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1 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti MICROBIOLOGIA 2⁰ ERA Apunte NO Oficial No sustituye la lectura del material indicado por la cátedra 2020 2 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Bacteriologia.......................................................................................... Antibiótico.............................................................................................. Flora normal........................................................................................... Tecnicas de coloración -coloración de gran……………………………………….. Cocos gran positivo……………………………………………………………………………. ➢ Genero Streptococcus: → Streptococcus pyogenes, → Streptococcus pneumoniae: → Streptococcus grurpo virian: S. gordonii, S mitis, S mutans, S oralis y S sanguis, S mutans y S sobrinus, S. Crista, S. intermedius, S. anginosus, S constellatus. ➢ Genero Enterococcus: E. faecalis y E. faecium ➢ Genero Stafilococcus → Staphylococcus aureus: SAU → Staphylococcus epidermidis → Staphylococcus saprophyticu Aula practica ................................................................................................. Mecanismo de resistencia a los antimicrobianos.......................................... Bacilo gram negativo entérico....................................................................... Família enterobactéri → E.Colli → Klebsiella ssp: Klebsiella pneumoniae → Enterobacters ssp → Serratia marcecens → Tribos proteeae: proteus, providencia y morganella → Salmonella (tiphy y paratiphy) → Shigella → Yersínia ssp → Campylobacte Jejuni → Campylobacte Coli → Campylobacte Fetus Helicobacter pylory……………………………………………………………………………….. Practico………………………………………………………………………………………………… Familia spirochaetacea…………………………………………………………………………. → Treponema → Borrelia → Leptospira → Brucella Practico………………………………………………………………………………………. Generalidades de micobacterias………………………………………………… Familia micobacteryaceae…………………………………………………………. → Mycobacteriu tuberculosis (bacilo de kosh) → Mycobacteria atípica → Mycobacteria leprae (Bacilo de Hansen) Família neisseriaceae – neisseria → Neisserias – meningitis – gonhorreae → Morazacella catarrharlis (branhmella) Família Haemophilis → Haemophilus influenzae → Haemophilus ducreyi Grupo hacek Genero Rickettsia → Ricketssia prowazekki → Ricketssia typhy – tifus endêmico 3 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti → Ricketssia ricketssi – fiebre de las montanas rocosas Gênero Mycoplasma: mycoplasma pneumoniae Gênero chamydia → Chlamydia trachomatis → Chlamydia pneumoniae → Chalmydia psitacci Practico............................................................................................................... Anaerobios......................................................................................................... Cocos Gram negativo anaerobio: NO ESPORULADOS: → Género Veillonella Bacilos Gram negativos anaeróbio: NO ESPORULADOS: → Género provotella → Porphyromonas → Bacteroides → Wolinella → Fusobacterium - Bacteroides: → Grupo fragilis: → B. Fragilis: Flora normal de tracto vaginal feminino → B. thetaiotaomicron → B. melaninogenicu Bacilo gran positivo ESPORULADO (Clostridium) → C. tetani → C. botulinum → C. perfringes → C. novy → Enterotóxicos: C.difficie Bacilo gram positivo NO ESPORULADO → Género: propionibacterium: → Rothia → Lactobacillus → Mobiluncus: produce vaginoses bacteriana → Eubacterium Cocos gram positivo NO ESPROULADOS → Género peptoestreptococcus → Peptococcus (endometritis) Clostridium perfringes Clostridium tetani Clostridium botulinum Clostridium difficle Actinomyces – Arachnia Género Listeria → Listeria monocytogenes Género Corinebacterium → Corynebacterium diphteriae Gardenerella vaginallis Practico……………………………………………………………………………………………. 4 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti BACTERIOLOGÍA Generalidade → Procariotas (núcleo primitivo, que no esta organizado en membrana nuclear) → Estrutura: Parede celular Membrana celular Citoplasma Ribossomos Grânulos Vesículas Regiones nuclear (nucleoide) Anexos: pueden estar presente o no, pero cuando presente hace más patógena, tienes propiedades antigénicas y pude desencadenar una respuesta inmune en huésped. → Capsula → Flagelo → Pili o fimbrias PARED CELULAR → Heteropolímero insoluble en agua → Las cadenas laterales están constituidas por un soporte formado por N-ACETIL- GLUCOSAMINA N- ACEITIL-MURÁMICO y un conjunto de puentes transversos idénticos. → Función de la pared celular: Morfología celular Propiedades tintoriales Auto- biosíntesis Reproducción Sitio de determinantes antigénicos → La pared puede variar en sus componentes estructurales, lo que hace que tenta distintos comportamientos frente a los colorantes y nos permite clasificarlas de acuerdo a sus propiedades tintoriales. GRAM + O GRAM – no se colore, con coloración de gran que son las bacterias acido alcohol resistente (BARR). → GRAM + Gruesa pared de péptidos glucano Determinante antigénico: Acidos teicoico: Polímero solubles en agua. Constituidas por residuos de ribitol o glicerol unidos por enlaces fofodiésteres. Las mayores parte de ácido teicoico se encuentra entre la membrana citoplasmática y la envoltura del peptidoclucano. Fijan el ion magnesio e intervienen en el suministro de este ion a la célula. 5 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti GRAM + Poseen Acido teicoico (determinante antigênico) Pared gruesa de peptidoglicanos GRAM – Capa media densa rodeada de una membrana interna y una membrana externa. Membrana externa por fuera de la pared de péptido glicanos “sándwich” Espacio periplásmico – importancia en la resistencia antimicrobiana. Pose bicapa lipídica: bisacarido y lipoproteína Pared peptídico glicana esta por fuera de la membrana celular. → Membrana externa de GRAM – La membran externa tiene una composición fosfolipidica semejante a de la membrana citoplasmática. Proteínas de la membrana externa: • PORINAS: se organizan en los poros o canales hidrofílicos y permiten el paso de compuestos hidrofílicos con P.M inferior a 600-650 Da • PROTEINAS MAYORES NO PORINICA: (OmpA y Omp B) participa en la fijación de la membrana externa a la capa de peptidoglicano y se comporta como receptoras del pil sexual en la conjugación bacteriana • PROTEINAS MENORES: participan en la difusión de compuestos a través de la membrana exterior transporte de pequeñas moléculas como la vitamina B12 y los sideróforos con hemosiderina. También participan en la replicación de ADN y en la división celular. • ENZIMAS (fosfolipasa A, proteasas) Debido al hecho de servir como barreras a la difusión de moléculas grandes, se le atribuye en parte la grand resistencia de las bacterias gram negativas a muchos antibióticos. Lipopolisacáridos en la membrana las gram - • Principal ENDOTOXINA BACTERINA, firmemente unida a la superficie celular, siendo solo liberadas cuando la células son lisadas. • Consisten en un complejo lipídico denominado lípido A (toxica) al cual se fija un polisacárido. • El LPS esta fijado a la membrana exterior por enlaces hidrófobos. • Tienen propiedades antigénicas Pared celular le da rigidez y resistencia. Las células eucariota (animal) no pose pared celular 6 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti MORFOLOGIA:que proporciona la membrana y la pared celular Tamaño: 0,5 a 5 µm Formas: Coco → Cadenas → Diplococos → Tétradas Bacilos (bastones) → Cortos: cocobacilos → Ahusados: fusiforme → Largos: filamentosos → Curvos: vibriones Espiralares: → Espiroqueta (treponema, Borrelia y Leptospira) PROPIEDAD DE LA PARED CELULAR: → Coloración de GRAM: Fijación con color Cristal violeta (violenta genciana) Lugol (yodo – yoduro de potasio) Etanol – cetona Safranina (segundo colorante) GRAM (+): violeta (retienen primer colorante) – su pared celular es resistente por el contenido de Ácidos teicoicos GRAM (- ) rosada (no retienen el primer colorante) – su pared celular se desintegra con el lavado con etanol – acetona sale el cristal violeta y permanece la safranina por ser delgada. La desintegración se da porque la membrana externa esta constituida por LIPOPOLISACARIDOS. Bacterias que no tienes capacidad de coloración gram tiene elevado contenido de lípidos: → Bacterias acido alcohol resistente – BAAR ZIEHL – NEELSEN - fijación con calor - Fucsina - Calentar hasta emisión de vapores - Descolorante de Zihel neelsen (álcool – HCl) - Azul de metilo o verde de malaquita - BAAR (+) rasadas - Resisten la decoloración con ácido (son acidorresistentes) porque su pared celular tiene ACIDO MICOLICO MEMBRANA INTERNA Composición: → Proteína – 60 y 70% → Lípidos – 30 y 40% → H. de carbono 10% Función: - Barrera osmótica: plasmólisis o plasmoptise - Transporte especifico - Receptores quimiotácticos - Secreción proteica - Enzimas de biosíntesis y respiración 7 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti - Replicación de ADN - Mesosoma: une material genético a la membrana interna, y implica en la replicación y formación de esporo. CITOPLASMA BACTERIANO: → Ribosomas: 70 S coeficiente de sedimentación (*en las eucariontes es de 80S) Composición: proteínas ARN dirige el ensamblaje de partículas Subunidades: 30S: ARN amino acetilación del ARN 1 Descodificaicon del ARNm 50S: ARN formacion de enlace péptidos → Inclusiones intracitoplasmáticas: - Material de reserva: Glucógeno: en las enterobacterias Polibetahidroxibutirato: en las pseudomonas, Bacillus Polifosfato o gránulos de volutina: en lasmicobacterias y pestis, C. diphtheriae) Poliaminas: en las putrescina, espermidina. (olor desagradable en las infecciones) → Nucleoide: Composición: ADN – 60% ARN – 30% PROTEÍNAS – 10% Estructura cromosoma: Base: adenina- timina y citosina- guanina Hélice bicatenaria y complementaria circular Cerrado covalentemente Superhelicoidal (< longitud y < orden estructural) Topoisomerasas: I y II (ADN girasa) → ADN BACTERIANO: Esta constituido por una sola molécula circular de tipo bicatenaria, muy delgada y que suele estar unida a los mesosomas. Tambien puede haber una o más moléculas pequeñas de ADN extracromosomica, denominada plásmidos. (semejante a las mitocondria). ANEXOS: CÁPSULA Y SLIME - Naturaleza polisacáridas - Función: Antigénica y anti fagocítica Evade la acción de los anticuerpos Adhesión a superficie Barrera contra antibiótico Forman colonias húmedas (M) y lisas (S) → Capsula las que pose son más resistente a los antibióticos → Slime mas amorfo 8 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti FLAGELOS - Altamente antigénico (AgH) - Compuesto por flagelina - Estructura helicoidal, delgada y largas - Anciados a la pared celular y membrana celular por el cuerpo parabasal Funciones: Movilidad Movimiento helicoidal de las bacterias Localización: Peritricos: Enterobacterias (en todo lo soma de la bacteria) Polares: pseudomonales Monotricas: 1 flagelo Iofótrico: 1 penacho de flagelos Anfitrica: 2 penachos de flagelos Se detecta se la bactéria es móvil o no PILI O FIBRIAS Microfibrillas proteicas 2 tipo: Pilis somáticas (comuns) Pilis sexuales Funciones: Adhesinas (colonización) Evasinas Agrecinas Conjugación bacteriana PROCESO DE ESPORULACION: La esporulación puede entenderse como el empaquetado de una copia de ADN bacteriano en una nueva forma que contiene poca agua, actividad metabólica reducida, no se divide y se ha rodeado de una cubierta con varias capas que la hacen prácticamente impermeable. Eso permite que suporte cambios de temperaturas y PH, en medios que pose poco contenido de carbono y nitrógeno. Gran mayoría son GRAM + Ej: Bacillus y Clostridium Durante la esporulación sufre: 1- Sufre duplicación y división celular 2- Forma pared (tabicamiento) 3 – forma espora Por la Mesosoma empieza forma la corteza que empieza a forma una según capa de protección y finalmente se forma exospora que impermeabiliza la endospora (espora). Cuando la endospora ya termino de forma lo que queda de la célula vegetativa se lisa y se elimina. Cuando ocurre eso cuando las condiciones son adversas. Soporta elevada temperatura Sustancia química 9 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Cambio de PH La clasificación de los mecanismos esterilización y desinfección de la bacteria está dada por capacidad que tienes de eliminar las esporas. Los mas eficiente elimina la forma vegetativa y las esporas. Ejemplo materiales quirúrgicos puede introducir esporas en los individuos que va forma uno medio apropiado y desarrolla una patología. PROCESO DE ESPORULACION: 1- Se produce una duplicación del material genético (ADN) 2- Comienza a formarse el seto de la espora y va aislando en ADN recién replicado junto a una pequeña porción de citoplasma 3- La membrana plasmática comienza a rodear el ADN, citoplasma y membrana aislada en el paso 2 4- Septo (pared) de la espora rodea la porción aislada 5- Se forma una capa de peptidoglicano entre la membranas 6- La espora se recubre de una cubierta de resistencia 7- Liberación de la endospora (lisa la célula) de la célula al medio, en acciones a este paso también se le denomina esporulación. Se puede clasificar debido la ubicación de la espora ESPORA: - Núcleo - ADN ribosomas, ARNt, enzimas - Cubierta (integumento) - Membrana interna - Corteza - Capa interna - Capa externa (exosporium, lipoproteína) *en citoplasma pose espacio de agua que permite suporta las variaciones. Puede sobrevivir años en el ambiente en el agua, aire y después se transformar en vegetativa cuando encontrar un ambiente adecuado. TOXINAS: - Sustancias solubles que alteran el metabolismo normal de las células huésped - Responsable de signos y síntomas de algunas enfermedad bacterianas - Exotoxinas: secretadas al medio - Endotoxincas: LPS de BGN - Puede estar codificada por fagos, o plásmidos - Actúan en forma local y- o sistémica - Actúan a bajo nivel - Inactivadas se llama TOXOIDES (principio de muchas vacunas) - Ej: toxinas diftérica, colérica, tetánica BACTERIA X CÉLULAS EUCARIONTAS HUMANA Velocidad: las bacterias metabolizan una tasa de 10 a 100 veces mayor Versatilidad: las bacterias utilizan compuestos mas diversos como fuente de energía y son mucho mas variadas en sus requerimientos nutricionales. Sencillez: la organización de la célula procariota posibilita que la bacterias sinteticen macromoléculas eficientes. Naturaleza: única, algunos procesos de biosíntesis como la que producen peptidoglicanos, lipopolisacáridos y toxinas, son específicos de la bacterias. Patogenecidad: la capacidad de cualquier especie bacteriana para ocasionar enfermedades en un hospedado humanos susceptibles. Patogeno: especie bacteriana capaz de ocasionar dichas enfermedades al presentarse circunstancialmente favorable (para el organismo) 10 Microbiología 2ª ERAVanessa Catto Gritti Antimicrobianos Antibiótico: - Penicilina (Fleming, 1928) - Penicilina (florey y Chain, 1940) - Estreptomicina (Waksman, 1945) - Waksman incorpora el termino: ANTIBIÓTICOS para denominar esta nueva sustancias - Antibiosis et simbiosis (Vuillemin, 1889) Quimioantibióticos Antimicrobianos Diagnóstico: para indicar un antimicrobiano hay que determina su utilidad y necesidad, para que no seleccione cepas. - Clínica - Epidemiologia - Laboratorio - Serología - Imagen - Gammagrafía - Bacteriología: directo, cultivo (aeróbico y anaerobios), aislamiento de germen – antibiograma- prueba de las betalactamasas – PCR - HEMOCULTIVOS: CIM – CBM – poder bactericidas del suero - LCR: fistulas – abscesos – coleciones – urocultivos - Localización: meníngea- endocárdica – vias biliares – via urinarias – osteoarticular – pulmonar - Edad, peso, insuficiencia renal – insuficiencia hepática – embarazo. Resistencia bacteriana: - Natural (primaria) - Adquirida (secundaria) - Cromosómica: mutación de las características de su cromosoma - Extra cromosómica: adquisición de material genético con ubicación extracromosómica por mecanismos: Conjugación, transformación, transducción, transposición. Mecanismo de la resistencia: Disminución de la permeabilidad bacteriana al ATB Reducción de la afinidad a la enzima blanco del ATB Modificación de la enzima blanco Secreción de enzimas inactivadoras del ATB: betalactamasas, aminoglutasidasas, sintetasas (sulfamidas), acetilasas (clorafenicol), metilasas (macrólidos). Mecanismo de acción de los antibióticos: - Síntesis de la pared celular bacteriana: penicilinas, cefalosporina, vancomicina. - Membrana citoplasmática: polimixinas, polienos, imidazoles. - Sintesis proteica (ribossomos bacterianos): aminoglucosidos, tetraciclina, clorafenicol, macrolidos, lincosaminas. - Sintesis de ácidos nucleicos; sulfamidas, trimetropima, quinolonas, metronidazol, rifampicina, nitrofurantoina , 5- fluorocitocina. Se la bacteria no tienes pared celular va ser resistente a los β lactamicos. Ejemplo micoplasma, clamidea que no tienes ninguna actividad de la pared celular, entonces una amoxicilina que actúa sobre la pared no va tener ninguna acción. Entonces usa el antimicrobiano que va tener acción. Tratamiento empírico Pose acción Baja acción 11 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti PENICILINAS Penicilina G - I.M 1.000.000 U.I casa 6 horas Penicilina G - I.V 1 a 3.000.000 U.I cada 3 – 4 a 6 h Penicilina V – oral 500.000 a 1.500.000 U.I casa 6 a 8 h Penicilina G – benzatinica 2.4000.000 U.I – I.M cada 8 a 30 días. Vida – media corta SENSIBLES Streptococcus beta- hemolíticos grupo A y B Streptococcus pneumoniae Streptococcus viridans Staphylococcus aureus Peptococcus Peptostreptococcus Bacillus anthracis Actinomyces israelii Neisseria meningitidis Neisseria gonorrhoeae Fusobacterium Bacteroides Treponema pallidum Leptospira interrogans RESISTENTE (no utiliza) Bacilos gram-negativos aerobios Aminopenicilinas Ampicilina Ampicilina – Sulbactam Amoxicilina Amoxicilina -Ácido Clavulánico ➔ oral, I.V ➔ vida media mayor: cada 8 -12 o 24 horas Sensibles Esterococcus faecalis, Listeria monocytogenes Haemophilus influezae tipo b Salmonella Escherichia coli Shigela Bordetella pertussis Moraxella catarrhalis Inibidores de las betalactamasas Sulbactam Tazobaxtam (acinetobacter) (une ampicilina) Clavulanico (Legionella pneumophilas, neisseria gonorrhoeae, campybacter jejuni) (une a la amoxicilina) Ureidopenicilina Piperacilina: I.M o I.V 4g cada 6 a 8 h Piperacilina -Tazobactam I.M o I.V ( 4 g⁄500mg) cada 6 a 8 h - germenes intra hospitalar Cefalosporinas - Primera generación: Cefalosporina I.M o I.V 1 a 2 g cada 4 a 6 h Cefazolina I.M o I.V 1 a 2 g cada 6- 8 a 12 h Cefalexina oral 500 mg a 1 g cada 6 h Cefadroxilo oral 500mg a 1 g cada a 12 h Sensibles: Pseudomonas aeruginosa (grave problema Enterococcus Citrobacter Klebsiella Enterobacter Burkhoderia cepacia Escherichi coli Serratia 12 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti • buena concentración a nível urinario • Pediátricamente utiliza como tratamiento empírico hasta que tenga resultado. Sensibles: Staphilococcus aures Streptococcus beta- hemolítico grupo A y B Alfa hemolítico Clostridium Neisseria Antinomyce Escherichia coli Proteus mirabilis Klebsiella Salmonella Schigella Resistentes: (no sirve) Pseudomonas aeruginosa Enterococcus Listeria Segunda generación: Cefoxitina I.M o I.V 1 a 2 g cada 4 a 6 h Sensibles: fusobacterium, Bacteroides fragilis Resistente: enterococcus, Pseudomonas aeruginosa Cefuroxima I.M o I.V 759 a 1500 mg cada 8 h Cefuroxima axetil oral 250 a 500 mg cada 8 a 12 h Cefaclor oral 500 mg a 1 g cada 6 a 8 h Sensibles: Haemophilus influenzae tipo b, Klebsiella, Enterobacter, Proteus, Citrobacter. Resistente: Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus Tercera generación: Cefotaxima I.M o I.V 1 a 2 g cada 6 a 8 h Ceftriaxona I.M o I.V 1 a 2 g 12 a 24 h Ceftazidima I.M o I.V 1 a 2 g cada 8 h Sensibles: Escherichia coli Proteus Klebsiella Enterobacter Serratia Salmonella Shigella Haemophilus influenzae tipo b Pseudomonas Streptococcus pneumoniae Resistentes: enterococcus listeria Cefixima oral: 200 a 400 mg cada 12 a 24 h Ceftibuten oral 200 a400 mg cada 12 a 24 h Sensibles: Haemophilus influenzae, Moraxella Catarrhalis, Neisseria Resistentes: Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas, Staphylococcus aureus, Bacteroides fragilis. Cuarta generación: Cefepima I.M o I.V 1 a 2 g cada 12 h Cefpiroma I.M o I.V 1 a 2 g casa 12 h Sensibles Pseudomonas aeruginosa Haemophilus influenzae Naisseria gonorrrhoeae Neissseria meningitidis Moraxella catarrhalis Staphylococcus aureus Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogene Resistente: Enterococcus. Listeria - Para paciente sem terapia intensiva 13 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Carbapenemes Imipenem -Cilastatina I.M o I.V 500 mg a 1 g cada 6 – 8 a 12 horas (amplio espectro de uso parenteral) Meropenem I.V 1 a 2 g casa 8 h ➔ Amplo espectro antibacteriano Sensibles: Haemphilus influezae Acinetobacter Neisseria meningitidis Neisseria gonorrhoeae Pseudomonas aeruginosa Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus Streptococcus pneumoniae Listeria monocytogenes Bacteroides fragilis Peptococcus Peptostreptococcus Resistentes Staphylococcus aureus MR Enterococcus faecium Clamídias Micoplasma Rickettisias Atua sobre la pared Sinergia Cotrimoxazol Cefotaxima Gentamicina Monobactam Aztreoman I.M o I.V 1 a 2 g cada 8 a 12 h Sensibles: Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa No sirve para ninguno gran + Aminoglucósidos Estreptomicina I.M o I.V 1 g casa 24 h Indicaciones: tuberculosis Kanamicina I.M o I.V 1 g casa 24 h Indicación: de segunda elección, de acuerdo con la sensibilidad en Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium kansasii Gentamicina I.M o I.V 160 a 240 mg cada 24 h Amikacina I.M o I.V 1 a 1,5 g cada 24 h Sensibles: Escherichia coli, Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa Macrólidos Eritromicina oral 250 a 500 mg cada 6 h Claritromicina oral 250 a 500 mg cada 12 h Claritromicina I.V 500 mg cada 12 h Roxitromicina oral 300 mg⁄dia Azitromicina oral 500 mg⁄dia (3 a 5 dias) *para alérgicos a penicilina Sensibles: Streptococcus grupos A-B-C Streptococcus pneumoniae Moraxella catarrhalis Bordetella pertussis Haemophilus influenzae 14 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Streptococcusviridans Bacillus anthracis, Clostridium tetani Actinomyces israelii Listeria monocytogenes Staphylococcus aureus Mycoplasma pneumoniae Ureaplasma urealyticum Chlamydia trachomatis Neisseria gonorrhoeae Treponema pallium Rhodococcus equi Micobacteriu atípica Espiramicina oral 1 a 2 g cada 12 Indicación: toxoplasmosis (en primer trimestre del embarazo) Lincosaminas Lincosaminas (ha sido reemplazado por la clindamicina) Clindamincina oral 300 a 600 mg cada 6 a 8 h Clindamicina I.M o I.V 300 a 600 mg casa 6 a 8 h Usado en processos graves Sensibles: Streptococcus beta hemolítico grupo A Streptococcus pneumoniae Staphylococcus aureus Bacteroides fragilis Peptococcus Peptostreptococcu Propionibacterium Clostridium perfrigens Fusobacterium Plasmidium falciparum Toxoplasma gonddi Glucopéptidos Vancomicina I.V 1 g cada 12 h Teicoplamina I.M o I.V 400 mg casa 12 h (3 dosis) luego una dosis cada 24 horas Sensibles: Staphylococcus aureus Streptococcus bovis Streptococcus viridan Streptococcus pneumoniae Streptococcus beta – hemolítico grupo Ay B Clostridium dificcile Corynebacterium Enterococcus Rhodococcus equi No hay accion sobre los gran – Quinolonas (I) Ciprofloxacina oral 250 a 750 mg cada 12 h Ciprofloxacina I.V 200 a 400 mg cada 12 h Sensibles Staphylococcus aureus Streptococcus epidemidis Haemophilus influezae Neisseria gonorrhoeae Moraxella catarrhalis Poco sensibles: Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Pseudômona aeruginosa Escherichia coli Enterobacterias Clamidias Micoplasma Norfloxacina oral 400 mg casa 12 h Sensibles: Bacilos aeróbios gram-negativos Resistente: enterococcus Indicación: infecciones urinarias (todos gram – aeróbios) 15 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Quinolonas (II) Levofloxacina oral 500mg cada 24 h Levofloxacina I.V 500 mg casa 24 h Moxifloxacina oral 400 mg casa 24 h Sensibles: el mismo espectro que ciprofloxacina con buena actividad contra Streptoccus pneumoniae y cocos grampositivos. Tetracilcinas Ocitetraciclina oral 250 a 500 mg cada 6 h Doxiciclina oral 100 a 200 mg cada 12 h Minociclina oral 50 mg cada 12 h Bacteriostático, quelante del cálcio. Hipertension endocraneana. Fotosensibilidad. Contraindicado en el embarazo Sensible Streptococcus Enterococcus Neisseria Escherichia coli Brúcela Antinomyces Mycoplasma pneumoniae Ureaplasma Urealyticum Chlmydia Treponema pallidum Clorofenicol Clorafenicol oral 500mg a 1 g cada 6 h Clorafenicol succinato I.V 1 g casa 6 a 8 h Amplio espectro antibacteriano buena penetracion al LCR Bactericida frente a H. influenza y N. meningitidis Bacteriostático frente a otras bacterias Sensibles Streptococcus Enterococcus Staphylococcus Streptococcus pneumoniae Listeria Salmonella Shigella Neisseria gonorroheae Treponema Leptospira Borrelia Chlamydia Rickettsia Micoplasma Peptococcus Petostreptococcus Bacteroides Tratamiento de alternativa Puede generar: Depresión medular – aplasia medular Sulfonamidas Sulfadiazina oral 500 mg a 1 g casa 4 a 6 h Sensbiles Streptococcus pyogenes Neisseria Haemophilus influenzae Actinomyces Nocardia Chlamydia Plasmodium Toxoplasma En toxoplasmosis associado com pirimetamina o clindamincina. 16 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Sulfametoxazol – trimetoprima (Cotrimoxazol) – oral o I.V SMS 800 mg ⁄TMP 160 mg cada 8 a 12 h Sensibles Staphylococcus aureus Staphylococcus epidemidis Escherichia coli Proteus Salmonella Haemophilus influezae Nocardia Plasmodium Toxoplasma gondii Pneumocystis carinii Isospora belli En Pneumocytis carinni la dosis oral o I.V es la SMz 100 mg⁄TMP 20 mg⁄kg⁄dia Miscelanea (I) Colistina I.M o I.V 100 mg casa 8 a 12 h Sensibles: Pseudomona aeruginosa, bacilos gram-negativos aeróbio Fosfomicina oral 500mg a 1 g cada 6 h Fosfomicina I.V 3 g cada 6 Sensibles: cocos gram +, bacilos gram -, aeróbios, Pseudomonas aeruginosa Miscelánea (IV) Rifampicina oral o I.V a 1.200 mg⁄dia Sensibles Mycobacterium tuberculosis Brucella Staphylococcus aureus Streptococcus pneumoniae Profilaxis de la menigisti por Neisseria menigitis y haemophilus influezae Siempre se usa combinada. Miscelánea(V) En infecciones urinarias Nitrofurantoida oral 100 mg cada 6 horas Sensibles: Escherichia coli Enterococcus Staphylococcus aureus Saphylococcus epidemidis Klebsiella Enterobacter Bacteroides Proteus Miscelánea(VI) Metronidazol oral 250 mg a 500 mg cada 6 a 12 h Metronidazol I.V 500 mg cada 8 h Sensibles: Trhicomonas vaginales Entamoeba histolitica Giardia lamblia Balantidium coli Bacteroides fragilis Fusobacterium Clostridium Gardenerella vaginalis Helicobacter pylo 17 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti FLORA NORMAL DEL CUERPO HUMANO - No patógena - Es normal en nuestro cuerpo humano - Gran superficie cutánea mucosa que están en contacto con el medio ambiente - Residen de diferente organismo que depender del PH de la zona, de la disponibilidad de nutrientes que tenga, la temperatura de la humedad de cada sector para que viva una determina población de bacterias. Concepto: Conjunto de gérmenes que conviven con el huésped en estado normal sin causarles enfermedad. Están conviviendo y ayudándole en un montón de actividad a todo el cuerpo humano. → Constituída por microrganismo cuyas características fisiológicas y genéticas les permitem: - colonizar y multiplicarse bajo las condiciones existentes en determinadas zonas - coexistir con otros microorganismos que colonizan el mismo habitad - inhibir a otros microorganismo competidores SITIOS COLONIZADOS (puede tener bactérias) SITIOS ESTERILES (no debe tener microorganismos) - Piel y mucosa - intestino delgado - Intestino grueso - Vagina - Tracto urinário inferior - Estomago* (depende mucho del PH) - Pleura - Meninge - Pericardio - Peritoneo - Sistema circulatorio Conceptos: FLORA BASAL O RESIDENTE FLORA TRANSITORIA Característica de cada sector, constituida por gérmenes que siempre están presentes. Ejemplos: Staphylococcus epidermitis en piel E. Coli en intestino Todas personas tienes igual Variable de un ser humano a otro, compuesta por gérmenes que colonizan en forma intermitente un determinado sector. Altera con el Ph, tabaquismos, estrés, enfermedad inmunodeprimida, tratamiento con corticoides. Puede aumentar su populación y volverse patógena. Puede tener alteraciones de persona para persona, Multiplicase y produce infecciones → Importancia de la flora normal: - Producción de bacteriocinas - Producción de metabolitos tóxicos - Reducción del potencial redox - Consumo de nutrientes esenciales - Competencia de receptores EFECTOS DIRECTOS (Lo que hace los patógenos) - Aumento de la producción de AC (IgA) - Estimulo de la fagocitosis - Aumento de la producción de interferón - conjugación de ácidos biliares EFECTO INDIRECTOS (lo inducen) 18 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti → FLORA NORMAL DE LA CAVIDAD ORAL: Implica en diferentes zonas: - Dientes - Lengua - Surco periodontal La flora normal es de tipo mixto, con asociación de gérmenes aerobios y anaerobios. Composición: - Diferentes especies de estreptococos alfa hemolíticos Strep mutans, Sangui, mitis, Salivarus - Anaerobios Gram positivos ActinomycesLactobacillus - Gram negativos: Anaerobios B Bacteroides y Fusobacterium - Espiroquetas del género Treponema - Cocos Gram (+) Petcococos Ruminococos - Mycoplasma - Candidas → FLORA NORMAL DEL APARATO DIGESTIVO Alberga un gran número de bacterias Cumple con muchas funciones importantes ESTOMAGO: - La densidad de bacterias es baja - Se compone de gérmenes de la flora oro faríngea que ha sido deglutidos - Streptococos alfa - Cándias sp - Lactobacilos 19 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti INTESTINO DELGADO - Limitado crecimiento de gérmenes - pH del duodeno - peristaltismo - bilis tiene propiedades antimicrobianas - lisozima e IgA secretoria - Hacia el íleon va aumentando - Ílio terminal: 104 a 106 bactérias por ml de contenido intestinal (aumenta la cantidad de bactérias) - Intestino delgado: Duodeno: lactobacilos y enterococos Ileon: enterobactérias (buenas) INTESTINO GRUESO - las bacterias representan aprox.. el 40% del peso seco de las materias fecal - se explica por: disminución del peristaltismos Aumento del PH Disminución del contenido de agua - Alcanzan concentraciones 108 a 109 bacterias por ml alcanzando el máximo cerca del recto. - BG(-): fusobacterium y bacteroides - Cocos: peptostreptococcus, Sarcina y Vaillonela - BG(+): Actinomyces, Bacillus, Lactobacillus - Anaerobios facultativos: enterobacterias: E. coli, Klebsiella, Proteus entre otras - Cocos gram +: enterococcus, Streptococcus y Sthaphylococcus. IMPORTANCIA de la flora normal del aparato digestivo: - Correcto desarrollo de la mucosa intestinal (efecto directo), interviene en el metabolismo del Ac.Folico, biotina (efecto indirecto). - Favorece la producción de IgA y contribuye a la inmunotolerancia - Interviene en el ciclo enterohepático de drogas - Tiene efecto de barrera: interferencia bacteriana - Sagrega bacteriocinas - Interviene en infecciones oportunistas o endógenas FLORA NORMAL DE LA VAGINA - La composición de la flora depende del contenido de estrógeno (que depende de la estimulación hormonal, que depende de la edad que tenga la mujer) Después del crecimiento Lactobacilos aerobios (PH acido) Hasta la puberdad Flora mixta de cocos y bacilo (pH neutro) Puberdad Reaparecen lactobacilos aerobios y anaerobios aumenta (pH ácido) En la menopausa Retorna la flora mixta La flora vaginal incluye además (transitoria) Estreptococos hemolítico del gurpo B Estreptococos anaerobio Gardnerella vaginalis Ureoplasma Clostridio Función: - Proteger frente a la infección vaginal, principalmente durante el embarazo - Suministrar la flora al recién nacido - Disminuir los riesgos de madre y del recién nacido en la fase bacteremica del parto 20 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti → FLORA NORMAL DEL TRACTO RESPIRATORIO Salvo las vias respiratoria superiores los demás son prácticamente esteréis - Sujeto normal solamente el árbol respiratorio alto presenta flora normal (fosa nasales y faringe) - Senos paranasales, oído medio, tráquea, bronquios pulmonares y pleura son estériles - Es sistema mucociliar, la capa de moco y los reflejos como la tos, el estornudo y la broncoconstricción son otros mecanismo de defensa - La mucosa respiratoria también es rica en IgA - A nivel de tejidos pulmonar se encuentran macrófagos alveolares que contribuyen fagocitando bacterias y otras partículas. - Sthaphyloccos epidemitis - Corynebacterium - Streptococos pneumoniae - Staphylococcus aureus - Haemophylus influenza - Moraxela catahrralis - Neiseria ssp - Propionibacterium ssp - Candida - Micoplasma → FLORA NORMAL DE LA PIEL - Continuo recambio celular - Ph bajo debido a metabolitos de la glándula sebáceas - Macrófagos de la piel Composición: flora basal (normal) Sthaphylococcus epidermidis Micrococcus Corynobacterium Propionibacteriu acnés: BG(+) anaeróbio en glândulas sebáceas Composición: flora transitória: Staphylococcus aureus Acinetobacter (axila ingle y períneo) La flora cutânea se involucra en infecciones cuando presenta soluciones de continuidad → FLORA NORMAL DEL APARATO URINARIO - Salvo la uretra anterior, el aparato urinario es esteril - La orina contribuye a mantener la via urinaria libre del gérmenes, debido al arrastre, al pH, acido y a su elevada osmolaridad - La mayoría de las bacterias provienen del perineo siendo los Enterococos y Candida los mas comunes. Diagnostico es importante saber lo normal, cuando se hace un examen por ejemplo, raspado de piel, ensopado de mucosa respiratoria, hay que saber que bacterias deben no aparecer. 