegurar que a amostra seja o mais idêntico possível à matriz onde foi coletada. Algumas etapas devem ser realizadas na ordem correta para que seja obtida uma amostra com tamanho adequado às análises laboratoriais, mas com tamanho su� ciente para resultados estatísticos do todo. 9WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA Os métodos analíticos devem ser compatíveis com os experimentos que serão realizados e o tipo de alimento que está sendo analisado. Uma sequência analítica é necessária: • de� nição do problema. • escolha do método, amostragem. • pré-tratamento da amostra e separação. • medição. • calibração de equipamentos. • avaliação. • ação. Qualquer falha em uma das etapas pode comprometer os resultados do estudo em desenvolvimento. A amostra obtida para análises de alimentos pode ser de� nida como sendo um conjunto de unidade de amostragem, selecionada dentro de um universo ou de uma população. A unidade de amostragem é a unidade básica da amostra, sendo a população um conjunto de indivíduos com certas características semelhantes. A partir da amostragem se obtém, do material a ser analisado, uma pequena porção que representa o todo e em quantidade su� ciente para todas as análises laboratoriais. Ao analisar um alimento, objetiva-se obter a composição centesimal dele, podendo ser de todos os componentes da análise centesimal ou apenas de um. Para a indústria, torna- se importante poder controlar a qualidade dos produtos processados, bem como das matérias- primas. De uma maneira geral, em um processo analítico, o tempo empregado no preparo da análise é em tomo de 60% e as outras etapas, 40%. Bem como a estimativa de erros no preparo é de 30% e nas outras etapas é de 70%, o que demonstra a importância dos cuidados em todo o processo analítico. Ou seja, a necessidade de um planejamento cuidadoso em todas as etapas envolvidas no processo analítico, dependendo, assim, o sucesso da análise de uma preparação adequada da amostra. A primeira etapa de uma análise consiste em submeter a amostra a um tratamento adequado, visando sua preparação para os passos subsequentes da análise. A maneira de se decompor a amostra depende de sua natureza, do elemento a ser determinado e sua concentração, do método de análise, da precisão e exatidão desejadas. O procedimento da amostragem pode envolver estágios anteriores à análise do material, segundo critérios adequados. 2.2.1. Definições O Incremento é uma pequena parte do produto a ser analisado. A junção de vários incrementos forma a amostra bruta. Por exemplo, na amostragem de líquidos, toma-se um incremento na parte superior do frasco, um incremento no meio e um incremento no fundo do frasco. A junção dos três incrementos constitui a amostra bruta doliquido. A amostra bruta precisa ser reduzida para facilitar a análise. Quando é separada em duas ou mais partes iguais, essas partes são chamadas de amostras reduzidas. 10WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA Há dois tipos de amostragem: a) Amostragem ao acaso. b) Amostragem representativa ou sistemática. A amostragem ao acaso aplica-se aos materiais com distribuição inteiramente casual. Os incrementos são por acaso, cada porção do universo tem, assim, a mesma probabilidade de ser incluída na amostra. A amostragem representativa aplica-se, particularmente, aos universos caracterizados por variações sistemáticas, sendo dividido em certo número real ou imaginária de estratos ou seções. De cada estrato ou seções, deve-se tomar um número proporcional de incrementos ao acaso, seguindo um plano sistemático. A amostragem e o seu posterior tratamento constituem operações de fundamental importância no método analítico, pois os resultados da análise somente terão signi� cado se a quantidade de material recolhida para análise for representativa do sistema e convenientemente tratada. Desse modo, o tratamento prévio da amostra deve garantir que suas características naturais sejam preservadas. Os erros cometidos durante a amostragem não poderão ser reti� cados ou compensados, por mais cuidadosas que venham ser as futuras análises. Em casos de amostra homogênea, como por exemplo, um líquido, o processo de amostragem é simples, qualquer fração re� ete a composição média do conjunto. Caso o material seja heterogêneo, ou seja, uma mistura sólida, haverá necessidade de combinar várias porções a � m de se poder garantir que a amostra representativa seja selecionada para a análise. 3 - COLETA, TRANSPORTE E ARMAZENAMENTO DAS AMOSTRAS A coleta da amostra constitui a primeira fase da análise do produto. Dentro do conceito de que a análise começa com a coleta da amostra, o serviço de coleta deve estar bem integrado com o laboratório, devendo haver sincronismo entre a remessa e a capacidade do laboratório em executar as análises. As amostras para análises deverão ser enviadas separadas daquelas destinadas a análises microbiológicas. As amostras devem ser enviadas em sua embalagem original para evitar modi� cações em suas características, devendo ser acondicionadas em recipientes limpos e íntegros. As amostras de produtos perecíveis deverão ser acondicionadas em recipientes isotérmicos, embaladas em sacos plásticos e acompanhadas de gelo ou outra substância refrigerante, cuidando-se sempre para que não haja contato destes com a amostra. As amostras que devem chegar congeladas ao laboratório serão acondicionadas em recipientes isotérmicos com gelo seco. Na falta deste, acondicionar a amostra (previamente embalada e posteriormente embrulhada em papel alumínio ou plástico) em recipiente isotérmico com a adição de gelo comum. Providências especiais deverão ser tomadas para que o tempo decorrido entre a colheita da amostra e sua chegada ao laboratório seja o mais breve possível, recomendando-se que seja evitada a utilização de mecanismos que impliquem em estocagem intermediária entre o ponto de coleta e o laboratório. O armazenamento deve ser feito de forma adequada, para garantir a sua integridade até o � nal da análise, devendo as amostras serem conservadas ao abrigo da umidade, luz e contaminação. 11WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA 4 - PRÉ-TRATAMENTO DA AMOSTRA Dentre todas as etapas analíticas, a de pré-tratamento da amostra é a mais crítica. Em geral, é onde se cometem mais erros e se gasta mais tempo, sendo a etapa de maior custo. Por isso, os passos de um procedimento de pré-tratamento de amostra deverão ser sempre considerados cuidadosamente. As etapas preliminares são procedimentos aplicados às amostras a partir do estado em que são coletadas e, em alguns casos, antes de serem entregues ao laboratório analítico. A maior parte delas envolve procedimentos físicos, tais como: moagem de sólidos, análise direta de sólidos, secagem, separação de componentes de amostras sólidas, operações de � ltração. Cada método analítico, inclui algum tipo de pré-tratamento de amostra. Frequentemente, esta etapa consome a maior parte do trabalho analítico. Assim, quando um método estiver sendo avaliado, seja quanto ao seu desempenho ser adequado ou não para o propósito analítico, seja na comparação de dois métodos, as etapas de pré-tratamento deverão ser sempre consideradas com muito cuidado. No pré-tratamento das amostras utilizam-se termos como “dissolução” da amostra, que signi� ca que a amostra sólida, líquida ou gasosa é dissolvida em líquidos adequados a baixas temperaturas. A dissolução corresponde à transformação direta da amostra em uma solução, envolvendo ou não uma reação, enquanto que a “abertura” da amostra signi� ca converter a amostra em uma outra forma sólida com transformação química. 4.1. Preparação da Amostra (Bruta) do Laboratório a) Alimentos Secos: a amostra pode ser reduzida com o uso de equipamentos ou manualmente. Exemplos: alimentos em pó ou granulares. O quarteamento (Figura 1) é a forma mais comum de redução manual. A utilização de equipamentos consiste no uso de amostradores, por exemplo, tipo Boerner ou tipo Ri� e. Alguns exemplos de pré-tratamento: para determinar metais e proteína bruta, é preciso realizar uma desintegração da amostra com ácidos antes das análises. Alimentos secos precisam ser moídos ao ponto que passem por uma peneira de 20 mesh. Para extrair componentes de amostras úmidas, a moagem também se faz necessária até passarem por uma peneira de 40 mesh. A desintegração pode ser realizada de três maneiras: de forma mecânica - utilizando moinhos em caso de amostras secas ou moedores e liquidifi cadores para amostras úmidas; de for- ma enzimática - vegetais requerem celulases para a quebra da celulose, amidos precisam de amilases e proteínas de alto peso molecular necessitam de prote- ases; de forma química - utilizando-se vários compostos químicos que podem promover a solubilização ou dispersão das moléculas do alimento. São exemplos os detergentes sintéticos: piridina, ureia etc. 12WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA Figura 1 – R epresentação esquemática do método de quarteamento de amostras sólidas. Fonte: SlideShare (2017). b) Alimentos líquidos: o liquido do recipiente deve ser agitado, invertido ou passado por diversas trocas de recipientes. Os incrementos devem ser retirados de cima, do meio e do fundo do recipiente e somados em um recipiente de amostragem. c) Alimentos Semissólidos: os alimentos precisam ser ralados e, depois, passar por quarteamento. Exemplos: alimentos úmidos, chocolates e queijos duros. d) Alimentos Úmidos: o alimento deve ser picado ou moído, em seguida misturado. Se preciso, realizar o quarteamento e, então, obter a amostra para a análise. Exemplos: vegetais, carnes e peixes. Devem ser mantidos sob refrigeração. e) Alimentos Semiviscosos ou Pastosos: este tipo de amostra precisa ser processado em mixer ou liquidi� cador. São exemplos os pudins e molhos, frutas em compotas, conservas de vegetais e demais enlatados. f) Alimentos com emulsão: precisam ser aquecidos com cautela em um frasco tampado a aproximadamente 35ºC. Depois que derretem devem ser agitados para homogeneizar e, então, retiradas as alíquotas. Exemplos margarina e manteiga. g) Frutas: as frutas precisam passar pelo método de quarteamento e, em seguida, trituradas em liquidi� cador e homogeneizadas. 13WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA 4.2. Coleta de Amostras Algumas precauções na coleta de amostras devem ser tomadas: • Ao utilizar sacos plásticos para o congelamento de amostras, eles devem estar esterilizados ou desinfetados, com capacidade mínima de um litro.Se utilizar frasco de vidro, deve conter tampa de metal ou tampa plástica fervível, e esterilizado em autoclave (15 minutos a 121ºC) ou em estufa (1 hora a 150ºC) ou, ainda, fervido por 15 minutos. Não podem ser usados desinfetantes químicos, como cloro, iodo ou álcool. • Os utensílios utilizados na coleta devem ser desinfetados no álcool, fervidos ou � ambados e utilizados na distribuição, sendo um utensílio para cada alimento especi� co. • A quantidade mínima de amostra a ser coletada dever de 100g. • As amostras devem ser armazenadas em frasco de vidro ou saco plástico e congeladas a -10ºC ou menos, por até 72 horas. Essas amostras devem ser encaminhadas diretamente ao laboratório em condições que mantenham o resfriamento. A água do gelo usado na conservação da temperatura não pode entrar em contato direto com o alimento durante o transporte. • Para alimentos líquidos, como refrigerantes, sucos e água, a coleta deve ser em frasco esterilizado de vidro, entregue pelo laboratório que realizará a análise. Estas amostras não devem ser congeladas, apenas refrigeradas por até 72 horas. 4.3. Analise Centesimal A análise centesimal pode ser observada na � gura a seguir. Figura 2 – Re presentação esquemática dos componentes analisados de forma centesimal. Fonte: @limentus (s/d). 14WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA 4.4. Determinação de Umidade, Cinzas e Fibras nos Alimentos 4.4.1. Determinação da umidade Trata-se de uma das análises mais utilizadas e importantes nas análises bromatologicas. Relaciona-se à composição, qualidade e estabilidade de um alimento e pode in� uenciar em características do processamento, embalagem e estocagem. Para o crescimento de bacterias, leveduras e fungos é necessária a umidade, assim como o desenvolvimento de insetos. Para alguns produtos, o resfriamento pode inibir o crescimento de microrganismos, mas para outros a secagem é o método mais adequado. Produtos perecíveis requerem resfriamento, produtos deterioráveis requerem redução da umidade até 12%. Considerando a análise por secagem, a umidade é a fração que engloba todos os constituintes voláteis à temperatura de 100 – 105ºC (estufa/micro-ondas), sendo que a porcentagem de umidade do alimento (%U) está relacionada com a quantidade de água (H2O) disponível nele existente, pois, na realidade, não é somente a água que é removida, mas outras substâncias que se volatilizam. Outros métodos também permitem a determinação da umidade, como exemplo os métodos físicos de condutividade elétrica ou os químicos, como de Karl Fischer, ou, ainda, por destilação. Dentre os métodos existentes, a secagem em estufa é o mais empregado, porque é o método o� cial descrito na legislação. Para realizar a secagem, utiliza-se uma temperatura entre 100ºC e 105ºC, por no minimo 6 horas e no maximo 8 horas ou até peso constante. O princÍpio consiste em remover a água pelo aquecimento, uma camada muito � na do alimento absorve o ar quente e o conduz para o interior do alimento por condução. 5 - DETERMINAÇÃO DE RESÍDUO MINERAL FIXO (RMF) OU DETERMINAÇÃO DE CINZAS É um método de grande importância nas análises bromatológicas por vários motivos, por exemplo, nas determinações de conteúdo de minerais presentes na cana-de-açucar, que podem causar clari� cação e cristalização do açúcar. Outro exemplo é a determinação de carbonatos na água, estes podem inscrustar nas tubulações e até reduzir o efeito de produtos de sanitização e limpeza. Assista ao vídeo disponível em: <https://www.youtube.com/watch?v=Zw1rPsUciJY>. 15WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA Cinza é todo resíduo inorganico que não desaparece após a queima de uma matéria orgânica. Não pode conter resíduo de carvão. É formada por grandes proporções de sódio, potássio, cálcio e magnésio, também por quantidades reduzidas de ferro, alumínio, cobre, manganês e zinco, sem contar nos traços de arsênio, iodo e ferro, cloro, chumbo etc. O elevado teor de cinzas pode indicar a presença de substâncias adulterantes. A temperatura com que uma amostra deve ser incinerada para obtenção das cinzas pode variar de 400 a 700ºC, mas a mais comum é a 550ºC. A coloração da cinza após a queima varia de branca a acinzentada. Não necessariamente a cinza produzida após a queima tem a mesma composição da matéria mineral do alimento, porque, muitas vezes, ocorrem perdas por volatização ou por interação entre os componentes da amostra. Nas cinzas encontram-se óxidos, fosfatos, sulfatos, silicatos, cloretos e outros, a depender das condições em que alimento foi incinerado e, até mesmo, da composição do proprio alimento. O método utilizado e a natureza da amostra determina a composição de cinzas: • Produtos lácteos, nozes, cereias, alguns peixes e alguns vegetais apresentam alta concentração de cálcio. • Carnes, aves, ovos, legumes, peixes, produtos lácteos e alguns grãos apresentam alta concentração de fósforo. • Grãos, farinhas, cereais cozidos e assados, nozes, produtos farináceos, frutos do mar, ovos, peixes e legumes têm alta concentração de ferro, enquanto frutas e produtos lácteos têm baixa concentração. • Sal, frutas, nozes, carne, cereais, peixes, ovos, aves e vegetais são ricos em sódio. • Algumas frutas, cereais, vegetais e carnes têm alta concentração de manganês. • Frutos do mar são ricos em cobre. • Alimentos super proteicos são ricos em enxofre. • O cobalto é encontrado em altas concentrações em frutas e vegetais. • Frutos do mar são ricos em zinco. Quanto mais industrializado for o alimento menos minerais ele conterá, pois a industrialização gera perda destes componentes. Assim, como aqueles alimentos que � cam muito tempo em imersão (conservas) têm redução de minerais, pelo fato de serem solúveis em água. O vapor é o método de aquecimento que mais conserva os nutrientes no alimento. Estes minerais são analisados tanto para fi ns nutricionais como, também, para segurança. Como exemplo pode-se citar os resíduos metálicos provenientes de inseticidas e outros agrotóxicos e o estanho, proveniente de corrosão de latas etc. 16WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA Algumas propriedades podem ser indicadas a partir da determinação de cinza total: a) Índice de re� nação de açúcares e farinhas. b) Propriedades funcionais de alguns alimentos. c) Valor nutricional de alimentos e rações. Os componentes minerais podem ser classi� cados como indispensáveis para uma dieta, considerados elementos essencias e aqueles que não apresentam função conhecida, ou até mesmo causem danos à saúde, por exemplos residuos de agrotoxicos que contêm chumbo e mercurio. 6 - DETERMINAÇÃO DE FIBRAS ALIMENTARES Quimicamente a � bra alimentar (FA) é composta, principalmente, de polissacarídeos de origem vegetal interligados entre si formando uma rede tridimensional, com a presença de outras substâncias, como proteínas de parede celular, lignina, compostos fenólicos, � tatos, oxalatos e outros. Para a análise de alimentos de consumo humano, o conhecimento do teor � bra alimentar é mais adequado do que o de � bra bruta. Hoje, a de� nição mais aceita para � ns analíticos é a de Asp, considerando os aspectos � siológicos, como polissacarídeos (exceto amido) e lignina que não são digeridos pelo intestino delgado humano. Hellenboon et al. (1975) desenvolveram o método enzimático-gravimétrico, que consiste em tratar o alimento com diversas enzimas � siológicas, simulando as condições do intestino humano, permitindo separar e quanti� car gravimetricamente o conteúdo total da fração � bra e/ou as frações solúveis e insolúveis. Este método foi posteriormente modi� cado por Asp et al (1983) e Prosky et al. (1984). 6.1. Legislação de Alimentos A legislação de alimentos (ou lei de alimentos) constitui o corpo completode textos legais (leis, regulamentações e padrões) que estabelecem princípios amplos para o controle de alimentos de um país, além de governar todos os aspectos da produção, manipulação e comércio de alimentos, como forma de proteger os consumidores contra alimentos não seguros e práticas fraudulentas. As regulamentações de alimentos são instrumentos legais subsidiários (normalmente instituídos por um ministro e não por parlamentares) que prescrevem requisitos obrigatórios aplicáveis a vários aspectos da produção, manipulação, marketing e comercialização de alimentos, além de fornecerem detalhes suplementares que permanecem em aberto na legislação em nível parlamentar principal. Lista de exercícios comentada sobre cálculos empregados em analise centesimal. Disponível em: <https://www.youtube.com/watch?v=fs52kzT8H4E>. 17WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA Os padrões de alimentos são procedimentos e diretrizes nacional ou internacionalmente aceitos (voluntários e obrigatórios) que se aplicam a diversos aspectos da produção, manipulação, marketing e comercialização de alimentos, para intensi� car e/ou garantir a segurança e a qualidade dos alimentos (FAO, 2006, p. 39). A criação de uma base legal para o controle dos alimentos é vital para conferir uma proteção efetiva aos consumidores. É de se esperar que a vasta maioria dos fornecedores de alimentos deseje garantir que o alimento fornecido seja seguro e atenda às necessidades do consumidor. Entretanto, haverá aqueles que, por negligência ou visando garantir lucros pessoais, estarão preparados para fornecer riscos. A legislação é necessária para que sejam adotadas providencias adequadas para a minimização do número de fornecedores preparados para assumir os riscos. Os documentos legais impressos precisam fornecer uma estrutura abrangente para o controle de alimentos. Os elementos-chave, usualmente encontrados nas principais legislações de alimentos, são: • Clausulas introdutórias: a legislação trabalha melhor com de� nições claras e é comum encontrar termos-chave de� nidos na lei. • Clausulas capacitadoras e administrativas: identi� carão as autoridades públicas que possuem responsabilidades perante a lei e podem estabelecer uma agência ou conselho para representar o governo. A lei também especi� cará a autoridade para o cumprimento da lei e os poderes dos inspetores de entrar nos estabelecimentos e obter amostras. • Violações e penalidades: usualmente são criadas violações importantes que conferem proteção geral contra um alimento perigoso ou alimento rotulado de forma incorreta. As penalidades devem ser su� cientes para deter os potenciais transgressores. • Cláusulas especí� cas sobre alimentos: dependendo das prioridades de um país, a lei tende a conter certo número de controles especí� cos. Estes podem estar relacionados a condições importantes de importação e exportação ou a requisitos relacionados a registros ou licenciamentos. De um modo geral, a lei tende a conceder autoridade para a adoção de regulamentações de alimentos secundários. A legislação secundária, sob a forma de regulamentações de alimentos, irá conter os principais detalhes necessários a um controle de alimentos efetivo. Essas regulamentações podem ser classi� cadas em três tipos: • Regulamentações que afetam os produtos alimentícios em geral (por exemplo: higiene e rotulagem de alimentos). • Regulamentações que afetam produtos alimentícios especí� cos (por exemplo: pão, chocolate, alimentos para bebês). • Regulamentações para � ns organizacionais ou de coordenação (por exemplo: o procedimento para emissão de licenças ou obtenção de amostras). Os requerimentos de caráter mais técnico contidos nas regulamentações de alimentos tendem a ser atualizados com mais frequência à medida que são disponibilizadas novas informações sobre potenciais perigos ou os avanços tecnológicos introduzem novas substancias ou processos na cadeia de fornecimento de alimentos. 18WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 1 ENSINO A DISTÂNCIA Consulte a Biblioteca de Atos Normativos da Anvisa, disponível em: <http://portal. anvisa.gov.br/documents/33880/4967127/Biblioteca+de+Alimentos_Portal.pdf/ a458826b-f6e9-494c-a45c-4ea1f8a9311d>. Portaria SVS/MS nº 326, de 30 de julho de 1997. 1919WWW.UNINGA.BR UNIDADE 02 SUMÁRIO DA UNIDADE INTRODUÇÃO .............................................................................................................................................................21 1 - ÁGUA ..................................................................................................................................................................... 22 1.1. ÁGUA LIVRE ........................................................................................................................................................ 23 1.2. ÁGUA LIGADA ..................................................................................................................................................... 23 1.3. PRESSÃO DE VAPOR (PV) ................................................................................................................................ 24 1.4. PROPRIEDADES COLIGATIVAS ........................................................................................................................ 24 1.5. ATIVIDADE DE ÁGUA (AW) ................................................................................................................................. 24 1.6. VALORES DA AW................................................................................................................................................ 25 1.7. ISOTERMAS DE ADSORÇÃO DE ÁGUA ............................................................................................................ 26 2 - AW ........................................................................................................................................................................ 28 2.1. AW E UMIDADE RELATIVA DO AR (URA) ........................................................................................................ 28 ÁGUA PROF.A DRA. ANA PAULA MARGIOTO TESTON ENSINO A DISTÂNCIA DISCIPLINA: ANÁLISES BROMATOLÓGICAS 20WWW.UNINGA.BR 2.2. MICROBIOLOGIA DOS ALIMENTOS E AW ...................................................................................................... 28 2.3. A ESTABILIDADE DOS ALIMENTOS E A AW ................................................................................................... 30 2.4. A TEXTURA DOS ALIMENTOS E A AW .............................................................................................................31 3 - MÉTODOS DE MEDIDAS DE ATIVIDADE DE ÁGUA ...........................................................................................31 3.1. MÉTODO TRADICIONAL .................................................................................................................................... 32 3.2. MÉTODO DO PONTO DE CONGELAMENTO .................................................................................................... 33 3.3. MÉTODO MANOMÉTRICO................................................................................................................................ 33 3.4. MÉTODOS HIGROMÉTRICOS .......................................................................................................................... 33 3.5. A MEDIDA DE AW NA INDÚSTRIA ................................................................................................................... 33 4 - ÁGUA UTILIZADA NA INDÚSTRIA DE ALIMENTOS ......................................................................................... 35 21WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA INTRODUÇÃO Nesta Unidade serão abordados aspectos relevantes à água e suaatividade e importância nos alimentos, bem como algumas análises para determinar a atividade da água nos alimentos e sua in� uência sobre a microbiologia e textura de alimentos. As leituras complementares e vídeos encontram-se ao longo desta Unidade, procure saber mais utilizando as dicas e complementos deste material. Bons estudos! 22WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 1 - ÁGUA Quimicamente, a molécula de água apresenta estrutura tetraédrica e é constituída por dois átomos de hidrogênio e um de oxigênio (H2O). Possui pequeno volume, peso molecular baixo e diamagnética. Devido à repulsão dos pares de elétrons nos orbitais não ligantes do átomo de oxigênio, a angulação da molécula é de 104,5º (Figura 1). As propriedades solventes da água são oferecidas pelo seu pequeno volume, constante dielétrica elevada e momento dipolar alto. Figura 1 – Representação da molécula de água, seus átomos e angulação. Fonte: Brainly (2016). A água nunca está sozinha, sempre está associada, pois consegue formar pontes de hidrogênio (Figura 2), que interagem fortemente entre si, contendo o híbrido sp2. Formam pentâmeros. Figura 2 – Ponte de hidrogênio entre moléculas de água. Fonte: SlideShare (2011). 23WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA A água é um nutriente absolutamente essencial, compondo 60 a 65% do corpo humano e da maioria dos animais. Dentre as várias funções da água no organismo podemos destacar: a) É o solvente universal, indispensável aos processos metabólicos. b) Manutenção da temperatura corporal. c) Manutenção da pressão osmótica dos � uídos e do volume das células. d) Participação como reagente de um grande número de reações metabólicas. A água é considerada o adulterante universal dos alimentos, por isso sua determinação é de grande importância. Usualmente, a quantidade de água nos alimentos é expressa pelo valor da determinação da água total presente no alimento. Não há como saber como está distribuída a água neste alimento nem permite saber se toda a água está ligada do mesmo modo ao alimento, apenas utilizando esse valor. Muitas vezes, o teor de água determinado permite que ocorra o desenvolvimento de algum microrganismo, porém isso não ocorre, porque muita desta água não está disponível ao microrganismo. Há também o fato de uma parte da água não ser congelável. Isso nos leva a crer que existem moléculas de água que possuem propriedades e distribuição diferentes no mesmo alimento. A água pode se apresentar em duas formas nos alimentos: - forma livre e (água livre). - forma ligada ao substrato (água ligada). 1.1. Água Livre É aquela fracamente ligada ao substrato, funcionando como solvente, permitindo o crescimento dos microrganismos e reações químicas e que é eliminada com facilidade (Figura 3). 1.2. Água Ligada Está fortemente ligada ao substrato, mais difícil de ser eliminada e que não é utilizada como solvente. Não permite o desenvolvimento de microrganismos e retarda as reações químicas. Interage fortemente com o substrato e as moléculas constituintes dos alimentos, não podendo ser removida ou utilizada em reações físicas ou químicas (Figura 3). Figura 3 – Repr esentação esquemática da água total, água livre e água ligada. Fonte: Food Safety Brazil (2016). 24WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 1.3. Pressão de Vapor (PV) É representada pela pressão em que a água, sob efeito de uma determinada temperatura, passa para o estado de vapor. A PV é sempre maior quando a água está pura, quando comparada à água presente em uma solução ou mistura. À 100°C, à nível do mar há a correspondência 1 atm = 760 mmHg. Quando se abaixa a temperatura à 10°C, o mesmo ocorre com a PV, que passa a ser menos que 760 mmHg. 1.4. Propriedades Coligativas Quando um soluto é adicionado à água, como o sal, ocorre a redução da temperatura de congelamento e aumento da ebulição. A PV também diminui na presença do sal. Sempre que adicionado um soluto na água a temperatura também deve ser aumentada para que a pressão retome a normalidade, já que a pressão da água pura é maior do que da água com solutos. 1.5. Atividade de Água (Aw) É possível estabelecer uma relação entre o percentual de água livre nos alimentos e sua conservação. Expressa-se teor de água livre através da atividade de água que é dada pela relação que ocorre em mesma temperatura entre a pressão de vapor de água em equilíbrio no alimento e a pressão de vapor da água pura. A medida desse valor baseia-se no fato de que a pressão P do vapor de água sobre um alimento, após atingir o equilíbrio a uma temperatura T, corresponde à Umidade Relativa de Equilíbrio (URE) do alimento. A atividade da água será, então, igual a URE e é expressa por URE/100. Aw = Ps/Po Ps = Pressão parcial de vapor de água no sistema. Po = Pressão de vapor na temperatura considerada da água pura. A Aw se torna de extrema importância em todos os quesitos que envolvam os alimentos devido a íntima relação entre ela e a estabilidade dos alimentos. A Aw é um indicativo da possibilidade de deterioração dos alimentos, uma vez que a PV varia de acordo com que as moléculas de água (ligada), interagem com as moléculas do alimento. 25WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 1.6. Valores da Aw Na água pura a Aw = 1, sendo este seu valor máximo. • Aw acima de 0,90: alimentos com grandes possibilidades de serem contaminados por microrganismos, pois quanto mais diluídas as soluções dos alimentos, mais substrato disponível para o desenvolvimento de microrganismos. • Valores entre 0,40-0,80: há um favorecimento na ocorrência de reações enzimáticas e químicas devido a concentração dos reagentes estar aumentada. • Aw a partir de 0,60: condições que não favorecem o desenvolvimento de microrganismos (Figura 4). • Aw inferior a 0,30: os componentes do alimento estão pouco dissolvidos pela água, na chamada zona I ou de adsorção primária. As reações � cam extremamente reduzidas, exceto a oxidação lipídica, que ocorre tanto em Aw elevadas quanto baixas. Resumidamente, quando o valor de Aw é reduzido � ca mais fácil de conservar o alimento. Um exemplo clássico é a salga dos alimentos, utilizada desde a antiguidade para conservação dos alimentos. Figura 4 – Valores de Aw e exemplos de alimentos que apresentam cada valor na escala. Fonte: adaptado de Slide- Player (2016). 26WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 1.7. Isotermas de Adsorção de Água As propriedades da quantidade de água são diretamente in� uenciadas pela composição do alimento, uma vez que a composição do alimento é dada por diferentes moléculas, assim como os diferentes tipos de água presentes em um alimento. As curvas de teor de água versus Aw provam isso. As curvas (Figura 5) que se obtêm entre o processo de hidratação e desidratação são chamadas de isotermas de sorção e a diferença entre uma e outra é chamada histerese. Os valores de Aw nunca serão os mesmos nas duas curvas. Através deles é possível saber muito sobre o alimento que se pretende analisar. Figura 5 – Isoterm a de sorção da água (adsorção, dessorção e a diferença entre as duas é a histerese). Fonte: Rese- archGate (2015). As isotermas de sorção são curvas que inter-relacionam o percentual de água (umidade) no alimento com a sua atividade de água em uma temperatura mantida. O percentual (teor) de água é expresso como a quantidade, em gramas, de água, por grama da amostra seca. Sendo assim, a atividade de água determina o equilíbrio higroscópico que ocorre entre a pressão de vapor de água presente dentro do alimento e a pressão do ambiente externo. Existem dois tipos de isotermas, as de adsorção ou de dessorção. As de adsorção são obtidas pela hidratação da amostra seca. Já as de dessorção são adquiridaspela desidratação da amostra. Adsorção: é uma operação que consiste na retenção à superfície de um sólido ou placa metálica, de partículas líquidas ou gasosas (fl uido), devido a uma atração de moléculas da superfície do adsorvente e as do fl uido. Dessorção: operação contrária a adsorção. 27WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA Quando é adicionada água gradualmente a uma amostra seca de qualquer alimento, se for medida a atividade de água, uma isoterma de adsorção é obtida. Se nesta mesma amostra for retirada a água e traçadas as medidas da Aw, em temperatura similar, uma isoterma de dessorção será obtida. Para obter essas isotermas, é preciso traçar um grá� co com o teor de umidade do produto seco no eixo Y e a atividade da água no eixo X, ao traçar a curva que une os pontes, obtem-se a isoterma. Na legenda deve constar a temperatura na qual o equilíbrio higroscópico foi obtido. O formato da curva da isoterma varia de acordo com o alimento em análise. Frutas ricas em açúcares, vitaminas e sais minerais têm sua isoterma em formato de “J”. Vários fatores podem determinar a posição e o formato da isoterma: estado físico em que a amostra se encontra, componentes da amostra, temperatura e outros. Isoterma signi� ca que todas as curvas são obtidas em mesma temperatura, sendo, assim a temperatura in� uencia diretamente na posição da isoterma. Isto ocorre porque acontecem interações � sico-químicas entre a água e as moléculas do alimento. Quando observadas em um único grá� co, as isotermas de dessorção e adsorção mostram a histerese, que nada mais é do que a diferença entre os dois processos, já que um nunca se sobrepõe ao outro. O valor de atividade da água sempre será maior na dessorção do que na adsorção, mesmo quando avaliamos um único alimento nas mesmas condições de temperatura. A partir das isotermas é possível obter informações sobre vários processos, como o de secagem, concentração, hidratação e outros. Isso permite acompanhar e veri� car a estabilidade da água do alimento, devido a facilidade em hidratar ou desidratar um alimento, relacionando o ato com a atividade da água. Alterações na visibilidade ou nos aspectos sensoriais do alimento devem ser observadas durante a elaboração das isotermas. As caracteristicas do alimento in� uenciam na isoterma, e estão relacionadas à aglomeração, textura, alteração da cor inicial, escurecimento, alteração do sabor e aroma (� avor), desenvolvimento de microrganismos e � uidez. Todas essas informações permitem avaliar a estabilidade do alimento ou produto. De acordo com a zona ou fase da isoterma de adsorção é possível classi� car o tipo de água encontrada no alimento. Exemplos são mostrados na Figura 6. Figura 6 – Isotema de adsorção com a separação por zonas onde cada tipo de água se encontra. Fonte: SlideShare (2016). 28WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 2 - AW 2.1. Aw e Umidade Relativa do Ar (URA) A variação da Aw acontece conforme a URA varia, isso quer dizer que o ambiente troca umidade (água) com o alimento. Seguem alguns exemplos: • Se a Aw de um alimento for maior que do ambiente, o alimento doa água para o ambiente até atingir o equilíbrio. • Se a Aw do ambiente for maior do que do alimento, quem doa água é o ambiente e quem recebe é o alimento, tornando-o mais hidratado. Exemplo: pacote de biscoito aberto no armário, em dia chuvoso, ou em qualquer outro dia mais úmido, os biscoitos irão receber água do ambiente e se tornar murchos, perdendo a crocância. 2.2. Microbiologia dos Alimentos e Aw A Aw na indústria de aliementos é de suma importância porque está intimamente relacionada ao desenvolvimento de microrganismos, que dependem da água livre do alimento. A quantidade de água e sua atividade em um alimento permitem dizer o quanto ele é suscetivel à contaminação microbiológica. Sendo assim, o controle dos valores de Aw permite evitar o desenvolvimento de bactérias, fungos e leveduras patógenos ou que deterioram o alimento, levando a redução do prazo de validade. Já aqueles alimentos que dependem de microrganismos para serem produzidos, como é o caso do queijo e da cerveja, garantir valores de Aw ideais é fator crucial na produção destes alimentos. Para o crescimento dos microrganismo é necessária uma Aw mínima, por exemplo, bactérias patógenas não crescem em Aw menor de 0,86, mesmo que a temperatura, o pH e quantidade de nutrientes sejam su� cientes. Apenas a água livre é utilizada para o crescimento de microrganismos, sendo assim, os valores de Aw estão diretamente ligados com a probabilidade de crescimento de microrganismos, já que os valores de Aw também correspondem a agua livre. Em ordem de exigência de água no alimento, temos em primeiro lugar as bactérias, depois os bolores e, por último, as leveduras. Algumas leveduras conseguem se desenvolver e crescer em ambiente com baixa Aw. Em Aw abaixo de 0,60 o crescimento microbiano é mínimo, porem eles não morrem nestas condições, apenas entram em estado de latência. 29WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA A maior parte das bactérias necessitam de Aw mínima de 0,88 a 0,91; os bolores precisam de, no mínimo, 0,80 e as leveduras Aw mínima de 0,88. Valores mínimos de Aw para o crescimento dos microrganismos: • Bactérias deterioradoras: 0,9. • Leveduras deterioradoras: 0,88. • Bolores: 0,8. • Bactérias halofílicas: 0,75. • Bolores xerofílicos: 0,65. • Leveduras osmofólicas: 0,61. Tabela 1 – Valores minimos de atividade da água (Aw) para o crescimento de alguns microrganismos e produção de toxinas. Fonte: o autor. Alguns microrganismos podem resistir a baixas Aw, eles são de� nidos como: • Osmofílicos: se se desenvolvem em ambientes com Aw baixa. Ex.: alimentos açucarados. • Osmodúricos: não exigem, mas suportam altas concentrações de açúcar. • Halofílicos: só se desenvolvem em ambientes altamente concentrados de sal. • Halodúricos: não exigem, mas sobrevivem em ambientes altamente concentrados de sal. • Xerofílicos: gostam de ambientes secos. Ao adicionar-se um soluto, a atividade da água pode ser diminuída e, com isso, uma limitação no crescimento de microrganismos é alcançada. A permeabilidade da membrana celular dos microrganismos frente a água é alta, porém seletiva em relação aos solutos. Quando se adiciona açúcar ou sal em um alimento tem-se a redução da Aw, e a osmose passa a ocorrer no microrganismo, levando a perda de água para o meio externo, reduzindo seu metabolismo e impedindo seu crescimento, até a possível morte. 30WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA Algumas situações podem alterar a Aw e, consequentemente, alterar o crescimento dos microrganismos. São elas: tempo de estocagem, temperatura, tratamento térmico, adição de antimicrobianos, adição de solutos (sal ou açúcar) e mudanças de pH. Para saber por qual método de conservação o alimento deve ser submetido, basta conhecer os valores de Aw em que as bactérias, fungos e leveduras se desenvolvem. 2.3. A Estabilidade dos Alimentos e a Aw A estabilidade dos alimentos também é determinada pela Aw, pois é de suma importância para as reações de escurecimento, reações hidrolíticas, reações de oxidação e reações enzimáticas (Figura 7). Desta forma, exercendo forte in� uência sobre a textura, o sabor, o odor, a coloração e a estabilidade nutricional dos alimentos. Figura 7 – Velocidade reativa das reações frente a atividade da água. Fonte: Oliveira (2006). O valor de Aw que garante maior estabilidade aos alimentos em relação às reações de escurecimento, microbiológicas e de oxidação é igual a 0,300. Quanto maior esse valor maior será a velocidade com que essas reações estarão sujeitas a acontecer (Figura 7). As reações enzimáticas e químicas, diferente das microbiológicas, têm início em Aw baixíssimas.A intervenção nos valores de Aw podem auxiliar no prolongamento da vida de prateleira do alimento. As vitaminas também têm sua estabilidade in� uenciada pela Aw. A perda de vitaminas não promove a deterioração do alimento, mas faz com que reduza seu valor nutricional. As vitaminas mais comuns a sofrer ação da Aw no alimento são: vitamina B2 (ribo� avina), vitamina B1 (tiamina) e vitamina C (ácido ascórbico). Cada uma delas tem um valor de Aw em que sua estabilidade é maior. Não é fácil determinar esses valores, pois vários fatores podem in� uenciar nessa determinação, como, por exemplo, o pH, a temperatura e composição matricial. 31WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 2.4. A Textura dos Alimentos e a Aw A mobilidade das moleculas e a plasti� cação são as duas maiores alterações físicas que um alimento pode sofrer com o aumento da Aw. Em Aw baixas, os alimentos apresentam-se como secos e duros, na faixa intermediária os alimentos podem ser � exíveis, mas também � rmes e secos. Já em altas Aw são mais pegajosos, macios e úmidos (Figura 8). Figura 8 – In� uencia da Atividade da água na textura dos alimentos. Fonte: Braga (2015). A textura � rme de alguns alimentos confere valor comercial aos produtos, exemplos disso são biscoitos crocantes e cereais matinais. Essa textura é determinada pela atividade da água que, se elevada, faz com que o alimento perca essa crocância e tenha menor valor comercial. A mudança física do alimento também é in� uenciada pela Aw, quando se trata de transição vítrea, a qual consiste na mudança de sólido vítreo para semilíquido gomoso, uma condição que acontece quando o aumento na viscosidade leva ao aumento da temperatura de transição vítrea. A composição do alimento e a Aw são fatores que in� uenciam na transição vítrea. Essas condições de temperatura e Aw são de extrema importância no processo de produção do alimento, bem como, na manutenção da sua textura. 3 - MÉTODOS DE MEDIDAS DE ATIVIDADE DE ÁGUA Pode ser medida pelos seguintes métodos: método estático (tradicional), Método manométrico, Método do ponto de congelamento e por Métodos higrométricos. 32WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 3.1. Método Tradicional Para realizar o método tradicional, é necessário pesar uma amostra do alimento a ser analisado (2 a 3 g). Utiliza-se um cadinho de aluminio e um dissecador fechado com umidade relativa do ar conhecida em temperatura controlada (Figura 9). As amostras devem ser regularmente pesadas, em intervalos determinados e constantes, até que o peso atinja a estabilidade, ou seja, a amostra e o ambiente entrem em equilibrio. Calcula-se a Aw subtraindo o peso � nal do inicial da amostra. Figura 9 – Aparelho dessecador utilizado no método convencional para a medida dos valores de atividade da água. Fonte: adaptado de Rahman (2009). A medida da Aw pelo método convencional apresenta algumas desvantagens: • Necessita de amplo espaço físico. • Pode demorar de três semanas a meses para obter peso constante da amostra e o obtenção do equilibrio. • A abertura do aparelho de dessecação faz com o que o produto demore a atingir o equilibrio. • O crescimento de microrganismos pode acontecer em amostras com Aw alta durante as determinações. • O resultado nem sempre é con� ável, pois o tempo de medida pode in� uenciar nos aspectos � sico-químicos. 33WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 3.2. Método do Ponto de Congelamento Utilizado para relacionar as propriedades físicas e químicas com a atividade da água de um alimento. Como já é sabido, o congelamento da água pura exige temperatura maior do que em solução, podendo, assim, ser estabelecida relação entre a Aw e a temperatura. Quando se adiciona solutos a uma solução, consequentemente, altera-se o ponto de congelamento, porque a pressão de vapor é reduzida e começam a formar cristais de gelo em temperatura mais baixa, considerado o ponto de congelamento. Normalmente esse método se aplica à medida de Aw de alimentos compostos de quantidade considerável de compostos voláteis, que não são facilmente medidos por outros métodos. Esse método é aplicado apenas a amostras liquidas, limitando seu uso, o que faz com que seja pouco usado em laboratórios de análises de alimentos e industrias. 3.3. Método Manométrico O método manométrico pode ser, também, utilizado na medida da Aw. Para isto, um alimento, após amostrado, é colocado numa câmara acoplada a um manômetro. Quando o alimento e o ambiente entram em equilíbrio é gerada uma pressão de vapor parcial que é medida pelo aparelho e relacionada à Aw da amostra. Para atingir o equilíbrio, leva-se cerca de uma hora. É um método sensível e altamente preciso, mas não é ideal para alimentos com compostos voláteis. 3.4. Métodos Higrométricos Os aparelhos utilizados são denominados higrômetros e realizam o equilíbrio entre a água livre e o espaço da câmara fechada. O espaço vazio tem sua umidade medida e esta passa a corresponder com a Aw da amostra. Na indústria podem utilizar-se de vários métodos higrométricos, como temperatura de bulbo úmido, temperatura de bulbo seco, capacitância de sal, ponto de orvalho, ponto de congelamento e resistência elétrica. 3.5. A medida de Aw na Indústria Outros setores, além da indústria de alimentos, também utilizam a atividade da água em seus processos. Por exemplo, na agricultura a Aw é importante para saber como garantir a estabilidade de sementes estocadas. Cada semente tem uma composição diferente, para tanto, necessitam de Aw diferentes para manterem-se estáveis. Em Aw muito baixa, podem perder a viabilidade, e em Aw muito alta podem deteriorar-se ou germinarem. A Aw também é de suma importância para a indústria farmacêutica, uma vez que a textura de matérias-primas, o prazo de validade e a dosagem de compostos podem ser alterados pela Aw. A contaminação microbiológica e as reações de degradação podem ser diretamente in� uenciadas pelo aumento na Aw. Através do conhecimento do valor de Aw pode-se prever quanto uma substância é solúvel em outra, assim como avaliar se um medicamento é estável no interior de uma cápsula ou, ainda, veri� car se uma embalagem é estável. 34WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA Na indústria de papel a Aw também tem importância, especialmente no controle de qualidade do processo de secagem, evitando-se, assim, a deformação do papel e até a taxa de absorção da tinta que será usada na impressão. Na Tabela a seguir podem ser observados os principais aparelhos que medem Aw disponíveis no mercado. Tabela 2 – Caracteristicas e preço dos principais equipamentos utilizados na indústria para medir a atividade da água. Fonte: Braga (2015). Todo e qualquer equipamento utilizado na medição da Aw deve ser calibrado, garantindo resultados precisos e con� áveis. Esse processo é facilmente realizado com a utilização de soluções salinas saturadas. São fáceis de preparar, bastante estáveis e variam pouco em relação à Aw. Essas soluções são muito fáceis de serem preparadas, basta adicionar o sal aos poucos em água destilada ou deionizada mexendo com a espátula. A solução deve ter duas fases: uma superfície límpida em cima e um corpo de fundo. Devem ser mantidas em recipiente fechado e temperatura ambiente para evitar perda ou ganho de água. 35WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA 4 - ÁGUA UTILIZADA NA INDÚSTRIA DE ALIMENTOS O abastecimento de água para as indústrias alimentícias deve respeitar os mais altos padrões de qualidade, in� uenciando diretamente no controle higiênico-sanitário, evitando que contaminações ocorram nos produtos processados. A presença de coliformes fecais são indicativos graves de contaminação microbiológica, mas não somente eles são importantes,uma vez que a presença de microrganismos não patogênicos pode ser indicativo de possíveis deteriorações no alimentos já que possuem atividades lipolíticas e proteolíticas durante seu desenvolvimento. As características físico-químicas também são importantes, uma vez que determinam a vida útil dos equipamentos, podendo, de acordo com suas características, causar corrosões ou incrustações nos equipamentos. A água na indústria deve ser classi� cada como matéria-prima e passar por processos de amostragem e atender todos os padrões exigidos em legislação, de acordo com a Portaria N°2.914 de 12 de dezembro de 2011 do Ministério da Saúde. A água que é utilizada na indústria de alimentos deve respeitar especi� cações microbiológicas e físico-químicas. Esta é a forma com que são evitadas alterações dos produtos produzidos por aquela indústria, permitindo que o produto � nal apresente qualidade nos aspectos sensoriais. Mantêm-se as condições higiênico-sanitárias adequadas, sem oferecer risco à saúde de quem irá consumir o alimento produzido, sem contar que evita a deterioração de equipamentos e máquinas utilizadas durante o processamento. Os principais aspectos avaliados são os físicos, os químicos e os microbiológicos. Os métodos que analisam os aspectos físico indicam e medem aquilo que pode ser percebido pelos sentidos: turbidez e cor, sabor e odor. Esses fatores podem in� uenciar negativamente o processamento de alimentos. As características químicas, por sua vez, resultam da dissolução de substâncias na água e requerem meios analíticos para sua determinação. Têm signi� cativa importância na higiene, no processamento, bem como na economia da indústria produtora. Nesse aspecto analisa-se a alcalinidade e acidez, a dureza, alguns compostos como ferro, sílica e manganês e gases. Do ponto de vista microbiológico, considera-se grandes transtornos para uma indústria se a água utilizada não apresentar boa qualidade microbiológica. Se os padrões exigidos pela legislação não forem atendidos, as indústrias são punidas e até impedidas de produzirem o alimento. Portaria N°2.914 de 12 de dezembro de 2011 do Ministério da Saúde. 36WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 2 ENSINO A DISTÂNCIA Na industria, a água pode ser utilizada de diferentes formas, por exemplo como veículo de formulação, adição de ingredientes às formulas, para limpeza e sanitização, para aquecimento ou resfriamento e, dessa forma, como fonte de crescimento para microrganismos. Muitas substâncias podem estar dissolvidas na água que chega à indústria, o que altera sua qualidade e, consequentemente, os processos industriais. 3737WWW.UNINGA.BR UNIDADE 03 SUMÁRIO DA UNIDADE INTRODUÇÃO ............................................................................................................................................................ 39 1. CARBOIDRATOS .................................................................................................................................................... 40 1.1 NOMENCLATURA E ESTRUTURAS .................................................................................................................... 40 1.1.1 DISSACARÍDEOS ............................................................................................................................................... 43 1.1.2 POLISSACARÍDEOS ......................................................................................................................................... 45 1.1.3 AMIDO .............................................................................................................................................................. 46 1.1.4 GLICOGÊNIO ..................................................................................................................................................... 47 1.1.5 CELULOSE ........................................................................................................................................................ 47 1.1.6 PECTINAS ....................................................................................................................................................... 47 1.1.7 GOMAS ............................................................................................................................................................. 48 2. REAÇÕES DOS CARBOIDRATOS ......................................................................................................................... 48 CARBOIDRATOS E PROTEÍNAS PROF.A DRA. ANA PAULA MARGIOTO TESTON ENSINO A DISTÂNCIA DISCIPLINA: ANÁLISES BROMATOLÓGICAS 38WWW.UNINGA.BR 2.1 CARAMELIZAÇÃO ............................................................................................................................................... 48 2.2 REAÇÃO DE MAILLARD ..................................................................................................................................... 48 3. PROTEÍNAS ............................................................................................................................................................51 3.1 ESTRUTURA MOLECULAR DAS PROTEÍNAS ................................................................................................... 52 3.2 DESNATURAÇÃO DAS PROTEÍNAS .................................................................................................................. 53 3.3 IMPORTÂNCIA NUTRICIONAL DAS PROTEÍNAS ............................................................................................ 55 3.3.1 CARNES ............................................................................................................................................................ 55 3.3.2 LEITE ................................................................................................................................................................ 56 39WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA INTRODUÇÃO Nesta unidade serão abordados conceitos da bioquímica de alimentos. A compreensão dos conceitos bioquímicos fundamenta a habilidade de controlar muitos aspectos referentes a características e estabilidade dos alimentos. Será abordado nesta unidade: carboidratos, proteínas e enzimas, bem como os principais alimentos representados por cada classe e os métodos para identi� cação de fraudes e adulterações. Primeiramente será realizada uma abordagem teórica do conhecimento, e logo adiante as abordagens práticas serão descritas e exempli� cadas. Os aspectos bioquímicos estão voltados aos componentes fundamentais que formam a maioria dos alimentos e nos princípios básicos ou processos bioquímicos pertinentes a eles. Serão abordados em forma de categorias. Bons estudos! 40WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA 1. CARBOIDRATOS Também conhecidos como hidratos de carbono ou, até mesmo, por açúcares, representam uma das quatro principais classes de biomoléculas e compõem a maioria das massas orgânicas do planeta. A unidade formadora dos carboidratos é bem simples e pode ser resumida em uma única formula: (CH2O)n. Apresentam funções essenciais à sobrevivência e desenvolvimento humano e animal. As mais importantes são citadas a seguir: • Armazenamento de energia: amido vegetal, glicogênio animal. • Transmissão de energia: ATP, vários intermediários metabólicos. • Formação de componentes estruturais: celulose vegetal, quitina artrópode. • Comunicação intra e extracelular: ligação espermatozoide-óvulo, reconhecimento do sistema imunológico. Essenciais para a indústria alimentícia, os carboidratos constituem em torno de três quartos do peso seco de todas as plantas terrestres e algas marinhas, servindo, portanto, como fonte primária de energia nutritiva de alimentos como grãos, frutas e vegetais, e como ingrediente de sumaimportância para a indústria alimentícia por meio da elaboração de formulados e processados. Na indústria de alimentos, os carboidratos desempenham várias funções: • Adoçantes ou edulcorantes. • Gelei� cação. • Emulsi� cação. • Encapsulamento. • Ligação. • Coloração e produção de sabor por meio de reações de escurecimento. • Controle de umidade. • Controle da atividade da água. 1.1 Nomenclatura e Estruturas A menor unidade de um carboidrato ou unidade básica é chamada de monossacarídeo. Dois monossacarídeos são denominados dissacarídeos, três, trissacarídeos, e assim por diante. Uma cadeia de dois a dez monossacarídeos é denominada de oligossacarídeos, enquanto aquelas que contêm mais de dez monossacarídeos serão denominadas de polissacarídeos. As menores unidades formadoras de carboidratos, ou seja, os monossacarídeos, são aldeídos ou cetonas, com dois ou mais grupos hidroxilas (-OH) e, pelo menos, três carbonos (trioses). Os monossacarídeos mais comuns em relação aos alimentos como a glicose, manose e galactose são aldoses, enquanto que a frutose é uma cetose. 41WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA Figura 1 - Exempli� cação de carboidratos classi� cados como aldose e cetose. Observe que o grupo funcional aldeído e cetona encontram-se destacados em azul. Fonte: Mundo Educação (2019). A Figura 2 mostra estruturas de cadeia aberta, porém, em soluções, os açúcares, como a glicose e a frutose, existem como estruturas de anéis fechados. Açúcares aldoses, como a glicose, formam por ciclização um anel de seis lados chamado de piranose. Os açúcares cetoses, como a frutose, formam anéis de cinco lados, denominados furanoses. Figura 2 - Demonstração das reações de ciclização para formação de piranose e furanose. Fonte: Experimentos de Bioquímica (2019). Com a ciclização pentoses e hexoses contêm um carbono assimétrico adicional. Na glicose, o carbono da carbonila da cadeia aberta C-1 torna-se um carbono assimétrico na con� guração em anel, permitindo, assim, duas formas estruturais distintas chamadas de anômeros (α- e β-glicopiranose). O termo aldose indica a presença de um aldeído e o termo cetose indica a inclusão de um grupamento cetona (Figura 1). 42WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA Figura 3 - Anômeros de glicose. Fonte: Brasil Escola (2019). Ao observar a estrutura de um carboidrato é possível identi� car vários grupos hidroxilas (-OH) ligados em cada molécula, esta característica determina uma alta capacidade deste carboidrato em fazer ligações de hidrogênio. Diante disso, os carboidratos tornam-se muito hidrofílicos, ou seja, altamente capazes de interagir com moléculas de água. Tal propriedade torna-se importante à indústria alimentícia, uma vez que por meio dos carboidratos é possível controlar a umidade dos alimentos. Uma das propriedades mais importantes dos carboidratos é a umectância, a capacidade de uma substância se ligar à água. Na tecnologia de alimentos muitas vezes é necessário controlar a entrada e saída de água dos alimentos. Por exemplo, glacês e coberturas grudentos não são ideais para produção de bolos, neste caso é necessário limitar a entrada de água no alimento. Os açúcares maltose e lactose são ideais para este caso, pois possuem baixa umectância, possibilitam sabor doce e não afetam a textura dos glacês e coberturas. Por outro lado, alguns alimentos exigem maior permanência de água, como é o caso dos assados, que para se manterem macios é necessário reter a água. Açúcares higroscópicos, como o xarope de milho e açúcar invertido são mais adequados aos produtos que precisam manter a umidade. Porém, vale destacar que, além da quantidade de hidroxilas, a umectância também depende da estrutura geral do carboidrato, por exemplo, a glicose e a frutose têm o mesmo número de hidroxilas, no entanto a frutose se liga mais à água do que a glicose. As convenções α e β referem-se à confi guração do grupo hidroxila ligado ao car- bono carbonila, em que α indica que a hidroxila está abaixo do plano da estrutura em anel e β indica que ela está acima do plano do anel, como mostra a Figura 3. 43WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA 1.1.1 Dissacarídeos Os carboidratos sacarose, maltose e lactose são dissacarídeos encontrados em alimentos, logo são constituídos de dois monossacarídeos unidos por uma ligação denominada O-glicosídica. Estas são ligações carbono-carbono, envolvendo o carbono da carbonila de um monossacarídeo com o álcool de outro, como pode ser observada na Figura 4. Figura 4 - Ligações O-glicosídicas entre dois monossacarídeos para a formação da maltose e celobiose. Fonte: Nu- trição Acessível (2015). A sacarose ou açúcar comum é o dissacarídeo mais empregado na indústria alimentícia para efeito adoçante e como doador de carbono nas fermentações. É extraído principalmente da cana-de-açúcar e da beterraba (em outros países, onde a cana não se desenvolve bem). É formada por uma reação de desidratação, onde há a perda de uma molécula de água e formação de uma ligação glicosídica entre glicose e frutose (Figura 5). Figura 5 - Síntese por desidratação de uma molécula de sacarose. Fonte: Tudo sobre os carboidratos! (2013). 44WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA A sacarose não é um açúcar redutor, uma vez que não possui aldeídos livres. A capacidade de redução é normalmente identi� cada em aldeídos e cetonas. A hidrólise da sacarose é realizada pela enzima sacarase, que reverte a sacarose em glicose e frutose. O tratamento da sacarose com sacarase gera o açúcar invertido. Açúcar invertido é obtido quando a sacarose é aquecida em água, devido ao processo de hidrólise, na presença de ácido, é gerado um xarope viscoso, chamado de açúcar invertido e muito utilizado na indústria de balas, biscoitos e outros alimentos doces. O termo “invertido” decorre de uma característica física da sacarose: ela inverte o plano da luz polarizada quando submetida à análise no aparelho polarímetro (aparelho óptico que permite identi� car se uma substância possui poder rotatório e se é dextrógira ou levógira). O raio de luz polarizada que incide sobre o açúcar comum gira para a direita, ou seja, a sacarose é originalmente uma molécula dextrógira (D,+). Mas, após o procedimento descrito, a luz incidente passa a ser desviada para a esquerda, portanto o açúcar invertido é levógiro (L,-). Este açúcar é vastamente utilizado na fabricação de balas e biscoitos. A aplicação em balas previne a cristalização do açúcar (fator desagradável que dá ao produto a consistência arenosa e seca). A função do açúcar invertido em biscoitos é proporcionar ao produto maciez e coloração caramelada. A lactose ou açúcar do leite trata-se de um dissacarídeo, é formada pela ligação glicosídica entre galactose e glicose. É um açúcar redutor e compõe a principal fonte de carboidratos de mamíferos bebês e tem suma importância na saúde humana, relacionada à hidrólise desse dissacarídeo. A hidrolise da lactose é realizada pela enzima lactase no intestino de mamíferos ou pela β-galatosidase presente nas bactérias fermentadoras. Todos os mamíferos jovens, normais, produzem lactase para a digestão do açúcar do leite, no entanto, a maioria dos adultos perdem a capacidade de produzir lactase. Na indústria alimentícia é muito comum a aplicação de tratamento com lactase nos laticínios, para que possam ser ofertados na forma “zero lactose”. A produção de alimentos derivados do leite que passam por processo de fermentação, como queijos e iogurtes, a concentração de lactose é baixíssima ou nula, pois as bactérias fermentadoras convertem a lactose em ácido lático, tornando o alimento livre de lactose. No controle de qualidade do mel, a presença de açúcar invertido é considerada prejudicial à qualidade deste alimento, umavez que indica adulteração do produto original e tem a fi nalidade de prevenir a solidifi cação natural do mel de abelha, porém adultera o produto e interfere na sua qualidade. É preciso saber: um açúcar redutor é qualquer açúcar que, em solução básica, apresenta um grupo carbonílico livre aldeído (derivado de uma aldose). Sua capa- cidade de redução se dá pela presença de um grupo aldeído ou cetona livre. Açu- cares redutores reagem com aminoácidos na reação de Maillard, que ocorre prin- cipalmente ao cozinhar uma comida em altas temperaturas, conferindo sabor ou gerando produtos tóxicos e prejudiciais à saúde. Os níveis de açúcares redutores também são importantes para identifi car a qualidade de produtos como vinhos, sucos e cana-de-açúcar. Os açúcares mais comuns que consumimos galactose, glicose e frutose são açucares redutores. 45WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA O dissacarídeo maltose é formado por duas unidades de glicose unidas por ligação glicosídica. A ligação de várias moléculas de maltose dá origem ao polissacarídeo amido (será discutido detalhadamente mais adiante), a digestão do amido ocorre pela enzima β-amilase. 1.1.2 Polissacarídeos São formados pela junção de centenas de monossacarídeos de forma repetida, e nomeados sistematicamente com o su� xo –ano. Apresentam três funções principais, tanto em animais quanto nos vegetais, sendo elas: • Fonte de energia (amido e glicogênio). • Estruturação (celulose). • Aglutinação de água (ágar, pectina e alginato). Em relação à tecnologia de alimentos, uma das propriedades mais importantes dos polissacarídeos está em sua capacidade de formar géis aquosos, geralmente após o aquecimento, contribuindo, desta forma, para a estruturação e textura de alguns alimentos. Toda lactose ingerida por individuo normal é convertida pela lactase em glicose e galactose, pois apenas esses monossacarídeos são absorvidos pelo intestino. Em indivíduos com intolerância à lactose, devido à ausência de lactase, ocorre o acumulo de açucares no intestino delgado, gerando um infl uxo de fl uido devido ao aumento da osmolaridade. Quando esse açúcar acumulado atinge a parte inferior do intestino, ele passa a ser anaerobicamente fermentado pelas bactérias ali pre- sentes, produzindo gases e ácidos de cadeia curta que promovem a irritabilidade da superfície intestinal. O resultado inclui quadros de inchaço abdominal, cólicas e diarreias, proporcionais ao nível de defi ciência de lactase e a quantidade de lac- tose ingerida. O refl exo desse quadro está na redução da absorção de nutrientes e água. Na indústria fabricante de cervejas o termo malte consiste no produto obtido a partir da germinação dos grãos de cevada após fi carem mergulhados em água. A produção da β-amilase após a germinação promove a hidrólise do amido presente nos grãos em maltose. Maltose é um açúcar redutor, portanto pode ser hidrolisa- do cada vez mais pela β-amilase e gerar glicose livre. Ou seja, a fabricação dos mais diversos tipos de cerveja, com sabores peculiares está relacionada ao malte utilizado e o quanto ele é exposto à hidrólise pela β-lactamase. 46WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA 1.1.3 Amido O amido é um polissacarídeo constituído de dois tipos de glicanos, a amilose e a amilopectina. A amilose é um polímero linear, já a amilopectina é um polímero de cadeia rami� cada, como pode ser visto na Figura 6. Figura 6 - Estruturas químicas da amilose (cadeia linear) e Amilopectina (cadeia rami� cada). Fonte: Mundo da bioquímica (2017). A amilose forma estruturas em hélice com capacidade de prender outras moléculas em sua estrutura, tais como álcoois orgânicos ou ácidos graxos para formar compostos de inclusão de estrutura helicoidal ou espiral. A Amilopectina é uma molécula mais complexa que a amilose devido à sua estrutura. O processo de gelatinização é característico do amido quando hidratado e submetido a temperaturas na faixa de 55-70ºC. Durante este processo, inicialmente os grânulos de amido absorvem água e incham, como consequência perdem progressivamente sua estrutura organizada. Grânulos de amido hidratados separam a amilose, o que favorece o aumento da viscosidade até o ponto em que se forma uma pasta. Conforme ocorre o esfriamento dessa pasta, interações do tipo ligações de hidrogênio ocorrem entre amilose e amilopectina levando a formação de um gel. 47WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA 1.1.4 Glicogênio É o polissacarídeo armazenado pelos animais no fígado e nos músculos como fonte de energia. Tem uma estrutura muito similar à Amilopectina, porém com mais rami� cações. Essas rami� cações são favoráveis à liberação rápida da glicose. O metabolismo de glicogênio não cessa com o abate, portanto as carnes que são comercializadas já perderam todo seu glicogênio. 1.1.5 Celulose É o polissacarídeo mais abundante na natureza, constitui as paredes celulares das plantas. É um polímero linear de resíduos de glicopiranose ligados por β (1→4). Esta ligação β não é quebrada pelas amilases salivares como ocorre com o amido, sendo assim, a celulose representa, na dieta, uma importante fonte de � bras, já que não pode ser digerida pelo organismo humano. As � bras são digeridas no intestino delgado, através da microbiota que naturalmente coloniza o intestino, e fermenta a celulose. 1.1.6 Pectinas Apresentam como característica principal a capacidade de retenção de água e formação de gel. Géis consistem de uma rede polimérica tridimensional de cadeias que prendem a água. Devido às suas propriedades gelei� cantes, as pectinas são utilizadas especialmente na fabricação de geleias e conservas. Geleias de maçã são ricas em pectina, mas não por adição industrial e sim por característica própria da fruta, que é rica em pectinas. O gel de amido, quando armazenado por muito tempo, passa por um processo chamado retrogradação, em que as moléculas de amilose se agrupam para formar complexos cristalinos, fazendo com que o gel de amido encolha e sofra sinerese. Para evitar retrogradação em produtos alimentares são utilizados amidos cerosos que contêm apenas Amilopectina, ou então, amidos quimicamente modifi cados que são parcialmente hidrolisados. Sinerese: é uma reação causada por um aumento de associações moleculares entre as cadeias de amido, em particular a retrogradação da amilose, o que resulta na expulsão de água a partir da estrutura do gel (MORRIS, 1990). Os farelos, em geral, são constituídos por hemicelulose que constitui um grande grupo das fi bras. Por isso, as recomendações dietéticas sobre a ingestão de fare- los de aveia, de arroz e outros. 48WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA 1.1.7 Gomas As gomas são grupos de polissacarídeos incapazes de formar géis, mas que possuem alta a� nidade pela água, permitindo a formação de soluções aquosas altamente viscosas. Uma goma bastante conhecida é a goma xantana, secretada pela Xanthomonas campestris. A goma xantana é um aditivo alimentar comumente utilizada pela indústria alimentícia, quando o objetivo é tornar o alimento mais viscoso, como exemplo nos cremes de leite industrializados. 2. REAÇÕES DOS CARBOIDRATOS 2.1 Caramelização A caramelização é uma reação de escurecimento não enzimático, em que uma solução concentrada de açúcares é aquecida acima de 100ºC, com isso várias reações de decomposição térmica podem ocorrer causando a formação de componentes de sabor e produtos de coloração marrom. Este processo ocorre particularmente durante o processo de derretimento de sacarose (açúcar comum). Durante a caramelização, ocorrem etapas de formação de compostos importantes. A primeira etapa desta reação é a isomerização reversível de aldoses ou cetoses, em sua forma de cadeia aberta para formar um enediol. Esse intermediáriopode, então, desidratar para formar uma série de produtos de degradação. No caso de hexoses, o produto formado será o 5-dhidormetil-2- furaldeido (HMF), enquanto que as pentoses produzem principalmente o furfural. 2.2 Reação de Maillard Esta reação consiste em uma reação química entre um aminoácido e um açúcar redutor que por meio da formação de vários intermediários reativos leva a formação de compostos de sabor e pigmentos de melanoidina. Inicialmente ocorre a condensação do açúcar redutor e do aminoácido. O grupo carbonila reativo do açúcar reage com o grupo amino nucleofílico do aminoácido para formar um composto Amadori. Para que esta reação ocorra se faz necessário altas temperaturas (>100ºC), baixo teor de umidade e um ambiente alcalino (Figura 7). Na indústria alimentícia HMF e furfural são indicadores úteis de temperatura exa- ta de armazenamento de alimentos. 49WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA Figura 7 - Estágios da reação de Maillard. Fonte: Google imagens (2019). Figura 8 - Diferentes níveis de reação de Maillard. Quanto mais escura a fatia de pão, maior a produção de acrilami- da (propriedades mutagênicas ou cancerígenas). Fonte: Jornal Momento Químico (2018). Reação de Maillard é a reação que produz o cheiro de pão assando, carne assan- do ou outros alimentos passando pelo processo de cozimento. Além do aroma produzido, esta reação também é responsável pelo tom de cor dos alimentos pre- parados. 50WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA Ainda que a cor e o aroma produzidos durante a reação de Maillard sejam posi- tivos em alguns aspectos, esta apresenta algumas implicações, tais como a per- da de aminoácidos essenciais (cisteína e metionina), a formação de compostos mutagênicos e podem causar reticulação de proteínas, implicando no diabetes. Os derivados tóxicos do açúcar mais importantes são aqueles de propriedades mutagênicas, principalmente as aminas heterocíclicas, formadas, por exemplo, quando as carnes são grelhadas em temperaturas muito altas por longo período de tempo (crosta queimada), além disso, a acrilamida encontrada em salgadinhos a base de batata também gera preocupações devido ao seu potencial cancerígeno (Figura 8). Nos produtos industrializados, os adoçantes, principalmente os artifi ciais, estão presentes em alimentos diet, as vezes nos light e especialmente nos alimentos zero açúcar, como refrigerantes, gelatinas, guloseimas, entre outros. Leia mais sobre a reação de Maillard em: <https://jornalmomentoquimico.wor- dpress.com/2018/03/23/quimica-alimentar-e-a-reacao-de-maillard/>. Portaria nº 29, de 13 de janeiro de 1998; Resolução RDC n° 271, de 22 de setembro de 2005. Reações de Escurecimento. Disponível em: <https://www.youtube.com/watch?v=NJnl8IYsNBo>. 51WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA 3. PROTEÍNAS As proteínas são componentes essenciais da formação dos tecidos, tantos vegetais quanto animais, sendo um macronutriente de extrema importância ao organismo humano. São constituídas por inúmeros aminoácidos ligados por ligações peptídicas, sendo assim, chamados de polipeptídeos. A menor unidade formadora de polipeptídeos são os aminoácidos. A Figura 9 mostra a estrutura geral de um aminoácido. Figura 9 - Estrutura geral de um aminoácido. Fonte: Google imagens (2019). Consiste em um ácido carboxílico ligado a um grupo amino, um átomo de hidrogênio e um grupo R distinto, todos eles ligados a um carbono α. O grupo R varia de um aminoácido para outro, sendo a cadeia lateral que determina a identidade do aminoácido. Existem 20 aminoácidos diferentes comumente encontrados nas proteínas, porém algumas proteínas possuem aminoácidos incomuns (além dos 20 aminoácidos padrão). As ligações peptídicas são responsáveis pela união de dois ou mais aminoácidos e formação de peptídeos e polipeptídeos (Figura 10). Figura 10 - Ligação peptídica formada entre o grupo carboxílico de um aminoácido e o grupo amino de outro ami- noácido por uma reação de condensação ou síntese por desidratação, com a perda de uma molécula de água. Fonte: adaptado de Mundo da bioquímica (2015). 52WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA Peptídeos são compostos menores, de até 50 aminoácidos ligados, enquanto que um polipeptídeo consiste em cadeias de 50-100 resíduos de aminoácidos ligados. Uma proteína é uma cadeia de polipetídeos de mais de 100 resíduos de aminoácidos e possui um grupo amino com nitrogênio de carga positiva em uma ponta (N terminal) e um grupo carboxílico de carga negativa na outra ponta (C terminal). 3.1 Estrutura Molecular das Proteínas As proteínas são classi� cadas em estruturas primárias, secundárias e terciárias. Primárias: é a sequência simples de aminoácidos ligados, listados a partir do aminoácido N terminal. Existem milhões de possíveis sequencias, como mostra a Figura 11. Figura 11 - Estrutura primária de uma proteína. Aminoácidos ligados por ligações peptídicas. Fonte: Google ima- gens (2019). Secundárias: a ligação de hidrogênio que pode ocorrer entre um átomo de hidrogênio da amida com um par de elétrons livres em um átomo de oxigênio da carbonila determina a formação das estruturas secundárias (cadeia polipeptídica). Essas ligações de H promovem o enovelamento da estrutura proteica. Terciárias: consiste na disposição tridimensional de todos os átomos dentro da molécula. As proteínas dobram para formar uma estrutura mais estável. Classi� cam-se em dois tipos: • � brosas: formadas por uma haste longa mecanicamente resistentes, desempenhando, na maioria das vezes, um papel estrutural na natureza. Relativamente insolúvel em água e não se deixam afetar por mudanças moderadas de temperatura e pH. • globulares: as estruturas proteicas dobram-se umas sobre as outras, interagindo com o solvente. Não é uma estrutura estática, e sensível às mudanças de temperatura e pH. 53WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA Essa sensibilidade das proteínas globulares frente a temperatura e pH é de suma importância na tecnologia de alimentos, pois pode determinar o prazo de validade e condições de preparo e armazenamento dos alimentos compostos por elas. Quaternárias: característica de proteínas formadas por mais de uma cadeia polipeptídica. Nem todas as proteínas adquirem essa conformação. Um exemplo de proteína quaternária é a hemoglobina (duas cadeias α e duas cadeias β). A Figura 12 resume a classi� cação estrutural das proteínas. Figura 12 - Estruturas primária, secundária, terciária e quaternária das proteínas. Fonte: adaptado de Google ima- gens (2019). 3.2 Desnaturação das Proteínas Consiste no processo de romper a estrutura nativa da proteína, formada por forças que estabilizam as estruturas secundárias, terciárias e quaternárias das proteínas. O rompimento dessas estruturas pode se dar por tratamentos físicos (ex.: calor) ou químicos (ex.: alteração de pH). Esse processo pode ocorrer durante o processamento dos alimentos à base de proteínas, fazendo com que ocorra mudanças na proteína, alterando suas propriedades físicas e/ou biológicas sem provocar quebra de suas ligações peptídicas. Em geral, caracteriza-se pelo desdobramento da proteína. 54WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA Algumas consequências importantes da desnaturação proteica consistem: • Perda da atividade biológica (ex.: atividade enzimática). • Perda da solubilidade e mudanças na capacidade de ligação com a água. • Viscosidade intrínseca aumentada. • Aumento da suscetibilidade à proteólise. A desnaturação pode ser um processo reversível ou irreversível, depende da suscetibilidade da proteína e dos fatores aos quais forem expostas, podendo ser físicos ou químicos (Figura 13). Figura13 - Esquema de desnaturação proteica. A - modelo de estrutura proteica natural. B - proteína desnaturada (perda da conformação estrutural). C - ovo cru, alimento rico em proteínas. D - ovo cozido, exemplo prático da desnaturação pelo calor. Fonte: Google imagens (2019). Físicos: incluem calor, tratamento mecânico, pressão hidrostática, irradiação e adsorção. O calor é o agente físico mais empregado, uma vez que tende a melhorar as propriedades sensoriais e a digestibilidade das proteínas, também pode ser utilizado para manipular as propriedades espumantes e emulsi� cantes. Também é importante durante a reação de Maillard vista no tópico “Carboidratos”. Os agentes químicos que desnaturam proteínas são os ácidos, álcalis, metais, solventes e solutos orgânicos. Um exemplo de relevância na produção de alimentos é a ação da quimosina sobre a caseína. A quimosina quebra a ligação peptídica entre a fenilalanina e a metionina na k-caseína, usada para causar precipitação ampla e formação do coalho durante a fabricação de queijos. 55WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA A quimosina é uma enzima presente no estômago de bezerros para digestão do leite que eles mamam. A partir de modi� cações tecnológicas, hoje é possível comprar a quimosina associada a leveduras e produzir o queijo. 3.3 Importância Nutricional das Proteínas Consiste em uma das fontes nutricionais mais importantes para seres humanos e animais, são aproveitadas pelo corpo principalmente para fornecer nitrogênio e aminoácidos, a partir do qual o organismo sintetiza suas próprias proteínas. Dentro do trato gastrointestinal as enzimas hidrolíticas quebram as proteínas em seus aminoácidos formadores, que são, então, usados pelo corpo para sintetizar outras substâncias. O fígado é órgão responsável pelo equilíbrio entre o fornecimento de aminoácidos e a necessidade de síntese. As proteínas são classi� cadas de acordo com seu conteúdo de aminoácidos essenciais e não essenciais. Aminoácidos Essenciais são aqueles que nosso organismo não é capaz de produzir, portanto devem advir da alimentação. Aminoácidos essenciais compreendem: histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina. Enquanto que os Não Essenciais são sintetizados pelo organismo com base no nitrogênio amino e carboidratos provenientes da alimentação. Em geral, alimentos proteicos de origem animal, como carnes, ovos e leite, são fontes completas de aminoácidos, ao passo que as proteínas de origem vegetal são menos e� cientes, pois são de� cientes de lisina ou metionina. Por isso vegetarianos devem utilizar de suplementação ou proteínas mais completas para evitar a de� ciência desses aminoácidos essenciais. 3.3.1 Carnes As carnes representam as principais fontes proteicas da alimentação humana. Rica em proteínas de origem animal, lipídeos e água. Normalmente possui atividade de água próximo a 0,99 e pH entre 5,4 e 5,9, fazendo deste alimento altamente perecível, favorecendo o crescimento de diversos microrganismos, como bactérias, bolores e leveduras. Seu tempo de prateleira depende principalmente das condições higiênicas durante o abate. Sem contar que, por serem obtidas de animais, podem sofrer contaminação por parasitos, que se tornam fonte de infecção aos humanos, como exemplos os cisticercos de Taenia saginata presente na carne bovina. Para serem obtidas as carnes, os músculos, após o abate do animal, passam por um processo denominado rigor mortis, que corresponde um sinal reconhecível de morte que é causado por uma mudança química nos músculos, causando aos membros um endurecimento (“rigor”) e impossibilidade de mexê-los ou manipulá-los. Em média, o rigor mortis começa entre 3 e 4 horas post-mortem, com total efeito do rigor em aproximadamente 12 horas e, � nalmente, o relaxamento em aproximadamente 36 horas. Neste período os músculos estão completamente transformados em carnes. O estresse dos animais pré-abate é considerado fator crucial na obtenção de carne macia e saborosa. Assista o vídeo: Fabricação industrial de queijos em Portugal. Disponível em: <https://www.youtube.com/watch?v=dkNvr8TQgLw>. 56WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA 3.3.2 Leite Do ponto de vista nutricional e bromatológico não tem como falar de proteínas sem adentrar ao alimento leite. O leite é composto em sua maior parte por água (87,5%) e nela encontram-se dispersos os demais componentes, sendo as proteínas, gorduras, açúcares (como a lactose citada anteriormente em carboidratos), sais minerais e vitaminas, formando uma emulsão gordurosa em solução aquosa rica em várias substancias em estados coloidal. Devido a seu alto valor nutritivo torna-se também um excelente meio de proliferação de microrganismos, como as bactérias. A principal proteína do leite é a caseína. Do total de caseína bruta, 50% está sob a forma de α-caseína, 30% sob a forma de β-caseína, 5% de γ-caseína e 15% de k-caseína. A caseína é formada por aminoácidos essenciais para o crescimento dos animais jovens e está associada ao cálcio e fosforo podendo ser coagulada por ação de ácidos, quimosina (vista anteriormente) ou álcool. As proteínas do soro são compostas por 64% de α-lactoalbumina, 15% de β-lactoglobulina, 7% de albumina, 13% de lactoferrina e 1% de imunoglobulina. A caseína e imunoglobulina são proteínas insolúveis, as demais são proteínas solúveis. São consideradas de alta qualidade nutricional e possuem propriedades funcionais. Outras proteínas estão associadas com a fase gordurosa ou lipídica e em pequenas concentrações, como a lactoferrina, lactoperoxidade e lizosima atuam como inibidores do crescimento bacteriano no leite. No Brasil, o consumo de leite cru não é permitido, sendo assim, todo o leite comercializado no país deve passar pelo processo de pasteurização. A caseína é o principal constituinte dos queijos (após precipitação ácida), enquan- to que as proteínas do soro formam a ricota após precipitação ácida. Os tipos de leite são classifi cados de acordo com a legislação brasileira: • TIPO “A”: a produção do leite deve ocorrer nas granjas leiteiras, o veterinário do Serviço de Inspeção Federal (SIF) deve realizar o acompanhamento do rebanho. O leite deve ser ordenhado mecanicamente e pasteurizado logo em seguida. A rotu- lagem deve ser de cor azul. A contagem padrão de bactérias não deve ultrapassar 2,0 x 103 UFC/mL, e não pode conter coliformes fecais. • TIPO “B”: estábulos leiteiros devem ser os locais de produção, a ordenha deve ser realizada mecanicamente e em seguida o leite pode ser resfriado para ser transportado até o local onde será realizada a pasteurização. Tem que ser do tipo integral. A cor da rotulagem é verde. A contagem padrão de bactérias não deve ultrapassar 2,0 x 104 UFC/mL. Coliformes fecais não podem ultrapassar 1,0 /mL. 57WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 3 ENSINO A DISTÂNCIA • TIPO “C”: é o tipo de leite que não exige acompanhamento do SIF, e pode ser pro- duzido sem exigências em relação à propriedade. A quantidade de gordura tem que estar em 3%. A cor do rótulo deve ser marrom. A contagem de bactérias não pode ultrapassar 3,0 x 105 UFC/mL, 4,0 /mL para coliformes totais e 2,0 /mL para coliformes fecais • UHT: normalmente utiliza-se leite tipo C e precisa passar por pasteurização de longa duração, que classifi ca o leite como UHT ou longa vida. A associação com a embalagem adequada, permite aumentar o tempo de prateleira ou prazo de vali- dade. Não precisa ser conservado sob refrigeração. • INTEGRAL: contém teor igual ou superior a 3% de gordura. • SEMI-DESNATADO: deve conter teor de gordura que varie de 0,6 a 2%. • DESNATADO: deve conter no máximo teor de 0,5% de gordura. O leite pode passar por diferentes tipos de tratamentos térmicos que, associados a embalagem correta, farão com o que o produtotenha mais tempo de pratelei- ra. Para cada tipo de leite é necessário um tipo de máquina para realização do tratamento térmico e envase. O prazo de validade (em dias) do leite processado também irá diferir. A pasteurização é um tratamento térmico e pode ser de três tipos: muito rápida (UHT “Ultra Hight Temperature”, 135ºC/4 seg.), rápida (HTST “High Temperature and Short Time”, 75- 120ºC/15 seg.), ou lenta (LTLT “Low Temperature Long Time”, 63ºC/30min.). Para ser considerado pasteurizado o leite deve passar por um aparelho chamado pasteurizador de placas, em seguida resfriado até aproximadamente 4ºC. Para evitar a contaminação, o envase precisa ser em circuito fechado. Para ser considerado como UHT, o leite deve passar pelo processo de � uxo contínuo, com temperaturas que variam de 130 a 150ºC pelo tempo de 2 a 4 minutos, logo em seguida deve ser resfriado a aproximadamente 32ºC, o envase deve ser realizado em condições assépticas, embalados em embalagens esterilizadas e fechadas hermeticamente. Este tipo de leite também é conhecido como longa vida, devido ao período de tempo que � ca na prateleira sem necessitar de resfriamento. Tecnologia de leite em pó na indústria. Disponível em: <https://www.youtube.com/watch?v=UgU4GDSwIU4>. 