Determinação do Número Mais Provável de coliformes totais e termotolerantes em Leite Pasteurizado Integral

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Determinação do Número Mais Provável de coliformes totais e termotolerantes em Leite Pasteurizado Integral
Bruna Celeste de Oliveira; Luan Henrique de Castro Valese; 
Matheus Constantino Silva Paulo Pasquini Junior
Microbiologia de alimentos
Engenharia de Alimentos
Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Professora: Leila Larisa Medeiros Marques
Objetivo: este relatório teve por objetivo a determinação do Número Mais Provável de coliformes totais e termotolerantes em amostra de leite Pasteurizado integral. 
Dados da amostra: Leite Pasteurizado Integral, lote: 252 29 28/38/16, validade 17/04/2017, adquirido dia 19/04/2017 nos supermercados Paraná.
Metodologia utilizada: Determinação do Número Mais Provável de coliformes totais e coliformes termotolerantes foi realizada de acordo com a instrução normativa 62 (BRASIL, 2003).
Resultados obtidos: 
A técnica do Número Mais Provável, também chamada técnica dos tubos múltiplos, é uma maneira bastante utilizada pelos laboratórios de microbiologia de alimentos para estimar a contagem de alguns tipos de microrganismos, como coliformes totais, coliformes fecais. E. coli e Staphylococcus aureus (Franco & Landgraf, 1996).
	O número de microrganismos na amostra original é determinado pelo uso de tabelas NMP, como a da ABNT. O método é estatístico na natureza e os resultados de NMP são geralmente maiores que os resultados da contagem padrão em placas (Jay, 1998).
	A metodologia utilizada detectou a presença de coliformes a 45°C/ml de acordo com a RDC n°12, e a tabela abaixo mostra a combinação de tubos positivos obtidos no experimento. Os resultados encontrados estão fora do padrão o que nos diz que o produto não está apto a ser consumido e tenha uma má qualidade
	
	1,0g
	0,1g
	0,01
	NMP
	VBB
	3
	1
	3
	16
	EC
	3
	1
	0
	4,3
	E. coli
	3
	1
	0
	4,3
Padrão microbiológico de Leite Pasteurizado Integral:
Segundo o quadro abaixo, a Resolução RDC nº 12, de 02 de Janeiro de 2001, indica o padrão microbiológico para coliformes termotolerantes e Salmonella em leite pasteurizado.  
	GRUPO DE ALIMENTOS  
	MICRORGANISMO  
	Tolerância para Amostra INDICATIVA  
	Tolerância para Amostra Representativa  
	
	
	
	n 
	c 
	m 
	M 
	1 – Leite pasteurizado 
	a) Leite pasteurizado 
 
	 
Coliformes a 45ºC/g 
	 
4 
	 
5 
	 
1 
	 
2 
	 
4 
	 
	Salmonella sp/25ml 
	Aus 
	5 
	0 
	Aus 
	- 
Quadro 2 – Padrões microbiológicos para leite pasteurizado segundo RDC nº 12.
Significados em alimentos:
	Por esta técnica pode-se obter informações sobre a população presuntiva de coliformes (teste presuntivo), sobre a população real de coliformes (teste confirmativo) e sobre a população de coliformes de origem fecal (coliformes fecais) (Siqueira, 1995).
A presença de coliformes nos alimentos é de grande importância para a indicação de contaminação durante o processo de fabricação ou mesmo pós-processamento. A presença de Coliformes totais e Escherichia coli em alimentos processados segundo SILVA (1997), é considerada uma indicação útil de contaminação pós–sanitização ou pós processo, além de evidenciarem práticas de higiene e sanitização ademais dos padrões requeridos para o processamento de alimentos.
Conclusão:
Interpretação: Segundo as analises, Constatou-se presença de Coliformes a 45 °C/ml acima do limite permitido pela RDC 12/2001.
Conclusão: “AMOSTRA É IMPROPRIA PARA CONSUMO HUMANO”
Atualmente a RDC n°12 – ANVISA (Brasil,2001) somente refere-se à tolerância de até 4 NMP de Coliformes a 45 °C/ml de leite pasteurizado.
Referências:
Agropecuária. Departamento de Defesa Animal. Manual de métodos microbiológicas para alimentos. Coordenação Geral de Laboratório Animal. 1991/1992 2ª revisão. 136p
BRASIL. Ministério da Saúde. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. 2001. Resolução RDC nº 12, de dois de janeiro de 2002, que aprova o Regulamento Técnico sobre padrões microbiológicos para alimentos. Disponível em: http://www.abic.com.br/arquivos/leg_resolucao12_01_anvisa.pdf
MATURIN,L.J.; PEELER, J.T. Aerobic Plate Count. In: Bacteriological Analytical Manual. 8 ed. Arlington, AOAC International, 1995. p. 3.01 - 3.10.
SILVA , Neusely da. Manual de métodos de análise microbiológica de alimentos. Valéria Christina Amstalden - São Paulo : Livraria Varela,1997, p31.
FRANCO, Bernadette D. G. M; LANDGRAF,Mariza, Maria Tereza Destro. Microbiologia dos Alimentos. São Paulo, Ed. Atheneu, 2005.p27-171.
SILVA, M. C. Avaliação da qualidade microbiológica de alimentos com a utilização de metodologias convencionais e do sistema SimPlate. São Paulo. Dissertação (Mestrado)- Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de São Paulo, 2012.
SIQUEIRA, R. S. Manual de microbiologia de alimentos. Brasília : EMBRAPA, SPI, Rio de Janeiro: EMBRAPA, CTAA, 1995.