21 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti TECNICAS DE COLORACIÓN COLORACIÓN DE GRAM PASOS I. Fijacion con calor: Evita que la muestra se desintegre con los sucesivos lavados. II. 1ª colorante de Gram: Cristal violeta / Violeta genciana → 1 minuto III. Hacer el lavado IV. Lugol (mordiente): Tiene elevado contenido de yodo/yoduro de potasio y permite acomplejar las estructuras formadas por la coloracion violeta y la pared de las bacterias, sobre todo de las grampositivas (las gramnegativas tambien forman complejos, pero muy delgados) → 1 minuto V. Hacer el lavado VI. Decolorante: Etanol- cetona, deshidrata la celula. VII. Hacer el lavado VIII. 2º colorante de Gram: Safranina o fucsina, es el contracorante o corante de contraste. Las bacterias que perderan la coloracion violeta (gramnegativas) van a fjar el color rojo. → 1 minuto IX. Hacer el lavado y esperar que sequen. X. Observar con el microscopio 100x y con aceite de inmersion. Grampositivas Violetas Pared celular resistente por acidos teicoicos Gramnegativas Rosadas Pared se desintegra con el lavado por etanol, pierde el cristal violeta y permanece la safranina. La desintegracion se debe a que la pared se forma por LPS. UTILIDAD ✓ Determinar la estructura de la pared ✓ Morfologia: Coco, bacilo o espiral. Las espiroquetas, en la mayoria de las veces, no se tiñen con el Gram y hay que utilizar otros corantes. ✓ Distribucion ✓ Orientar hacia el medio de cultivo que debe ser utilizado: Cada bacteria necesita de un ambiente especifico para su desarrollo, y de la misma forma, existen diversos tipos de cultivo. La coloracion orienta cual medio de cultivo debe ser utilizado en cada situacion. Una vez realizado el cultivo, se realiza el antibiograma. ✓ Orientacion para tratamiento empirico: En casos de emergencia, donde no hay tiempo para hacer el cultivo. MEDIOS DE CULTIVO - Agar nutritivo ➢ Agar sangre ➢ Agar chocolate ➢ Agar Levine ➢ Agar SS (Salmonella shigela) ➢ Agar infusion cerebro corazón ➢ Otros 22 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ZIEHL-NEELSEN Para las bacterias acido-alcohol resistentes (BAAR). Las bactérias possuen pared celular con alto teor de lipido, (60% principalmente acido micólico) PASOS I. Fijacion: Con colorante fucsina. II. Calentar hasta emitir vapor. III. Decolorante de ZN: Alcohol-HCl IV. Colorante: Azul de metileno o verde de malaquita. ➢ Las BAAR se veen rosadas: Eso se debe a que resistenten al decolorante gracias a la presencia de acido micolico en su pared. Resultado final → Se ve bacilos rojos sobre fondo azul. ejemplo: Mycobacterium leprae. Mycobacterium tuberculose 23 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti COCOS GRAM POSITIVOS ➢ Retienes lo primer colorante➢ No esporulados y aerobios ➢ Color violeta ➢ Genero Stafilococcus ➢ Genero Streptococcus ➢ Genero Enterococcus Coco: Aspecto de uvas Forma de cadena: Streptococcus o enterococcus. Bacilos: gram positivos - Listeria Monocytogenes - conynebacterium ssp - Bacillus spp. Bacterias del Género Streptococcus (estreptococo) - Importância médica - Cocos gram positivos, que se agrupan e cadenas - Catalasa (enzima) negativa a diferencia de los Staphylococcus - Son inmóviles y no forman esporas - Fermentadores acido lactico - Necesita medio enriquecidos para crecer en cultivos (agar sangre es el más utilizado) - Forman parte de la flora normal del hombre: habitan en el tracto respiratorio superior y otras en el tracto intestinal, piel y tracto genitourinario. - Mas de 20 especies algunas son patógenas al hombre. La mayoría de las estreptococos que causan infecciones en el humano son anaerobios facultativos, aunque algunos son aeróbicos estrictos Taxonomia: Según su hemolisis en agar sangre: → β – hemolítico: lisis completa de GR por lo que las colonias están rodeadas de un halo claro (se clasifican según sus glucidos de la pared celular en serotipos que van de la A, B, D y G) → ɑ - hemolítico: hemolisis parcial, colonias rodeadas de un halo verdoso → γ- hemolítico: carecen de halo de hemolisis Especie Hemolisis Grupo de lancefield Infecciones S. pyogenes β A Faringitis, imétigo, celulitis, escarlatina, FR y glomerunoferitis postestreptococcia S . agalactiae β B Neumonía, sepsis y menigitis neonatal S . equi β C Celulitis, bacteriamia, endocarditis Enterococos E .faecalis E .faecium β, ɑ o sin hemolisis D Infección urinaria, endocarditis, bacteriemia y sepsi S. pneumoniae ɑ - Neumonía, menigitis purulenta S. grupo viridans ɑ - Endocarditis, absceso dentario, absceso cerebral Entreptococos anaerobios: Peptoestreptococus magnus s. bovis No hemolitico - Sinusitis, empiema, absceso cerebral, absceso hepático 24 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti - Importante patógenos NOSOCOMIAL (Hospitalar) - Causas infecciones a individuos de la COMUNDIAD Todos tiene muchísimas especies pero se nombra nos que tienes más importancia: Especies de importancia: Streptococcus ssp ➢ Streptococcus pyogenes ➢ Streptococcus pneumoniae ➢ Streptococcus agalacctiae ➢ Streptococos grupo viridans ➢ Catalasa positiva Enterococcus spp ➢ Cocos positivo en cadenas ➢ Fermentan los H de C produciendo acidos lácticos ➢ Aerobios facultativos y algunos aerobio captnofílico (co2) ➢ Espesa pared de péptidoglicano Antifagocitosis, resiste la fagocitosis Una bacteria tienes muchos metabolitos, enzimas. Una misma bacteria puede causar varias entidades clínicas, afecciones y muchas afecciones puede tener muchas causas. Hay una interacción entre medio y las bacterias Virus que invade bacteria; se llaman bacteriófago. Tienes en su material genético la información para que todo el mecanismo de la síntesis de proteínas por ejemplo, de una célula que invaden actúan comandada por una maquinaria por ese disco rígido que lleva al virus. En caso que un bacteriófago invada a un estreptococo lo hace productor de una toxina que se llama toxina eritrogenica que produce una vascularitis un cuadro de erupción, con fiebre. Enfermedad de Escarlatina (en los niños), esta asociada a estreptococos beta hemolítico tipo pyogenos, que incorpora un bacteriófago y entonces produce la toxina. No todos estreptococos producen toxina. Pyogenes: más frecuente en las patologías 25 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Pueden tener capacidad hemolítica: ➢ Β- hemólisis total ➢ ɑ- hemólisis parcial ➢ γ- no hemolítico Sirve para típica con nombre y apellido – genero y especie Hay distintos grupos de acuerdo a los hidratos de carbono de la pared Resumiendo: Identificación de estreptococos: 1) Propiedades sorológicas: grupos de Lancefield de la A-W antígenos específicos de grupos son H de C a la pared. 2) Patrones hemolíticos: hemólisis completa de (beta), hemólisis incompleta (alfa) y ausencia de hemólisis gama, 3) Propiedades bioquímicas (fisiológicas) La bacitracina es un antibiótico que inhibe la síntesis de pared celular bacteriana, y a la concentración que se encuentra en los discos (0.04 U) inhibe el crecimiento de los estreptococos beta hemolítico del grupo A de Lancefield pero no inhibe el desarrollo de otro estretococcos beta hemolítico. ➢ es una prueba especifica Prueba de la coagulasa: catalasa: staphylo (+) y Strepto (-): usa para diferenciar las especies de strapylos catalasa diferencia Staphylo(+) de Streptococcus(-). Estreptococos beta – hemolíticos Streptococcus pyogenes: β-hemólise del grupo A: ➢ Presencia de estreptolisina S y O ➢ Es la causa más frecuente de faringitis bacteriana, infecciones cutáneas, responsable por secuelas post infección con estreptococos no supurtaivas: fiebre reumática y glomerulonefritis. Morfología: Cocos gram positivos, agrupan de pares o en cadenas. En agar sangre forman colonias blancas o grises rodeadas de una zona de hemolisis completa producida por sus dos hemolisinas: estreptolisina S y estreptolisina O. Pared celular encuentra el antigeno especifico del grupo A (proteína M) que en un importante factor de virulencia. Ácido lipoteicoico. Cubierta por una capsula hialurónico que le sirve para evadir la respuesta inmune del hospedero. Factores de patogenicidad: ➢ Cápsula de acido hialuronico: interviene en la evasión de la respuesta inmune ➢ Proteína M (principal factor de patogenicidad). Capacidad de la bacteria a resistir la fagocitosis por los leucocitos humanos debido a que degrada el factor de complemento C3b, evita su opsonización. Se une al factor H ➢ Proteína tipo M: se una a porción FC de la IgG y IgA 26 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ C5a proteasa: esta en la membrana de la bacteria, degrada factor C5a del complemento ➢ Acido lipoteicoico: interviene en la adhesión de la bacteria al epitelio faríngeo al unirse a la fibronectina ➢ Estreptoquinasa: lisis del coagulo de fibrina por acción indirecta al catalizar la conversión del plasminógeno en plasmina. Induce a formación de anticuerpos ➢ Hialunoridasa: función solubilizar el ácido hialurónico del tejido conectivo facilitando así el pasaje de la bacteria a través de los tejidos. ➢ Estreptolisina O: responsable de la hemolisis, antigénica y O2 lábil. Acción de lisar el leucocito, células tisulares y plaquetas por formación de poros en su superficie. ➢ Estreptolisina S: no es antigénica, es estable frente al oxigeno y es responsable de la hemolisis. ➢ Enxotoxina pirogenica estreptococcica (Spe): serotipo A, B y C. responsable de las manifestaciones cutáneas de la escarlatina. Es producida por S. pyogenes con un bacteriófago particular. Spe A – shock toxico provocado pro S. aureus debido a toxina TSST-1 CLINICA: Enfermedades causadas por EGA (Streptococus pyogenes) ➔ Infecciones piógenas: faringitis, erisipela, celulites Superfícies: pielodermites (impetigo) Invasivas: ➔ Enfermedades producidas por la exotoxinas pirogénica (Spe): ➔ Enfermedades postestreptocóccicas no supurativas (pose componentes antigénicos): fiebre reumática y glomerulonefritis, es una secuela de la infección. Causas de afección cardiaca y renal. Impétigo – pielodermites ▪ Coloniza las fauces: produce la angina hay que tener un receptor que llama fibronectina que no se expresa antes de los 3 anos de vida. • Antes de los 3 anos las causas son virales de angina (no utiliza antibiótico)Que producen? Piodemirtes (impétigo), Faringitis, Escarlatina, Endocarditis, Sepsis puerperal, Caries dentales, Infecciones piógenas: Enfermedad periodontal Fiebre reumática, Glomerulonefritis aguda Sepsis Shock y muerte • Faringitis 60-80% son producidas por virus (no requieren antibiótico) Muy frecuente en niños de 4- 15 años Mayor incidencia en fines de inverno y en la primavera. Entrada por via inalatórias por saliva o gotitas de fluegge Periodo de incubación 2-4 dias Contamina las fauces asintomáticamente Inicio de la faringitis: odinofarigia (dolor al deglutir), malestar general, hipertémicas con exudado blanco glisáceo, adenomegalia. Enfermedad autolimitada, la fiebre cede entre 3 y 5 dias. Los otros síntomas 1 semana. 27 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Tratamiento: No se han encontrado aún cepas resistentes a la penicilina (son sensibles) Puede ocurrir una falta terapéutica Objetivo primordial del rápido inicio del tratamiento evita la presencia prolongada del antígeno en el huésped • Impétigo: Infecciones superficiales de la piel con compromiso epidémico las lesiones pueden o no ser ampollares. Las ampollares son mas comúnmente ocasionadas por S. aures, mientras que las no ampollares por S. pyogenes. Las lesiones se secan y forma una característica costra gruesa de color miel (costra meticérica). La fiebre no forma parte del impétigo, si aparece debe sugerir extensión a tejidos más profundos u otro diagnóstico. • Erisipela: Es una infección de la piel, que compromete la dermis y la parte superficial del tejidos subcutáneo, involucrando ganglios linfáticos superficiales. Se presenta con dolor, edema e induración. La principal característica es que los bordes de la lesión están bien demarcados. Se produce un agudo acceso de fiebre, escalofríos y linfadenopatías regionales. La erisipela facial suele resolver de 4 a 10 dias, en cambio una lesión del tronco o extremidades pueden afectar grandez zonas y terminar fatalmente. • Celulitis: Involucra las capas profundas de la dermis, se caracteriza por: dolor local, edema, fiebre, escalofrió y linfadenopatías regionales. A diferencia de la erisipela los márgenes del área de la celulitis no están definidos. Suele aparecer en zonas anatómicas en las que se ha alterado el drenaje linfático como ser áreas de celulitis previa, brazo homolateral a una mastectomía, miembros inferiores con trombosis venosa profunda. La infección de heridas por estreptococos o la celulítis localizada pueden asociarse también a linfagitis (inflamación de vasos linfáticos) manifestada como líneas rojas que se extienden en dirección proximal desde el sitio de infección a lo largo de los linfáticos superficiales. • Fascitis necrotizantes: Comienza como una infección localizada de la piel, que puede diseminarse a los tejidos blando y producir necrosis. Los pacientes se deterioran rápidamente y mucho de ellos mueren. El único procedimiento eficaz para el tratamiento de esta patología es la remoción quirúrgica del tejidos necrótico para evitar la diseminación de la bacteria sumada a la administración de penicilina en altas dosis. • Sepsis puerpal: Sigue el aborto o al parto cuando los estreptococos que colonizan a la paciente o que fueron transmitidos por el personal médico, alcanzan al endometrio y llegan al torrente sanguíneo. • Neumonitis y empiema: Los estreptococos del grupo A suelen ser causa ocasional de neumonía. Los síntomas constan de dolor pleurítico (dolor en punta de costado), fiebre, escalofrió y disnea (sensación consciente de esfuerzo respiratorio). Puede haber tos. Aproximadamente la mitad de los pacientes con neumonía por estreptocococos grupo A tienen derrame pleural asociado, que a diferencia de los neumococcicos, que son esteriles, estos caso siempre infectados (empiema). Enfermedades debida a las toxina pirogénica: Escarlatina: es casos que el S. pyogenes esta hidrogenizado incorpora el bacteriófago y produce la toxina eritrogenica- (produce eritematosa). Complicaciones temprana de la farigitis por S. pyogenes por estar en estado de lisogenia (tener un fago) excreta la toxina eritrogénica que produce la erupción cutáneas por un proceso de hipersensibilidad. 28 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Erupciones en la lengua: lengua frambuesada ➢ Textura de Papel de lija – oclusión de las glándulas sudoríparas. ➢ Signo de bandera ➢ El exantema está producido como consecuencia de los efectos de una de las tres toxinas pirógenas estreptocócicas (A, B o C) Aparece en la región superior del tórax y luego se extienden al resto del tronco, cuello y extremidades. Tratamiento con penicilina Sindrome similar al shock tóxico: Se produce falla multiorgánica (fiebre, hipotensión, afectación renal y síndrome de dificuldad respiratoria). A diferencia del shock tóxico producido por S. aureus en shock S. pyogenes, siempre hay bacteriemia y la mortalidad es diez veces mayor. Abscesos: Hacer diagnóstico diferencial con Stafilococcus Impétigo (Tratamiento penicilina) más probable en MI Complicaciones graves: relación con la Fascitis necrotizante, es más profunda, llegan a las fascias membrana que recubre las estructuras celulares. Se hace ANAEROBIO (no necesita oxigeno) y produce gases y agua – lesiones grave diseminada, isquémica y necrótica. Hay que hacer resolución quirúrgica. El antibiótico no llega tener efectividad. ➢ Streptococcus pyogenos o streptococo β- hemólitico del grupo A 1- Infecciones piógenas o supurativas - farigitis - impetigo - infección de piel y parte blandas: celulitis, erisipela, fascitis necrotizante 2- Complicaciones post estreptocócicas no supurativas ➢ Fiebre reumática (afecta corazón, articulaciones, vasos sanguíneos y tejidos subcutáneo 3- Enfermedades producidas por la toxina pirogénica ➢ Escarlatina ➢ Síndrome semil- shock tóxico Enfermedad postestreptocóccica no supurtativas: (autoinmune) Producidas por una respuesta inmune cruzada a componente antígeno de Streptococcus. Tratamiento: inmunológico, con corticoides. • Fiebre reumática: Entrada por via inalatória a veces cutânea Es una enfermedad inflamatoria, no supurativa Producida por la respuesta inmune, A los antígenos de Streptococcus del grupo a beta hemolítico A partir de las dos o tres semanas de una Faringomigdalitis aguda (14-15 días después). 29 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Puede afectar cualquier parte del organismo, siendo el principal órgano comprometido: el corazón, puede dar pericarditis, miocarditis endocarditis, las articulaciones, el tejidos subcutáneos y eritema marginado Fase aguda: febril y autolimitada pero puede haber dano crónico y progresivo de las válvulas cardiacas con posterior insuficiencia cardiaca y aún muerte. Es una secuela tardía (tres semanas pos infección) ➢ Afecta niños de 6- 15 anos: clinicamente se manifesta como endocarditis, poliartritis, corea, nódulo subcutâneo y eritema marginado. Diagnóstico: cuadro clínico y epidemiológico: ➢ Fiebre ➢ Soplo cardiaco ➢ Nódulo subcutáneo ➢ Eritema ➢ Antecedentes epidemiológico de infecciones faringitis ➢ Escarlatina Diagnóstico laboratorio: Cultivo de hisopado de fauces Identificación Elevado titulo de Asto (anticuerpos antiestreptolisina o) – son anticuerpos que certifica que hay tenido contacto. • Glomérulo nefritis: Entrada por via cutânea a veces inhalatoria Es una enfermedad inmunológica, aguda del glómerulo renal. Se caracteriza partologicamente porlesiones glomerulares difusas y clinicamente por edemas, hipertensión, hematuria y proteinuria. Es una consecuencia tardía de la infección faringea o cutánea con ciertas cepas “nefritogénica” de Streptococcus de grupo A que pertenecen a un numero limitado de serotipo M El huésped genera IgG contra componentes del Streptococcus (M12, M49) y otros (laminas, cólageno) En determinadas circunstancias no bien conocidas las IgG reconocen epitopes en la membrana del glomérulos y produce inmunocomplejos que atrae el complemento dando como resultado final la lisis celular de la membrana. Resumiendo: Depósito de complejos en la membrana de glomerulo + C3b y C4b Inflamación y daño tisular Diagnóstico titular C3b y C4b (complemento – para formar inmunocomplejo) DIAGNÓSTICO: Faringitis: hisopodo de fauces. Cultivo en agar sangre Prueba de bacitracina (+) Pyr (+) Comprueba la beta hemolisis Detección de anticuerpos ASTO TRATAMIENTO: PENICILINA G – O PARA ALERGICOS ERITROMICINA O MACRÓLIDOS (AZITROMICINA, CLARITROMICINA) Detección de antigeno Infección respiratória Detección de anticuerpos Manifestación autoinmunes: antitreptolisIna O Pnicilina Amoxicilina Cefalosporina Macrolido: infección mas graves Clindamicina 30 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Streptococcus pneumoniae: α- hemolítico del grupo B Principal causa de meninginitis (no epidêmica) neonatales, neumonia y sepsis MORFOLOGIA: - Cocos gram + - Cadenas cortas y de a pares - Anaerobio facultativo - Pose antígenos capsulares que los dividen en serotipos: Ia, IIb, II, III, IV, V y VI PATOGENIA Cápsula con ácido siálico que le permite resistir a la opsonofagocitosis, esto ocurre por bloqueo de la via alternada del complemento. Es mortales Profilaxis de la neumonía de la comunidad Introducción de la vacuna conjugada contra neumococos al calendario nacional de inmunizaciones de la República Argentina. Diplococos capsulado Antecendentes: Streptococcus pneumoniaes es le agente infeccioso responsable de mas muertes infantiles que cualquier otro patógeno. Es responsable de más de 1 millón de muertes en niños cada ano a nivel mundial. Los adultos mayores son de alto riesgo para la infecciones por nemococos. Vacuna conjugada: en la infancia 2- 4 y 12 meses. Pose 3 pseudotipos que nos lo más frecuentes Vacuna polisacarida: para adultos Se puede prevenir IDENTIFICACIÓN: Criterios mínimos para la identificación y discriminación de otros estreptococos (pruebas bioquímicas) ➢ Tentación de gram: positiva ➢ Alfa hemólisis (parcial) ➢ Solubilidad en bilis ➢ Sensibilidad a la optoquina ➢ Requiere de medio enriquecidos para crecer ➢ Colonias mucoides (puede vivir con poco tenor de oxígeno) ➢ Anaerobios facultativos EPIDEMIOLOGIA: Los perfiles de infecciones están cambiando por la vacuna ➢ Es un miembro de la flora normal bacteriana, que coloniza más del 40% de la nasofaringe de adulto sanos y niños SIN efectores adversos. ➢ Los niños pueden ser portadores de más un serotipo en forma asintomática ➢ El único reservatorio es el hombre ➢ Constituye una de las diez primeras causas de muertes en los países desarrollados. Principal cuadro de neumonía en adultos ✓ Fiebre alta ✓ Tos ✓ Dolor pleurítica ✓ Baja mortalidad Transmisión de persona a persona 31 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Factores de virulencia: ➢ Capsula ➢ Pared ➢ Neumolisina ➢ IgA proteasa (rompe estructura de la mucosa para penetrar mas fácilmente) ➢ Autolisinas ➢ Enzimas ➢ Adesinas ➢ Foforilcolina (pared celular) PATOLOGÍAS EN EL HOMBRE: ➢ Neumonías aguda de la comunidad ➢ Meningitis en todos las edades menos neonatos ➢ Otitis media y sinusitis aguda ➢ Peritonitis primaria ➢ Artritis sépticas ➢ Endocarditis (rara) DIAGNOSTICO: Srep neumoniae Gram +, alfa hemolisis, Solubilidad en bilis, Sensible a la optoquina. Tipificación de los serotipos de acuerdo al antígeno capsular en suero, LCR TRATAMIENTO: generalmente β lactamico: Penicilinas (amoxicilina), cefalosporina de 3 geración. La resistencia a la lactamiáceos en común y la multirresistencia esta en aumento. Vancomicina + cefotrexoma Inmunoprofilaxias hay vacunas: 1) Vacuna polisacaridica: pneumococia plissacaridica 23- Valente Es una vacuna polivalente elaborada a base de antígenos polisacáridos purificados obtenidos de 23 serotipos de Streptoccocus penumoniae Indicada para mayores de 2 años de edad Una dosis Anemia drepanociítica (hemoglobinopatía), cardiopatía, EPOC, diabetes, VIH, enfermedades onchohemologicas, mayores de 64 años, embarazadas después de la semana 16. 2) Vacuna antineumocóccica conjugada 7 (13)- Valente indica en niños menores de 2 años con 3 dosis Pneumococica conjugada 13 – Valente: 1ª dose: 2 meses 2ª dose: 4 meses Reforzo: 12 meses ➢ Streptococcus agalactiae: O estreptococos β- hemólitico del grupo B Ley nacional: N: 26.369⁄2008 - una estrategia de prevención - hisopado vaginal y perianal para búsqueda de Streptococcus grupo B en la embarazada durante la semana 35- 37 de gestación Profilaxia ATB: penicilina G (I.V – 4 horas antes del parto- paciente alérgica: clindamicina o cefazolina( vancomicina o cefalosporinas) El S. agalactiae coloniza el tracto genital y/o gastrointestinal de mujeres embarazada. Enfermedad en el adulto: mujer post-parto y la via de entrada es el tracto genita. Manifestación de edometritis y la infección de heridas de la cesárea. Principal causa de la sepsis neo natal. 32 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Coloniza la mucosa vaginal y anal Tratamiento: penicilina Enfermedades neonatales: precoz o tardía: Neumonía, Sepsis ,Meningitis (recién nacidos) ➔ Patogenia: Ascenso a la cavidad amniótica – feto aspira el liquido que causa enfermedad neonatal Elevado contenido vaginal con S. agalactiae – el feto aspira el momento del parto – enfermedad neonatal ➢ Estreptoccos grupo viridans: Estreptococos alfa hemolítico Cocos gran positivo que se disponen en cadena Formado por varias bactérias: S. gordonii, S mitis, S mutans, S oralis y S sanguis, S mutans y S sobrinus, S. Crista, S. intermedius, S. anginosus, S constellatus. ➢ Alfa, beta; gamma; no hemolítico ➢ Aeróbio facultativo y algunos capnosfilicos ➢ Son flora normal de la cavidad oral, nasal, faringe, aparto genital femenino y aparato gastrointestinal En sanos la bacteria se adhieren a la cavidad oral por la fibronectina evitando la colonización patógena como ser bacilos gramnegativo por lo que se pude producir neumonía. CUADRO CLÍNICO: Endocardites (válvula cardíacas danadas) Abscesos dentales Bacteriemia. Abscesos cerebrales Es importante tener em cuenta que muchas especies (que forman parte del grupo viridians) suelen estar asociadas a cuadros particulares: ➢ Endocarditis bacteriana aguda: S. gordonii, S mitis, S mutans, S oralis y S sanguis ➢ Caries dental: S mutans y S sobrinus ➢ Abcesos: S. angionosus, S constellatus y S intermedius ➢ Septicemia en pacientes neutropenicos con mucositis: S. mitis ➢ Neuplasia del aparato digestivo: con S gallolyticus Tratamiento: sensible a penicilina G. asocia a algunos aminoglucósidos. Vancomicina, cloranfenicol. 33 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Enterococcus spp ➢ Estreptococos fecales β- hemolítico grupo D ➢ E. faecalis y E. faecium ➢ Cocos gran + que se dispone en cadenas cortas o pares ➢ Beta o gama hemolíticos ➢ Catalasa negativa ➢ No forma esporas ➢ Aerobios facultativos Toleran condiciones ambientales extremas: crecen en presencias de NaCl (sal) al 6,5% y sales biliares al 40% ➢ Hidrolizanla esculina y el PYR (resistente). ➢ Agar sangre: hemólises ɑ, β o nenhuma. ➢ Forma parte de la flora normal gastrointestinal, por lo que las infecciones son endógenas o en pacientes internados a partir del personal hospitalizado Hay especies E. faecium que es resistente a la vancomicina, que genera infecciones hospitalarias. - Poco factor de virulencia - Ambiente Hospitalar - Resistencia - No resistente a la fagocitase - Adhesina CLÍNICA: ➢ Endocardite bacteriana e infecciones urinarias (cistites pielonefrites, prostatites) ➢ Associa a cateterización ➢ 5-15% de todos los casos de endocarditis ➢ Es una bacteria multirresistente, produce infecciones graves DIAGNÓSTICO: - Agar sangre de carneiro; no presenta hemolise - Agar bilis esculina: crece en presencia de bilis – queda el medio negro - Teste PYR: que el enterococos puede hacer la hidrolise de L-pirrrolidonil- beta neftilamina. TRATAMIENTO: combinación de ampicilina con un aminoglucósido. Resistente: clindamicina, penicilina, cefalosporinas, otros beta lactamicos Vancomicina (vanA y vanB VanC) Aminoglicosídeos (EMAs) Teicoplanina 34 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Género Staphylococcus spp Familia microccaceas Catalasa: positiva (diferencia de las Streptococcus) Micococccus Spp: ➢ Ambiental ➢ Contaminante ➢ Piel y mucosa, asociados a infecciones en humanos ➢ Cocos gran positivo en racimos, inmóviles, no esporulado y no flagelado ➢ No forma esporo ➢ Son anaerobio facultativo, catalasa + pueden fermentar u oxidar hidratos de carbono. ➢ Causan: infecciones piógenas superficiales y profundas, intoxicaciones sistémicas y alimentarias e infecciones urinarias. Son la primera causa de bacteriemia, infecciones de herida quirúrgicas y de prótesis. ➢ Resistentes a la desecación, desinfectantes químicos y toleran concentraciones de NaCl de hasta 12% ➢ Los coagulasa + son mas virulentos que los coagulasa –. Coagulasa + (ECP): S. aureus, S. pseudintermedius, S. intermedius. Coagulasa – (ECB): S. epidermidis, S. saprophyticus. S haemolyticus S aureus S epidermidis S saprophyticus Prueba de coagulasa + - - Producción de ADNasa + - - Degradación de manitol + - Variable Prueba de novobiocina Sensible Sensible Resistente Producción de exotoxinas + - - Proteína A en superficie + - - ➢ Staphylococcus aureus: SAU Causa enfermedad mediante la producción de: • Toxina: intoxicación alimentaria • Cocos positivos en racimos • Catalasa: positiva: diferencia de los streptococcus • Coagulasa positiva: diferencia los staphylococcus • No forma esporas • Través de invasión directa y la destrucción de los tejidos por la proliferación bacteriana, abscesos y destrucción tisular (neumonía, osteomielitis, endocarditis) • Gelados, maionese contaminada. • Resistente a las condiciones adversas del medio ambiente • Contienes peptidoglucano, ácido teicoicos y proteína A. Capaz de oxidar hidratos de carbono y fermentar manitol EPIDEMIOLOGIA: Principal lugar de colonización es la parte anterior de la nasofaringe, otra localización son la axila, la vagina, el periné y tubo digestivo. PATOGENIA: → Colonización: adhesión del principal reservorio de este microorganismo a la mucosa nasal está dada por la pared celular, proteína A y ácido teicoico. → Invasión: no atraviesa la superficie de la piel intacta. Rotula mecánica del epitelio o por el taponamiento de una glándula o folículo piloso. 