Bacillus Cereus

Prévia do material em texto

Características bactérias aeróbicas mesófilas - necessita de oxigênio para que consiga se multiplicar por serem mesófilas a temperatura ótima é ambiente: 28-35°C - podendo apresentar crescimento a partir de 10°C até 48°C, ou seja, na temperatura ótima eles vão se multiplicar intensamente tratamento térmico usual 65°/80°C característica de resistência: bactérias capazes de formar esporos - ao aquecer o alimento elimina a bactéria, mas ativa o esporo e não o elimina também Aa limitantea toxina exerce na mucosa intestinal - ingere o alimento com a toxina pré formada os alimentos envolvidos geralmente são contaminados após o tratamento térmico - o alimento já pronto acaba tendo a formação da toxina - massas, produtos lácteos a massa é rica em carboidratos e tem molho, então tem mais água do que outros pratos e está dando condições para que a bactéria se multiplique produzindo toxinas esse tipo de intoxicação vai ser mais rápido, porque é destruído pelo aquecimento o pudim está relacionado a síndrome diarreia porque tem carboidrato, açúcar (leite condensado), amido de milho, e em banho maria o centro do pudim fica com muita água 2. Toxina Termo Resistente os surtos mais comuns são provocados pelas toxinas termoresistentes já que só são destruídas se aquecidas a 126°C durante 1h e meia provoca a síndrome emética enjoo e vômitos geralmente relacionada ao consumo do arroz, pois o plantio é imerso na água e rico em amido ao fazer o arroz e não guardar na geladeira cria um ambiente proprício a partir de 10°C já tem multiplicação Identificação e contagem diluição e contagem plaqueamento em superfície incubação 35-37°C / 24-48hrs UFC: coloração vermelha e halo claro ao redoridentificação da amostra de arroz com strogonoff, retirada da unidade analítica, higienização com alcoól 70% e abertura no bico de pulsen ou na cabine de segurança biológica preparar as diluições e plaquear no plaqueamento de superfície e no meio de cultura Ágar Manitol Gema de Ovo Polimixina esse meio tem manitol e gema de ovo, sendo que o Bacillus não usa o manitol como substrato mas usa a gema de - a polimixina vai inibir o crescimento de outros microorganismos naquele meio no meio também tem o indicador de pH chamado Vermelho de Fenol semear a diluição do plaqueamento em superfície e encubar as placas a 35-37°C durante 48h colônia característica: colônias vermelhas com halo claro ao redor bactérias do Gênero Bacillus, mas não sabe a espécie o gênero já se confirma no plaqueamento, ao contrário do Sthaphylococcus Provas Bioquímicas antes de realizar as provas é preciso reestabelecer o potencial de multiplicação semeando as colônias características em um meio de enriquecimento a 35-37°C por 24hrs - utilizar o Ágar Nutriente e o Caldo BHI 1. Prova da Gelatinase o Bacillus cereus vai produzir as enzimas gelatinase ele é gelatinase positivo e tem que fazer mais duas provas bioquímicas 2. Prova da Amilase objetivo de verificar se a bactéria cresceu no Ágar Manitol Gema de Ovo Polixima se é realmente produtora da enzima amilase que é responsável pordegradar o amido dependendo da quantidade de amilase que a bactéria produziu pode ter hidrólise parcial do amido ou hidrólise total do amido não importa se produziu muita ou pouca amilase, apenas se produziu ou não se a bactéria produziu pouca amilase vai ter apenas uma hidrólise parcial do amido, levando a formação da maltose quebra o amido gerando a maltose se teve a produção de uma quantidade de água de amilase tem hidrólise total do amido quebra do amido em maltose, e da maltose em glicose o que interessa é que teve a produção da enzima amilase semear o crecimento que teve no meio de enriquecimento do ágar no amido encubar a 30° durante 24h ao retirar pingar o lugol ao pingar lugol vai mudar de se ficar azul tem a presença de amido no tubo, se tem amido é negativo para a produção da amilase (porque se tivesse amilase teria a quebra do amido) - amilase negativa se ficar vermelho tem a presença da maltose, se tem maltose ocorreu a hidrólise parcial amilase positiva - se ficar incolor tem a presença da glicose, ocorreu a hidrólise total amilase positiva para ser um resultado compatível com a presença do Bacillus cereus (que é produtor da amilase) tem que ser amilase positiva (claro ou incolor) 3. Prova do VP avaliar se a bactéria é capaz de utilizar a glicose como substrato para sua multiplicação gerando um composto chamado Acetil- Metil-Carbinol não basta só quebrar a glicose resultado da quebra tem que ser a formação da substância aceti-metil-carbinol semear o crescimento que teve no ágar nutriente no caldo VP a 30°C durante 24h ao retirar não vai observar nenhuma diferençapingar 2 reagentes: hidróxio de potássio e alfa-lactato - se ficar amarelo não teve a quebra da glicose gerando o acetil-metil- carbinol - prova do VP negativa (não é o resultado esperado) - se ficar avermelhado tem a presença do acetil-metil-carbino e é Bacillus cereus positivo - prova do VP positiva após as 3 provas é possível confirmar que a colônia vermelha com halo claro do plaqueamento é o Bacillus cereus