5858WWW.UNINGA.BR UNIDADE 04 SUMÁRIO DA UNIDADE INTRODUÇÃO ............................................................................................................................................................ 59 1. LIPÍDEOS ............................................................................................................................................................... 60 1.1 ÁCIDOS GRAXOS ................................................................................................................................................. 60 1.2 PROCESSAMENTO DE ÓLEOS E GORDURAS .................................................................................................. 62 1.2.1 HIDROGENAÇÃO DE LIPÍDEOS ...................................................................................................................... 62 1.2.2 INTERESTERIFICAÇÃO.................................................................................................................................... 64 1.3 EXTRAÇÃO DE ÓLEOS VEGETAIS ..................................................................................................................... 64 1.4 OXIDAÇÃO LIPÍDICA ........................................................................................................................................... 68 1.5 AUTO-OXIDAÇÃO E FOTOXIDAÇÃO ................................................................................................................... 68 1.6 OXIDAÇÃO HIDROLÍTICA (RANCIDEZ) OU LIPOLÍTICA .................................................................................. 69 1.7 MÉTODOS PARA DETERMINAÇÃO DA RANCIDEZ OXIDATIVA ..................................................................... 70 1.8 EFEITOS ANTIOXIDANTES .................................................................................................................................73 LIPÍDEOS PROF.A DRA. ANA PAULA MARGIOTO TESTON ENSINO A DISTÂNCIA DISCIPLINA: ANÁLISES BROMATOLÓGICAS 59WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA INTRODUÇÃO Nesta unidade será dado continuidade aos conceitos da bioquímica de alimentos, porém com ênfase na bioquímica e demais aspectos relacionados aos lipídeos. Com destaque para alguns processos e alimentos pertencentes a esta classe e os métodos para identi� cação de fraudes e adulterações. Continuaremos com a inicial apresentação da abordagem teórica do conhecimento e, logo adiante, as abordagens práticas serão descritas e exempli� cadas. Bons estudos! 60WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA 1. LIPÍDEOS São macromolécula s com função estrutural e de armazenamento de energia, precursores de hormônios e sais biliares; transporte de vitaminas lipossolúveis, isolantes térmico e físico; e impermeabilizantes de superfícies. De modo geral são solúveis em solventes orgânicos apolares e apresentam baixa solubilidade em água. Formados pela associação de ácidos graxos mais álcool. São comumente denominados Óleos e Gorduras. Óleos comestíveis, à temperatura ambiente, apresentam-se no estado líquido, enquanto que as gorduras são sólidas ou semissólidas. Isso se dá pela estrutura química dos ácidos graxos que compõem o óleo (insaturados) ou a gordura (saturados) (Figura 1). Figura 1 - Conformação estr utural de óleos e gorduras. Fonte: adaptado de Wikilivros (2014). 1.1 Ácidos Graxos Um ácido grax o é um ácido carboxílico com uma cadeia ou cauda alifática longa não rami� cada. A cadeia alifática pode ser tanto saturada (sem ligações duplas entre os carbonos), como insaturadas (com uma ou mais ligações duplas entre os carbonos). Ácidos graxos saturados normalmente possuem um número par de átomos de carbono (n = 4 a n = 20). Nos ácidos graxos insaturados as ligações duplas podem adotar tanto uma con� guração –cis quanto –trans (Figura 2). A Figura 3, mostra a classi� cação dos ácidos graxos e alguns exemplos. De acordo com a resolução ANVISA RDC 270 de 2005, a classifi cação de lipídeos graxos em óleos e gorduras não depende da natureza da fonte oleaginosa, mas apenas do ponto de fusão da mistura na temperatura de 25 ºC. Segundo essa resolução, em 25 ºC os óleos são líquidos e as gorduras são sólidos ou pastosas. 61WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA Figura 2 - Diferenças estrut urais de ácidos graxos cis e trans. Fonte: adaptado de NutriçãoSadia (2008) e Wikilivros (2014). Figura 3 - Classi� cação dos ácidos graxos de acordo com o número de duplas ligações. Fonte: adaptado de Passei Direto (2018). Nos óleos e gorduras podem ser encontrados os ácidos graxos livres ou, preferencialmente, combinados. Na forma combinada, seus derivados são normalmente encontrados como monoacilglicerídeos, diacilglicerídeos e triacilglicerídeos. 62WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA A tecnologia de óleos e gorduras é crucial à saúde humana, uma vez que o exces- so delas pode refl etir diretamente na homeostase. Um exemplo claro são as dislipidemias, condições em que os níveis de lipíde- os corporais se elevam além do considerado normal. O aumento do LDL, é uma dislipidemia que pode levar a sérios problemas como infarto e acidente vascular cerebral (AVC). Os lipídeos são 2,23 vezes mais fonte de energia/kg quando da oxidação, em rela- ção aos carboidratos (açúcares, amidos, celuloses, gomas, entre outros). Disponível em: <https://www.revistas.usp.br/rbefe/article/view/16561>. 1.2 Processamento de Óleos e Gorduras 1.2.1 Hidrogenação de lipídeos Consiste em um processo industrial importante que promove a conversão de ácidos graxos cis em trans, óleos líquidos em gorduras semissólidas ou sólidas. Este processo é utilizado pelas indústrias para promover o aumento da estabilidade oxidativa, através da conversão de ácidos graxos insaturados em saturados. De forma sucinta, a hidrogenação consiste no processo de exposição do óleo ao gás hidrogênio sob condições de altas temperaturas (150-180ºC) e pressão (2-10 atm), na presença de um catalisador de níquel (Figura 4). 63WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA Figura 4 - Representação de um processo de hidrogenação de óleo à gordura. Fonte: adaptado de SlideShare (2013). As gorduras trans são encontradas em alimentos industrializados com o intuito de aumentar o tempo de prateleira, ou seja, o prazo de validade, além de aumentar a palatabilidade, como exemplo a cremosidade dos sorvetes, crocância de biscoi- tos e bolachas, maciez de pães e bolos industrializados.Margarinas são alimen- tos que não são encontrados na natureza, são obtidas pela hidrogenação do óleo de milho. A isomerização de cis para trans, reduz o valor nutricional dos alimentos. Por ser obtida apenas sob processo artifi cial, esta gordura possui temperatura de crista- lização acima da temperatura do corpo humano e, além do metabolismo difícil, não é bem processada pelo organismo humano, sendo que o consumo excessivo destas gorduras refl etem no revestimento e acúmulo destas nas paredes dos va- sos sanguíneos, aumentando consideravelmente o risco de doenças cardíacas e coronarianas, como a aterosclerose e infarto. 64WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA 1.2.2 Interesterificação Como as gorduras e óleos não apresentam uma distribuição uniforme dos ácidos graxos que compõem os triglicerídeos, a reação de interesteri� cação consegue realizar essa reorganização mudando a consistência da mesma (Figura 5). Figura 5 - Desenho esquemático do processo de interesteri� cação. Fonte: Panelas de Gaya (2016). Este processo consiste em aquecer as gorduras e óleos a altas temperaturas (<200ºC) por longos períodos, o que pode ser substituído pelo uso de catalisadores, como o metóxido de sódio. O uso de enzimas fúngicas (lipases) também é comum e promove efeito similar ao catalisador, o que é chamado de transesteri� cação. Exemplo clássico de transesteri� cação é a produção de manteiga de cacau a partir de óleo de palma. Os constituintes químicos são relativamente os mesmos, rearranjados, e a manteiga de cacau tem maior valor comercial do que o óleo de palma. 1.3 Extração de Óleos Vegetais Os métodos mais aplicados na extração de óleos são o de prensagem, extração por meio de solvente ou a combinação dos dois. Para extrair por prensagem é necessário esmagar o material sob aquecimento e pressão, permitindo o escoamento do óleo do interior das células do grão ou parte da planta que estiver sendo extraído. Para cada tipo de material são necessárias condições de pressão e temperatura especí� cas. O Biodisel é produzido a partir de uma reação de insteresterifi cação chamada alcoólise. A reação de transesterifi cação que lhes dá origem consiste na reação dos triglicerídeos presentes nos óleos vegetais ou gorduras animais com álcool em presença de catalisador. Os óleos vegetais usados podem ser de mamona, de dendê, de palma de soja, milho, amendoim, algodão, babaçu etc. Óleos de fri- turas também podem ser reutilizados, esse reaproveitamento é benéfi co para o meio ambiente porque impede que esses óleos sejam lançados nas águas de rios, lagos, lençóis freáticos ou contaminem o solo. Além do biodiesel, obtém-se tam- bém a glicerina como produto. Esse é outro aspecto positivo, porque a glicerina é um produto de valor comercial, sendo usada na produção de cosméticos e produ- tos de limpeza. 65WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA Para extrair por solventes, o ideal é que se combine com o processo de extração por prensagem, mas também pode ser realizada isolada. Devido aos altos rendimentos na indústria, tem sido dada grande importância ao método, pelos fatores econômicos e técnicos. Promove alterações na natureza física do óleo. Para extrair um óleo, seguem-se as etapas e processos: limpa-se as sementes e removem- se as cascas, a polpa é triturada e, em seguida, cozida. Após cozimento a polpa é prensada e, então, obtém-se o óleo bruto, que deverá passar por processo de puri� cação. Ao que restou após a prensagem é chamado de torta, que pode ser moída ou triturada. A trituração da polpa tem como objetivo facilitar a extração do óleo, seja por prensagem ou por solvente. O cozimento tem como objetivo amolecer as paredes das células para facilitar a extração do óleo. O processo de prensagem faz com que a polpa aquecida e triturada expila o óleo através de uma parede vazada. 5 a 12% não são extraídos por prensagem, necessitando de uma extração por solvente em seguida. A extração por solvente tem percentual de perda de apenas 1%. O que sobra da prensagem é submetido a ação do solvente, este dissolve o óleo residual e passa por uma destilação para ser recuperado. O que resta da extração por solvente, em torno de 1% do óleo, é moída e ensacada para � ns posteriores (Figura 6). Figura 6 - Exemplo das etapas co mpreendidas no processo de extração de óleos vegetais, no caso óleo de algodão. Fonte: Castro (2014). 66WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA São chamados de óleos extravirgens ou virgens, o que pode ser visto com frequ- ência nos rótulos de óleos nos supermercados, aqueles que são considerados óleos especiais, como o de oliva. O óleo de oliva, depois de ser mecanicamente prensado, passa por uma fi ltragem simples para apenas retirar algumas partículas maiores. Desta forma, estes óleos são consumidos logo após sua extração, sem precisar passar pela etapa de refi no ou purifi cação. A diferença entre óleo extra- virgem e virgem é a temperatura empregada na prensagem. O óleo extravirgem é prensado a frio, em temperatura ambiente. O óleo virgem é obtido do que sobrou da prensagem do extravirgem, depois que a torta é aquecida a 70ºC. O óleo virgem é considerado de menor qualidade que o extravirgem, uma vez que a temperatura alta favorece reações de quebra de triglicerídeos por hidrólise, o que promove o aumento na acidez do óleo virgem, já que a porcentagem de ácidos graxos livres é maior. Assista em: <https://www.youtube.com/watch?v=ORyII6JkQRE>. Óleo bruto é o nome do óleo proveniente da extração, o qual precisa passar por etapa de re� no para obtenção de produto de maior qualidade e próprio para o consumo. O óleo de soja é um importante exemplo, porque possui muitos contaminantes quando óleo bruto. Ácidos graxos livres, lecitina e tocoferol são os contaminantes mais comuns no óleo bruto de soja. A presença deles confere gosto e odores ruins e estabilizam emulsões em água. Para que o óleo de soja possa ser usado na alimentação humana ou em outros processos na indústria de alimentos, essas impurezas precisam ser removidas por meio de um processo de re� no (Figura 7). 67WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA Figura 7 - Esquema de re� no de ó leo bruto. Fonte: Castro (2014). Os objetivos do re� no de óleos são diminuir os odores desagradáveis e fortes do óleo bruto, deixar mais claro e límpido (coloração) e alterar a acidez, desfavorável ao consumo. O Brasil converte anualmente 15 milhões de toneladas de soja em óleos, conse- quentemente, são produzidas 60.000 toneladas/ano de subprodutos do refi no ri- cos em fosfatídeos. Os fosfatídeos da soja são conhecidos como lecitina de soja e é empregada em várias e diversas aplicações na produção de outros alimentos. É utilizada como antioxidantes na produção de margarinas, como homogeneiza- dor de chocolates e doces, melhora a viscosidade de coberturas, dá cremosidade aos sorvetes e queijos. 68WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA 1.4 Oxidação lipídica A porção de lipídeos de um alimento pode ser relacionada a diferentes propriedades do alimento, como o conteúdo calórico, prazo de validade após congelamento, estabilidade de algumas proteínas, suculência, textura, cor e aroma. A oxidação lipídica deteriora os lipídeos e gera alterações organolépticas nos produtos, com odores característicos conhecidos como rançosos. A reação de oxidação pode ocorrer de duas maneiras, a primeira, denominada rancidez oxidativa, é causada quando os triglicerídeos, que possuem ácidos graxos insaturados, sofrem a ação do oxigênio da atmosfera. A segunda forma é pela rancidez hidrolítica, causada pela ação da água na quebra da ligação éster, catalisada por uma lipase ou por um agente químico. 