35 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti FACTORES DE VIRULENCIA Capsula: protección a fagocitosis Pared celular: peptideoglicano, acido teicoico Adhesina: liga al colágeno del huésped Proteína A: escape del sistema inmune, no opsoniza y no fagocita. Enzimas: hace degradaciones Toxinas: lise de las células, estimula sistema inmune, enterotoxinas que causa aumento de lo peristaltismo. Enzimas: catalasa, coagulasa, lipasa, hialuronidasa. Toxina: ɑ- toxina, β- toxina, γ- toxina, δ – toxina, leucocidina de panton-Valentine, exfoliatina, enterotoxina, toxina del síndrome de shock toxico (TSST-1). Piel y mucosa Asociados a infecciones en humanos De la comunidad y nosocomiales CUADRO CLÍNICO: Infecciones por SAU: desde infecciones leve de piel hasta infecciones sistémicas graves Síndrome de toxinas → INFECCIONES ESTAFILOCÓCCIAS: Infecciones de piel y parte blanda ✓ Foliculitis: infección de los orificios foliculares. Aspecto de pústula con borde eritematoso ✓ Forunculosis: infección necrótica profunda de folículo piloso, en nalgas, cuello o cara. ✓ Ántrax: infección profunda de un grupo continuo de folículos. Con fiebre elevada y malestar general. ✓ Impétigo: infección superficial de piel con lesiones eritematosa, ampulares o no. Las ampulares son causadas por S. aures y las NO ampulares por streptococcus del grupo A. se da en neonatal y niños. ✓ Celulitis: infección difusa de capas profundas de dermis. No es un área bien delimitada, puede causar infecciones secundarias en tejidos profundo como osteomielitis, artritis, neumonía, abscesos cerebrales, pulmonares y renales, empiema pleural, endocarditis y pericarditis. Mayor prevalencia de los estreptococos beta hemolíticos. 36 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ✓ Osteomielitis y atritis séptica: S. aures es agente etiológico frecuente en enfermedad en adultos y niños. Absceso del psoas. ✓ Neumonías: aspiración de la flora de la via respiratoria superior o por diseminación desde el torrente sanguínea (frecuente en drogadictos endovenosos), es infrecuente, pero es grave, con fiebre, disnea, dolor toráxica y formación abscesos pulmonares (neumonía bullosa) Frecuente que produzca después de la intubación traqueal de un paciente hospitalizado o luego de una infección viral de las vias respiratorias. ✓ Infección del SNC: absceso cerebral ✓ Endocarditis bacteria: es la causa mas frecuente. Elevado índice de mortalidad. ENFERMEDAD PRODUCIDAS POR LA TOXINAS DE S. AUREUS ➢ Leucocidina Efecto sobre la membrana citoplasmática de los leucocitos: desgranulación y lisis celular Síndrome del pie escaldada: en recién nacidos, enfermedad de Ritter y en individuos más graves se llama necrosis epidérmica tóxica. Signos de nikolsky ✓ Intoxicación con alimentos Enterotoxinas preformadas en alimentos como cremas, helado, papas, carnes procesadas y fiambres. Termoestables Aumentan el peristaltismo intestinal Síntomas autolimitados terapia de soporte Causa: diarrea, vomito y dolor abdominal. Sin fiebre. ✓ Toxina del síndrome de shock tóxico – 1 (TSST-1) – es lo más grave Super- antígeno Fiebre, hipotensión, exantema tipo quemadura solar, disfunción multiorgánica (vomito, diarrea, mialgias intensas, aumento de creatinina y urea aumento de bilirrubina y transaminasas, trombocitopenia y desorientación o alteración de la conciencia) y descamación cutánea (planta del piel y palmas) Enterotoxina estafilocócica B Produce un síndrome clínico que incluye: fiebre, hipotensión, vértigo, rash cutáneo, falla renal. Síndrome del shock tóxico: Mujeres -> uso de tampones actualmente pocos casos Muyeres y hombres -> complicaciones de infecciones por SAU DIAGNÓSTICO: - Agar sangre - Agar manitol salgado - Microscopia: cocos gram+ intra y extracelular en racimos, en material purulento o líquidos normalmente estériles es orientativo. Presencia de coagulasa. - Teste bioquímico: ✓ Catalasa ✓ Coagulasa ✓ DNAse: se la bacteria puede o no degradar el DNA 37 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti TRATAMIENTO: un grupo sensible a penicilina (Beta lactamicos), otro resistente a penicilinay sensible a meticilina y otro resistente a penicilina y meticilina pero sensible a vancomicina o teicoplanina. ➔ Antimicrobianos indicado Las straphylococcus, produce la BETALACTAMASES, que degrada los beta lactamicos y degrada el antibacteriano. Capacidad de adquirir resistencia de los antibióticos: Como se evalúa la meticilino resistencia? Como sabemos si un estafilococo es sensible o resistente? Por ejemplo, a CefTriaXone (cefalosporina de 3 era o Ampicilina sulbactam penicilina)? DISCOS DE OXACILINA DE 1 mg ➢ Staphylococcus epidermidis: Estafilococos coagulasa negativa (SCN) Frecuentemente asociado a infecciones Hospitalar Infecciones asociadas a prótesis. Produce macromoléculas que favorecen su adhesión a superficies plásticas: 1- Adherencia: polisacárido capsular (PS⁄A) 2- Colonización; glicocálix o slime extracelular SEP: INFECCIONES ➢ Endocarditis: válvula protésica ➢ Bacteriemia asociada a catéter ➢ Meningitis en paciente con shunt ➢ Infección de herida quirúrgica Tratamiento: beta lactamico o vancomicina (casos mas graves) No passa nada para imunocompetentes 38 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Staphylococcus saprophyticcus: Es el segundo agente causador de infecciones del tracto urinario en mujeres jóvenes sexualmente activas Los beta lactamicos, penicilinas no sirve para Staphylococcus spp, porque produce una beta lactamasa: penicilasa Por eso hay que usar ceftriaxone (cefalosporinas) Gen MEC A-> que altera la proteína ligadora de penicilina que son moléculas que β lactamicos tienes que actuar. PBP 2a altera la estructura química e impide la acción de los B- lactamicos Infecciones severas por Staphylococcus sp. Meti-R Ttp. Con vancomicina⁄teicoplanina (glicopeptidos) – evaluar por CIM Resistencia a vancomicina: 1⁰ aislamiento (2002) (vanA) En argentina HAY reportes de cepas con vanA. Otros antibióticos útiles: Quinolonas fluradas (cripofloxacina), trimetoprima – sulfametoxazol, clindamicina- eritromicina, minociclina, gentamicina, rifampicina, tigeciclina, linezolid. 39 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Practica: Principales diferencias bioquímicas entre las especies de estreptocococos Sensible a bacitracina Sensible a bilis escurina Sensible a optoquina Reacción de PYR Reacción de camp S. pyogenes Sensible - Positiva - S agalactae resistente - positiva S pneumoniae - Sensible sensible S viridans - enterococcus resistente positiva BACTERIA COCOS POSITIVOS: Forma redondeada Retener primero colorante que es la violeta genciana, en su pared celular Color violeta Algoritmo de diferenciación: Identificación es para hacer un adecuado tratamiento. La importancia clínica son: Staphylococcus Streptococcus FORMA Redondeado Redondeada DISTRIBUCION A pares o en racimos En cadenas largas o cortas MOVILIDAD Inmóviles Inmóviles ESPORAS No forman esporas No forma esporas (algunas capsuladas) RESPIRACION Anaerobios Facultativos Anaerobio facultativos CRECIMENTO Crecen a temperatura óptica de 30-37⁰C Crecen a temperatura óptica de 30- 37⁰C 40 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Como se hace en laboratorio? ➢ Toma la amuestra ➢ Técnica de GRAM ➢ Cocos +: fija el primero colorante (violeta genciana) ➢ Distribución: cadena o racimos ➢ Forma ➢ Característica de la pared celular Técnicas rápidas: 1- 2 horas: pero no determina que especies es y que hace otras pruebas para identificar y implantar el tratamiento correcto. Prueba de la CATALASA: Gotas de peroxido de hidrogeno 3%: Efervescencia: hay oxigeno molecular (conveirte el peroxido de hidrogeno en oxigeno y agua) Ausencia de efervescencia: no hay oxigeno molecular Como hacer la identificación entre: Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprofiticus PRUEBA DE LA COAGULASA: Determinación de la presencia de la enzima coagulasa Se pone en contacto una pequeña cantidad de cultivo bacteriano con plasma con anticoagulantes e incubar 4 Hs a 37⁰ Confirmación de S. Aureus: cultivo se observa el crecimiento de colona amarillas doradas. ➢ Agar de manitol salado Catalasa positiva -> Staphyloccos Catalasa negativa -> Estreptococcos 41 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Casos de Coagulasa negativa: Disco de novobiocina: Placa de agar: mueller Hilton Forma uno alo todo variado de colonias, significa que eso alo es SENSIBLE a eso antibiótico que es de uso solo de laboratorial: Halo >16 cm de diámetro: SENSIBLE y la Sta. Epidermidis es sensible a eso Se no forma halos o son chiquitos: RESISTENTE. Presencia de Sta. Saprofiticus Estreptococos: 1⁰ determinar qué tipo de hemolisis causas en agar sangre: Disco de optoquinina No forma halo de resistencia, RESISTENTE: presencia - Strep. Viridans Forma halo es SENSIBLE a la optoquinina: presencia de Streptococcus Pneumoniae Beta hemolíticos: hemolise completa: PRUEBA DE PYR (pirrolidonis arilamidasa) 30 minutos a 35 grados Las pruebas que tengo resultado PYR positivas, se hace DISCO DE BACITRACINA Bacitracina: Es un ATB (antibiótico) que inhibe el desarrollo Estreptococos pyogenes a bajas concentraciones. Resultados: Las pruebas que se encuentra PYR NEGATIVO, se hace: TEST DE CAMP Los estreptococos del grupo B secretan el factor CAMP, una proteína termoestable y difusible que interactúa con la B- hemolisis: Resultado: • Atención no confundir beta con grupo B • No hemolíticos: o gama hemoliticos PRUEBA DE BILIS ESCULINA: Resultado: Negra -> presencia de enterococcus Amarillo: negativo a pyr Fusia: positivo pyr SENSIBLES, cuando halo (grande) de inhibición -> presencia de Estreptococos pyogenes RESISTENTE: cuando halo es pequeño o nulo -> presencia de enterococcos (+) -> Streptococos agalactiae (-) -> Entercoccos 42 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti MECANISMO DE RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS SENSIBLIDAD: significa que cuando una bacteria es sensible a uno determinado ATB, se puede utilizar en vivo RESISTENCIA: significa que cuando una bacteria es resistente, se utilizar un ATB, se puede tener fallas en vivo. El laboratorio se utiliza las placas de Agar de Mueller Hinton Halo de inhibición: significa que al redor del ATB no desarrollo bacteria Y que en vivo se puede utilizar No hay halo de inhibición: que este ATB no sirve para utilización en vivo, la sepa es resistente. Mecanismo de resistencia: NATURAL La bacteria carece de diana para el antibiótico • El antibiótico no fue criado para esta bacteria, no tienes el punto que debe actuar na bacteria. Punto diana: es el punto de acción de los ATB ADQUIRIDO Por mutación cromosómica Transferencia genética (de una especie para otra especie diferente) Adquisición de ADN foráneo (lisis de una bacteria y que otra se utiliza su material genético) – ej bacteriofago Principal mecanismo de resistencia adquirido: ➢ Producción de enzimas ➢ Modificaciones bacterianas que impiden la llegada del antibiótico a la punta diana. ➢ Alteración de la punta diana Producción enzimática: Gram +: libaran enzimas que se va a espacio extracelular que ataca los Betalactamicos, que no ingresa y no hay efectividad. Gram - : ATB, pasa por más etapas hasta llegar a proteína ligadora de penicilina, actúa liberando enzimas, que se queda en espacio periplásmico (que no tienes las gran +) acción es mucho mas potente en las gram negativas Ejemplos de enzimas ➢ Penicilinasas (afecta penicilina) ➢ Cefalosporinasas (afecta cefalosporinasas) ➢ Betalactamasas (afecta todas las betalacatamicos) ➢ Aminoglucocidoacetilgransferasas (destruye aminoglucogenos) ➢ Cloranfenicolacetiltranforasas Inhibidores suicidas: (asocia betalactámicos + inhibidor) ➢ Desde que se descubrieron las betalactamasas empezaron a utilizarse los inhibidores; • Sulbactam • Tazobactam • Clavulánico • Sin embargo, ya se han detectado enzimas que actúan también sobre estos inhibidores 43 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Actuación del inhibidor: el ingreso del inhibidor suicida, que es atacado por las enzimas y después ingresa el betalactamasas. Modificaciones de la bacteria que impiden la llegada del antibiótico al punto diana: ➢ Modificaciones de las porinas ➢ Eflujo ➢ Dna girasa y quinolonas: no encontrar donde unirse y entonces no es efectivos para esta bacteria ➢ ARN y macrólidos o lincosaminas (modifica la subunidad y no une) ➢ PBPs y betalactámicos ➢ Una misma bacteria puede desarrollar varios mecanismos de resistencia frente a uno o muchos antibióticos y del mismo modo un antibiótico puede ser inactivado por distintos mecanismos de diversas especies bacterianas. Resistencia natural: ➢ Aminoglucocidos: las bacterias anaerobias son naturalmente resistente por carecer de sistemas de transporte para aminoglucósidos. No se utiliza entonces en bacterias anaerobias. ➢ Glucopéptidos: las bacterias GRAM – son resistentes a estos antibióticos ya que no les es posible atravesar la membrana externa para poder actuar sobre la pared. ➢ Betalactámicos: no pueden utilizarse frente a bacterias que carecen de pared celular. 1) b- lactamases 2) Perdida de porina 3) Enzimas modificadoras 4) Bomba de efluxo 5) Modificacion del alvos 44 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti • Gran grupo de bacterias estrechamente relacionadas. • Gran diversidad de especies • Residen en colon humano, son flora normal de piel, intestino, tracto genital femenino y raramente el tracto superior. • Aparece en flora de paciente hospitalizados y con patología debilitantes • Grande importância en las infeciones hospitalares • Forman parte del microbiota intestinal • Cuadro de diarreia, autolimitada, atua a nível de intestino delgado o colón. • Incluye al agente de la peste neumonica (yersinia pestia) el de la fiebre tifoidea ( Salmonella typhi) antes causales de diarrea e infecciones nosocomiales. Hábitat natural: - Comensales comunes en intestino de animales y humanos (bacilos entéricos) suele, plantas, agua y materias en descomposición. - Algunos con nichos ecológicos muy litado (S.Typhy solo en humanos) - Otros ambientales (klebsiella pneumoniae) - Via de infección: fecal oral - Fonte de contaminación en la mayoría: agua contaminada Descripción de la familia Bacilos BGN (negativos) No eporulada Móviles por flagelos perítricos ó no móviles Algumas capsuladas Crecen bien en peptona sin agregados Crecen en anaerobiosis y aerobiosis – anaerobias facultativos Fermentan la glucosa con producción de gas Catalasa + y oxidada – (no consume oxigeno en la respiración) – no fermentadores Reducen nitrato a nitrito Fermentadoras de glucosa (importante) Pili: adherencia y conjugación Estrutura antigénica (serotipo): Ag H: flagelar – termoestable Ag k: capsular – que puede cambiar por ej en la salmonela Ag o: somático – relacionado con lo lipopolisacárido, termostable Esos permiten la tipificación de cada una de las bacterias LPS: estimulo antigénico - O antigen - Core - Lipid A Cuando lisa la bacteria libera la LPS, que hace estimulo antigénico, estimula em complemento las citocinas eso hace que lleva una estimulación de la cascada inflamatoria y lleve a la manifestaciones clínicas. - Leucocitose - Plaquetopenia - Fiebre - Shock 45 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Determinantes de patogenicidad: Estructurales: - Cápsula: mayor patogenicidad, promueve la invisibilidad de la cepa, protege de la fagocitose y complemento - Flagelos: antigeno H en estrutura - Fimbrias - Sideróforos (estructuras que captan (secuestra el fe) el Fe de la Hb para bacteria) - Plásmidos de resistencia a drogas: forman resistencia a los antibióticos Metabólicos: - Endotoxina: - Enterotoxinas: causa diarrea y secreción - Exotoxina de origen proteica: actúa sobre la celulas hospedera inhibe la síntesis de proteína. - Citotoxinas - Hemolisinas → Capacidad de invasión del epitelio intestinal Enfermedades en humanos: - Asociadas a abscesos, neumónias, menigitis, septis, infecciones urinarias infecciones intestinales. - Componentes de la flora intestinal de humanos - Asociadas a infecciones intrahospitalarias - Caudales de 50% de casos de sepsis y más del 70% de la infecciones urinarias, y diarreas aguda Géneros representativo EXTRAINTESTINALES INTESTINALES Escherichia coli Proteus miralibis Citrobacter freundii - Grupo KES: Klebsiella (pneumoniae y oxytoca) Enterobachter (aerogenes y cloacae) Serratia marcescens ITU, Cistitis Infecciones respiratorias bacteriemias, inf SNC Muchas son intrahospitalarias y de alta mortalidad Debido a esto es necesario identificar el agente y realizar antibiograma 4 géneros: Salmonella Shigella Escherichia Yersina Plasiomonas shigelloide: anterior filia vibroniacea Identificación enterobacterias: - Agar Mcconkey: evalúa se fermenta la lactose - Ágar EMB: Identifica genero y especie de gran + ENTEROBACTERIAS: EXTRAINTESTINALES ➢ Escherichia coli ➢ Proteus miralibis ➢ Citrobacter freundii ➢ Klebsiella (pneumoniae y oxytoca) ➢ Enterobachter (aerogenes y cloacae) ➢ Serratia marcescen 46 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Escherichia coli Causa más frecuente de: Infecciones extrainteinales - Infecciones urinarias - Infecciones respiratorias - Bacteriemias - Meningitis neonatal - BGN, móvil, con o sin cápsula, es anaerobio facultativo, tolera la bilis y es capas de crecer a 44 C. - Fermenta la lactosa (con rapidez), producción indol y se dispone de provas bioquímicas para su identificación completa PATOGENIA: Antigenos O (sómatico), H (flagelar), K (capsular), F (fibrico) que sirve para serotipificar Endotoxinas: LPS presente en todas las cepas, adhesinas como la fimbria P asociada a infecciones urinarias y factores de colonización (CFA I y II, K88 Y K99), asociadas a infecciones del tubo digestivo. Capsulas Como oportunista: ➢ Infecciones respiratorias: Por aspiración de secreciones respiratorias en pacientes colonizados y hematógena. Hospitalaria ➢ Meningitis neonatal (k1): 1er mes de vida. Puerta de entrada gastrointestinal, con bacteriemia y meningitis. Cepa capsulada ➢ Bacteriemia endotoxina: shock Asociada a interacciones urinarias. Causa principal de bacteriemia IH. Focos primarios: cuerpos extraños y tracto GI y urinario ➢ Infecciones de heridas quirúrgicas y quemadura ➢ Infecciones urinarias: cistitis pielonefritis Sitio más común de infección, desde cistitis hasta PNF y sepsia. Fimbrias P y tipo 1 (se une a D-manosa que se encuentra en epitelio). Asociadas al serogrupos O. 1- Escherichia coli enteroxigenica (ECET - ETEC) • Cepa productora de 2 enterotoxinas secretora: TL(termolábil) y TS (termo estable) • Se caracteriza por diarrea acuosa - Diarrea del viajero (tipo coleriforme) sin la presencia de moco, sangre o pus que progresa a la deshidratación. • Las bacterias colonizan el intestino delgado sin producir invasión de la mucosa por medio de la adherencia de la fimbrias (tipo 1 y tipo CFA que son manosa- resistencia y se codifican en plasmidos) a la vellosidades. • Enterotoxinas: ST Y LT (estimula la diarrea) • En poco paciente se observa el vómito y la fiebre • En cuadro clínico puede varia dese 1 a 5 días, o extenderse hasta 21 días. • En el examen directo de las heces fecales no se observan polimorfonucleares • La antibioticoterapia antibiograma lleva a la aparición de cepas altamente resistentes • Aplicar siempre medidas de sostén al equilibrio hidroelectrolítico • Contaminación: fecal – oral, alimentos y agua contaminadas Infecciones intestinales: Diarrea del viajero Infecciones entéricas Provocada por lo menos 4 variedades bacterianas con diversos mecanismos de infecciones: 1. E. colli enterotoxigénica (ECET) 2. E. coli enteropatogénica (ECEP) 3. E. coli enteroinvasiva (ECEI) 4. E. coli enterohemorrágica (ECEH) 47 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti La diarrea que produce esta bacteria es producida por dos toxinas: (codificadas en plásmidos) → Toxina termolábil: activa el adenilato ciclasa por lo aumento de AMPc y aumenta la excreción de Na, Cl, HCO3 hacia la luz intestinal. Que arrastra el agua → Toxina termoestable: estimula la guanilato – ciclasa → Autolimitada: hidrata, no recomienda ATB 2- E. Coli enteropatogénica: ECEP - EPEC • Preferentemente en niños: por destrucción de las microvellosidades • Cepa que NO PRODUCE TOXINAS • Diarrea de verano • <2 AÑOS (Neonatos) • Diarrea con moco - acuosa • Se adhiere fuertemente a las microvellosidades, destruyendo sin producir invasión. • Produce cambios histopatológicos conocidos como adhesión y borramiento o eliminación (A-B) en 3 etapas: a) Adherencia inicial b) Transducción de la señal por medio de proteínas secretadas c) Intima unión: intimina Produce borrado de las microvellosidad Como consecuencia de la acción patógena de ECEP se produce: - Presencia de polimorfonucleares que pueden activar el receptor apical de adenosina y activar la secreción del cloro - Aumento de la permeabilidad por activación de las cadenas ligeras de miosina que abre la intima unión y disminución de la superficie de absorción por borramiento de las microvellosidades - Aparición de diarrea que puede evolucionar hacia una diarrea presiente (depende de la inmunidad del paciente) - Suporte con hidratación - ATB: ceftriaxona, ciprofloxacino. 3- E. coli entero invasiva: ECEI – EIEC (EAEC) • Cepa semejante a Shigella (no fermenta lactosa o lo hace tardíamente) • Inmóviles • Diarrea disentérica con fiebre, sangre y pus • Ulcera del cólon Fisiopatogenia: - Penetración en epitelio celular, lisis de la vacuola endocitica - Multiplicación intracelular - Movimiento direccional a través del citoplasma y extensión dentro de la células del epitelio adyacente - cuando la infección, estos eventos da lugar a una gran reacción inflamatoria y se produce las ulceraciones La lesión ocurre en la mucosa colónica: Las manifestaciones clínicas producidas por este microorganismo semejan a la shigelosis. → Diarrea mucho, cólico y tenesmo. Reacción inflamatoria. → PATOGENICA: colon e intestino delgado → La fiebre puede estar presente y en las heces fecales se reparta la presencia de PMN → La evolución es autolimitada con duración de 1 a 2 dias, la hospitalización muy rara se requiere y no se ha reportado muerte debido a la infección. → ATB: Cefolosporina, azitromixina → No hay bacteremia 48 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti 4- E. coli entero hemorrágica: ECEH - EHEC Síndrome urêmico hemolítico Más grave Diarrea, nauseas y vomito Coloniza el colon transverso y ascendente sin producir invasión de la mucosa. Adhiere al enterocito y destruyen la microvellosidad. • La cepa ECEH (O157:H7) pertenece a la categoría de E. coli alta productoras de verotoxina (VT) o citotoxinas: responsable pro el síndrome urémico -hemolitico (SUH). Aparece en niños pequeños al final de la primera semana de iniciada la diarrea disentérica, expresandose con insuficiencia renal aguda, manifiesta por la oliguria y las alteraciones del medio interno (acidosis, hiperkalemia, hiponatremia, edemaa) palidez y cansancio. Anemia hemolítica y petequias, debido a la trombocitopenia. • Este microorganismo fue descrito por ves primera 1982 (Michigan y oregon), en brotes por ingestión de hamburguesas (mas cozidas), caracterizados por diarreas sanguinolentas. • No recomienda antibiótico • Entre los factores de virulencia de esta cepas está la producción de 2 hemolisinas: 1- Hemolisina alfa 2- Hemolisina beta o enterohemolisina relacionada con la producción de VT (VT 1 y VT 2) inducida por un fago temperado. • La VT1 es antigénicamente similar a la siga- toxica: las dos están formadas por subunidades A y la B. en el caso de la Shiga -toxica esta en relación con un gen del cromosoma bacteriano de la shigella mientras que la formación de la VT1 esta dada por un fago temperado. • La VT2 es antigénicamente distinta a la siga- toxina y la VT1, pero biológicamente idéntica. Posee, igual a la anterior, dos subunidad, la cuales también están en relación a un fago temperado • La producción de citotoxina también esta mediada por fagos • Tanto la VT1 como la VT2 interfieren con la síntesis de proteínas • Asi la VT1 inhibe la absorción de agua y sales por enterocitos, o lo que se debe la diarrea acuosa primaria. • No usa antibiotico porque cuando lisa la bacteria libera mas toxina • Argentina es país con mayor número de SUH, y mismo es la primera causa de insuficiencia renal en niños menores de 2 anos Infecciones de aparato urinario: ITU E.coli uropatogena Afecta muyeres sexualmente activas, por el mala técnica de asceo en la mujer. La bacteria proviene de la región perianal, o en la relación sexual. Adherencia al epitelio por la fibrias tipo 1 y tipo P. Causa hemolis y daño en epitelio urinario y leucocitos por formar poros en la membrana en presencia de Ca - Bacteriuria asintomática, cistitis o pielonfefritis Bacteriemia: Es la invasión en la torrente sanguineo representa el proceso más grave que puede causar este microorganismo y uno de los que con mayor frecuencia provoca la falla multiorgánica grave. El shock septico es un cuadro de hipotensión inducido por sepsis que persiste a pesar de la reanimación con fluido terapia y que acompaña de hipoperfusión con acidosis láctica, oliuri y alteración aguda del estado mental, sumado a la falla multiorgánica. Produce abscesos en cualquier órgano. Además puede causar, artritis séptica, abscesos cerebrales, endoftalitis y neumonías. En los neonatos meningistis y bacteriemia (e. coli K1) DIAGNOSTICO: antibiograma, patogeno con variada resistencia antibióticos • Cistitis: hasta vejiga (tratamiento: nitrofurantoina, fosfomicina, cefalosporinas, amox+cav) • Pielonefritis: uréter y riñón (amox+clav, cefuroxima, ceftriaxona, aminoglicosideos, fluroquinolonas) 49 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Klebsiella ssp - Inmóviles - Gram – - Kebsiella pneumoniae, klebsiella oxytoca, Klebsiella granulomatis - Infecciones hospital - Flora normal del tracto digestivo, no produce infecciones en inmunocompetentes, son patógenos oportunistas en inmunodeprimidos. - Fermentadoras de lactosa - Usan citrato como única fuente de carbono - Capsulada – polissacarídica (importante para inhibir fagocitosis – bloqueai el complemento) - Endotoxinas: LPS, fibriasy adhesinas - Pili tipo 1 y 3 - Sideróforos - Resistencia ao antimicrobiano: produce las Beta lactamasa - ESBL: ENZIMA que degrada todas las cefalosporinas - KPC: ENZIMA QUE DEGRADA CARBAPENEMICO - Forman colonias mucoides por su cápsula polisacarida sobresaliente: - Grande resistencia, y difícil de tratar Klebsiella pneumoniae Causa de neumonía lobular sobretodo en varones mayores de 40 años alcholicos y con patogenia de base como diabetes mellitus o EPOC, tendencia a formación de abscesos pulmonares y empiemias. Infecciones primarias: ✓ Neumonía lobar (lobular) 1- En paciente con enfermedad de base severa (etilismo, DBT, EPOC) 2- Hemorragia e inflamación. Abscesos, cavitación y empiema (acumulación de pus en el espacio pleural) Infecciones secundarias ✓ Neumonías de foco múltiples. Intrahospitalaria ✓ Infeccione urinarias ✓ 14% de las bacteriemias primarias de paciente internados ✓ Infecciones del tracto biliar y de heridas. ✓ Resistencia a múltiple fármacos CLÍNICA: ✓ Neumonia ✓ ITU ✓ Infección del sitio quirúrgico ✓ Infección de via biliar ✓ Infección de dispositivos intravasculares ✓ Peritonitis ✓ Meningitis ✓ Infecciones hospitalarias graves Tratamiento: depende do perfil de sensibilidad: amox-clav. Cefalosporina 1ª a 4ª geración, carbapenêmico, aminoglicosídeos, fluoroquinolonas 50 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Enterobacter ssp - Móviles - No possen capsula - Fermentan la lactosa - Citrato como única fuente de carbono - Oportunistas - Infecciones de quemadura, respiratoria, urinaria. - Colonizan pacientes internados, sobretodo aquellos en tratamiento antibiótico - Presentan alta resistencia a los antibóticos ➢ Serratia marcecens - Móviles - Fermenta la sacarosa - Citrato: único fuente de carbono - Crece a una temperatura que oscila entre 5-40 ⁰C en nivel de PH que varían entre 5 y 9 - Infecciones intrahospitalaria: respiratoria, urinaria, quirúrgicas, bacteriemias - Oportunistas: paciente que tienen la inmunidad disminuida por enfermedades sistémicas o tratamiento médico inmunosupresores - Coloniza tracto GI y respiratorio (ARM) - Extrahospitalaria: artritis séptica post- punción ➔ Resistencia a antibióticos ➔ Factor R (plasmídico): el más importante de este es el SMAL inactivación enizmatica - Resistencia primaria a todas las penicilinas, a las cefalosporinas y a las pomixiana. Klebsiella, enterobacter y serratia: fermenta la lactose y toleran la billi, son oxidada negativos Varias cepas han adquirido resistencia a la mayoría de los beta lactamicos. ➢ Tribu proteeae: proteus, providencia y morganella - Bacterias móviles que desaminan la fenilalanina - P. mirabilis y P. vulgaris - Toleran la bilis y desarrolla en medio alcalinos - Son muy móviles - Produce ureasa - Alta tendencia de colonizar el tracto urinario - Habitat normal: intestino humano, agua - Fatores de patogenicidade: uréase, fimbrias, flagelos, hemolisinas, adesina, hemolisinas, proteases contra IgA - Personas sana: produce infecciones urinarias, en inmunodeprimidos la bacteria puede causar infecciones de heridas hospitalaria, septicemia y neumonías. Litiasis renal Proteus mirabilli; - 10% de las ITU no complicadas – mas importante - espécie indol (+): infecciones hospitalrias Providencia (rettgeri y stuartii) - Causas de infecciones urinarias de origen nosocomial por manipulación (cateterizaciones) o por infecciones debidas a otras patologías urinas de base Morganella (morganii) - Sepsis generalizada de origen urinaria en paciente inmunocomprometidos Citrobacter (freundii) - Grupo de bacilos gramnegativos aerobios que se encuentran frecuentemente en el agua, suelo, comida y el tracto intestinal de anilaes y humanos como flora saprofita. - Móviles - Utilizan citrato como fuente de carbono 51 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti - Hidrolizan lentamente la urea - Fermentadores variable (si o no) de la lactosa (con producción de ácido láctico y gas) - Infecciones hospitalaria (endocarditis, bacteriemias) - Junto con enterobacter, klebsiella y Escherichia forma el grupo de coliforme de bacteria entéricas. - Algunas especialmente tinenes antígenos somáticos O, flagelar H y de superfície K, lo que hace que den reacciones cruzadas com otra Enterobacteriás. - Es una de los patógenos más importantes en unidades de cuidasos neuonatales hospitalarios. - Destruyen las microvellosisad, formando lesiones muy características denominadas de adherencia y eliminación borrado (igual a las cepas de E.coli). Enterobacterias INTERSTINALES ➢ Salmonella (tiphy y paratiphy) ➢ Shigella (disenteriae) ➢ Escherichia (cepas entero agresivas) ➢ Yersina (pestis) 52 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Salmonella (Tiphy y paratiphy) - BGN - Móviles por flagelos - No capsulada excepto Tiphy y paratiphy, que expresan polisacaridos capsulares - Igual a Shigella - No es habitual del intestino humano - Anaerobios facultativos - No fermentan la lactasa y producen sulfuros de hidrógenos - Se clasifica segundo su Ags somatico: O y flagelaes H - Ag capsula o de virulencia (VI) - Se adquiere por ingesta de agua y alimento contaminados - Reservorios (fuentes de infección): Salmonellas no tifoideas: animales Salmonellas tifoideas (s. typhi): sólo el hombre Fisiopatogenia: - Inoculo alto (10-6 o 10-9) - Multiplicación en intestino: A) ASINTOMATICA: Excreción de microorganismos B) SINTOMATICA: enterocolitis, fiebre entérica o bacteriemia Patogenia: ➔ Ingesta y llegada al estomago, se unen a la mucosa del intestino delgado e invaden la célula M localizadas en las placas de peyers y enterocitos ➔ Las bacterias quedan adentro de los enterocitos donde se replican. también se pueden trasportar a través del citoplasma y liberar hacia la sangre o circulación linfática. ➔ Las tiphy y paratiphy son las que produce bacteriemia ➔ Salmonella sp (especie) queda y actúa a nivel de enterocitos Traviesa el estomago, llega al intestino delgado, se adhiere en las microvellosidad, preferentemente en las placas de peyer. Característica de romper la mucosa intestinal, rompe la estructura del citoesqueleto y disminuye la absorción de electrolitos. Se internaliza y empieza a producir la destrucción de los enterocitos. - La regulación del anclaje, el englobamiento y la replicación se deben a dos grandes agregados de genes (islote de patogenicidad I y II) - Los islote de patogenicidad I: codifica las proteínas invasivas secretadas por salmonellas y un sistema de secreción de tipo III que inyecta las proteínas en interior de las células. - Los islotes de patogenicidad II: contiene los genes que permite a la bacteria escapar de la respuesta inmunitaria del hospedador Família: enterobactereaceas Gênero salmonela Espécie: 1- Entérica: afeta humanos Subespécie: → Entérica (humanos) Serovariedad: Typhy, paratiphy, enterititdis, pollo y huevo, Choleraesuis, Thyphimurium → Salamae → Arizonae → Diarizonae → Houtenae → indica 2- Bongori: anilaes – no es patógena en humano Fiebre tifoide o fiebre entérica → S. tiphy Fiebre paratifoicas → S. paratiphy Enterocoliis o salmonelisis → salmonella sp 53 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti En resume los islote lo que hace es proteger la bacteria - La respuesta inflamatoria: 1- Limita la infección al tracto gastrointestinal 2- Media la liberación de prostaglandinas 3- Estimula el AMPC y la secreción activa de líquidos Clínica: 1- Enterocolitis; niños menores de 5 anos y mayores de 60 años 2- Diarrea acuosa3- Fiebre entérica: S. typhy, S paratyphi, A, B, C - incubación 10- 14 días - Fiebre, sintomas respiratórios, mareos, confusión, diarrea ó constipación - Roseóla tifoidea, hepatoesplenomegalia (diagnóstico por hemocultivos) 4- Bacteriemia: sin fiebre entérica: común en SIDA (s. typhimurium y S. choleraesuis) 5- Infecciones locales: meningitis, enf. pleuropulmonar, endocarditis, pericarditis, osteomielitis y abscesos. 6- Portación crónica (en vía biliares) 7- Gastroenterite 24-48 hs, después de la ingesta. Diarrea, vomito y dolor abdominal cólico Fiebre tifoidea: o fiebre entérica Afecciones intestinal, febril, sistémica, aguda y afecta a los macrofagos. Causados por: S. typhy, S paratyphi A y B y S. Typhimurium Epidemiologia: agua y alimento contaminados Portador crónico mayor de 50 años, mujeres con calculo biliar. Patogenia: infección se da por via oral, a nível del ileon distal y el colon atraviesen la mucosa y alcancen el torrente sanguínea. Producen la bacteriemia asintomática ya que son fagocitadas por macrófagos en cuyo interior sobreviven y se multiplican. Fase de estado de fiebre tifoide, es cuando la bacteriemia persistente e es suficiente para multiplicar intracelular, ocurre invasión en nivel de vesícula biliar y de placa de Peyer en intestino, es cuando llega en intestino que se encuentra las manifestaciones. Manifestaciones clínica de: colecistiti, hemorragia intestinal o perforación. Fiebre tifoidea, es una fiebre persistente de 4 a 8 semanas, astenia, adinamia, cefalea, anorexia con coagulación intravascular diseminada y afección del SNC que lleva de forma rápita a la muerte. Diarrea intermitente o ausente Estreñimiento en adultos y diarrea leve en niños. TRATAMIENTO: fluoroquinolonas y ceftriaxona Salmonelosis no tifóidica: Cuando es producida por S. Enteritidis y S. typhymurium Diarrea aguda, sepsi, abscesos focales, meningitis, osteomielitis, endocarditis o incluso asintomático. Huevos contaminados, animales domésticos puede ser portador: gallinas Ingressa por la via ora, llega al intestino delgado, adhiere a la mucosa y la invade, pero no llega a la circulación, en la mucosa produce inflamación. Tratamiento: Fluroquinolonas, Ceftriaxona, azitromicinae 54 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Shigella - BGN Inmóvil - Especies: S. dysenteria, S. flexneri, S. Boydii y S. sonnei. - No capsulada - Bacteria se adhiere al epitelio colonico e ingresan a las celulas endocitosis, donde se reproducen de manera constante generando la destrucción del epitelio y la invasión a otra celula. – genera inflación y produce ulcera diseminadas en la mucosa colónica. - No fermenta lactosa ni glucosa - 4 grupos serológicos: Grupo A: S. dysenteriae (enterotoxina o toxina shiga)→ disentería bacilar clássica Grupo B: S. flexneri Grupo C: S. Boydii Grupo D: S. sonnei Fisiopatogênica: → la enfermedad está restringida a la mucosa intestinal (invasión), se localiza en la mucosa del colon y recto, y raramente ocurre la diseminación (infección autolimitada), destruye el epitelio y invade las células. El ciclo de invasión y replicación genera la inflamación y la producción de ulceras diseminadas en la mucosa colonicas. → alta transmisión de persona a persona → Incubación que varía desde menos de 12 horas hasta 4 días → Producción de toxina: fiebre, dolor abdominal (pujos y tenesmos), diarrea líquida y luego mucosanguinolenta (disentérica) → Tacto rectal doloroso → Raro hemocultivo positivos – pide recuento de leucocito y materia fecal → No forma parte de la microbiota intestinal → A mayoría virulencia de la cepa, más rápidamente aparece el cuadro distérico → En individuos bien nutridos el cuadro desaparece sin tratamiento de 7 a 10 días después de haber comenzado → En individuos mal nutridos puede evolucionar a la forma persistente por meses → Raramente se identifica este microrganismo fuera del trato intestinal (autolimitado) → Muy baja dosis infectante (poca cantidad de bacteria suficiente para el inicio de la infección Clínica: Diarrea acuosa inespecíficas hasta la producción de graves cuadros disentéricos con numerosas deposiciones diarreica, abundante moco, sangre y pus, intenso dolor abdominal. Tríade: insuficiencia renal aguda, anemia hemolítica y trombocitopenia. Complicaciones: 1. Deshidratación: en niños muy pequeños y mal nutridos 2. Sepsis con coagulación intravascular diseminada (C.I.D) 3. Síndrome urémico hemolítico (en la infecciones por S. dysenteriae 1 y algunas serotipos de S. flexneri) 4. Purpura trombocitopénica trombótica 5. Otras (menos frecuente: prolapso rectal, megacolon tóxico, colitis pseudomembranosa, hepatitis, colestásica, conjuntivitis, iritis, úlceras corneales, artritis, Epidemiologia: cosmopolita. En países en via de desarrollo, las malas condiciones sanitarias y el hacinamiento facilita en contagio persona a persona (via fecal oral), agua, alimento contaminados Diagnóstico: pus y sangre en materia fecal, sumado a clínica y los dados de laboratorio. Examen microscopico, abundante hematites y PMN. Tratamiento: Reposición de equilibrio hidrolectrolitico Antibiograma: fluroquinolonas Tratamiento: ciprofloxacino, ceftriaxona (en caso resistencia) 55 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➢ Yersinia ssp - BGN, capsulado, cocobacilos - No fermenta lactona y ureasa positiva, oxidasa negativa - Móviles a 25C pero no a 37 C. depende del Ca para su crecimiento a 37 C - Especie: Yersina pests (peste bulbonica), Y. enterocolitica, Y. pseudotuberculosis Yersina enterocolítica Intoxicación alimentaria Distribución: región fría Temperatura ótima: 22-25 C Reservorio: roedores, cerdos, ovejas, vacas, caballos, animales de compania. Vector: pulga de rata – xeopsylla cheopis Patogenia: 1- Invasivo de ileon terminal 2- Necrosis de la placa de peyer 3- Inflamación de ganglio mesentérico ➢ Yersinia pestis Agente etiológico de la: Peste bubónica, mortalidad de 50% - no transmisión interpersonal Peste neumónica: mortalidad de 100% - transmisión de persona a persona Fisiopatogenia: 1- Multiplicación local (linfatico) ganglios locales y regionales 2- Nódulo linfático en axilas y ingles de gran tamaño y doloroso: bunones – con inflamación hemorrágica 3- Bacterimia- sepsis, enfermedad multisistémica, hemorrágica (Bazo, hígado, pulmones y SNC) Meningitis y neumonía Tratamiento: aminoglicosideos, estreptomicina y o tretamiclinas, fluoroquinolonas Prevención: curentena (aislamento) control de roedroes, Pleisomona ssp (nuevo) - Habitante de estuario y aguas dulces - Productores de diarrea acuosa por consumo de alimento marinos, agua contaminada, viajes - Factor de virulencia: hemolisis citotoxica - Clínica: gastroneteritis, septicemia y menigitis e inmunodeprimidos, afecta a ojos, heridas - No es frecuente en la america General: ANTIBIOTICOTERAPIA → SIEMPRE realiza antibiograma: debido a la gran resistencia a drogasm mediada por plasmidos o fagos temperados. → Esquema tentativo de sensibilidad a ATB → Quinolona – acido pipemidico → Fluroquinolonas: norfloxacina, cirpofloxacina, perfloxacina → Aminopenicilina + IBL (amoxicilina + ac. Clavulánico) → Cefalosporina de segunda geración: cefuroxima y de tercera geración: cfotaxima, ceftriaxona Factores de patogenicidad: - Ag capsular polisacárido - Endotoxina - Toxina proteicas Cuadro clínico: - Enterocolitis - Adenopatía mesentérica - Dolor abdominal y fiebre Tratamiento: se necesario puede usarse ceftriaxone o aminoglicosideos 56 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti CONCEPTO GENERAL → Patógenos oportunista de plantas, animal y humano → Aeróbias estritas (necessita oxigeno parasobreviver) → Mucho cambio taxonômicos → Bacilos gram- negativos, clinicamente importantes: • aeróbio no fermentadores: 10-15% de aislamientos clinico ✓ Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Stenotrophomonas maltophlia, Acinetobacter baumonnil, Monotaxella catarrhalis: >75% de todo aislamiento con no fermentadores Bacilos gram – fermentadores de importância clínica Pseudomonas aeruginosa (Família pseudomonadaceae) • Bacilo gram – • No esporulado • Produze infecciones oportunistas • Móviles (un flagelo simple o múltiples polares) • Aerobio obligado (estricto) – mínimo requerimiento • Oxidasa y catalasa positiva • Lactosa negativa • No fermentador • Oxido- positiva • No fermenta azucares • Produce hemolice completa en agar sangre • Metabolismo respiratorio químico - heterótrofo • Requerimentos nutricional mínimo • Glucosa usada oxidativa • Algunas cepas producen pigmentos difusibles • Común en la terapia intensiva • Producción de pigmetación: → Piocianina (azul) → Fluorescencia (amarillo) → Piorubina (rojo) • Olor característico y colonia y pus verde- azul • Amplia resistencia a los antimicrobiano. Infecciones: • Sobreviven donde la mayoría de m.o no pueden: - Forman capsula mucoide - Exopolisacárido Aumenta la protección de las pseudomona y auxilia en la identificación 57 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti EPIDEMIOLOGIA Ubicuo en la naturaleza, es oportunista Puede colonizar, piel oído externo, tracto respiratorio superior e intestino grueso. Facilidades hospitalarias: lavabo, baño, flores, equipo de diálisis y equipo de respirador, soluciones y equipos. Puede colonizar transitoriamente el tracto respiratorio y G.I de los pacientes hospitalizados Las infecciones han sido consecuencia de la proliferación en medicamentos soluciones de lente de contacto. - Tratados con antibióticos de amplio espectro - Hospitalizado son mucho tiempo - Expuestos a equipo de respiración (falta de las barreras de protección) FACTOR DE VIRULENCIA - Antígeno somático O y flagelares H - Fimbrias - Cápsula de polissacáridos (alginato): adherencia / proteción - Pili: adherencia - Flagelos: motilidad y invasión - LPS: Lipidio A, induce la respuesta inmune – inflamación - Enzimas extracelulares: Elastasas Proteasas: lesión tejido Dos hemolisinas: fosfolipasa C termolábil y lipolisacarido termoestable - Exotoxina A (EXOA) bloquea la síntesis de proteínas en células eucariótica (humano) responsable por la necrosis tisular - Exotoxina S (EXOS) inhibe la síntesis de proteínas por ribosilacion de proteínas G. impide la fagocitosis de los neutrófilos - Exotoxina U: macrófago, impide la fagocitosis - Elastasas, proteasas, proteasas alcalina, fosfolipasa C, leucocidinas, enterotoxina. - Fosfolipasa C: destruye la surfactante (atelectasia) Causas: - Infecciones respiratorias: neumonía - infecciones extraintestinales - Quemaduras de piel y tejidos blandos - Infecciones urinarias (catéteres) - Otitis externas (de otitis del nadador o otitis maligna) - Infecciones oculares: Líquidos de limpieza de lentes de contacto infectados - Septicemia, endocarditis, dermatitis y osteocondritis. ✓ Patógeno oportunista humano: Inmunosuprimidos Fibrosis quística SIDA - 50% de las neumonías bacterianas nosocomiales - El tratamiento de dichas infecciones puede ser difícil debido a la frecuente y repetidas resistencias a antibióticos Requerimiento nutricional: - No tiene muchas exigencias - No requiere factores de crecimiento orgánico - Temperatura óptima de crecimiento 37º C pero es capaz de crecer a 42ºC - Tolerante a varias condiciones físicas, incluyendo temperatura - Es resistente a alta concentraciones de sales y colorante, antisépticos débiles y muchos antibióticos comúnmente usados. 58 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti - Pseudomonas aeruginosa tiene predilección de crecer en ambientes húmedos lo que es reflejo de su existencia natural en suelo y agua DIAGNÓSTICO - Depende del aislamiento de identificación de laboratorio - Crece bien en mayoría de medio comúnmente usados - Es común aislarse en medio AS o MC - Se identifica por su morfología en frote gram - Incapacidad de fermentar glucosa - Reacción de oxidasa positiva - Olor característico - Capacidad de crecer 42º C - Pigmento fluorescente bajo luz ultravioleta es útil para la identificación temprana de colonias de P. aeruginosa - La fluorescencia también es usada para sugerir la presencia de P. aeruginosa en heridas. - Amuestra respiratoria como esputo, lavado bronquio alveolar, muestra para urocultivo, hemocultivo y punción de colecciones. Cultivo • P. aeruginosa puede producir tres tipos de colonias: 1) Rugosas: en aislamiento natural de suelo y agua 2) Lisa: Huevo frito: grandes, lisas con orillas plantas y elevada aparencia 3) Mucoide: obtenidas de secreciones respiratoria y urinaria (slime por producción alginato) • Las colonias lisas y mucoides juegan un papel en la colonización y virulencia Resistencia: → Notoria por su resistencia antibióticos → Es una patógeno peligroso y amenazante → Es naturalmente resistente a muchos antibióticos: - Barrera la permeabilidad por su membrana externa Gram- - Tiende a colonizare superficie en forma de biofilmes - Además, adquiere resistencia por plásmido: factor -R y RTFs - Capas de trasferir estos genes por medio de mecanismos horizontales de transferencia como transducción y conjugación → Antibióticos son efectivos contra pseudomonas: fluoroquinolonas, gentamicina (aminoglicosideos) e imipenem → Aun este no son todos efectivos contra todas las cepas → Lo peor de tratar infecciones por pseudomonas es dramático en pacientes con fibrosis císticas, lo cuales virtualmente se prenda sin se tratar por medio Tratamiento prevención: La diseminación de P aeruginosa puede controlarse mejor, observando procedimientos de aislamiento adecuados, técnicas asépticas y limpieza cuidadosa y monitoreo de respiradores catéter e instrumentos Terapia tópica de heridas por quemadura con agentes antibacterianos como sulfadiazina de plata, con desbridamiento quirúrgico reduce su incidencia. Pseudomonas aeruginosa es frecuentemente resistente a la mayoría de antibióticos usados comúnmente Muchas cepas son susceptibles: - Gentamicina - Tombramicina - Colistina - Fluroquinolonas - Genta + carbenicilina Mutación de porinas Alteración enzimática Β- lactamases 59 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ACINETOBACTER BAUMANNI Las especies mas comunes son A. baumonii, A.calcoacetius y A. Lwofi Cocobacilo gran negativo emergente // oportunista En los 30 años como agente infeccioso potencial importante en cualquier ambiente hospital Hace colonización en superficie seca (diferencial de los otros fermentadores) Incacapacidad de fermentar carbohidarato y reducir nitrato Epidemiologia: - En países tropicales - Problemas recurrentes durante las guerras y Desastre naturales - Recientemente ha causada brotes en muchos hospitales de clima temperado Alarmante: ejerce diversos mecanismos de resistencia contra todos los antibióticos comercializado Habita en agua y el suelo Ha sido aislado de alimento, artrópodos y medio ambiente Es los seres humanos puede colonizar en la piel, las heridas, el aparato respiratorio y el tracto gastrointestinal. Algunas cepas pueden sobrevivir a la desecación durante semanas Se puede aislar fácilmente en los cultivos estándar pero es relativamente no reactivo en muchas pruebas bioquímicas usadas para diferenciar los bacilos gran negativos. A veces utiliza el termino complejo A. calcoacetiu- A. baumanii, aludiendo a la dificultad para caracterizar el genotipo. Nemoniaes la infeccion más comun seguido de infeccion urinaria Frecuente en colonizacion de piel y del aparato respiratorio MICROBIOLOGIA → morfologia de tipo cocobacilo gram- → oxidasa negativo → Predominan en los medios fluidos, especialmente durante el inicio del crecimiento → Morfología pude ser variable en los especímenes tenido el laboratorio. → La mayoría de las cepas de Acinetobacter, excepto algunas de A. lwoffil crece bien sobre el agar MacConkey (sin sal) → Las diferentes especies de este género se pueden identificar usando FLM (desnitrificación fluorescente de la lactosa) para determinar la cantidad de ácido producido por el metabolito de la glucosa. Epidemiologia: Siempre ha sido el patógeno de los climas calientes y húmedos, donde ha sido la causa principal de las infecciones particularmente en unidad de terapia intensiva A veces es causa de neumonía adquirida en la comunidad Causa del 17% de las neumonías en paciente con respirador en pacientes con problema en la UTI de estados unidos Ultimamente há legado a ser um problema tambien en climas templados. Mecanismo de resistência → Beta lactamasa → Alteraciones de los canales de las paredes celulares (porinas) por mutaciones genéticas → Bomba de eflujo Resistencia a quinolonas a través de mutaciones genéticas y a los aminoglucósidos mediante la expresión de enzimas modificadores de aminoglucosidos 60 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Una informe reciente de 45 genes de resistencia En la actualidad, el término “resistencia a multiples fármacos” en referencia a Acinetobacter, para mencionar la resistencia a 3 o más clase de antibacterianos: quinolona, cefalosporina, carbapenems. El termino “panresistencia” se refiere a las cepas que son resistentes a todos los antimicrobianos estándar probados (excepto la colistina) Factor de riesgo → Paciente debilitados, sobre todo en UTI o en unidades de larga estancia, paciente con respirador → Postoperatorio → Cateterización vascular central → Traqueotomía → Ventilación mecánica → Alimentación enteral → Tratamiento con cefalosporina de tercera generacion, fluroquinolona o carbapenems → Modo de contagio importante: mano de las personas que asisten a pacientes colonizados o infectados o que han tocado objetos contaminados → Trabajadores de la salud son portados o de ce epidémicas → Una vez aparecido en el hospital: adopta un perfil epidemiológico de brote en serie o superpuesto causados por varias cepas resistentes a múltiples fármacos → Estos brotes destacan la importancia de la vigilancia la comunicación entre servicios asistenciales y la medidas de prevención Factor de resistencia de la bacteria: - ESBL - Carbapenemases - Mutación de las porinas - Enzimas modificadoras - Alteración de sitios de acción - Bomba de eflujo Medidas de control - Controlas la fuente de infección Hospitalar - Reducir el tratamiento con antibiótico de amplio espectro (fluroquinolona y carbapenems) - Limpieza exhaustiva de todos los ambientes y el equipo (respirador) - Descolonización del paciente: - Higiene de la piel con chorhexidina o polimixina tópica, oral o en aerosol - Medida adyuvante para el control de la infección que requiere más evolución 61 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Resistencia a los antimicrobianos y genética - Mas que por su virulencia el mayor peligro está asociada a la capacidad de adquirir resistencia genética antimicrobiana extremamente rápida. - Relacionadas sobre todo al uso de antimicrobiano de amplio espectro: cefalosporina y fluoroquinolona Mecanismo de resistencia Adquisición de un fenotipo de fármaco resistencia múltiple Elemento genético móviles: plasmidos, integrones, transposones Presencia de intergrones clase I y II. Antibiótico- resistencia Adquiridos en el contacto con otras bacterias: Enterobacteriaceae y Pseudomonas sp Transferencia del integron VEB – I que determina la beta- lactamasa de espectro expandido y otros 6 genes con resistencia a los antimicrobianos A. baumanni tiene alta frecuencia de transformación natural Degradación de enzimas, alteración de bombas de iones, deficiencia de porinas. La resistencia de los cabapenems, es a través de la adquisición de carbapenemasas clase B o D CRAB (cabapenem resistente Acinotobacter baumanii) MDRAB - PDRAB BURKHOLDERI SSP (CEPACIA) Principalmente en pacientes con fibrosis quistica y lesiónes pulmonares. Sindrome cepacia STENOTROPHOMONAS MALTOPHILIA Antes: pseudomonas maltophilia y despue xanthomonas Causas de infeccione nosocomiales infectando heridas, tracto urinario y sangre Oportunista: nemonia, bacteremia, meningitis, infección urinaria, infeccione de heridas. Epidemiologia: reservorio húmedos hospitalares (brotes epidêmicos) Soluciones desinfectes, floreros, maquinas de hielo, respiratorio, etc A riesgo: - Hospitalización - Pecientes inmunocomprometidos - Tratamiento prolongados con antibioticos Tratamiento, prevención y control: Multiples resistencias: beta lactamicos y aminoglucósidos Susceptible a: - Trimetoprim- sulfametoxazol (bactrim) - Clorangenicol - Ceftazidima Moraxella catarrhalis 62 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti FAMILIA VIBRIONACEA Vibrio cholerae Géneros de importância: → Vibrio, → Aeromas, → Plesiomonas. Productora de diarrea: cólera – gran perdida de H2O Característica generales: ✓ Bacilos Gram (-) ligeiramente curvos ✓ Aeróbios y anaeróbios facultativos ✓ Móviles (mayoría con flagelo polar) ✓ Oxidasas (+) ✓ No esporulado Pude clasificar de acuerdo con la capacidad de aglutinar con anti suero: Serogrupo: - Vibrio cholerae: Antisuero 01 – causa epidemia y endemias- Aglutina con antisuero 01 - Suporta elevadas concentraciones de cloruro de sodio Agente etiologico de la colera, pierde gran cantidad de liquido, puede perder hasta 1 litro de agua por hora. Diarrea: aguda, toxica, pero no es invasiva. - Vibrio no 01 (colera no epidémico) Epidemiologia - Asociada a las condiciones de saneamiento básico inadecuado - Constupre de consumir marisco y peces mal cocido. - Deposito de agua naturales o artificiales - Humanos se infectan de forma accidental - Agua contaminada con fecalismo representa la fuente de infección más frecuente. Alimentos contaminados - Mayor numero de casos en meses de verano y otono Clasificación Biotipos: - El Tor - Clásico ontinente americano asociado al biotipo el tor: Eso biotipo, es menos virulente pero persiste en habiente mucho mas tiempo La diferenciación se hace por la diferencia bioquímica Clásica El tor Voges Proskauer: negativo Polimixina (ATB): sensible Voges Proskauer: positivo Polimixina: resistente 63 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Clasificación serotipo: Baseados en el ag sómático: Serotipo antígeno OGAWA A B HIKOJIMA A B C INABA A B El antígeno se puede repetir pero, la combinación es diferente. Característica generales: → Reservorio: ambiente acuáticos → 1,5 y 2 micrometros de long 0,4 y 2,3 micrómetro de ancho → Aerobio facultativo o anaerobio → No espeorulado → Flagelo polar Aislamineto - diagnóstico - Agua peptonada (medio de enriquecimiento) - T.C.B.S = tiosulfato, citrato, sales biliares y sacarosa (MEDIO DE AISLAMIENTO) - Cary blair (medio de transporte) - Halofilicas (pero pueden subsistir en ausencia de Na Cl) - Medio mas utilizado MacConkey o agar sangre • Fermentan la glucosa • Poseen citocromo oxidasa • Son suceptibles al o⁄129 (fosfato de 2,4 diamino 6,7 didisopropilpteridina) •Presentan afinidad con el medio alcalino (7-10 pH) Confirmar identificando el V. cholerae en la heces. Observación directa del microorganismo en muestra frescas de heces al microscopio de campo oscuro y la posterio identificación de serotipo por inmovilización con antisueros específicos anti- inaba o anti – ogawa. Muestra de materia fecal o hissopado rectales PATOGENIA - Transmisión fecal – oral - H2O no tratada - Requiere de gran doses - Diarrea secretoria: no inflamatoria. Factores de virulencia - Proteínas flagelares - Hemolisinas - Factores de colonización - Proteínas de membrana externa (OMPS) - TOXINA: estimula la adenilato – ciclasa de los enterocitos Toxina colérica; subunidad A (A1 y A2) y una B (tienes 5 subunidad) 64 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti B: une al receptor en la superficie de la membrana GM1 La A1 ingresa y es la que tienes la acción toxígena que une a la adenilato ciclasa. Activa de manera crónica que produce grandes cantidad de AMPC, y de esa manera pierde gran cantidad de electrolito y agua – Cloro, sodio, bicarbonato y potasio. Inhibe entrada de sódio y activa la salida de Cl, K, HCO3, H2O CLÍNICA: Comienza de manera brusca. Periodo de incubación de 24 a 48 horas. Cuadro leve a graves: Diarrea y deshidratación severa: hipotensión, shock hipovolémico, desequilibrio electrolítico: acidosis, arritmias, hipoglucemia. DIARREA ACUOSA CON APARENCIA DE AGUA DE ARROZ. Indolora, que puede acompañar vomito. Acidose por perdida de bicarbonato y colapso circulatório Frecuente calambre muscular debido a trastornos electrolíticos Aspecto de las heces: - Liquida - Ligeramente opacas - Con restos de moco sin sangre y con olor ligeramente dulce no molesto Laboratorio: - Hematocrito elevados (hemoconcentración) - Leucocitosis: predominio neutrofílico, elevación BUN, y de la creatina, sodio, potasio y cloro normales con bicarbonato disminuido - pH sangre atrial suele ser bajo aproxi 7.2 TRATAMIENTO Reponer agua y sales Uso de antibióticos: - Tetraciclinas - Ampicilinas - TMS (Trimetroprima – sulfametoxazol) - Cloranfenicol VIBRION CHOLERA DEL TIPO NO 01: No produce diarreas abundantes, pero produce gatrointeristes y diarreas mas leves. Infecciones heridas, sepsis. - Vibrios no cholerae - Son: V. parahemolyticus - V. mimicus - V. fluviales - V. Vulnificus 65 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti AEROMONAS - A. Hidrophyla - A. veronii - A. caviae Características microbiológicas: ✓ Bacilos rectos o ligeramente curvos ✓ Oxidasa + ✓ Poseen un solo flagelo polar ✓ Crecen entre 4 y 45⁰ C ✓ Similar a otras bacterias entéricas características bacteriológicas similares a las de las enterobacterias, Vibrio y Pseudomonas. ✓ Son bacterias aerobias o anaerobias facultativas, que fermentan carbohidratos y demuestran varias reacciones bioquímicas. ✓ betahemolíticas. ✓ Las diarreas se relacionan comúnmente con la producción de enterotoxinas Aislamiento e identificación: • Agar sangre con AMP (ampicilina) para evitar el desarrollo (inhibe la flora acompañante) de flora agregada • En agar MC colonias lactosa y oxiadasa + • Resistentes al vibriostático o⁄129 • Desoxirribonucleasa + (la ADNasa es importante porque diferencia la aeromona de la plesiomona que es ADNasa negativa) Clínica: - Gastroenteritis - Diarrea disentérica - Septicemia - Infecciones cutáneas - Abscesos intraabdominales, osteomielitis, endocarditis Tratamiento: antibiograma - Resistencia a la ampicilina - Sensibles a la cefalosporina, quinolonas, TMS PLESIOMONAS - P. Shigelloides Característica - Oxidasa + - Anaerobio facultativo - Móvil Crecimiento: - Agar sangre de carnero: colonias grises, - Sin hemolisis - DNAasa – - Antibiograma: AMP (cada vez hay mas resistencias), TMS, aminoglucósidos, quinolonas. 66 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti COMPILOBACTER Campylobacte Jejuni Campylobacte Coli Campylobacte Fetus Gran importancia Características: - Bacilo gran negativos curvos o espiralados - Móviles con flagelos polar que crecen en condiciones de microaerofilia - Oxidasa, catalasa, reducción de nitratos + - Termofílicas: detecta cuando busca la temperatura cercana 40 grados - Zoonosis (animales de granja). Puede considerarse una enfermedad profesional - Animales son reservorio Transmisión – epidemiologia - Contacto directo con animal infectado - Alimentos contaminados, crudo o mal cozido. Agua no tratada e contaminada, e leche. - Sensible a la congelación, pasteurización y deshidratación - Las especies de Campylobacter se detectan en el intestino de pollos, ganado bovino, ovino y porcino, e aves, perro y gato. Pero en dichos huésped no produce infecciones - Verano y otoño - Las infecciones sistémicas por C. fetus, son más frecuente en inmunodeprimidos. Materia fecal: reacción inflamatoria, moco y sangre Septicemia en pacientes con SIDA Sindrome de Guillian Barre Necesita de una gran carga patogénica para que tenga la infección Entertitis: dolor bajo ventre, diarrea acuosa Disenteria; sangre, pus, fiebre Aislamiento e identificación: - Medio de aislamiento: agar sangre y agar chocolate - Medios selectivos Skirrow y campi bap - Identificación Oxidasa + Catalasa + Móvil (flagelo polar) Diagnóstico: Examen en fresco de materia fecal en la que pueden apreciarse gran cantidad de leucocitos y hematíes, además puede intentar observarse a los vibrios mediante una coloración gran o la observación de la movilidad característica en microscopio de campo oscuro. La certificación se hace a través del cultivo de muestras de materia fecal, sangre y otras localizaciones, en medios selectivos con antibióticos para inhibir la flora acompañante en atmosfera con 5% de CO2. Factores de patogenicidad → Enterotoxina con acción similar a la ECET → Citotoxinas tipo shiga → Proteína flagelar de adherencia → Bajas dosis infectante C. jejuni suele ser subclínicas. Las lesiones tisular se localiza en yeyuno, ileon y colon. Las bacterias penetran en células epiteliales del intestino, sobreviven dentro y las destruyen. La adherencia se produce mediante una fimbria agregativa. Produce enterotoxinas y citotoxinas. 