1.5 Auto-oxidação eFotoxidação A auto-oxidação consiste em três fases (Figura 8): 1. Iniciação. 2. Propagação. 3. Terminação. Figura 8 - Etapas da auto-oxidação lipídica. Fonte: adaptado de Slideplayer (2016). 69WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA A etapa de iniciação consiste na geração de radicais livres altamente reativos, pois são moléculas com elétrons não pareados. Estes radicais livres reagem com o oxigênio atmosférico para gerar radicais peroxila (ROO•). Dois fatores podem levar ao início da oxidação de lipídeos, sendo eles: as reações redox e absorção de energia. As reações que envolvem a absorção de energia podem ocorrer se os alimentos estiverem expostos a elevada energia ou irradiação ou ainda pelo simples processo de cocção, micro-ondas ou radiações ultravioletas. As reações redox são aceleradas por enzimas ou metais de transição. Essas reações podem quebrar a barreira eletroquímica entre as moléculas de um ácido graxo insaturado e o O2, para, assim, dar início a oxidação. Assim, inicia-se uma reação em cadeia até que produtos não radicais sejam formados. A quantidade de peróxidos, formados nas mais diversas reações de propagação, pode ser medida em alimentos e traçados os índices de oxidação no alimento. Por serem instáveis, os peróxidos precisam ser medidos no início da oxidação, uma vez que as reações ocorrem até a terminação. Quando se acabam os substratos, a propagação vai perdendo força até formarem-se os produtos � nais. Produtos estáveis e não reativos são característicos da reação de terminação, porque nesta etapa � nal os substratos já estão esgotados. Aldeídos, álcoois, cetonas, ésteres e outros hidrocarbonetos são derivados da deterioração de hidroperóxidos e produtos � nais da oxidação lipídica. A auto-oxidação é acelerada em altas temperaturas e é mais rápida em lipídeos que contém ácidos graxos poli-insaturados. 1.6 Oxidação Hidrolítica (Rancidez ) ou Lipolítica É o tipo de oxidação que ocorre na presença de enzimas (lipase/lipoxigenase) ou por ácidos e bases que promovem o rompimento da ligação éster dos triglicerídeos para a liberação dos ácidos graxos (Figura 9). Após a reação são formados ácidos graxos livres, sendo eles saturados ou insaturados. A qualidade das gorduras que são utilizadas em frituras sofre intensa redução após a rancidez hidrolítica, promovendo a alteração de algumas características, como sabor, odor e cor dos alimentos. Quanto mais água presente no alimento maior a velocidade da reação de oxidação. Nunca se deve utilizar a mesma gordura para processar/fritar alimentos por tempo prolongado, principalmente se forem alimentos com alta porcentagem de água. A forma de inibir a rancidez hidrolitica é eliminando a água do alimento/lipídeo. Alimentos processados ou armazenados a temperaturas moderadas tem muito menos radicais livres do que nos óleos utilizados nos processos de fritura. Se fo- rem utilizadas temperaturas muito altas no processo de fritura, os radicais livres formados chegam a concentrações muito signifi cativas, podendo formar díme- ros. Esse acúmulo torna o óleo viscoso, além do escurecimento do óleo, aumento na formação de fumaça e espuma, indicando produção de ácidos graxos livres durante a fritura. 70WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA Figura 9 - Esquema de oxidação hidr olítica. Fonte: adaptado de Google imagens (2019). A oxidação lipídica traz diversas consequências nutricionais, com destaque para perda de ácidos graxos essenciais, como o linolênico e o linoleico. As vitaminas (Tocoferois, carotenoides e vitamina A) também podem ser destruídas; outros produtos secundários também podem ser formados – como exemplo o malonaldeído –, que são provenientes da reação de Maillard que podem causar sérios problemas a saúde de quem os ingere. 1.7 Métodos para Determinação da Ra ncidez Oxidativa Para determinar a rancidez oxidativa normalmente utiliza-se o método de Índice de Peróxido (IP) e o método de Índice de TBA. Estes métodos permitem realizar a caracterização de óleos e gorduras frente a rancidez oxidativa. O IP é muito utilizado e serve para medir quanto de peróxido foi produzido na reação. Por serem os primeiros compostos químicos a serem formados quando se dá início a oxidação de uma gordura, logo, dará resultado positivo. A oxidação lipídica só termina quando todos os ácidos graxos tiverem sido consu- midos ou quando não houver mais oxigênio disponível. A oxidação de lipídeos piora as características sensoriais e nutricionais dos ali- mentos, mas mais grave que isso é a formação de compostos tóxicos que podem aumentar os riscos de doenças cardiovasculares, como aterosclerose e câncer. Sem contar os fatores ambientais, vapores liberados durante essas reações po- dem irritar pele e mucosas e causar câncer, sendo importantes fatores de riscos para cozinheiros e outros funcionários de cozinhas e industrias. 71WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA Para obter o IP é preciso utilizar de uma solução de ácido acético-clorofórmio, na qual será dissolvido determinado peso de gordura, com a adição de iodeto de potássio é possível titular o iodo com tiossulfato de sódio, sendo o amido o indicador adequado. Obtém-se o resultado que corresponde a peróxido/100 g de gordura. O Índice de Acidez (IA) mede o quanto deteriorou uma gordura pela rancidez hidrolítica, por meio da medida dos ácidos graxos livres. O IA corresponde com as mg de hidróxido de potássio necessário para neutralizar os ácidos graxos presentes na amostra (1 g). Baseia-se na utilização de um solvente misto, no qual a gordura é dissolvida, em seguida deve ser feita a neutralização com solução de hidróxido de sódio (padrão), usando o indicador fenol� aleína. Muitos outros métodos analíticos são utilizados para veri� car a qualidade dos lipídeos. Dentre eles temos: 1. Índice de saponi� cação É referido como a quantidade em miligramas de hidróxido de potássio necessários para saponi� car 1 g de amostra. O indicie de saponi� cação é inversamente proporcional à massa molar média dos ácidos graxos presentes nos acilgliceróis. Este teste é útil para identi� car adulteração por outros óleos ou gorduras contendo ácidos graxos com tamanhos diferentes daqueles presentes em óleo adulterado ou, até mesmo, com material insaponi� cável, como para� na e óleo mineral. A determinação é feita pela titulação da base (adicionada em excesso) com ácido clorídrico após reação de saponi� cação, usando fenol� aleína como indicador (Figura 10). Figura 10 - Reações envolvidas na de terminação do índice de saponi� cação. Fonte: a autora. 2. Índice de iodo É determinado pela quantidade em gramas de iodo absorvido por 100 g da amostra e está relacionado com o grau de instauração dos ácidos graxos presentes na amostra. Além de ser uma característica típica para cada tipo de óleo ou gordura em função de sua composição em ácidos graxos, esse índice pode ser usado para medir a redução no teor dos ácidos graxos insaturados decorrentes da oxidação. Esse índice baseia-se na capacidade do iodo em reagir com as ligações duplas dos ácidos graxos insaturados. Portanto, quanto mais insaturados estiverem os ácidos graxos em óleos e gorduras, maior será a quantidade de iodo consumido durante a reação e, por conseguinte, maior o índice de iodo. O método consiste na titulação iodométrica do iodo adicionado que não reagiu com a amostra usando o tiossulfato de sódio como titulante e amido como indicador. 72WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA 3. Medidas de acidez livre Processos degradativos, como a rancidez hidrolitica, podem dar origem a ácidos graxos livres. A acidez livre em óleo ou gordura decorre da presença desses ácidos e está intimamente ligada ao estado de conservação do produto. Esses ácidos graxos livrescontribuem para a formação de fumaça durante o uso do óleo ou da gordura durante a fritura, além de contribuir para uma oxidação lipídica mais rápida e para a formação de ranço no caso de ácidos graxos de cadeia curta. A acidez livre pode ser expressa como índice de acidez ou grau de acidez. A quantidade de álcali em miligramas que neutraliza os ácidos graxos livres (1g da amostra) é de� nido como índice de acidez. O grau de acidez é uma medida relacionada com o conteúdo (g/100 g) de ácidos graxos livres, determinado em relação a um ácido graxo especí� co predominante na amostra. Nos óleos vegetais, o grau de acidez é normalmente expresso como a porcentagem de ácido oleico livre. 4. Índice de peróxido Os primeiros compostos formados são os peróxidos, na oxidação dos ácidos graxos, o que pode ocorrer durante qualquer etapa do processamento e do armazenamento dos alimentos durante o uso de óleos e gorduras, como frituras. O índice de peróxido expressa, em mili-equivalentes de oxigênio ativo, a quantidade de peroxido em 1 kg de amostra. Pelo fato de os peróxidos serem os produtos iniciais da oxidação, esse índice é útil para caracterizar o estágio inicial da degradação oxidativa. O método se baseia na capacidade dos peróxidos orgânicos oxidarem o iodeto de potássio formando iodo, sendo a quantidade formada proporcional ao teor de peróxidos na amostra. A determinação é feita por titulação iodométrica do iodo formado, usando tiossulfato de sódio como titulante e amido como indicador. 5. Impurezas insolúveis em éter de petróleo Esse método é aplicável para todos os tipos de óleos e gorduras para determinar sujidades e/ou outras substâncias estranhas insolúveis em éter de petróleo (detrito do próprio produto ou proveniente da matéria-prima). 6. Matéria insaponi� cável Hidrocarbonetos, esteróis, carotenoides e vitaminas lipossolúveis são componentes insaponi� cáveis. O teor de matéria insaponi� cável mede a porcentagem de componentes que, após a reação de saponi� cação da amostra, é extraído com éter etílico e não sendo volátil. A determinação consiste em saponi� car a amostra com solução básica (KOH), tratando a solução resultante com éter etílico para a extração da fração não saponi� cada. O extrato é, então, seco para determinação gravimétrica do teor da matéria insaponi� cável. O grau de acidez é o principal fator para classifi car o azeite de oliva em lampante, virgem ou extravirgem. 73WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA 1.8 Efeitos Antioxidantes Substanci as capazes de impedir, retardar ou adiar a ocorrência do sabor de ranço ou qualquer outra alteração decorrente da oxidação, são chamadas de antioxidantes. A ação dos antioxidantes pode ser exercida por antioxidantes primários e secundários. Os primários sequestram radicais livres e os eliminam. Os secundários realizam atividades diferentes do sequestro de radicais livres (Figura 11). Figura 11 - Ação do antioxidante no s equestro de radical livre. Fonte: Scielo (s.d.). São vários os tipos de antioxidantes que podem ser primários, agentes quelantes, biológicos, removedores de oxigênio, sinergistas ou mistos. Os que são classi� cados como primários têm composição fenólica e realizam a inativação ou remoção de radicais livres que são formados na propagação ou iniciação da reação. Eles realizam a doação de hidrogênio impedindo que a reação continue. Os radicais livres R• e ROO• abstraem o átomo de hidrogênio do O2 presente no antioxidante. Dessa maneira, ocorre a inativação de espécies antes reativas proveniente do antioxidante (A•). Pelo fato de ser inativo, o radical A• perde a função de iniciação ou propagação das reações oxidativas. Os mais comuns deste grupo são propil galato (PG), terc-butilhidroquinona (TBHQ), butil-hidroxi-tolueno (BHT) e butil-hidroxi-anisol (BHA), que são polifenóis sintéticos. Mas também existem os antioxidantes biológicos, que são naturais como os tocoferóis. As substancias sinergistas têm muito pouca ou até nenhuma ação antioxidante, mas têm a capacidade de promover o aumento da ação de antioxidantes primários, desde que sejam usados sinergicamente de forma adequada. Os antioxidantes removedores de moléculas de oxigênio realizam a captura de O2, por meio de reações estáveis, para que passem a ser indisponíveis para propagar a auto-oxidação. O melhor exemplo desse grupo é o ácido ascórbico, o qual também pode atuar como sinergista. Antioxidantes biológicos podem ser enzimas como as catalases, superóxido dismutase, glucose oxidase. Atuam na remoção de O2 ou outros compostos com alta capacidade de reação oxidativa em um alimento. Quelantes ou sequestrantes são agentes que fazem a complexação de íons metálicos como ferro e cobre, pois aceleram a oxidação de lipídeos. A existência de um par de elétron livre na molécula consegue realizar a complexação. EDTA (ácido etileno-diamino-tetra-acético) e seus sais e ácido cítrico e seus sais são os exemplos mais comuns desse grupo. Aqueles considerados mistos são compostos por plantas e animais e fazem parte de muitos estudos na área de alimentos. Os exemplos mais comuns são: derivados do ácido cinâmico, como o ácido caféico, � avonoides e algumas proteínas hidrolisadas. 74WWW.UNINGA.BR AN ÁL IS ES B RO M AT OL ÓG IC AS | U NI DA DE 4 ENSINO A DISTÂNCIA O controle de processos físicos são ponto-chave para evitar a oxidação na indústria, para isto controlam-se condições de temperatura, luz e O2, mas também se recorrem a adição de antioxidantes para bloquear as reações com o oxigênio e impedir a formação de substâncias desagradáveis. Na indústria de alimentos os antioxidantes mais utilizados são BHT, BHA, PG e TBHQ, os sintéticos (Figura 12). Figura 12 - Exemplo de rótulo de alime nto contendo antioxidantes arti� ciais. Fonte: adaptado de Rede mobiliza- dores (2016). Já entre os naturais, os mais utilizados são os extratos de sálvia e alecrim, os tocoferóis e ácidos fenólicos. 75WWW.UNINGA.BR ENSINO A DISTÂNCIA REFERÊNCIAS @LIMENTUS. Representação esquemática dos componentes analisados de forma centesimal. (s/d). Disponível em: <http://www.ufrgs.br/alimentus/objetos-de-aprendizagem/composicao- centesimal>. Acesso em: 10 jan. 2019. ANDRADE, N. J.; MACEDO, J. A. B. Higienização na Indústria de Alimentos. São Paulo: Livraria Varela, 2008. p. 182. ANVISA. Portal de documentos regulatórios. 2018. Disponível em: <http://portal.anvisa.gov. br>. Acesso em: 15 fev. 2019. BARBOSA-CÁNOVAS, G. V.; FERNÁNDEZ-MOLINA, J. J.; ALZAMORA, S. M.; et al. Handling and Preservation of Fruits and Vegetables by Combined Methods for Rural Areas. Roma: FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION OF THE UNITED NATIONS (FAO), 2003. BARBOSA-CÁNOVAS, G. V.; FONTANA JÚNIOR, A. J.; SCHMIDT, S. J.; LABUZA, T. P. Water activity in foods – Fundamentals and Applications. 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