67 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti C. fetus, se sabe que poseen una estructura de tipo capsular que le otorga resistencia a la destrucción por el complemento y la opsonización. Puede invadir más allá del intestino y causar bacteriemia. Capacidad de producir infecciones crónica y recidivantes sobretodo en inmunodeprimidos. Clínica: Generalmente se produce fiebre, cefalea y mialgias como pródromo inespecífico ante del comienzo de la diarrea. Con el comienzo de la misma aparecen dolor abdominales intensos y fiebres. La diarrea puede ser acuosa o mucho sanguinolenta y el dolor abdominal puede ser localizado simulando una pseudoapendicitis. C. fetus causa un cuadro entérico similar a C. jejuni pero también puede causar enfermedad sistémica recidivante, especialmente frecuente en inmunodeprimidos. La colonización secundaria (meninges, cerebro, hueso, hígado e etc) complica el cuadro que a veces puede ser fulminante. La infección durante el embarazo frecuentemente produce la muerte fetal. Como complicaciones puede ser producir: colecistitis, pancreatitis y cistitis. Las complicaciones a distancia son meningitis, endocarditis, artritis reactiva, nefritis intersticial o síndrome urémico hemolítico (SUH). El síndrome de Guillain- Barre es una complicación rara pero debido a la gran incidencia de infección por campylobacterun 20 a 40% de todo lo caso de guillan – barré están producidos por esta infecciones. Tratamiento: sensible - Eritromicina (1 elección) – macrólido (azitromicina) - Aminoglucósidos - Tetraciclina - Cloranfenicol Resistente: penicilina y cefalosporinas HELICOBACTER PYLORY • Bacilo gran (– ) curvos y flagelados • Presentan un conjunto de flagelos polares, motilidad • Presentan ureasas • Microaerófilo • Se asocian a células gástricas que producen moco • Oxidasa + • Catalasa + • Ureasa + es um fator de virulência • Flagelo: motilidade • Protease: destruye el moco • Exotoxina: VACa forma vaculo y causa daño celular • LPS: Estimula sistema inmune • No fermenta los hidratos de carbonos Clínica: - GASTRITIS CRONICA NO EROSIVA - Úlceras duodenales 90% - Úlceras gástricas 70- 80% - Câncer gástrico H. pylori, puede ser asintomática, o con algún grado de infección gástrica. Produce infecciones crónica y es la principal causa de úlcera péptica, además su presencia en la mucosa gástrica se vincula con el mayor riesgo de padecer adenocarcinoma gástrico, linfoma gástrico no Hodgkin y maltoma (tumor de tejido linfoide asociado a mucosas) 68 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Toma de mostra: • Biopsia (mucho invasivo) • Cultivo en infusión cérebro corazón con sangre de caballo • Se agregan antibióticos para anular la flora acompanate • Urea positivo Diagnóstico • Ig G específica (en infección crónica) • CLO: Se toma una biopsia de mucosa y se coloca en un medio que contiene urea y rojo fenol. • La ureasa producida por H. pylori hidroliza la urea a amoníaco, lo que eleva el pH del medio y cambia el color de la muestra de: Clasifica en invasora o no invasoras: invasora: obtención de muestra para biopsia mediante la fibroendoscopia digestiva alta (FEDA) no invasora: utiliza la serología, presencia de IgG especifica en el suero. Patología: La forma espiralar y la presencia de flagelo le permite moverse en el medio mucoso gástrico. La ureasa le sirve para protegerse del medio ácido gástrico ya que convierte la urea en amonio. La adherencia bacteriana se produce mediante una hemaglutinina para ácido siálico y otra para lípidos. La lesión epitelial se debe a la presencia de una citotoxina la próteina VacA (cambios y destrucción en las células de manera directa), esta forma vacuolas acídicas en el citoplasma de la células del epitelio gástrico. Tambíen se vincula la citotoxicidad bacteriana a la presencia de otra proteína denominada CagA (destruye citoesqueleto altera) Epidemiologia: La prevalencia de la infección de H. pylori es mayor en países en via de desarrollo. A mayor edad y menor nivel socioeconómico mayor probabilidad de padecer infección por esta bacteria. El ser humano es la principal fuente de H. pylori auque no se conocen con exactitud las fuentes ni la via de infección de esta bacteria. Tratamiento: - omeprazol (imidazol) inhibidor bomba de H+ - metronidazol (nitroimidazol) o sale bismuto - claritromicina (macrólido) - amoxicilina (penicilina) Todos juntos amarillo (NEGATIVO) rojo (POSITIVO) 69 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Practico Diarreas infecciosa Caso clínico 2 Se trata de una paciente de 32 años de edad, cocinera, que ingresa a la guardia del hospital presentando un cuadro de estupor y delirio, con T° 39 °C y con una frecuencia cardiaca de 87 rpm. Abdomen distendido y los familiares refieren que en la ultima 48 hs ha eliminado materia fecal color verdoso grumoso, habiendo pasado su última deposición hace 6 hs. Consumió antidiarreicos sin controlar el cuadro de diarrea. En los exámenes de laboratorio presenta 3.600 glob. blancos con neutrofilia y desviación hacia la izquierda. Los familiares refieren que la paciente tuvo una erupción en la piel del tórax que desapareció espontáneamente. Al examen físico el abdomen seguía distendido, con pocos ruidos hidroaereos y con ruidos a la movilización de las asas intestinales, se palpa un bazo aumentado de tamaño levemente. Responda: 1. ¿Qué bacterias pueden producir diarreas infecciosas? E. Coli – ECEI, ECEH, Salmonela spp, Shigella spp, Yersinia, Campylobacter yeyuni, Clostridium perfringens 2. ¿se trata de una disentería? Si, esos microorganismos causan patogenicidad al ser humano, que provoca eliminación con de materia fecal con color verdoso grumoso, presencia de moco: Diarrea disentérica se la define como: frecuente deposiciones mucosa y⁄o sanguinolentas, de volumen escas o moderado que pueden estar acompañado de tenesmo, fiebre o dolor abdominal intenso. 3. ¿Cuál es el valor normal de leucocitos en sangre? ¿Qué diarreas cursan con leucopenia? Los valores normales de leucocitos en sangre están entre 4.000 a 10.000/L. (promedio 7.400) Las diarreas causadas por Salmonella suelen causar leucopenia (3.000 a 4.000/L) Con los datos reunidos el residente supuso una FIEBRE TIFOIDEA por lo cual indico tratamiento con ciprofloxacina 500 mg cada 12 hs. Y le solicito previamente urocultivo, hemocultivo y cultivo de materia fecal, además pidió reacción de widal. Confirma la fiebre tifoidea Responda: A. Características bacteriológicas de la Salmonella tiphy • BGN • Móviles por flagelos peritricos • No capsulada exceto Tiphy y paratiphy, que expresan polisacaridos capsulares • No es habitual del intestino humano • Anaerobios facultativos • No fermentan la lactasa y producen sulfuros de hidrógenos • Se clasifica segundo su Ag somatico: O y flagelaes H • Ag capsula o de virulencia (VI) • Salmonella thyphy y paratyphy: fiebre tifoide – bacteremia. 70 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti B. ¿Cómo se transmite? Reservatório (fuente de infección) salmonelas no tifoideas: animales salmonela tifoidea (S. typhi): solo el hombre Infecciones se da por via fecal- oral. Atraves de agua y alimento contaminados con deyección humanos Zona endémica provincia de centro y norte del país: Córdoba, Santa Fe, Entre Rios, Catamarca, Salta, Jujuy y Formosa. C. Describa su fisiopatogenia Infección se da por via oral, la bacteria atraviesa el medio ácido gastrico a nível del ileon distal y el colon atraviesen la mucosa y alcancen el torrente sanguínea. Producen la bacteriemia asintomática ya que son fagocitadas por macrófagos en cuyo interior sobreviven y se multiplican. Fase de estado de fiebre tifoide, es cuando la bacteriemia persistente e es suficiente para multiplicar intracelular, ocurre invasión en nivel de vesícula biliar y de placa de Peyer en intestino, es cuando llega en intestino que se encuentra las manifestaciones. → Adherencia e invasión: fimbrias, sistema de secreción tipo III → Supervivencia intracelular: inhibición de fagolisosomal → La invasión de la mucosa provoca inflamación → Se disemina a la circulación D. Explique cómo se toma las muestras para los estudios bacteriológicos solicitados , cuando cada uno tiene mayor probabilidad de positividad • Hemocultivo: (cuando empieza la fiebre) rendimiento de 90% a la primera semana en paciente no tratados, cifra que disminuye al 50 hacia la tercera semana. El resultado puede alcanzar el 100% si se cultiva muestra de sangre y medula ósea que inclusive puede dar positiva. • Coprocultivo: (durante la enfermedad) suele ser negativo a la primera semana y ser positivo hacia la segunda semana momento que la bacteria invade la vesícula e intestino. • Urucultivos: (3 semana de síntomas) puede dar positivo debido a la invasión reanal pero en general son de bajo rendimiento. Detección de anticuerpos aglutinantes frente a los anticuerpos O o H constituye la denominada prueba de widal. Coprocultivo: - Envasede boca ancha tapa hermética y estéril - Algodón estéril Obtención de la muestra: La muestra debe ser representativa en calidad y cantidad Debe recogerse en la primera semana de la enfermedad No debe estar tomando antibiótico Conservar en heladera, no congelar Examen directo MACROSCOPICO Olor Color Consistencia presencia o ausencia de moco o sangre Restos de alimento sin digerir MICROSCOPICO Leucocitos Fecales Tinción de gran Pruebas bioquímicas Tinción de azul de metileno 71 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Meio de cultivo SIEMBRA: Medio de cultivo salmonella Shingella - Medio de cultivo selectivo y diferenciado - Es selectivo por que inhibe el crecimiento del gran positivo, de los coliformes y de los proteus - Es difrencial por la fermentación de la lacosa y a la formacion de acido sulfihidrico - Fermentadores de lactosa viral al médio a rojo obteniendo colônias rosadas - Salmonella y Shigella son no fermentadoras, crecen bien y forman colonias transparentes • Si es fermentadora de lactosa el medio vira ROJO • NO fermentadora, crecen bien y tienes colonias transparentes - Salmonella (thiphy y thiphymurium) produce acido sulfihidrico; formando el ojo de pescado es caracteristico de salmonella que son colonias transparentes con centro negro Lo que importa a ca es diferenciar se esta en presencia de bacteria lactosa positiva o negativa, para saber que enterobacterias se esta hablando Si es fermentadora de lactosa el medio vira ROJO NO fermentadora, crecen bien y tienes colonias transparentes Meio de cultivo Mac Conkey Determina si es o no fermentadora de lactosa Rojo: fermentadora Naranja: NO fermentadora Pruebas bioquímicas para diferenciar salmonella vs Shigella 72 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti FAMILIA SPIROCHAETACEAE (Espiroqueta) Treponema, Borrelia y Leptospira. Brucella Las espiroquetas son bacterias helicoidales con endoflagelos y por tanto, móviles (pudiendo rotar y realizar fléxión). Poseen una estructura semejante a los gramnegativos. Estructura espiral que se entrelaza alrededor de los endoflagelos La motilidad incluye rotación y flexión Muchas son delgadas y se tiñen mal Los estudios en campo oscuro muestran la presencia de espiroquetas Algunas no se han aislado en medios de cultivo Pueden ser aerobias o anaeróbias Muchas son parte de la flora orofaríngea La proliferación excesiva causa “boca de las trincheras” Las principales enfermedades por espiroquetas son causadas por especies selectas de tres géneros que no se encuentran en la flora normal, Treponema (T. pallidum), Leptospira (L. interrogans) y Borrelia (B. recurrentis, B. hermsii y B. burgdorferi). Las esperioquetas patógenas crecen muy lentamente o no lo hacen en medio artificial - Genero treponema - Genero leptospira - Genero borrelia Genero Especie enfermedad Modo de transmisión ubicación Treponema Pallidum subesp. Pallidum Sífilis Sexual o congénita Mundial Pallidum subesp. Pertenue Pian o frambesia Contacto cutáneo Africa y Asia Pallidum subes. Endemicum Bejel Boca a boca Africa y Asia Carateum Pinta o carate Contacto cutaneo Centroamerica Leptospira interrogans leptspirosis Contacto con agua o suelo contaminado con orina de roedores enfermos Mundial Borrella Recurrentes Fiebre recurrente endémica Fiebre recurrente epidémica Vector: garrapato Vector: piojo del cuerpo mundial Burgdorferi Enfermead de Lyme Vector: garrapato USA, Europa, China, Japon, Australia Treponema pallidum SÍFILIS Gran cantidad de sífilis Género Treponema: Treponema patógenos par el hombre T. pallidum subespécie pallidum: sífilis venéra T. pallidum, subespécie endemicum: sífilis endémica, bejel T. carateum: pinta CARACTERÍSTICAS: → Bactérias helicoidales → Movilidad: tirabuzón → T. patógenos, no se colorean con técnicas habituales → Se observa por contraste de fase o fondo oscuro → Membrana lipídica antigénica → Fibrillar o flagelos: movilidad → No son cultivables: no desarrolla en meio de cultivo Orden: Spirochaetales. Familia: Spirochaetaceae. Género: Treponema. Especie: Treponema Pallidum. Subespecie: Pallidum (Tpp). Espiroqueta de 0,18 µm de diámetro con una longitud de 6-20 µm. Posee hélices regulares (6 a 14 por célula) con un largo de 1,1 µm y una amplitud de 0,3 µm. Extremos aguzados. Presenta flagelo a lo largo del cuerpo celular dentro del espacio periplásmico, que le permite rotar alrededor de su eje 73 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti → Se mantienen en cepas de inoculación en conejos: Cepa Nichols: patógena. Cepa Reiter: no patógena → Muere con rapidez por desecación y se destruye con facilidad en una amplia gama de detergentes y desinfectantes → Carece de enzimas comuns → Sin LPS y con pocas proteínas en la membrana externa → Pose capsula → Poca cantidad para que ocurra enfermedad Mecanismo de trasmisión: Contagio: sexual, vertical, transfusional, sanguínea por inoculación directa MANIFESTACIÓN CLÍNICA: Sífilis primaria: 25 dias de incubación (promedio) CHANCRO: lesión indurada, indolora, ulcerada de bordes sobreelevados y fondo limpio. 10% localización extragenital. 2 a 3 semanas de evolución Diferenciar de chancro blando, herpes simples, LGV, y epitelioma • Hombres: ubica en el glande y surco balanoprepucial • Mujer: labio y clítoris (25% en cuello uterino, 10% extravaginal) Curación total sin secuelas y espontanea Chancro dura aprox. 2 a 3 semanas, comienzo el periodo de latencia precoz que dura de 4 a 8 semanas, luego reaparece la sífilis secundaria. ➔ El uso de antibióticos para otra infección durante el periodo de incubación de una sifilis trae como consecuencia la no aparición del chancro de inoculación, de esta forma pasa inadvertido el periodo primario y solo se manifestara en el futuro. Asintomático Sífilis secundaria: 2 a 3 meses pos contagio. Diseminación sistémica Periodo mas contagioso y máximo anticuerpos Exantema maculoso (roséola sifilítica) que luego evoluciona a papulas no pruriginosas que afectan todo el cuerpo incluyendo palmas y plantas (sifílides) Diseminación: fiebre, alopecia, dolores ósea, adenopatías Sifílides: localización en el piel. No respeta palmas ni planta. En mucosas: sifílides opalinas en boca. Condilomas planos: lesiones en las zonas de pliegues. Muy contagiosos. “la gran simuladora” Diferenciar de exantemas virales y pitiriasis Secundarismo sifilítico en palmas y gomas en regiones facial de la sífilis terciaria Puede presentar: fiebre, cefaleas, dolores osteoarticulares, decaimiento, alopecia transitoria y adenopatías generalizadas. Poder producir síndrome nefrótico debido a inmunocomplejos circulantes. Causas de meningitis a LCR claro. 74 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Sífilis terciaria: 5 a 10 años Enfermedades inflamatorias crónica con afectación prácticamente generalizadas. Las lesiones no son contagiosas puesto que se dan por hipersensibilidad. Es de notar que este periodo es raro de ver en nuestro dia debido a tratamiento antibióticos. Localización cutánea: tubérculos en cara y tronco, goma en miembros y cuero cabelludo. Cardiovascular: aortitis y aneurismas aórticos luético Diferenciar de TBC, lepra goma micóticos Localización cardiovascular Neurosífilis: asintomática o sintomática em caso de goma, que puede llevar a parálisis y a muerte Tabes: degeneración de los cordones medulares posteriores con pérdida del equilibrio, marca tabetica, mal perforante plantar y trastornos a nivel esfinteriano. La meningitis crónica conduce a cambiosdegenerativos y psicosis La desmielinización causa neuropatías periféricas La paresia sifi lítica tiene muchos signos GOMA SIFILITICA: diferente de lo cranco, la base es sucia presenta dolor Treponema es cuase indetectable Sifilis – HIV: Enfermedad más exacerbada y la serología es más fácil de interpretar. Debe detectarse las neurofilis de forma temprana. Sifilis congénita: la infección transplacentaria se produce cuando la embarazada sin tratamiento contagio al feto, principalmente en el primero trimestre. Hay tropismo por tejidos mucocutáneo y oseo. - Sifilis congénita precoz: <2 meses d vida, es similar al secundario en adultos. Es muy grave. Hay hepatoesplenomegalia, neumonía, cuadro cutáneo, penfigoide palmoplantar. - Sifilis congénita tardía: >2 meses de vida, hay malformaciones varis. Se observa la triada de Hutchinson (sordera, queratitis y dientes en tornillos). Ademas puede haber tibias en hoja de sable, frente olímpica, nariz en silla de montar. El diagnóstico en embarazadas se hace por serología se pide VDRL al, 1, 2 y 3 trimestre, si son seropositivas, se las considera infectadas y se realiza tratamiento. Lo recién nacidos debe negativizar la VDRL a los 6 meses. Compromiso visceral Los fetos son susceptibles a la sífilis sólo después del cuarto mes de gestación; el tratamiento adecuado de la madre infectada antes de dicho periodo evita el daño fetal EPIDEMIOLOGIA: Exclusiva de humanos de distribución mundial, mas frecuente entre drogadictos, prostitutas y HIV. La transmisión es interpersonal por via sexual, sanguínea y perianal. No existen portadores sanos de T. pallidum. PATOGENIA: Se transmite por contacto directo con lesiones infecciosas, ingresando por piel o mucosas aunque estas se hallen intactas. Se multiplica en el sitio de inoculación y se disemina por via hemática y linfática. Al mismo tiempo el infiltrado mononuclear y la proliferación de células endoteliales determina la aparición de vasculitis obliterante. La membrana externa contiene muy pocas proteínas por lo que es poco antigénica y además tienes la capacidad de forma una capa anfolitica (creadas por proteínas MHC I, cadenas pesadas IgG y transferrina del huésped) que proporciona una disfraz contra el sistema inmune. El LPS es prácticamente atoxico. La bacteria no posee exotoxinas ni libera productos con actividad enzimática Enfermedades no venéras: Pian; lesiones papulosas en extremidades, transmitidas por contacto directo Pinta: lesiones primarias pequenas, eritematosas en extremidades, cara, cuello, pecho y abdomen que persisten varios años y puede confluir. Las lesiones puede cicatrizar dejando áreas hipopigmentadas Bejel o sífilis endémica: lesión en cavidad bucal durante la lactancia 75 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Tiene una adhesina apical que usa como receptor de adherencia a la fibronectina. Las respuesta inmune del hospedero produce anticuerpos contra epitopes proteicos o polisacáridos bacterianos (anticuerpos treponémicos específicos). También se produce anticuerpos contra la cardiolipina, fosfolipina, fosfolípido normal de las mitocondrias (anticuerpos no específicos). La transmisión es por contacto con mucosas o sangre La infección congénita ocurre por vía transplacentaria La sífilis terciaria no es infecciosa La diseminación a partir de lesiones de la mucosa hacia la sangre ocurre con rapidez La multiplicación lenta produce endarteritis y granulomas Las úlceras cicatrizan, pero las espiroquetas se diseminan TÉCNICAS SOROLÓGICAS DE EVALUACIÓN: mas utilizada • Prueba no treponémica (miden anticuerpos contra la cardiolipina,) - Usa antígeno no treponémico, son inespecíficas - Sirven para screening y seguimiento: Las pruebas no treponémicas más comunes son la: Reagina plasmática rápida (RPR) Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) cuali y cuantitativa Toda serología reactiva y cuantificada debe confirmarse con pruebas treponémicas especificas TÉCNICAS SEROLÓGICAS DE EVALUACIÓN 2: • Prueba treponémicas: utiliza antígenos treponémicos. Alta especificidad, son confirmatorias utilidad principal en el diagnóstico es confirmar un resultado positivo en las pruebas de VDRL T.P.I requiere cepa viable. Dificultosa, poco uso. M.H.A.T.P usa GR sensibilizadas con antígenos específicos internos del treponema. Económica, sensible y especifica. Para evaluar alto número de muestras. F.T.A.ABS: una antiGglubulina humana marcada. Requiere MO de flurescencia, sensible especifica y temprana. Usa antígenos de superficie del T.P IgG F.T.A ABS: para pruebas confirmatorias IgM F.T.A ABS: para sífilis congénita Falso positivo • No usar suero hemolizados ó lipémicos. Se pueden dar en: infecciones virales (HIV, hepatitis), lepra, TBC, brucelosis. A. Reumatoidea, lupus y enfermedades autoinmune. Diabetes, embarazo y vejez. • Sifilis congénita: Ac. IgG de la madre enferma pueden atravesar placenta y dar reactivas las muestras del bebe o del córdon. Realizar seguimiento con V.D.R.L para evaluar sero evolucíon y⁄o decidr tratamiento. Realizar F.T.A. ABS IgM (puede haber falso positivo) Se utiliza IgM para el diagnóstico de sífilis congénita Sifilis primaria Raspado de cranco duro Microscopia de campo escuro Sífilis secundaria Testes serológicos Es muy pequeña no puede visualizarse en MO sin embargo su movimiento puede detectarse indirectamente por microscopia de campo oscuro. Para observarlas se utiliza. NO CRECE en medio de cultivo bacteriológico. Es sensible a la desecación y se inactiva rápidamente con algunos desinfectantes. ✓ Métodos directo: observación campo oscuro, tinción argénica, inmunofluorescencia directa. El análisis en campo oscuro requiere experiencia y obtener líquido proveniente de la profundidad de las lesiones Puede ser negativo a causa de su pequeño número Los anticuerpos alcanzan sus máximas concentraciones en la sífilis secundaria 76 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ✓ Métodos indirectos: Determinación de anticuerpos no treponémicos como la prueba de VDRL Determinación de anticuerpos treponémicos: prueba FTA-abs y MHA-Tp Cronograma de positivización Tratamiento: penicilina G benzatínica (muy sensible), tetraciclina por via oral en alérgicos, Neurosifilis se trata con penicilina G por via IV o con ceftriaxona. Doxiciclina y tetraciclina para alergenos a penicilina BORRELIA. Borrelia sp: fiebre recurrente B. burgdorferi: enf. de Lyme Genero Borrelia • Espiroqueta delgada larga • Helicoidal, espiras irregulares, 30 – 40 flagelos periplasmáticos • Gram (-) se tiñe bien con Giemsa • Muy móviles • Microaerófilicas • Flora normal • Espiroqueta delgada larga Fiebre recurrente: B. Recurrente • Enfermedad zoonótica • Forma epidémica: piojo del cuerpo (pediculus humanus). Inoculación traumática. Pobreza, hacinamiento y deterioro social. Hombre es reservorio. Importante para nuestro estudio. Vetor: piojo humano • Forma endémica: transmitida por garrapatos (ornithodorus) Reservatorio animal: rata, ratones y ardillas • Característica: alta variabilidad genética, evadiendo la respuesta del hospedero. • Piojo: mas grave CLÍNICA: → Periodo incubación: 3-7 dia Borrelias en sangre: fiebre, cefalea, mialgias, debilidad. Dura una semana. Respuesta inmune. → 2 a 4 dias después: reaparece el cuadro: Cura cuando se termina el repertorio antigénico de la borrelia. DIAGNÓSTICO: Observación directa en MO de las Borrelia en sangre con Giemsa, fondo oscuro (S 70%) Cultivo: medio de Kelly Serología poco útil TRATAMIENTO: Tetraciclina y penicilina G Profilaxia: combate al vetor, uso de repelentes Enfermedad de Lyme: B. burgdorfen Zoonosis trasmitida por garrapatos del género ixodes 77 Microbiología2ª ERA Vanessa Catto Gritti Reservorio: roedores, ciervos Antígenos flagelar y polipétidos de superficie Producción de complejos antigeno – anticuerpos – complemento en las articulaciones → Etapa primaria: lesiones cutanes y bacteriemia con fiebre poliartritis y malestar general y una reactivación secundaria compromiso cardiaco y necrológico. Las espiroquetas se transmiten en un ciclo garrapata-ratón-ciervo Las garrapatas deben alimentarse de seres humanos en regiones boscosas Las garrapatas se alimentan de ratones y más tarde de ciervos Las etapas de ninfa y adulta pueden infectar a seres humanos Sin ciervo no hay enfermedad CLÍNICA: Lesiones cutáneas: 3-14 días incubación, eritema crónico migratorio, fiebre, poliartritis y malestar general Compromiso cardiaco y neurológico: meses después Artritis crónica (60-70%) El eritema migratorio y la enfermedad febril marcan la enfermedad aguda DIAGNÓSTICO: Observación directa Giemsa cultivo en medios e Kelly (LCR, piel y sangre). Serología TRATAMIENTO: doxiciclinas y tetraciclinas (amoxicilina, cefuroxima) Borrelia recurrentes Borrelia burgdorfen características Bacterias helicoidales, gran negativas microaerofilicas Zoonosis: fiebre recurrente que presenta dos formas: Forma epidémica: trasmitida por el piojo del cuerpo (Pediculus humanus) Forma endémica: esporádica y transmitida por garrapato (orithodoros) Gramnegativo Crece en microaerofilia en medio artificial de Barbour, Stoenner, Kelly (BSK) Enfermedad de lyme, epidemiologia Forma epidémica: los pijos del cuerpo humano se infectan al picar a persona con espiroquetas en su sangre. Luego el huéspedes se infecta cuando al aplastar el piojo, los liquidos infectados ingresa a través de pequeñas lastimaduras, cabe destacar que no hay infección por picada ni por expresión del piojo Forma endémica: las garrapatas se infectan de mamíferos con espiroquetas, las mismas son trasmitidas al humano en el momento en que la garrapata se alimenta. la infección de la garrapata se trasmite de forma vertical a sus descendientes. Estas garrapatas en general pican de noche y la picadura es indolora por lo que el hospedero no suele reconocer el antecedente. Patogenia Las borrelias ingresan por piel, se multiplican en sangre y circulan en gran número durante los accesos de fiebre. Puede alojarse en órganos como el hígado, el bazo, la medula ósea y el SNC. Los accesos de fiebre se deben a la producción de mediadores inflamatorios durante la presencia de las borrelias en sangre. Anticuerpos IgM e IgG anti B. burgdorferis por IF y ELISA. Muestras de sangre, LCR y piel y cultivo en meido de Kelly. Pacientes con enf de Lyme son VDRL NEGATIVO clínica El periodo de incubación es de una semana, luego aparece con fiebre, escalofríos, cefalea severa, mialgia y astenia y adinamia. Diagnóstico Frotis sanguíneo tenido con Giemsa en el periodo agudo de la enfermedad Microscopio campo oscuro, movimento espiroquetas Prueba de coaglutinación com Proteus OX-k Tratamento Sensibles a la eritromicina, la tetraciclina, la penicilina y el clorofenicol. Tetraciclina, penicilina y eritromicina 78 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti LEPTOSPIRA Género leptospira Leptospira interrogans Espiroqueta móvil de 0,1 mm x 6-20 mm con extremos aguzados. Gran negativa Helicoidal, espiras cortas, extremos em forma de gancho Dos flagelos periplasmáticos – endoflagelos Aeróbio estritos Sensibles a luz, calor, desinfectantes y desecación Crecen lentamente en medios semisólidos enriquecidos. Los medios ácidos alteran su viabilidad. Cultivo en medio artificiales: medio de fletcher Más de 200 serotipos patógenos con una sola especie No se observan con los procedimientos de tinción habituales; la detección se logra mejor con microscopia de campo oscuro. L. interrogans y el resto de serovariedades. Saprófita: I. biflexa Es muy sensible a la desecación y a una amplia gama de desinfectantes. Múltiples serogrupos tienen asociaciones geográficas Sobrevive en agua LOA21: Factor de virulencia Secreta catalasa Zoonosis EPIDEMIOLOGIA: Enfermedad profesional: granjeros, veterinarios, los que realizan actividades recreativos: nadadores, acampantes Transmisión por orina de animales infectados. Transmite por ratas, perros, bovinos, porcinos y equinos. La leptospiras se localizan en los túblos renales y se eliminan por orina contaminada suelo y agua, donde pueden sobrevivir varias semanas antes de repetir el ciclo en otros animales o el hombre. Puerta de entrada: piel y mucosas Cosmopolita (de grandes centros urbanos) Fuente: rata, perro (infectados en capital federal 6% en la provincia de BsAs: 50%) Los animales son reservorios, El agua es la vía de transmisión por ejemplo las inundación PATOGENICIDAD: Fase bacteriémica: respuesta inflamatoria genera vasculitis expresados por fenómenos hemorrágicos, y una segunda fase donde aparecen los anticuerpos con destrucción de las leptospiras, salvo las localizadas en los túbulos renales donde quedan protegidas de las respuestas inmune humoral. Esta fase es clínicamente sintomática y pude haber meningitis, nefropatías, ictericia, neuropetia, miocardiopatía y hemorragias. Mecanismo de acción: vasculitis, hemolisina proteína CLÍNICA: 2 a 26 dias Subclínica 15%,( solo detecta com sorologia) 90% forma anictérica 5-10% grave con ictericia Anictérica (no presenta icterícia- fase leptospiremica): síndrome gripal, cefaleia intensa, mialgias (posterio de la pierna), sufusión conjuntival. La enfermedad inicia con un cuadro seudogripal La meningitis y mialgias duran semanas La leptospirosis es una enfermedad seudogripal sistémica relacionada con agua contaminada con orina de animales. Inicia con fiebre, náusea, vómito, cefalea, dolor abdominal y mialgias intensas. En casos graves una segunda fase se caracteriza por alteración de las funciones hepática y renal con ictericia, postración y colapso circulatorio. A menudo hay afección del SNC que se manifiesta con rigidez de cuello y cambios inflamatorios en el LCR. Sensible al betalactámico: penicilina, amoxicilina Doxiciclina, forma preventiva. 79 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti El exantema hemorrágico se relaciona con resultados letales Fase septicémica 1 semana: síndrome gripal (fiebre, artralgias, escala fríos, vomito, dolor abdominal) Fase inmune: 4-30 días: bacterias en orina Ictérica: bascularitis + trombocitopenia. IRA, miocarditis: enfermedad de wiel – grave (icterícia, hemorragia y fallo renal) hay vasculitis (infecciosa) extensa, ictericia, daño renal y en ocasiones exantema hemorrágico. DIAGNÓSTICO: El diagnóstico de leptospirosis es principalmente serológico Hemo (Fase leptospiremica) y urocultivo (fase inmune) , evaluar que fase se puede encontrar Aislarlo: difícil demora 30 dias en crecer en medio de Tween 80 y albúmina (medio semisólido)- medio de Fletcher que contiene suero de conejo o medio EMJH – 28 30⁰C Se ven en campo oscuro (LCR, orina, sangre) Serología: MAT macro glutinación de leptospira (antigeno termorresistente) Microaglutinación (ag, vivo) ELISA (IgM- IgG) Seroconversión: aumento de títulos 4 veces Tratamiento: penicilina – ampicilina, eritormicina o claritromicina solo es útil en la fase bacteriemica Leve: doxiciclina o amoxiciclina Moderada y grave: ampicilina y ceftriaxona IV Profilaxis: en poblaciones de riesgo por brotes epidémicos se dan antibióticos por breve periodo y el uso de calzado y guantes 80 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti zoonosis bacterianas BRUCELLAS SPP Cocobacilo G (-) Aerobio estrictoProducen catalasa, oxidasa y ureasa pero No fermentan carbohidratos. Cocobacilos similares a Haemophilus No se tinen con colorantes acidorresistentes No forman esporas Inmóvil Multiplicación intracelular Antígenos: A (B. abortus) M (B. melitensis) Espécies: o B. abortus: 6 biovars: bovino, placenta – eritriol o B. melitensis: cabra, ovejas o B. suis (4 biovars), cerdos o B. canis: perros o B. ovis o B, neotomae o Zoonosis VIA DE TRANSMISIÓN → Contacto directo por piel ó conjuntiva → Ingesta de productos lácticos o cárneos → Inhalación EPIDEMIOLOGIA: → Criadores de ganado, empacadores, veterinários, mataderos, laboratoristas. → Directa: ocupacional → Indirecta: consumo de alimento, leche, carnes PATOGENIA - CLINICA → Porta de entrada: gânglios linfáticos – conducto torácico – sangre – SER → Enf. Subclínica símil influenza. Incubación: semanas a meses → Formas sintomáticas: cefalea anorexia, artralgias, fiebre, escalosfriós, linfadenopátias → Complicaciones: osteomielitis, endocarditis, hepatitis, colecistitis, artritis. → Fiebra ondualatoria, fiebre malta, fiebre mediterrâneo, DIAGNÓSTICO → Anamnesis: Cultivo: sangre, médula ósea, ganglios, orina hasta 4 semanas. Tejidos hasta 6 semanas Médio de cultivo de castañeda, lisis y centrifucación. CO2 → Serologia: aglutinación en tubo estándar (STA) título > 1⁄160 ó aum. Titulo 4 veces → Reacciones cruzadas → ELISA, aglutinación en 2 M-E. fij de complemento. TRATAMIENTO Tetraciclinas, estreptomicinas, cotrimoxazol (resistente a muchos betalactámicos) hace tratamientos combinados. Rifampicina, cefalosporina de 3⁰ Geración Prevención: vacuna SV 19 para bovinos, REV1 para B. melitensis, cepa 2 B suis HUMANOS: control de animales domésticos, pasteurización de lácteos. Uso de ropa y gafas protectoras. La brucelosis es una infección genitourinaria de ovejas, reses, cerdos y otros animales. Seres humanos como los granjeros, trabajadores de rastros y veterinarios se infectan de manera directa por contacto ocupacional o en forma indirecta por el consumo de productos contaminados de origen animal, por ejemplo la leche. En humanos la brucelosis es una enfermedad crónica que se caracterizada por fiebre, diaforesis nocturna y pérdida de peso que persiste por semanas o meses. La infección se localiza en órganos reticuloendoteliales, por lo que existen pocos datos a la exploración física a menos que haya hepatomegalia o esplenomegalia. Cuando el paciente desarrolla un patrón cíclico de fiebres nocturnas, la enfermedad se denomina fiebre ondulante. 81 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Pratico: Zoonosis: son enfermedades donde el reservorio es un animal, con o sin intervención de un vector animado ENFERMEDAD BACTERIA RESERVORIO MODO DE TRANSMISIÓN Carbuncio o ántrax Bacius anthracis Vacuno, oveja, cabra Contacto con animales enf, o sus derivados Tuberculosis bovina Mycobacterium bovis Vacunos Ingestión de leche no pasteurizada Brucelosis Bucella (varias especie) Vacuno, oveja, cabra, cerdo, perro Ingestión de leche y contacto con animales contaminados Leptospirosis Leptospira interogans Vacuno, roedores Agua contaminada Peste Yersinia pestis Roedores Pulgas, transmisión interhumana Fiebre Q Coxiella burneti Vacuno, oveja, cabra Polvo, contaminado aerosoles Enfermedad de Lyme Borrelia Burgdorferi Ciervos, coedores Garrapata Caso Clínico n°1 Se trata de un hombre de 36 años de edad, vecino de Bs As de la zona de Puntarenas, se dedica a las labores agropecuarias con contacto directo con ganado vacuno. No tiene antecedentes de uso de drogas, ni patológicos de importancia. Su enfermedad consiste en un cuadro febril de 8 meses de evolución, asociado a malestar general, mialgias, lumbalgia severa, artralgias sin artritis y perdida de pedo de 8kg. Consulto con múltiples ocasiones en su Área de Salud, donde recibió un manejo sintomático (AINES). Cuestionario: • ¿Cuál es su diagnóstico presuntivo? ¿Qué otros nombres recibe? Fiebre ondulante, fiebre de malta, fiebre mediterráneo, enfermedad de Bang. • ¿Cuál es la vía de contagio más frecuente? ¿Cuál es la población de riesgo? Zoonosis: Serie de enfermedad que son causadas por una bacteria que pertenece al género conocido como Brucellas Hombre es un huésped accidental • Características microbiológicas de la bacteria. Cocobacilos que se disponen aisladas o en parejas Gran negativas Inmóviles No esporulados No capsulados Aeróbicos esctrictos 82 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Tiene afinidad por la órganos ricos en eritriol (relacionado con la placenta de los animales) Formadas de colonias: LISA: B. mellitensi (patógena), abortus y suis RUGOSAS: B. canis (patógena para humanos) y ovis (no patógena) Estructura: G- presencia de lipopolisacárido y proteoglicanos Epidemiologia: - Enfermedad cosmopolita (por todo el mundo) - Incidencia mayor en países donde no se hace profilaxis identificación y tratamiento de los animales infectados - Frecuente en personas que manejan ganado criadores de perros, veterinarios - Accidentes de laboratorios - No se transmite de persona a persona. - En la argentina B. melitensis es la mas frecuente seguida de B. abortus y B.suis - Macho que transmite la brucelloses Forma de contagio: derivado lacto no pasteurizados Patogenia 83 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Signos y síntomas: - Fiebre, escalafrió - Cefalea - Mialgias - Artralgia principalmente de columna vertebral - Anorexia, perdida de peso, fatiga - Hepato- esplenomeglia icterícia - Exantema Complicaciones: • neurobrucelosis – meningitis • Osteoartritis, espondilitis • Genitourinarias como: orquiepidermitis unilateral, prostatitis, cistitis y formación de granulomas en el riñon • Endocarditis ¿Cómo se realiza el diagnóstico de certeza? → Método directo: muestra sangre, medula ósea, líquido cefalorraquide, pus, heces, orina Médio de cultivo: ✓ Caldas y agar triptosa ✓ Agar brúcela ✓ Médio de ruiz castañeda (mas usada) para hemocultivo ✓ Aglutinación con suero específico → Método indirecto (titulación de anticuerpo) ✓ Prueba de aglutinación en tubo estándar (met de confirmación) ✓ Mercaptoetanol (met de confirmación) ✓ Coombs (met de confirmacipon) ✓ Rosa de bengala (met de tamizaje) ✓ Prueba de huddleson (método de tamizaje) – mas se usa en humanos ✓ Elisa (confirmación) Diagnóstico de Brucelosis Colonias lisa (s) Ag o+ : B. abortus, B, melitensis, B. suis Colonias rugosas (R) Ag O- : B.ovis y B canis Resumiendo los estúdios microbiológicos: Frente a un paciente con sospecha de infección por Brucella ssp. Se solicita simultáneamente: - Hemocultivos - Rosa de bengala o PBA (tamizaje = Ac Aglutinantes) - Coombs o C- ELISA (confrimatorio = Ac aaglutinante y NO 84 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Si existen lesiones focales se tomana muestra de biopsia de médula ósea, hígado o hueso para cultivo. • ¿En qué consiste el tratamiento? • ¿Qué medidas de prevención se tomaría? • Vacunación a los animales • Control de os alimentos • Educación para la salud en áreas endémicas • Medidas de higiene y seguridad en el trabajo Caso Clínico n° 2 Paciente de 15 años de edad, sexo femenino , ingreso al servicio por un cuadro clínico de 13 días de evolución caracterizado por la presencia de fiebre , deposiciones liquidas sin moco ni sangre, vómitos en varias oportunidades , remitiendo el cuadro de diarrea con medicación , pero persistiendo el cuadro de fiebre y vómitos. Se suma cefalea y artralgias. A la inspección la paciente presenta ictericia más hepatoesplenomegalia.Cuenta con el antecedente de haber estado viviendo en una zona rural dos meses antes del cuadro clínico por el lapso de 1 mes. No tiene vacuna contra fiebre amarilla. La paciente presenta moderada deshidratación, FR : 20 por min Ante el cuadro se decidió: hidratación endovenosa con solución salina y transfusión de sangre entera en 3 oportunidades ante la persistencia de la rectorragía en moderada cantidad y en algunas ocasiones con coágulos en 2 a 3 oportunidades por día, que cede espontáneamente luego de3 días. Sospecha diagnóstica de: dengue severo?, fiebre amarilla?, leptospirosis? En los laboratorios destaco: anemia severa con Hb de 6.5 gr/dl respectivamente, leucopenia: 2.400 mm3, neutrófilos: 50 – 60%, V; el resto de la química sanguínea fue normal. Ecografía abdominal y tomografía de abdomen de abdomen muestran hepatoesplenomegalia, con vesícula biliar dilatada de paredes engrosadas, con líquido libre en cavidad en moderada cantidad. Serología para hepatitis A, B y C, VIH, dengue, fiebre amarilla, brucelosis, citomegalovirus, reacción de Widal, así como 2 hemocultivos, coprocultivos, urocultivos fueron negativos. Dos gotas gruesas negativas y la serología para leptospirosis en un inicio fue negativa. El decimoséptimo día de internación nos informan, desde el centro de enfermedades tropicales (CENETROP), que en la prueba para leptospirosis por el método ELISA existía una seroconversión de hasta 4 veces los títulos iniciales, lo cual indicaba que la prueba era positiva. Responda: 1- Características microbiológicas de la bacteria: Aerobias Gran negativas Morfologías helicoidal Finas con espiras cortas con extremos en forma de gancho Móvil No puede verse con tíncion de gran Se visalizan por microscopia de fondo oscuro o inmunoflurecencia Sobrevive en agua y en ambientes con pH mayor a 7 por varios días⁰ 85 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Leptospira biflexa (no patógena) Leptospira interrogans: Espiroqueta, ampliamente distribuida en la natureza, afecta el hombre y a varias especies animales. Fuente de infección: orina de animales infectados Transmisión indirecta: a tráves de terrenos, agua y alimentos contaminados. Hay 250 variadades: - Icterohemorragica: reservorio es la rata y ratones - Pomona: reservorio el cerdo - Canicola: reservorio los perros 2- ¿Cuál es la forma de contagio? ¿quiénes son poblaciones de riesgo? agua, tierra o alimentos contaminados abrasiones o cortes en la piel y mucosas inmensiones prolongadas en agua contaminada Diagnóstico: Observación microscópica directa: en campo oscuro (sangre, orina o LCR), BAJA SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD Cultivo: Sangre: leptospiremia hasta el fim de la primer semana – enfermedad aguda Orina: leptospiruria pude durar varias semanas Se incuba a 28 -30⁰ C, asta 13 semanas (positividad 1⁰ - 2⁰ semana) Metodo serológicos: ACS: en sangre una semana después del inicio de los síntomas - Test de microaglutinacion (MAT): Método de referencia para el diagnóstico serológico de leptosirosis - Macroaglutinacion en placa (TR): placa con antígeno Termoresistente (TR): es una técnica más rápida y viable para el diagnóstico presustivo, sin que pieda confiabilidad - Otros test serológico: inmunofluorescencia, hemoglutinación indirecta, ELISA, aglutinación de látex, IgM 3- ¿Cuál sería el tratamiento para esta paciente? Penicilina, dicoxiciclina 4- ¿Cuáles serían las medidas de prevención? Vacunación de animales, cloración de aguas, uso de vestimeta adecuada, control de roedores 86 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti GENERALIDADES DE LA MICOBACTERIAS Características del bacilo: • La luz solar, la desecación y el calor son bactericidas. El fenol, formol, formaledehído e hipoclorito de sódio son letales. • BG+ • Pueden resistir a bajas temperaturas (2 a 4⁰ C hasta - 70⁰C). también a cierto desifinfectantes como trifosfato de Na y a bases flertes como el NaOH • Se divide cada 18⁄24 hs, es aeróbio obligatorio y una atmósfera de CO2 al 10% favorece su crecimiento. • bacilos delgados que se tiñen con dificultad y que demuestran la propiedad de acidorresistencia • Sin motilidad, que no forman esporas. • La pared celular tiene alto contenido de lípido • Los ácidos micólicos y el LAM forman una capa cerosa • Acidorresistencia: una vez tenidas, son difíciles de decolorar • Carecen de exotoxinas y endotoxinas Clasificación → Mycibacterium tuberculosis complex: - M. tuberculosis - M. bovis. BCG - M. aficanum - M. conetti - M. microti - M. pinniperdii - M. caprae → Micobacterium no tuberculosa (MOTT) → Micobacterium leprae Poblaciones microbianas • Población de organismos que se multiplican activamente en el pH neutro del material caseoso que cubre la pared de la cavidad • Población de organismos localizados en un pH ácido, especialmente en el interior de los macrófagos • Población de organismos localizados en áreas caseosas sólidas. • Caseoso, deja con gran capacidad de infeccionar • Casium- presencia de caverna en lesiones cavitarias Baciloscopía: propiedad de captar fucsina- fenicada o auramina (elemento fluorescente) y retenerla bajo la acción del decolorante como la mescla de alcohol ácido. Busca de bacilos alcohol-ácido resistentes - BAAR en frotis de la amuestra, preparados y corados con metodología padronizada. - especifica pero poco sensible. - Resistente a baja temperatura - Rápida, económica y sensible con elevada utilidad - No hay complexidad a realizar Técnica: ✓ Ziehl – neelsen (fucsia): Alto pode predictivo De 65% a 80% enfermos pulmonares adultos pueden ser diagnosticados por la coloración de Ziehl – Neelsen en países de alta endemia de TBC ✓ Auramina – rodamina (fluorescente) Mycobacterium ou micobactéria é um gênero de actinobactérias bacilares, aeróbicas obrigatórias, imóveis e altamente patogênicas, que causam diversas doenças, entre as quais lepra, tuberculose e infeções por micobactérias não tuberculosas. 87 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti MATERIALES: Con baciloscopía - Esputo - Lavado bronquial - Orina - Ganglio - Abscesos - Empiema - LCR - Biopsia piel - Liquido sinovial Baciloscopía requiere mínimo de bacilos por mm3 - 5.000- 10.000 bacilos ⁄ml para que sea positiva - Extendido - Fijación - Coloración: fujina - Decoloración: alcohol acido - Contraste: azul de metileno Sin baciloscopia - L. pleural serofibrinoso - Biopsia pleural - Biopsia hepática - Hemocultivo Informe de resultados: ✓ Más de 10 BAAR (bacilos) x 20 campo (+++) ✓ De 1 a 10 BAAR x 50 campo (++) ✓ De 1 a 9 BAAR x 10 campo (+) ✓ De 5 a 9 BAAR X 100 campo (+) Cuántos bacilos se necesitan en una muestra para que la baciloscopía sea positiva: • +10 por campo (+++) 106 bacilos por ml • 1 a 10 por campo (++) 105 bacilo por ml • 1 a 9 en 10 campo (+) 104 bacilos por ml Microscopio Rendimiento de la repetición de baciloscopia • La segunda baciloscopía incrementa en 8% el hallazgo de bacilo AAR • La tercera aumenta 5% de los casos Control de tratamiento con baciloscopia: - Una baciloscopía por mes - Énfasis en el segundo mes de tratamiento - Baciloscopía al final del tratamiento Característica del cultivo: → Complementa a la baciloscopía, pone en evidencia bacilos viable de muestra (10-100b⁄ml) → Tiene mayor sensibilidad, es más compleja y más cara que la baciloscopía → Caracteriza los bacilos y permite diferenciar el M. tuberculosis del MOTT → Permite hacer ATB → Tiene 100% de especificidad → Es el método de referencia con el que se tiene que evaluar todo nuevo método 88 Microbiología 2ª ERAVanessa Catto Gritti Formas de presentación según medio de cultivo: Formación de colonias en medio sólido (Lowestein Jensen y Stonebrink) Turbidez en un caldo (dubos) Cambio de color en sensor incorporado (MBBact) o emisión de fluorescencia (MGIT) cuando el bacilo libera CO2 o consumo O2 Medición con isótopos radiactivos de CO2 (Bactec 460) liberado por la micobacteria y medido en una escala Requerimiento que limitan la implementación de cultivo ▪ Mayor dedicación del personal ▪ Entrenamiento en práctica de mayor riesgo biológico ▪ Equipos de mediano y alto costo con mantenimiento asegurado ▪ Laboratorio espacioso con direccionamiento y purificación del aire Normas para solicitud de cultivo (según el programa nacional de lucha antituberculosa) o Sintomáticos respiratorios con baciloscopias negativas y radiografía patológica o Tuberculosis extrapulmonar o Tuberculosis infantil o Paciente inmunocomprometido (HIV+, oncológico, trat. con corticoides). Diabéticos o Pacientes con antecedentes de tratamiento (fracasos o abandono) o Paciente que al segundo mes con buena adherencia al tratamiento continúan positivos. Seguimiento del cultivo: - Siembra: verde (ácido) Amarillo (básico) - A las 48 h se tapa se revisa que no hubiera contaminación - Revisa la estufa cada 7⁄10 dias - Sacar los positivos e informar - Descartar los negativos a los 60 días Lectura de cultivos - Fecha en que se observó el cultivo - Cuantificación de colonias Positivo 1 a 19 colonias + 20 a 100 colonias ++ +100 colonias separadas +++ colônias incontables - Morfologia de las colônias (rugosas, lisas, otras características peculiares) - Pigmentación (no pigmentada, amarillenta, anarajada) Rendimiento del cultivo ✓ Pulmonares entre 75% y 95% ✓ Extrapulmonares: - Ganglionar 32% 89 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti - Biopsia pleural 31% - Líquido pleural 15% - LCR 12% - Hemocultivo 8% - El 6% ya tenía diagnóstico por muestra pulmonar Tiempo de positividad segundo baciloscopia Materiales a estudiar en los medio líquidos: - Paciente HIV + SIDA - Pacientes con tratamento prévio - Personal de salud - Diabético o paciente HIV- con algún problema en la inmunidad - Contactos o familiares de multirresistentes - Pacientes que previenen de áreas con alta incidencia en TBMR - MECANISMO DE GENERACIÓN DE RESISTENCIA - Mutación: variación genética que consiste en la alteración de una pequeña región de ADN durante el proceso de duplicación - Es espontánea, al azar - Tiene frecuencia determinada - Los fármacos no inducen o provocan mutaciones, sólo seleccionan población de mutantes resistentes. Tipo de resistencia: PRIMARIA O INICIAL: Es la que se presenta en un paciente que nunca ha recibido tratamiento RESISTENCIA ADQUIRDA: es la que presenta el paciente que ha recibido tratamiento inadecuados o que ha abandonado el tratamiento MULTIRESISTENCIA (MDR): cepa resistente a H y R con o sin otras drogas POLIRRESISTENCIA: resistencia a dos o más drogas que no son H y R asociadas TB EXTENSIVAMENTE RESISTENTE (XDR): es una cepa resistencia a H y R + una droga inyectable diferente de S+ una quinolona PRE- XDR: cepa resistente a H y R + una droga inyectable diferente de S o una quinolona. TOTALMENTE RESISTENTE (TDR): Cepa resistentes a todas las drogas. MÉTODO DE LAS PROPORCIONES DE CANETTI, RIST Y GROSSET (1963) - Gold standard - Mide el desarrollo bacteriano en tubos con concentraciones estandarizadas de las drogas de primera y segunda línea - Proporción de resistencia >1% (H, R, P, E) >10% (Demás drogas) 90 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti BACTEC 460 ➢ MIDDELBROOK 7H9 con ácido palmítico -C14 (12 B vial) ➢ SIREZ ➢ Tempo de resolución 7.3 días ➢ Desventajas Discontinuado Costoso Desechos radioactivos Concordancia de antibiogramas BACTEC 460 Y MGIT 960 (n 55) • Concordância 100% en R • Concordância 98.2% en H: 1 ME • Concordância del 94.5% en S: 2 VME 1 ME • Concordância de 90% en E: 4 VME 1 ME A excepción de la R deben repetirse las drogas cuando dan resistencia en MGIT MODS • Detecta simultáneamente TB y susceptibilidad a H, R Y MDR • Utiliza caldo 7H9 enriquecido com OADC mesclado com PANTA • Identificación mediante microscopio invertido de la formación de microcolonias características de Mt (cordones) • Tiempo entre 7 y 21 días (para declarar negativo) • Algún riesgo bilógico • Recomendado por la OMS en 2010 LINE PROBE ASSAYS • Extrae ADN de muestras o cultivos • Amplifica el gen rpoB por PCR • Hibridación reserva con ADN especifico inmovilizados en líneas paralelas en una tira de papel • La hibridación es inferida porque se colorea la banda respectiva - INNO-LIPA rif TB (innogenetica)(complejo Mt y R) - GENO TYPE MTBD plus (Hain) (compejo Mt, H y R) Recomendados por la OMS en 2008 91 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Gene – xpert MTB⁄RIF - Test molecular automatizado que detecta Mt y resistencia a R - PCR en tiempo real para amplificar la secuencia del gen rproB - Integra los procesos sobre la muestra y la PCR dentro de un cartucho de plástico Lisis de la bacteria (sonicación) Extracción de ADN Amplificación Detección del amplicon - El resultado se obtiene dentro de las 2 horas • Ventajas - Tempo de entrega de resultados 2 horas - Mayor sensibilidad que la baciloscopia (131b⁄ml) - Descentralización de la prueba (siempre que se garantice temperatura y electricidad) - No genera aerosoles (no se necesitan áreas especiales) - Bioseguridad igual que la baciloscopia • Desventajas - Diferente precio real por país - Validad resultado por país - Calibración anual (área rurales) Sensibilidad según método Baciloscopía 5.000 – 10.000 b⁄ml Gene – xpert 131 b⁄ml MAS – PCR Multiplex allele sepecific polymerasa chaing reaction Detección de Resistencia a rifampicina e isoniacida Asociado a resistencia a H Associado a resistência a R Gen Kat G Promotor inh A Por B codón⁄posición 315 S16 S26 S31 Mutación ausente Presente ausente ausente presente Mutacion del promotor del inh A presente 79% sensible H 1µg⁄mL 70% resistente a etionamida No hay en la Argentina 92 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Orden Actinomycetales: Familia micobacteryaceae Genero mycobacterium Espécie: M. tuberculosis M. bovis M. afircanum Fotocromogeno: (ruyon tipo I) - Kansaii - Marinum Escotocromogenos (ruyon tipo II) - serofulaceum Acromogenos (ruyon tipo III) - M. Lepra Mycobacterium tuberculosis (bacilo de kosch) Genero Mycobacterium Características: ✓ Son bacilos inmóviles ✓ No capsulado ✓ No esporulado ✓ Pueden ser teñidos con técnica de Ziehl – Neelsen por lo que son ácidos – alcohol resistentes (elevado contenido de lípidos de la pared celular) ✓ Bacterias aerobías estrictas: se desarrollan en atmósfera de aire con 10% de Co2 ✓ Crecen muy lentamente en cultivo, leva 10 a 20 dias a 37⁰C para crezcan ✓ El cultivo crece formando condones debido al factor cuerda ✓ Son resistentes a la desecación, sensibles a la luz solar, y pierden su viabilidad con la pasteurización. ✓ Resisten ácidos, alcalinos, la mayoría de los desinfectantes (excepto formaldehido, glutaraldehedo, fenol y derivados, etanol 70% y en menor grado de hipocloritos) debido a la hidrofobicidad en sus envolturas. ✓ El crecimiento requiere semanas ✓ Las pruebas bioquimicas la distinguen de otras micobacterias ✓ la estructura de la pared celularen la MTB esta dominada por acidos micolicos y LAM. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA: Tuberculina, PPD (derivado proteico purificado), polissacáridos, fosfatidil – inositol- monósidos, cera D, muramildipéptido y fator cuerda. FACTOR DE PATOGENICIDAS: M. tuberculosis no posee endo ni exotoxinas. Su pagotenicidad reside en su capacidad para multiplicarse dentro de los macrófagos. Posee el factor cuerda (estimula la inflamación acido micolico), LAM (promueve la penetración al macrófago por uníon a receptores manosa. Ademas libera IL-8 suflátidos (inhiben la fusión lisosoma – fagosoma), ureasa, arginasa, glutaminasa y asparaginasa (liberan NH3 lo que alcaliniza el contenido fagolisosoma) EPIDEMIOLOGIA La mayoria de las infecciones se transmiten por la ruta respiratoria La tos repetida genera una dosis infecciosa que se emite al aire La falta de ventilación aumenta el riesgo Respuesta de la inmunidad: macrófago, linfocito que forma el GRANULOMA, puede detener la infección (90% de los pacientes). 93 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Tuberculosis primaria - asintomática o fiebre y mal estar general, tos - principalmente en niños - adenopatía hilar - no pose mucho bacilos La infección se produce por la via aerógena, a través de microgotas infectantes (apenas 10 micobacterias son capaces de generar infección) que se depositan en el pulmón. También puede haber infecciones cutáneas a través de lesiones y por ingestión de alimentos contaminados. Una vez dentro, las micobacterias son fagocitadas por los macrófagos a través de CR1, CR3, CR4 y receptores de manosa. Una vez dentro de los fagosomas, los sulfátidos y el NH3 producido impiden la fusión con lisosomas y así pueden multiplicarse. Hay algunas células NK que destruyen macrófagos infectados y si la cepa es poco virulenta o en inóculo escaso, se aborda la infección. Entre los 10 y 21 días las bacterias se multiplican sin mucho daño de monocitos ni mucha inactivación bacteriana. La lesión crece sin evidente inflamación o daño visible del tejido. Luego algunos macrófagos se activan y fusionan en células gigantes multinucleadas. Algunas bacterias migran a ganglios linfáticos regionales donde son captadas por otros macrófagos y producen nuevos ciclos. También puede haber bacteriemia (sitios comunes son vértices pulmonares, hueso, SNC ganglios linfáticos y riñones) y diseminación a cualquier parte del organismo. A las 2 o 3 semanas, en cada sitio de lesión los macrófagos liberan TNF ɑ por la que se producen granulomas. A las 4-6 semanas la masa linfocitaria es suficiente para medir la inmunidad adquirida (CD8 y CD4 Th1 → Fin de la infección o Th2 → síntesis de anticuerpos) Se forman los tubérculos. En ese sitio la tensión de O2 cae y cesa la replicación bacteriana. Si la infección no es limitada por la inmunidad celular, el tubérculo crece y puede descargarse al exterior (vómica) o a zonas sanas del pulmón (diseminación broncogéna) dejando una cavidad vacia (caverna tuberculosa). Si la infección es limitada, se ve el complejo de ghon. Tuberculosis secundaria o reactivación de la enfermedad: (pos primaria) Ocurre con mayor frecuencia en mayores de 50 años. Se asocia a inmunodepresión producida por alcohol, malnutrición, diabetes estrés, etc. La reactivación ocurre en sitios muy oxigenados y con poco drenaje linfático como el vértice pulmonar. Se producen tubérculos, cavernas, vómicas, hemoptisis, etc. Gran carga de bacilos. Pude haber una diseminación generalizada (tuberculosis miliar - extrapulmonar) Reacción a la tuberculina (Mantoux): - no es diagnóstico Una reacción positiva, significa que ha habido primoinfección actual o pasada. Una reacción negativa pude significar que nunca hubo infección, que todavía no se ha desarrollado inmunidad en la infección primaria actual, pérdida de la positividad o inmunosupresión por HIV, sarampión, esteroides. Es positiva cuando, al inyectar 2 unidades de PPD, hay una reacción eritematosa o indurada > 10 mm a las 48 – 72 hs Es negativa (< 10mm) y pueden administrar 20 unidades en caso de paciente inmunodeprimidos. Positiva > 10 mm (primoinfección actual o pasada) Negativa < 10 mm (nunca hubo infección) La tuberculosis es una infección sistémica que sólo se manifiesta por evidencia de una respuesta inmunitaria en la mayoría de los individuos expuestos. En algunas personas infectadas, la infección progresa o, lo que es más común, se reactiva después de un periodo asintomático (años). La forma más común de reactivación es neumonía crónica con fiebre, tos, esputo sanguinolento y pérdida de peso. También ocurre propagación fuera del pulmón y es en particular devastadora cuando llega al sistema nervioso central. La historia natural sigue un curso de emaciación crónica que lleva a la muerte, por lo que en el pasado recibió el adecuado nombre de “consunción”. 94 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti SINTOMAS: • tos persistente mas 3 semanas( sangre*), • dolor en el tórax, • debilidad o cansancio • pérdida de peso, Diagnóstico - clínica/radiografía / identificación patógeno La muestra debe ser previa al tratamiento quimioterápico. Se toman 3 muestra de esputo matinal de 3 dias consecutivos (seriado). Se hace un examen microscópio con tinción de ziehl- neelsen. También se pude tenir con técnica de kinyoun y con flurocromos. La muestra se homogeneizan antes de cultivo en medio sólidos de Lowestein- Jensen o Middlebrook 7H11 Las colonias tardan de 2 a 3 semanas para aparecer. No se considera negativo antes de las 8 semanas. M. tuberculosis produce niacina. Hay otros Mycobacterium diferente de tuberculosis y bovis que producen pigmentos con sin presencia de luz. Junto al cultivo se realiza el antibiograma Medio de cultivo para micobacterias Solidos Base de agar Middlebrook 7H10 y middlebrok 7H10 selectivo Middlebrook 7H11 y middlebrok 7H11 selectivo Middlebrook biplaca (agar 7H10⁄7H11) Base de huevo Lowenstein – Jensen Lowenstein – Jensen gruft Lowenstein – Jensen con hierro Lowenstein – Jensen ácido pirúvico Líquidos Medio CACTEC 12B Medio middlebrook 7H9 Septi -chek AFB TRATAMIENTO: Drogas de primera línea (en su mayoría bactericidas) y de segunda línea (menos efectivas, se usan cuando fallan la anteriores). Se utilizan un tratamiento de 4 drogas: R.I. P.I 1- Rifampicina (quinolona) 2- Isoniacida 3- Pirazinamida 4- Etambutol o estreptomicina Los primeros dos meses y luego dos drogas: isoniacidas y rifampicina por 4 meses (RI) VACUNA: Se vacuna con la BCG (Bacilo de calmette – guerin) el cual produce primoinfección atenuada. Recién nacidos (0-4 años antes de ingresa la maternidad ) El BCG estimula la DTH a la tuberculina Su eficacia es variable La vacuna BCG esta contraindicada en pacientes con SIDA • falta de apetito, • fiebre, • escalofríos, • sudoración nocturna. 95 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Mycobacteria atípica: Raramente se las aisla de paciente inmunocomprometidos, si embargo hay condiciones predisponente, como enfermedad pulmonar crónica e inmunosupresión. Estas micobacterias desarrollan infecciones pulmonares que a menudo se confunden con TBC, pero que generalmente son progresivas y de rápida evolución. El pronóstico es generalmente malo debido al compromiso inmunológico del paciente y a la resistencia que presentan las baterías a los antibióticos. La transmisión no parece ser humana sino que se adquiere de reservorios ambientales o animales. Las infecciones pueden afectar diversos órganos pero la localización pulmonar, cutánea e ganglionar son las más frecuente. Mycobacterium leprae (bacilo de Hansen) ✓ Bacilo ácido – alcohol resistente ✓ Inmóvil ✓ No capsulado✓ No esporulado ✓ La pared celular tiene ácido micólicos ✓ Trata la bacteria con piridina antes de la tinción de ziehl- neelsen, pierde su ácido alcohol resistencia, propiedad útil para distinguirla de otras micobacterias. ✓ No crece en cultivos ✓ Lento crescimento en animales ✓ Posee un glucolípido fenólico en su pared celular con un trisacárido llamado PGL – 1 que determina especificidad del antígeno para la especie. ✓ No es posible cultivarlo, pero pude inocularse en animales de laboratorio. Es de localización intracelular y se multiplica en macrófagos de piel y células de Schwann. La lepra es una enfermedad granulomatosa crónica de los nervios periféricos y tejidos superficiales, en particular de la mucosa nasal. La enfermedad va desde lesiones cutáneas anestésicas que se resuelven con lentitud hasta las lesiones faciales que provocan desfiguración y que son responsables del estigma y ostracismo social de los individuos con lepra (leprosos). EPIDEMIOLOGIA: Las goticulas nasales transmiten la infección Erradicada en muchos países Posee un tiempo de incubación muy prolongado (2 a 5 años) y la enfermedad es de curso crónico. El bacilo tiene como reservorio al humano, al armadillo, al chimpancé africano y otras especies de monos. La transmisión de la enfermedad es de persona a persona, a través de secreciones nasales. El mayor riesgo se da por el contacto con pacientes baciliferos (lepra lepromatosa). En nuestra país el área endémica incluye a las provincias de nordeste: Chaco, Formosa, Entre Rios, Misiones, Corrientes y Santa Fe; Buenos Aires, y su conturbanos. PATOGENIA: Si los bacilos exceden la capacidad de los macrófagos, se multiplican dentro de estos, se estimulan linfocitos T y se desarrolla la lepra tuberculoide (buena inmunidad). Si el bacilo es fagocitado pero no destruido, el macrófago degenera (células de Virchow) y las diseminación sistémica genera la lepra lepromatosa escasa inmunidad). Los de inmunidad intermedia desarrollan la llamada lepra dimorfa. Preferencia por las Célula de Schwann en SN – neuritis es un parasito intracelular obligado que, para persistir, debe multiplicarse en las celulas del hospedador CLINICA: Hay seis tipo de lepra (hanseniase) 1- Lepromatosa polar: Las lesiones son infiltrativas y difusas 2- Tuberculoide polar: Compromete a la piel y los nervios Produce lesiones anestésicas Intermediarias : 1- Borderline intermediara 2- Borderline tuberculoide 3- Bordeline lepromatosa 96 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Solo las formas tuberculoide y lepromatosa son estables. 1- Lepra interminada: hay máculas hipocrómicas o acrómicas, hipoestésicas, localizadas preferentemente en miembros, glúteos y cara. La baciloscopia es escasamente positiva o negativa. Lo mismo ocurre para la reacción de mitsuda- fernandez. 2- Lepra tuberculoide: afecta piel y SNP (mucho más a este último). Los pacientes desarrollan una eficiente inmunidad celular debido a esto la reacción a la lepromina es positiva y la baciloscopia es negativa. • PIEL: máculas eritematosas anestésicas con centro acrómico. Ausencia de vello en cara tronco y exptremidades. M. leprae desarrolla mejor el tejidos a bajas temperaturas por lo que no desarrolla en axilas, ingles y periné. • SNP: la bacteria invade nervios sensoriales periféricos y produce hipoestesis o anestesia cutánea (sobretodo a nivel del cubital y el ciático poplíteo externo). Las lesiones son granulomatosas por lo tanto la rama afectada esta engrosada. Además de los trastornos de la sensibilidad táctil, térmica y dolorosa hay trastornos tróficos (ulceras y amputación de falanges). Es frecuente la garra cubital y el piel cuboides. 3- Lepra lepromatosa: afecta piel, mucosa, SNP y vísceras. Debido a la falta de inmunidad celular la reacción a la lepromina es negativa y la baciloscopia es positiva. • PIEL: máculas color parduzco, discretamente infiltradas con alteraciones de la sensibilidad, en general respetan cuero cabelludo y gran pliegues. Sobre las máculas aparecen tubérculos (lepromas) que pueden ulcerarse y dejar cicatriz. Hay facies leonina (por engrosamiento de los pliegues de la cara), alopecia de cejas, ausencia de pestaña, infiltración de los lóbulos de la oreja (badajo de campana) • MUCOSA: se compromete la nasal, pudiendo descender a boca, faringe y laringe. Hay rinorrea, epistaxis, perforación del tabique y caída de la punta de nariz. Se eliminan gran cantidad de bacilos por mucosa oral y nasal. • SNP: el compromiso nervioso es menor que el cutáneo. Los nervios no se afectan tanto y la sensibilidad cutánea se pierde en forma de parche • VISCERAS: en riñón amiloidosis, en hígado, bazo y suprarrenales infiltrados y amiloidosis. En ganglios hay infiltrados lepromatosos con bacilos. En testículos infiltrados. En ojos hay uvetis, queratitis y cataratas. GRUPO DIMORFO: Las caracteres son compartidos, si está más cerca de un extremo será lepra lepromatosa o lepra tuberculoide. Lepra infantil: es excepcional antes del año, rara antes de los 3 y benigna hasta los 5, predomina en tipo indeterminado. Episodios reaccionales: Se dan en 10-40% de los pacientes y se deben al tratamiento, embarazo, infecciones sobreagregados y stress. >> TIPO 1: se dan en los casos borderline. Reacción reversal: hay mejoramineot de la inmunidad celular, el paciente vira a la forma tuberculoide. Reacción de degradación o empeoramiento: cae la inmunidad celular con viraje a la forma lepromatosa. >> TIPO2: es medida por la inmunidad humoral. Se ve en paciente con lepra lepromatosa. Comprende al eritema nudoso, el eritema polimorfo, el fenómeno de lucio (es una vesculitis necrotizante). Artritis, neuritis, orquitis hepatitis y glomerulonefritis. 97 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti DIAGNÓSTICO: - Clínico (lesiones cutáneas mas trastornos de la sensibilidad) y epidemiológico Los frotis y las biopsias con organismos acidorresistentes son los principales metodos de diagnostico Baciloscopia: se toman muestra de escarificación de piel o hisopado de mucosa. El material se extiende en un portaobjetos y se tiñe con la técnica de ziehl- neelsen. Se determina el número de bacilos por campo y el porcentaje de bacilos vivos sobre el total. Este método es diagnóstico de esta enfermedad. El diagnóstico de lepra lepromatosa puede realizarse al recuperar bacilos ácido alcohol resistente de muestras de lesiones por rasgado cutáneo. Diagnóstico de lepra tuberculoide deben hacerse biopsias de lesiones con corte histológico. Los tacos no deben ser incluidos en parafina (porque no se pude hacer la tinción de ziehl- neelsen) por lo que se recurrea a la técnica de wade- fite). La histopatología determina: ✓ Lepra indeterminada: infiltrado inflamatório inespecífico en piel (alrededor de los anexos, vasos y nervios) ✓ Lepra tuberculoide: granuloma tuberculoide. No se vem bacilos ✓ Lepra lepromatosa: células de Virchow y abundante bacilos ✓ Lepra dimorfa “borderline”: ambas caracteristicas Por serologia se pude identificar el PGL- 1 o de la fenolasa que degrada DOPA (con producción de un metabolito coloreado) Reacción de mitsuda – fernandez (intradermorreacción con lepromina) después de 26 dias La reacción a la lepromina tiene dos fases de positividad. 1) Primera fase: 24 – 48 horas (reacción de fernandez) que produce un eritema indurado 2) Segunda fase (reáccion de mitsuda) que produce un nódulo a las 3-4 semanas. La negatividad de la reacción en un enfermo con lepra de habla de la anergia inmune que el mismo posee. Pude que el paciente no tuve contacto o es un a forma/ polo virchowiana. NO es un teste diagnóstico. Solo prognóstico. TRATAMIENTO: Se utiliza dapsona (inhibe la síntesis de ácido fólico), fifampicina, clofazimina. Para losepisodios reaccionales se usan corticoides El tratamiento propuesto por la OMS es el seguinte: Paciente hanseniase paucibacilares (baciloscopia negativa y menos de 5 lesiones cutáneas): 100 mg dopsona por dia + 1 dosis mensual de rifampicina (600mg) durante 6 meses Paciente multibaciliferos: dapsona 100 mg – dia + clofazimina 50 mg⁄dia. Uma vez por mês se dan 600 mg de rifampicina y 300 de clofazimina. El tratamento tiene una duración de 1 año. Prevención: VACUNA: BCG 2 dosis La cicatriz del brazo derecho 98 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Familia neisseriaceae - Neisseria Genero Neissera Neisseria meningitidis (meningococo) Neisseria gonorrhoeae (gonococo) Diplococos gram (-), oxidase + Crece en agar nutritive y agar de Thayer- Martin Genero moraxela Moxarela (Branhmella) catarrhalis Diplococo gram (-), oxiadasa + • Característica generales: No tienen movilidad No forman esporas No son acidorresistentes (BAAR) Cocos Gram – Los elementos estructurales de N. meningitidis y N. gonorrhoeae son los mismos, excepto que el meningococo contiene una cápsula polisacárida externa a la pared celular Los diplococos gramnegativos tienen forma de granos de café Aerobia y de un medio enriquecido para un crecimiento óptimo. Oxidasa positivas Clasificación según su utilización de oxigeno Neisseria: meningitis – Gonhorreae Características generales: - Diplococos gram – - Aerobios - Catalasa y oxidasa + - Sensibles a agentes físicos – químicos - Sensibles a los cambios de temperatura - colônias lisas de tamaño mediano en placas de agar sangre después de incubarse durante la noche Característica diferenciales ✓ N. menigitis: capsulada (clasificación en serogrupos) eso hace que sea mas virulenta. En cultivo mas brillante. ✓ N. gonhorreae: no capsulada, en los cultivo opacos. Neisseria meningitidis- meningococo Causante de diversos tipos de infecciones, de las cuales, la meningitis purulenta y bacteriemia son las más frecuentes. Características morfológicas: - Diplococo gran – , con su cara adyacente aplanada, lo que le da forma característica de “galleta”. - Cápsula externa de polisacáridos (lo que diferencia de la N. gonorrhoeae) 99 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Factores de patogenicidad Estructurales: - Capsula antifagocítica - Serogrupo (total de 13) A B C D X Y W135 E29 K L I J – los en rojo responsable de las epidemias. Mas común B, C, Y - lipooligosaccharide (LOS) (necrosis vascular cutáneo e inflamación) es una endotoxina de membrana externa, libera sustancia vaso activa que activa la via de complemento, y inicia la coagulación diseminada. Disminuye de los leucocitos: leucocitosis, hipotensión, hipotermia – cuadro de respuesta inmune. - Pili: proteína de adhesión a la superficie de las células y media ingreso por endocitosis en las células. Permite ingresar también en la barrera hemato encefálica - Fimbrias: que permiten su adherencia a las células epiteliales de la nasofaringe humana. Metabólicos - Ig A proteasa: impide la opsonización de la bacteria - Autolisina Secuencia de acontecimientos: patogenicidad Los macrófagos lo que hacen es vehiculizar lo porque la bacteria evita la formación de lo fagolisosoma. Empieza a multiplicarse aún más dentro del macrófago y se disemina llegando al sistema nervioso central donde se produce una respuesta inflamatoria La infección se inicia en la: nasofaringe. El gonococo se adhiere selectivamente al epitelio cilíndrico no ciliado. El microorganismo es transportado a través de las células epiteliales en vacuolas fagocíticas (el polisacárido capsular le permite resistir la fagocitosis). Esta infección nasofaringe en la mayoría de los casos es subclínica, pero algunos casos, puede presentar sintomatología leve. N. meningitidis, no produce “exotoxina” pero secreta una IgA protease que degrada la IgA humana: Si los microorganismos atraviesan la mucosa, pueden llegar a la circulación donde puede ocurrir: que sean destruidos por la acción sinérgica de anticuerpos específicos complemento y células fagocíticas o que se multipliquen iniciando así la fase bacteriémica. La menigococcemia se acompaña de signos y síntomas de enfermedad sistémica y habitualmente precede a la meningitis en 24 a 48 hrs. Como esto microorganismos tienen una gran velocidad de replicación, en pocas horas, un paciente se puede deteriorar desde un estado de buena salud a un cuadro de shock irreversible caracterizado por diatésis hemorrágica (predisposición a la hemorragia espontánea) que culmina en la muerte. La endotoxina LPS de las membranas externa, es responsable de algunas manifestaciones clínicas, y su concentración en plasma, esta directamente relacionada con la gravedad de los síntomas. El desarrollo de enfermedad invasora depende de los factores inmunitarios del hospedero. La enfermedad invasora afecta casi exclusivamente a personas que carecen de anticuerpos bactericidas específicos para la cepa infectante. Los lactantes están protegidos en sus primeros meses de vida y luego disminuye progresivamente a medida que aparecen nuevos anticuerpos debido a la colonización por bacterias similares no patógenas o carente de virulencia. Transmisión y epidemiologia: Secreciones espiratorias Portación: 5 a 15% aumenta en epidemias Neisseria menigitidis: porción orofaríngea En la Argentina es una enfermedad endemo- epidémica de notificación obligatoria (ley 15.465). es una patología objeto de vigilancia intensificada en todo el país. El caso debe ser notificado a la autoridad sanitaria dentro de las 24 hrs de realizada el diagnóstico con los datos personales, domicilio y antecedentes de vacunación. 100 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Los meningococos solo afectan al humano. El habitual de colonización de estas bacterias, es la nasofaringe. Se transmite de persona a persona mediante secreciones respiratorias y mediante el contacto oral directo o indirecto, el estado de portación suele durar unos pocos meses pero puede hacerse crónico. Este estado de portación ocasiona la producción de anticuerpos específicos séricos contra la cepa en cuestión. La colonización por una cepa nueva justo antes que se produzcan los anticuerpos específicos. La mayoría de las infecciones se observan en niños de 6 años a 3 años. Un segundo grupo de riesgo esta representado por adolescentes de 14 a 20 años. Manifestaciones clínicas: Enfermedad sistémica Casos graves Secuelas Fiebre y postración Petequias (exantema cutáneo hemorrágico) LPS (Actividad del complemento): depósito de fibrina en vasos sanguíneos. Síndrome de Waterhouse – frederichsen Hemorragias cerebral Bacteremia Shock Coagulación intravascular diseminada (CID) Insuficiencia renal No detectables Sordera del VIII par Amputaciones Secuelas neurológicas graves Necrosis de piel o tejidos. equimosis Menigitis meningococemia ✓ Meningococcemia: un 30 a 40% de los pacientes. Sin signos o síntomas de meningitis tras la infección meningocócica. Manifestaciones clínicas: bacteriemia transitoria con sintomatología leve, hasta cuadros fulminantes de pocas horas de duración. El inicio suele ser brusco con fiebre, escalafrios, naúseas, vomitos, exantema, mialgias y artralgias. El exantema es frecuente, y pude ser maculopapula, petequial o equimótico. Se distribuye principalmente en tronco y miembro. Exantema puede evolucionar a un cuadro hemorragico. La meningococcemia fulminante (síndrome de Waterhouse – Friderichsen) tiene evolución rápida y se caracteriza por: shock, coagulación intravasculardiseminada y fracaso multiorgánica. Las lesiones hemorrágicas afectan la piel, mucosa, músculos esquelético, glándulas suprarrenales y en ocasiones la hipófisis. ✓ Meningitis: se asocia frecuentemente a meningococcemia. Se observan sintomas como cefalea intensa, confusión, letargia, vómito y rigidez de nuca. La sintomatología no se pude diferenciar de las meningitis producida por otro microorganismo. A media que avanza la infección la letargia puede progresar al coma y aparece convulsiones, parálisis de pares craneales y hemiparesia u otros signos de foco. Una de las características de la meningitis bacteriana es la intensa neutrofilia. La respuesta inflamatoria de la infección produce edemas cerebral e incremento a la presión endocraneana. La administración sistémica de dexametasona reduce as contracciones de de citoquinas en el LCR. ✓ Otras manifestaciones: artritis, neumonía, sinusitis, otitis media, conjuntivitis, endoftalmitis, uretritis, endometritis, endocarditis y pericarditis. En la fase aguda de la enfermedad meningococcica se observa una elevada prevalencia del herpes labial. 101 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Diagnóstico microbiológico: Pruebas serológica no es útil para el diagnóstico ya que la infección es demasiado aguda como para poder detectar anticuerpos. - LCR (frotis GRAM + son diagnósticos) - Hemocultivo - Petequias - Hisopado faríngeo (en caso de epidemias para ver portación) - Estudio microbiológico: diplococos gran negativos, a riñonadas como granos de café. Se los ve intra e extracelulares. Los cuadros graves se ven contra extracelulares y ausencia de células de glóbulos blancos, puede causar la muerte. - Hemocultivos - Hisopado faríngeo en los contactos íntimos para ver el estado de portación y hacer también quimiprofilaxis con antibióticos. Característica del examen físico químico de LCR Menigitis purulenta LCR – TURBIO Meningitis aséptica (LCR claro) Etiología Bacterias Virus, hongos, tuberculosis, leptospirosis, menigitis bacteriana tratada. Proteínas en LCR >100 mg⁄dL (hiperproteinorraquia) < 45mg⁄dL Glucosa en LCR < 40 mg⁄dL (hipoglucorraquia) Normal Leucocitos en LCR 100- 2000µl (predomina de neutrófilo) 100- 1000µl (predominio de monocitos) Relación glucosa LCR⁄Plasma <0,6 Identificación: ✓ Gram ✓ Cultivo: agar sangre y agar chocolate ✓ Fermentación de Hidrato de carbono, glucosa y maltosa (+), sacarosa(-). Serotipificación en LCR: ✓ Aglutinación del látex ✓ Coaglutinación ✓ Contrainmunoeletroforesis (CIE) (en LCR, suero, orina) ✓ PCR ANTIBIOGRAMA: ✓ Sensibilidad: - Penicilina – ampicilina (alteración de PLP2 Y PLP3) - Clorofenicol - Cefalosporina de 3⁰ geración Profilaxis: con antibióticos a los contactos íntimos con rifampicina. Vacuna: es tetravalente (ACYW) conjugada con toxoide diftérico, protege contra enfermedad la enfermedad meningocócica invasiva y sus complicaciones. Calendario de vacunación: a los 3 meses la primera dosis, segunda dosis a los 5 meses y refuerzo a los 15 meses. Dosis única: 11 años. Tratamiento: cualquier paciente febril con exantema petequias debe ser estudiados para descartar una infección meningocócica. Los hemocultivos se deben tomar inmediatamente y se comienza el tratamiento empírico sin esperar la confirmación. Con el diagnóstico confirmado, se utiliza penicilina por via endovenosa, ya que ataca el meningococo y también tiene la propiedad de penetrar las meninges inflamadas. Para los tratamientos empírico se recomiendan cefalosporinas de tercer generación ya que tiene mayor actividad contra otros patógenos meníngeos comunes. 102 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Pronostico: la tasa de mortalidad es menor de 5% en los pacientes con menigitis menigocóccica pero puede alcanzar el 50 – 60% en pacientes con menigococcemia fulminante, que fallecen en 24 a 48 horas de ingresado al nosocomico, debido al shock grave que presentan. Las secuelas permanente de la miningitis tratada a tiempo son raras. Neisseria gonhorreae: ETS Causa de enfermedad de transmisión sexual, conocida también como gonococo. Agente causal de la gonorrea. CARACTERISTICAS: - Patógeno intracelular - Diplococo - manera adecuada unicamente en agar chocolate y CO2 – hace un enriquecimiento 0 - Gran negativa - Oxidasa positiva - Utiliza la glucosa y no la maltosa, la sacarosa o la lactosa. - Riñonadas (como grano de café) - Posee fibrias (pili) y la membrana externa trilaminar, está compuesta por fosfolípidos, lipooligosacáridos (LOS) y varias proteínas (I, II, III) que constituyen la base para el sistema de serotipificación. - Pose IgA proteasa (patogenicidad) - Proteina I: forma poros - Proteínas II: ligando para la adhesión de gonococo a diferentes células. - Reservorio es el hombre – reservorio es la mujer y es asintomática en la mayoría de los casos. - Inmóvil una vez que han accedido a la mucosa vaginal o uretral buscan llegar a las células epiteliales columnares y no hacen del cuello uterino o uretra una vez que llegan se multiplicar Epidemiologia: - Enfermedad mundial - Transmisión por relación sexual - Mujer reservorio asintomático - Transmisión vertical entre madre e hijo- que puede producir oftalmia neonatal - Gonorrea en mayor en los hombres - La incidencia de gonorrea es mayores en los hombres, pero la prevalencia de la enfermedad es mayor en las muyeres. Por lo general, los meningococos son miembros quiescentes de la flora nasofaríngea, pero pueden producir infecciones fulminantes del torrente sanguíneo, del sistema nervioso central (SNC) o de ambos. Hay pocas advertencias; rara vez se reconocen las infecciones localizadas que preceden a la propagación sistémica. La enfermedad principal es meningitis purulenta aguda con fiebre, cefaleas, convulsiones y signos mentales secundarios a inflamación y aumento de la presión intracraneal. Incluso en los casos en que el SNC no se ve comprometido, las infecciones por N. meningitidis tienen una marcada tendencia a acompañarse de erupciones cutáneas, púrpura, trombocitopenia y otras manifestaciones asociadas con endotoxemia. Esta bacteria ocasiona una de las pocas infecciones en las que los pacientes pueden pasar de un estado de salud normal a la muerte en menos de un día. También puede extenderse rápidamente dentro de la familia, la escuela e, incluso, puede haber brotes a nivel nacional. Gonorrea En contraste con la enfermedad meningocócica, la gonorrea se localiza sobre todo en las superficies mucosas con una propagación relativamente infrecuente al torrente sanguíneo o a órganos profundos. La infección se adquiere por vía sexual mediante el contacto genital directo y la manifestación principal es dolor y una secreción purulenta en el sitio de infección. En los varones, esto suele referirse a la uretra y, en las mujeres, al cuello uterino. La extensión directa de la infección por las trompas de Falopio produce fiebre y dolor en la parte baja del abdomen, síndrome denominado enfermedad inflamatoria pélvica (PID). En las mujeres, las consecuencias de la gonorrea a largo plazo pueden ser esterilidad o embarazos extrauterinos. 103 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti FACTORES DE PATOGENICIDAD: Solo afecta el hombre. El primer paso en la infección es la colonización de la superficie mucosa, generándose una intensa reacción inflamatoria con polimorfonucleares, los cuales contienen a la bacteria en su interior. La adhesión de las bacterias al epitelio se da por medio de la fimbrias y luego por la proteína tipo II: la proteína tipo I permite el pasaje de nutrientes a través de la membrana externa mediante la formación de poros. Además, esta proteína disminuye el estallido respiratorio de los polimorfonucleares facilitandosu supervivencia en el interior de los mismo. Estas bacterias también producen la IgA proteasa. Las personas infectadas y curadas de gonorrea se pueden reifectar y esto se explica por la capacidad de N. gonorrhoae de varias sus antígenos de superficie, esto se produce principalmente en las fimbrias y en la proteína tipo II. Lipooligosacaridos son responsable de muchos de los síntomas, ya que desencadena una intensa respuesta inflamatoria, induce la producción local de TNFɑ y el consecuente daño en las trompas de Falopio. Además, intervienen en la resistencia al complemento. La bacteria requiere de hierro para crecer por lo que produce proteínas que retienen el hierro y facilitan su liberación de la transferrina y lactoferrina. - Pilis: les permite evadir la fagocitosis y la adhesión a las células epiteliales no ciliadas Proteínas de membrana externa - LOS - Proteína I (POR) responsable de la bacteriemia - Proteína II (OPA) – responsable de la opacidad de las colonias - Proteína III (RPM) Factores de patogenicidad: - IgA proteasa - FBP Proteína de unión a Fe MANIFESTACIONES CLÍNICAS: - Uretritis masculina 95 y 98% de los casos con colación de gran se confirma N. - Oftalmía neonata – conjuntivitis 100% de los casos (posparto) - Proctitis - imposible hacer diagnóstico solo con gran. Exudado rectal mucopurulento, tenesmo, constipación y prurito (picazón). - Prostatitis: prácticamente inexistentes en nuestro dias. - Epididimitis: es una complicación infrecuente de la uretritis, generalmente unilateral y más frecuente en menores de 35 años. Se presenta con severo dolor escrotal e inguinal. - Faringitis – (sexo oral) imposible solo hacer diagnóstico con gran. Asintomática en 90% de los casos En muyeres; - Salpingitis 50 75% de los casos en mujer - Endocevicitis (mujer) - Cervicitis - Faringitis - Proctitis - Abscesos en glándulas de bartholin Niños: - Conjuntivitis: transmisión vertical, en el útero, o posparto. - Sepsis y artritis Infección gonocócicas diseminadas (IGD) 2⁄3 de los pacientes afectados son mujeres y los síntomas suelen iniciarse durante la menstruación. Cuadro inicial: - Manifestaciones de gonococcemia o atritis purulenta que afecta 1 a 2 articulaciones. - Gonococcemia se caracteriza por: fiebre, poliartralgia y lesiones cutáneas de tipo paulares, pustulares, hemorrágicas o necróticas sobre todo en la parte distal de la extremidades. - Artitirs asintomática afecta, muñeca, dedos, rodillas y tobillos. - Endocarditis y la meningitis son complicaciones poco frecuentes pero muy graves de la IGD. Favorecem la formación de poro 104 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti NO COMPLICADAS COMPLICADAS HOMBRE Uretritis, faringitis, proctitis Prostatitis, epididimitis, IGD MUJER Cervicitis, faringitis, procititis, uretritis Conjutivitis, endocericitis EPI (endometritis, salpigitis, peritonitis, abscesos, ováricos) Abscesos de glándula de Bartholin, IGD NEONATO Conjuntivitis Oftalmía, neonatal, sepsis, artritis Además N. gonorrhoeae puede producir endocarditis bacterianas con muy baja frecuencia Complicaciones: • Diseminada • Poliartralgias (dolor en las articulaciones) TIPOS DE MUESTRA - Hisopado uretral - Primer chorro miccional - Endocervix - Hisopado anorrectal - Liquido articular - Sangre Toma de muestra: → Hisopado especiales → Muestra debe tomarse del lugar adecuado → No demorarme en la siembra IDENTIFICACIÓN: ❖ GLUCOSA + ❖ MALTOSA Y SACAROSA – ❖ Gran negativo: intracelular con sus lados adyacente aplanados en altamente sospechoso de infección gonocócicas. El frotis directo es de utilidad en los varones La flora interferente complica la interpretación en las mujeres ANTIBIOGRAMA - Penicilina - Cefalosporina de 3⁰ generación - Quinolona Fácil tratamiento, no hay mucha resistencia. Puede producir penicilinasa. • Agar de Theyer- Martin a 35⁰ - 37⁰ en atmósfera con CO2. Además se debe agregar antibióticos para hacer el medio selectivos. • A la prueba de oxidasa es positiva • Las pruebas serológicas no se usan, debido a que no se puede distinguir los anticuerpos de una infección activa de los de una infección pasada. Además puede dar lugar a la aparición de falso positivos, debido a la reacción cruzada con anticuerpos frente a N. meningitidis. TRAMIENTO: - Penicilina: resistente. - Ceftriaxona (3ª ceración) no hay cepas resistente y porque su largar vida media, permite utilizar solo una dosis. Tratamiento realiza en enfermo y en la pareja. - Mujeres embarazadas puede tratar con espectinomicina CULTIVO Tayer martin modificado (MTM), pose: → Agar base → hemoglobina → ISSO vitalex → ATB 105 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Moraxella catarrharlis (branhmella) Genero moxacela Colonizarte habitual • Diplococos o tétradas gramnegativo Características: - Crecen en agar sangre a 25⁰c - Crece en agar nutritivo a 35⁰C - No utiliza los hidratos de carbono - Comensal del tracto respiratorio superior y en ocasiones del tracto genital feminino - DN ASA + - Oxidasa + - Catalasa + - Movilidad – Potencialmente patógena MUESTRAS - Sinusitis - Otitis media - Bacteriemia - Conjuntivitis - Laringitis - Infecciones broncopulmonares - Septicemia - Endocarditis Colonizarte habitual del tracto respiratoria superior y del aparato genital femenino. DIAGNÓSTICO: Amuestra: esputo Gran cantidad de leucocitos y diplococos grannegativos Intacelular Colonia de color grisáceo, por hidrolizar el ADN y por su capacidad para producir ácido a partir de azúcares. TRATAMIENTO → Beta lactámico +INH – > resistente a penicilina G, ampicilina y amoxicilina → Cefalosporinas → Macrólidos → Quinolonas Debe usar inhibidores de la β- lactamasa como: amoxicilina⁄ácido clavulánico o ampicilina⁄sulbactam. (tratamiento más empírico, sin la realización de un antibiograma) 106 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Familia pasteurellaceae HAEMOPHILUS SSP Influenza – drucreyi CARACTERÍSTICA GENERAL: - Bacilo gram – (pose LPS) - cocobacilos - Anaerobio facultativo - No esporulado - Inmóvil - Pleomórfico (presenta morfología diferentes) - “parece cardume de peces” Especie habitat transmisión Factores de virulencia H. influenza Tracto respiratorio sup. Ojos y oído Microgotas Cápsula Pilis Lip A (endotoxina) IgA proteasas Neuraminidasa H. influencia aegyptis Tracto resp. Sup Microgotas Incierto H. ducreyi No forma parte de la microbiota habitual Contacto sexual incierto Haemophilus influenzae CEPA INDICE DE PORTACION MANIFESTACIONES CLINICAS No capsulada 30 a 80% Bronquitis crônica Otitis Sinusitis Conjuntivitis Capsuladas tipo B (la mas importante, la única invasiva) 2-4 antes de la inmunizacion Menor a 1 em poblaciones vacunadas Meningitis Epiglotitis Artritis séptica, osteomelitis, celulites, bacteriemia, pericarditis Capsuladas tipos A C F 1-2 No patógena MANIFESACIONES CLÍNICA Importante patologia niños menores de 5 años • Meningites (principalmente en lactantes y niños) • Epiglotitis aguda • Celulite • Pneumonia • Otites mexida • Sinusite • Pericarditis • Artritis séptica • Epiglotis – en niños grande producción de saliva • Conjuntivitis Ingresa en el espacio de dos células, espacio entrecelular. ➔ mecanismo de ingreso ➔ Los pelos y otras adhesinas se fijan a las celulas epiteliales ➔ La invasión ocurre entre las celulas ➔ La capsula previene la fagocitosis 107 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➔ Principia forma de infección ocurre por consecuencia de otralesión causada por una infecciona viral o bacteria Cápsula B es un importante factor de virulencia, grande capacidad antigénica capas de participar de procesos de la fuga de fagocitosis, lisis de la membrana celular, envasado do sistema inmune y gana la corriente sanguínea llegando a los pulmones y SNC Transmisión: - Secreción respiratoria Colonización: orofaríngea MEDIO DE CULTIVO - Agar chocolate, pose factores: Hemina o factor x (toda placa) NAD o factor V (solo en lado de la estría) - Agar sangre de carnero al 5% - Hemina o factor X + estria de Staphilococcus aureus - H. influenza y H. ducreyi no hagen hemolisis - H. influenza solo crece al redor de la estria y el factor V solo esta el lado de la estría - H. ducreyi crece en cualquier logar de la placa (toda la placa) porque requiere solo del factor X Vacuna: Se encontra em calendário de vacunacion formando parte de la quíntupla bacteriana - difteria tétano bertuci- difteria tétano bertuci b – hepatitis – QUINTUPLE PENTAVALENTE 1⁰ DOSE: 2 meses 2⁰ DOSE: 4 meses 3⁰ DOSE: 6 meses La vacuna es elaborada por polisacáridas conjugadas, en las que el polisacárido capsular (PRP) se conjuga con una proteína trasportadora, como el toxoide tetánico (PRP-T). TRATAMIENTO Las cepas resistentes a la ampicilina producen betalactamasas Las cefalosporinas de tercera generación son el tratamiento inicial Hemophilus ducreyi - Punción aspiración del ganglio satélite - Cultivo en Agar Sangre suplementado con isovitalex y vancomicina (Agar chocolate) - Necesita el factor X - Incubación 7 días, humedad y CO2 - 33⁰C A 35⁰C - CAUSA CHANCRO BLANDO (no es duro es mole): Doloroso, sucio. Diagnóstico diferencial con la sífilis, herpes simplex, LGV (linfogranuloma venerio), donovanosis. Bacilos gran negativo, pleomórficos – finitos, dispuestos como cardumes de peces Grupo Hacek Endocarditis en válvulas cardiacas - H. parainfluenzae, aphropilus, paraphropilus - Actinobacillus - Cardiobacterium hominis - Eikenella corrodens - Kingella kingii Essencial para su crescimento Fenómeno de satelitismo, solo crece al redor de la estría que se realizado de Estafilococos 108 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Son microorganismos que se encuentra en la placa dentaria y gingivales y eventualmente puede causar endocarditis, en manipulaciones odontológica. ✓ Antibiograma consensuado para haemophilus spp - Ampicilina - Cloranfenicol - Cefalosporina de 3 generacion - Meropenem - Inactivación enzimática cloranfenicolacetiltranferasa y penicilinas. 109 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Rikettsia, clamidias, Mycoplasma Rickettsias: Caracteristica generales: - Zoonosis de distribución casi mundial. - Cocobacilos gram negative - LPS NO es mucho toxico, y pose poca adherencia. - Al microscopio: de a pares unidos por sus extremos afinados - Intracelulares obligados - Reservorio: animales (roedores) y se transmiten por medio de VECTORES (garrapata, pulgas, piojos, ácaros) es una zoonosis. - Bacteria intracelular estrictica, sin embrago tiene la capacidad de mantener un metabolismo independente de la célula que las alberga - Ingresa las células por fagocitase pero luego escapa del fagosoma para ingresar en citoplasma y ocasionalmente en el núcleo - El género rickettsias posee dos grupos: grupo tífico y el grupo de fiebres manchadas Toxonomia: Familia: Rickettsiae (Howard Ricketts) Genero: rickettsia Especies: a) Grupo de la FIEBRE MACULOSA: 1) Rickettsii (fiebre de las Montañas Rocosas) (carrapatas) 2) Akaria (universal) (ácaros) 3) Africae 4) Australis 5) Conorii 6) Japónica 7) Sibírica b) Grupo de TIFUS 1) Prowazeckii (piojos) TIFUS epidémico (universal) TIFUS recrudescente (universal) TIFU Esporádica (USA) 2) Typhi (pulga) TIFUS (murino) endémica (univesal) 3) Orienta: Especie Grupo de TIFUS DE LA MALEZAS: Orientia tsutsugamushi (ácaro rojos) 4) Erilchica (garrapatas) Erlichiosis Especie: - Canis - Chaffensis 110 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Hombre es un huésped accidental GRUPO TÍICO TIFUS EXANTEMÁTICO O EPIDÉMICO: es producido por R. prowazekii. Es la distribución mundial, tiene como vector el piojo del cuerpo y el reservorio es el humano. El vector se infecta al succionar sangre infectado, luego de un tiempo las ricketssias aparecen en las heces del parasito e ingresan al hombre por rascado y abrasión. El cuadro clínico al principio es inespecífico con fiebre, cefalea, vómito, dolor muscular y abdominal. Una semana mas tarde aparece la erupción cutánea maculó pápular en palmas y plantas que evoluciona en forma centrípeta. Además hay compromiso multisistémico: meningitis, a LCR claro, compromiso hepático, renal, miocarditis, neumonía y signos de hipovolemia debido a la extrañación plasmática por daño capilar. La enfermedad de Brill – Zisser es el recrutamiento del tifus epidémico que aparece años después de la infección primaria TIFUS MURINO: es producido por R. typhi es de distribución mundial, tiene como vector a la pulga Xenopsylla cheopis. El reservorio esta constituido por especie de roedores. La enfermedad es similar al tifus epidémico pero más leve. ENFERMEDAD DE TSUTSUGAMSHI: tifus de los motorrales, es producido por orientia tsutsugamushi. Afecta el continente asiático. El vector es el ácaro de los roedores y el reservorio son tanto estos ácaros como los roedores GRUPO DE LAS FIEBRE MANCHADAS FIEBRE MANCHADA DE LAS MONTAÑAS ROCOSAS: es producida por R. rickettsi. Afecta al continente americano. El vector es un garrapato (género dermacentor y amblyamma) y el reservorio está representado por roedores y perros. clínicamente comienza de forma inespecífica (fiebre, cefalea, mialgias, etc). Y luego de unos días sobrevien la erupción en forma de máculas eritematosas que luego se transforman en muchas purúricas sobretodo a nivel del tronco y axila. Hay compromiso sistémico siendo particularmente importante la afección a nivel suprarrenal. Como complicaciones se ven CID, encefalitis, vasculitis, falla renal y cardiaca 111 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Fisiopatogenia TIFUS EPIDÉMICO: (Ricketssia prowazekii) • Se transmite de persona a persona • Vector: piojos (pediculus humanus subeespecie; corporis) • Via de infección: heces de piojo • Predisponen: pobreza, falta de higiene, hacinamiento. • Exantema aparece a los 4 a 7 días: forma petequias y hemorragias • Tronco, extremidades y axilas • Cara, palma y planta de los pies no se ven afectados • Frecuente alteraciones mentales, delirios, fotofobia, conjuntivitis • Si no se trata suele ser grave • Mortalidad: 40% • Diagnóstico: 112 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti TIFUS ENDÉMICO O MURINO (Ricketssia typhi) • Reservorio: zarigüeyas • Vector: pulga murina (Xenopsyllas cheopis) – pulga de la rata • Via de infección: heces que contaminan la herida, inhaladas • Hombre huésped accidente • Menos grave que anterior • Exantema a los 3-5 días • lesiones localizadas en el tronco y en las raíces de los miembros • La enfermedad no dura más de 2 semanas • Lesiones viscerales • No es hemorrágica Síntomas: cefalea, náuseas, temblor, fiebre, erupciones cutáneas y inmunofluorescencia indirecta. Fiebre de las montañas rocosas (Ricketssia ricketssi) • Fiebre manchada americana • OmpA: proteinas de membrana queproduce adherencia a los organismos del humano • El tifo de los matorrales se transmite por larvas de ácaros de roedores (níguas) • Zonas endémicas: norte América • Vector: garrapato (genero Dermacento y amblyoma) • Síntomas: cefalea, erupción exantema, mialgias, exantema y linfadenopatia • Causa vasculitis Diagnóstico biológico: Coloración de gran en confusa Coloración efectiva (para ver daño celular) 1) Giemsa 2) Gimenez Cultivo (dificultoso y riesgoso) - En tejidos - En huevos embrionados (como VIRUS) - ADF (anticuerpo directo fluorescente) - MIF (micro lnmunoflurecencia) - PCR (reacción en cadena de polimerasa) Tratamiento: Antibioticoterapia: - Tetraciclina (doxiciclina) - Fluoroquinolona (ciprofloxacina) - Colrafenicol en embarazadas y niño que no puede tomar tetraciclina Prevención: • Higiene • Desmalezamiento • Control de vectores • Erradicación de roedores • Usar ropas adecuadas (no exponer piel) 113 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Familia micoplasmataceae - Mycoplasma Ampliamente distribuida en la naturaleza. Son las bacterias más pequeñas con vida autónoma y puede tomar varias formas desde cocoides hasta filamentosas- Pleomórfica. (< 0,45µm) CARECEN DE PARED CELULAR por lo que no tiñen con técnica de gram Son comensales frecuentes del tracto genital. Algunas especies son comensales bucofaíngea genitales masculino y femeninos Presenta una membrana celular trilaminar con presencia de esteroles (ergosterol) Móviles por medio de un mecanismo por proteínas contráctiles Anaerobios facultativas (excepto micoplasma pneumoniae) Crecen en medio enriquecido Crece en medios enriquecidos por esteroles, purina y primidinas como el (caldo PPLO) - > colonias huevo frito invertido Mycoplasma genitalium causa infecciones del aparato genitourinario. Mycoplasma pneumoniae es un patógeno de las vías respiratorias bajas Taxonomia: Familia: mycoplasmataceae Género: 1) Micoplasma Especie: - Pneumoniae (agente Eaton) - Hominis - Genitalum - Germentans (SIDA) Especie patógenas para el hombre: Mycoplasma pneumoniae: - Patógeno respiratorio de neumonía atípica - Preferentemente en niños y adolescentes - Verano y principio de otoño - Aerobio extrínseco - Síntomas: síndrome gripal con cefalea - Produce neumonía atípica primaria en individuos de la comunidad de edad 5 y 15 años. También causa faringitis, traqueo bronquitis, neumonitis y otitis media. - Menos frecuente: artritis, anemia hemolítica, meningitis, erupción cutánea y reacciones alérgicas. - Las enfermedades que producen son de individuos a individuos, de forma endémica y muy raramente epidémica. Fisiopatogenia: 1) Citoadhesina P1: se unen a Rc oligosacáridos que se encuentra en las células epiteliales bronquiales. - Perdida de la actividad ciliar y aclaramiento por barrido 2) Destrucción de los cilios y posterior destrucción del epitelio 3) Exagerada respuesta inmunitaria por la presencia de un suerantigeno Género: 2) ureaplasma Espécie: urealyticum 114 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti 4) Liberación de peroxidasa y anión superóxido Enfermedad: - Genero micoplasma: Neumonía Pielonefritis Enfermedad inflamatoria pélvica Fiebre post parto Uretritis Pseudogripe Neumonía (SIDA) - Genero ureoplasma: Uretritis Clínica: Neumonía primaria: Asintomáticos Presenta como un síndrome gripal, con fiebre, cefalea y malestar general. Luego de 2-4 días aparece tos seca con expectoración escasa. Tos seca que evalúa a una tos con secreción. El paciente puede contagiar desde 2-8 días antes hasta 14 semanas después de empezado el cuadro clínico. La infección es más frecuente a fines de verano y principio de otoño y la bacteria es tan virulenta que basta con microorganismo por via aérea para que se produzca enfermedad. Diagnostico: Muestras de hisopados faríngeos o esputo y cultivo en medio enriquecidos pero debe esperarse como mínimo 7 dias, por lo que se prefiere la identificación de la bacteria por inhibición de su desarrollo por anticuerpos anti, M. pneumoniae. También puede hacerse diagnóstico por serologia. Tratamiento: Macrólidos (eritromicina o tetraciclina). No se usan penicilinas porque la bacteria carece de pared celular donde actúa el ATB. UREASA ARGINASA GLUCOSA U. urealyticum + - - M. hominis - + - M. pneumoniae - - + LISIS CELULAR Antibioticoterapia: • Sensibilidad ɑ: Tetraciclina (no en ninos) Eritromicina (ninos y adultos) Fluroquinolona • Resistência ɑ: NO USA Penicilina Cefalosporina 115 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Género Chamydia - Chlamydia • Bacterias intracelular obrigatório, transforma ADP en ATP para poder multiplicar-se. • Diferencian de ellas porque se replican sólo en las células y carecen de peptidoglucano en su pared celular • Ciclo bifásico • Pequeñas redondas • La envoltura no tiene una capa de peptidoglucano entre las membranas • Bacteria intracelular obligada que no crece en medios artificiales • Dos formas morfológicas: • MOMP: Diferencia las especies y el sorotipos (diferencia las especies) • LPS: con baja actividad 1) Cuerpos elementales: mínima unidad infectante, presenta una pared celular semejante a los gran negativos. “SIN PEPTIDOGLICANO”(depende de la literatura). Puede sobrevivir afuera de la célula hasta que encuentre otra. Mínima unidad infectante. encuentra la célula introduce en la célula y se transforma en células reticulares. 2) Cuerpos reticulares: intracelular. Forma reproductiva Pared celular parecida con gramnegativo pero si peptidoglicano entre ambas membranas. - No se cultiva ne médio convencionales bacteriológicos - Son altamente susceptibles a las condiciones del medio ambiente - Trasmisión es por contacto directo. - Lábil fuera del organismo Manifestaciones clínicas Biovar tracoma (serovars A-C) Biovar T. genital (serovars D-K) Biovar LGV (serovars L1-L3) Clasificacion: Familia Chalamydiaciae Genero: 1) Chlamdia Especie: trachomotis Sorovariedades: A, B, BA y C D K L1, L2, L2A, L3 2) Chlamydophila Especies: pneumoniae Psittaci Factores de virulecia y fisiopatogenia - Adhesinas (reconoce la célula) Inhibición de la formación del fagolisosoma - Cuerpo elemental (CE) (minima unidad infeccioso) El CE penetra a la celula, se transforma en CR dentro del fagosoma, se divide por fisión binaria, obtiene energía de la célula huésped. Sintetiza sus metabolitos, se fusiona y origina un nuevo CE el que libera del fagosoma destruyéndolo - Cuerpo reticular (CR) (no infeccioso, metabólico) parásito energético –Lisis celular. ➔ Resume: adhiere a las células induce su internalización, impedir la fusión del lisosoma con la vesícula endocitica. Transformarse de cuerpo elemental a reticulado, replicarse, transformase nuevamente a cuerpo elemental, escapar de la célula hospedera y todo al mismo tiempo que debe evitar los mecanismos de defensa. Clínica: puede hacer enfermedades en uretra, coló del útero, tubas uterinas, recto y anus, tracto respiratorio y conjuntivas. Tratamiento: quinolonas, macrólidos y tetraciclina, presenta resistencia a betalactámicos 116 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Enfermedad: chamidia trachomatis: Diagnostico por serología: IgM especifica. Linfogranuloma venero Chlamydia trachomatis: Es sensible a las sulfamidas y posee cuerpos de inclusión con glucógeno. Clínica: causa 3 tipos de infecciones: oftálmicas, genitales y respiratorias. Oftálmicas Genitales Respiratorio Trocoma (serovares A, B1 Y C) es una queratoconjuntivitisfolicular crónica que puede llevar a la ceguera. La respuesta Th1 y la producción de interferón γ se asocian a protección, la respuesta Th2 a la perpetuación de la infección. Conjuntivitis de inclusión: es frecuente la forma neonatal. La bacteria puede ser aislada en muestra de hisopados conjuntival Uretritis: no gonocócica en hombre Epididimitis Cervicitis Salpingitis (causa de esterilidad) Síndrome uretral Linfogranuloma venéreo neumonia REITER: conjuntivitis, uretritis y artritis reactiva. Transmisión: secreción de la bacteria nos ojos Diagnóstico: Muestras de hisopado Cultivo en células McCoy, Hela o BHK-21 tratada com cicloheximida o deoxiuridina. Luego se detecta por inmunofluorescencia. Detectarse con PCR (es más rápido y eficaz): NAAT IF o ELISA para detectar el antígeno del cuerpo elemental: detecta LPS o MOMP Tracoma diagnostico por examen oftalmológico Tratamiento: Sulfamidas, tetraciclina, eritromicina y rifampicina, macrólidos (azitromicina) según la OMS: 1) Cirugía 2) Antibiótico: azitromicina oral (1dose)/ tetraciclina 3) Higiene 4) Saneamiento 117 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Chlamydia pneumoniane • Se estima que al menos 30% de las neumonías son por este germen. No requiere hospitalización. • Afecta a niños mayores de 5 años, adolescentes y adultos. • Se transmite entre humanos • Tos seca persistente, faringitis y ocasionalmente neumonía. • Mal estar general, disnea, derrame pleural • Diagnóstico: aislamiento en cultivo e identificación de secuencias especificas por PCR. • Cultura: poco usada • Tratamiento: tetraciclina y eritromicina (macrolideo) Chlamydia psittaci Agente etiológico de la PSITACOSIS • Enfermedad zoonótica que se adquiere por inhalación de secreciones respiratorias o de polvo de deyecciones seca de aves infectadas: paloma, loro • Enfermedad aguda del tracto respiratorio bajo • Fiebre malestar genera, cefalea, mialgias y tos seca • Diagnóstico: serología. • Cultura: NO HACE debido ser alto grado de riesgo para contaminación Sensibilidad a: eritromicina/ macrólido y tetraciclinas Resistencia: cefalosporina 118 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ETS Casos Clínicos Caso clínico n°1 Se presenta a la consulta un hombre de 36 años que presenta ardor al orinar. El médico solicita urocultivo Informe 1CEP (Célula epitelial plana/campo) 15 leucocitos/Campo (Más de 5 leucocitos por campo hace indicaciones que tienes una inflamación y puede estar acompañada de piocito) No se observan gérmenes. Cultivo: Negativo. (a pesar de la inflamación no hay crecimiento) 1) ¿Por qué razones considera que el cultivo ha sido negativo? - Uso previo de antibióticos antes del cultivo - Orina hay que se del primero choro - Hisopados inadecuados - Tomada de amuestra inadecuada que puede tener uno falso negativo 2) ¿Cuáles pueden ser los microorganismos causantes de la patología? Los microorganismos causantes de esta patología, uretritis pueden ser: Uretritis gonocócicas • Neisseria Gonorrhoeae Uretritis no gonococicas • Clamydia Trachomatis • Ureopasma urealyticum • Micoplasma hominis Diplococo gran negativos, que se obtiene de un liquido seropulento que se esta en aparato genital masculino – diagnostico de uretritis gonocócica. Porque no existe otro diplococo gran negativo en esa región. Se es necesario cultivo: (en eso caso no) Thayer Martin: 35-37 C 24 – 48 hs 3-7% Co2 Humedad Identificación: - glucosa, maltosa y sacarosa - caralasa + - oxiadasa + Antibiograma: penicilina ceftriazona y ciprofloxacina CASO Clínico n°2 Una mujer embarazada cursando el tercer trimestre de embarazo se presenta con su estudio de TORCH: TOXO 1/512 – toxoplasmosis aguda Chagas : Negativo Hepatitis B: No reactivo. VDRL: Positivo 4Dils HIV: No reactivo. 1)En pocas palabras ¿Cómo interpreta cada resultado? El valor de toxo indica infección pasada y no representa un riesgo para el bebe. 119 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti • Toxoplasmosis aguda IgG 1⁄512. Se debe buscar IgM y el valor alto solicito teste de avidez, si la avidez es baja de tratar de un toxo aguda. Hace tratamiento Chagas, HB y HIV resultados negativos. • VDRL positivo 4 DILS significa que esta dentro de la seroprevalencia de sífilis. valor bajo debe confirmar con Ftabs. De 8 a 10 dils, no necesita confirmación. Resultado reactivo de < 1:8 dils -> necesito solicitar una prueba treponémica especifica como FTA-ABS para confirmación. Consecuencia en el RN: - Muerte - Ceguera - Problema oseos - Hepatoesplenomegalia - Anemias - Menigitis - Dientes de Hutchinson - Piernas en catre 2) ¿Qué medidas debería tomar en cada caso? Las medidas a tomar en cada caso son: Frente a toxo, se aconseja realizar la curva de seroconversión o de evolución de títulos junto con pruebas que aportan la detección de inmunoglobulinas de aparición temprana. Respecto VDRL es necesario confirmar el diagnostico mediante pruebas treponémicas específicas. Respecto HIV corresponde brindarle información sobre formas de transmisión, factores de riesgo para su adquisición y beneficios de la pesquisa precoz en el embarazo. Tratamiento con penicilina 3) Teniendo en cuenta la edad gestacional de la paciente. ¿Solicitaría algún otro estudio? ¿Cuál y por qué? Indique la importancia de realizar este estudio. Prueba del Estreptococo tipo B. La prueba se toma en la semana 35 a 37 para detectar si es portadora del estreptococo grupo B que le pueda pasar al bebé durante el trabajo de parto. El estreptococo B, es el causante de una infección neonatal muy grave que puede causar daño cerebral, meningitis, daño a la visión y pérdida auditiva y muerte. 4)Describa las características microbiológicas del Treponema pallidum. Características Microbiológicas del Treponema Pallidum: • Fila: Spirachaetaceae • Orden: Spirochaetales. • Género: Treponema. • Especie: Treponema Pallidum. • Subespecie: Pallidum (Tpp). • Helicoidales - Fibrillar ó flagelos: movilidad • No se colorean, no se cultivan - T. patógenos, no se colorean con técnicas habituales • Espiroqueta de 0,18 µm de diámetro con una longitud de 6-20 µm. • Posee hélices regulares (6 a 14 por célula) con un largo de 1,1 µm y una amplitud de 0,3 µm. • Extremos aguzados. • Presenta flagelo a lo largo del cuerpo celular dentro del espacio periplásmico, que le permite rotar alrededor de su eje. • Movilidad: tirabuzón • Se observa por contraste de fase ó fondo oscuro • Membrana lipídica antigénica • Se mantienen en cepas de inoculación en conejos: Cepa Nichols: patógena. Cepa Reiter: no patógena Tratamiento; penicilina 120 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Componentes de las células bacterianas: 121 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ANAEROBIOS: Son bacterias que NO REQUIER ÓXIGENO como aceptor final de electrones 1) Utilizan energía – ATP 2) Exigentes nutricionales 3) Crecimiento lento Son flora NORMAL de boca y tracto digestivo Clasificación I: Cocos Gram negativo anaerobio: NO ESPORULADOS: Género Veillonella Bacilos Gram negativos anaeróbio: NO ESPORULADOS: Género provotella Porphyromonas Bacteroides Wolinella Fusobacterium - Bacteroides: Grupo fragilis: B. Fragilis: Flora normal de tracto vaginal feminino B. thetaiotaomicron B. melaninogenicus (más de 50% de los aislamiento) Provotella pigmentadasy Porphyromonas: catalasa – (negativa) y no crecen en medio con bilis a 20%. Son comensales de boca, tracto respiratorio y digestivo superiores y colon. P. melaninogenica es fuertemente endotóxica y sensible a la penicilina. Provoca infecciones de senos nasales, pulmón, absceso y demás infecciones en otros lados por mordeduras. Prevotella spp. Y bacteroides spp (no fagilis): son anaeróbicas estrictas. P. bivia se encuentra en vagina y P dentalis en boca. Producen β- bactamasas. Fusobaterium: son bacilos gramnegativos, que habitan en boca, colon y tracto genital femenino. Son sensibles a penicilina. Si se asocia un Fusobacterium con Borrelis vicenti (asociación fusoespiriliar), se produce angina de vincent (lesión necrótica – ulcerativa faríngea similar a la difteria faríngea). Esta es una enfermedad oportunista que se desarrolla en individuos mal nutridos, con leucemia o inmunocomprometidos. También puede aparecer como complicación de una infección por Herpes simplex. El diagnóstico es por observación de la muestra de la lesión ulcerosa tenida con Giemsa u otro colorante apropiado. Bacteroides fragilis, son catalasa +. Crecen en agar sangre sin desarrollar hemóslis. Son aerotolerantes. Se desarrollan en bilis 20%. Produce infecciones abdominales y peritoneales por derrame del contenido intestinal en peritoneo. Posee fibrias, cápsula polisacárida, LPS (de pobre actividad endotóxica), colagenasa, IgA – proteasa, heparinasa y desocirribonucleasa. Posee una β – lactamasa que le otorga resistencia a diversos ATB. Son sensibles a clorafenicol , clindamicina y metronidazol Clasificación II Bacilo gram positivo ESPORULADO (Clostridium). Neurotóxicos: C. tetani C. botulinum Histotóxicos: C. perfringes C. novy Enterotóxicos: C.difficie Clasificación III: Bacilo gram positivo NO ESPORULADO. Género: propionibacterium: crece con aire con 5-10% CO2. P.acnes produce acné. Rothia Lactobacillus Mobiluncus: produce vaginoses bacteriana Anaeróbios gram-negativos no formam esporas. Producen abscesos y necrosis tisular. Son patógenos oportunistas ya que son miembros de la flora normal de tracto respiratorio y digestivo superiores. La infección producida es de origen endógena. Causan abscesos, sinusitis y otitis media crónica, neumonía necrotizante y por aspiración, artritis séptica, osteomielitis y colecistitis. 122 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Eubacterium Flora de piel y mucosas (vaginosis) Placa periodontal Cocos gram positivo NO ESPORULADOS Género peptoestreptococcus Peptococcus (endometritis) Peptostreptococcus y Streptococcus microaerofilicos: membro de la flora normal de la boca, colon y tracto genital feminino. Se asocian con S. aureus y producen gangrena subcutánea Son sensible a penicilina y otros ATB contra cocos grampositivos. Determinante de patogenicidad: 1) Estruturares: - LPS - Cápsula (B. fragilis) 2) Metabólicos: Enzima: colagenasa, lipasa, hialurondinasas, elastasas, heparinasas, adhesinas. Producción de ácidos grasos de cadena corta Enterotoxina (B.fragillis) FISIOPATOGENIA: → Flora normal de: piel, intestino, tracto respiratorio superior, tracto genital. → Actúan como OPORTUNISTA ENDÓGENOS → Hacen sinergismo infeccioso (provocan infecciones mixtas a partir de una infección preexistente). → Se valen de factor facilitadores del hospedero: Disminución del potencial de óxido reducción Bacterias anaerobias: • Obtienen energía y biomasa sin O2 • Sensible al 02: - Por toxicidad directa - Por radicales libres tóxicos - Oxidación de radicales SH de enzimas • Mecanismos defensivos: - SOD - Catalasas - Peroxidasas Características y signos clínicos Presencia de gas Intervención quirúrgica previa Tejido necrótico o gangrenoso Mordedura animal o humana Proximidad a mucosa Endocarditis con hemocultivos aerobios negativos Bacteriemia con ictérica Infecciones pleuropulmonares (bacteroides) Abscesos del SNC Tratamiento con aminoglucósidos Infecciones obstétricas y ginecológicas: Bacteroides spp Tromboflebitis séptica Gránulos sulfurosos Infecciones associadas a turno maligno Olor fétido Dolor 123 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Diagnóstico I Diagnóstico II Mejores muestras a analizar: - Lavado broncoalveolar con cepillo envainado - Líquido pleural - Líquido ascítico - Culdocentesis - Curetaje de succión endometrial - Tejido, úlceras y abscesos – por punción - Orina por punción suprapúbica Temperatura ambiente NO en jeringa Medios de transporte para anaerobios Examen directo con GRAM de material de la gangrena o heridas. CULTIVO: Agar Brucella con sangre de carnero+ vitamina K y hemina. A⁄S+ kanamicina + vancomicina (Bacteroides⁄prevotella) A⁄S con alcohol feniletílico Incubación (cultivo) Jarra anaeróbica que utilice paládio como catalizador Identificación Sensibilidade (antibiograma) Diagnóstico de no esporulados: muestra de pus o exudado de lesión colocados en tubos de transporte o jeringas sin aire. Las muestras deben procesar de inmediato. Se cultivan en agar sangre-Brucella con sangre de carnero, hermina y vitamina K1 (medio no selectivo) El medio agar- sangre de carnero adicionado con vancomicina y kanamicina es útil para el aislamiento bacteroides. Tratamiento: Sensibilidad: Muy activos: Metronidazol (excepto Bacilos gram positivos no esporulados) Carbapenemes Cloranfenicol Betalactamicos con inhibidores de betalactamasas Variable (medianamente sensible) Macrólidos – lincosaminas Cefamicina: si uso clínicos Penicilinas para algunos gran positivos y gran negativos Escasa (medianamente poco sensible) Tetraciclinas Quinolonas fluoradas Nula (Resistencia) Aminoglucósidos Tratamiento para no esporulado: detección y drenaje del absceso y antibioticoterapia B. Fragilis responde bien a cloranfenicol, clindamicina, cefalosporinas de terceira generación o metronidazol 124 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Clasificación Neurotoxicos Histótoxicos Enterótoxicos Clostridium tetani Clostridium botulinum Clostridium perfringes Clostridium septicum Clostridium difficile Clostridium perfringens Clostridium perfringens - Gram positivo - Anaeróbio - Esporulado - Pose cápsula y es inmóvil. - Crece en agar sangre y medio líquidos formando un halo central de hemólisis completa (por toxina θ-tita) y un halo exterior de hemólisis incompleta (toxina ɑ). - La esporas de esta bacteria son resistentes a la ebulición y a desinfectantes. - Es flora normal de colon, vagina, boca y regiones de piel. - Ingresa por heridas en la forma exógenas (produce varias exotoxinas) o endógena - La toxina difunden por contigüidad produciendo necrosis tisular y abundante cantidad de gas. PATOGENIA: De acuerdo a la exotoxinas que produce C.perfingens ha sido clasificado en 5 grupos según las cuatro toxinas principales: alfa, beta, épsilon e iota El tipo A: es el más importante y se halla en coló y suelo El tipo C: pertenece a aislamientos asociados a toxinfección alimentaria, ya que produce una enterotoxina beta, que se produce durante la replicación del bacilo en el intestino y puede causar una enteritis necrotizante. Exoproductos: Toxina ɑ (PLC): posee actividad de fosfolipasa C, degrada esfingomielina y lecitina, destruye membranas de eritrocitos. Leucocitos y miocitos, puede contribuir a desarrollar un CID al provocar la liberación de tromboplastina de eritrocitos y plaqueta ES EL PRINCIPAL FACTOR ASOCIADO A GRANGRENA GASEOSA Toxina β: productoenteritis necrotizante severa, debido a la formación de poros en la membrana celular Se asocia a la ingesta de carnes de cerdo mal cocida Toxina θ(tita): hemolisina O2 lábil, puede alterar la permeabilidad vascular y es tóxica para los cardiomiocitos, es responsable de la β hemólisis Enterotoxina (CPE) produce desbalance electrolítico y muerte celular CLINICA: GANGRENA GASEOSA: El ingreso se da por lesiones traumáticas abierta, la infección se produce rápidamente y al poco tiempo varias especies anaerobias facultativa acompañan al clostridium contribuyen a crear el microambientes propicio para su desarrollo, por ello las infecciones gangrenosas son siembre mixtas. La toxina - ɑ genera nuevas áreas de necrosis para el crecimiento del clostridium, la fermentación de hidratos de carbono genera grande cantidad de gas en tejido celular subcutáneo dando el episema subcutáneo que se aprecia a la palpación (crepitación). Una vez instalada la infección lo más importante es la remoción quirúrgica de los tejidos necróticos para evitar la progresión de la infección CELULITIS ANAEROBIA: Es similar a la gangrena gaseosa pero limitada al TCS ENDOMETRITIS: se produce luego de partos o abortos realizados con material no esterilizados ENFERMEDAD TÓXICA ALIMENTARIA: generalmente se asocia al consumo de carne cruda o mal cocidas, también es frecuente por ingestión de carnes “que se ha dejado enfriar fuera de la heladera”, debuta con nauseas, diarrea y dolor abdominal. Que duran habitualmente de 12 a 24 horas. ENTERITIS NECROTIZANTE: es causada por la toxina β que produce la cepa C. el cuadro se asocia a la ingestión de alimento rico en proteína – carne- asociados a inhibidores de la tripsina (batata), ya que la toxina es sensible a la tripsina. 125 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Curso con intenso cólicos abdominales, diarrea sanguinolenta (debido a la inflamación, necrosis y hemorragias del intestino), peritonitis y shock. DIAGNÓSTICO: - Clínico - Microbiologico: recolectan muestras de heridas, (la muestra se obtiene por aspirado con jeringa de las heridas más representativas) se tiñe con gran y se aprecian bacilos grampositivos. El cultivo se hace en medio enriquecido con carne picada y se incuba en anaerobiosis a 45⁰C. Luego se subcultivo en agar sangre a 37⁰C por triplicado: • Una placa en atmósfera normal • Otra con 10% CO2 • La tercera en anaerobiosis (esta demuestra el patrón característico de hemolisis) En agar carne picada- glucosa forma grandes cantidades de gas El coprocultivo solo es significativo si hay grandes cantidades de esporos. También puede determinase la cantidad de enterotoxina en heces por ELISA - Prueba de NAGLER para detectar toxina ɑ Prevención: - No hay vacunación - Asepsia durante las cirugías - Antibiótico inmediatamente - Cameras hiperbáricas Clostridium tetani - Bacilo grampositivo - Anaerobio- no desarrolla en contacto con oxigeno - Esporulado - Móvil: presencia de flagelo perítricos - Crece en anaerobiosis a 37 C y pH 7,4 – resiste hasta 120 grados - Forma parte de la flora normal - No fermenta hidrato de carbono - Produce una ligera hemolisis - Agar sangre produce una fina película por su movilidad - Presenta antígeno H (flagelades), O (somáticos) y esporulares. - Vacuna: dobre o triple bacteriana EPIDEMIOLOGIA: No es contagiosa Se produce por la exotoxina de la bacteria La toxina se codifica por un plasmido y no toda la bacterias lo portan, no toda bacteria contaminada con la bacteria causará tétanos. Frecuente en adultos de sexo masculino Las esporas se encuentran, en tierra cultivada o cuerpo extraños e infectan por penetración de herida traumática (lo más frecuente), aunque también puede producirse la infección luego de cirurgias o de inyecciones intramusuclares. PATOGENIA: La presencia de esporas (ingresa) en heridas con bajo potencial redox (pro necrosis tisular) permite el pasaje a la forma vegetativa. La bacteria desarrolla en el sitio de infección sin invadir ni dañar los tejidos adyacentes con la consecuencia formación de toxina. La misma se compone de las fracciones, la TETANOLISINA, que es una hemolisina O2 lábil y la TETANOESPAMINA que es la que se inactiva por formaldehido para generar el toxoide que se utiliza en la vacuna antitetánica. 126 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti La toxina ingresa en la unión neuromuscular a la motoneurona alfa y llega al soma por transporte anterógrado, sale al espacio sináptico y bloquea la liberación presináptica de GABA y glicina por la células de Renshaw del asta anterior, esto genera la pérdida de inhibición de las motoneuronas con la consecuente aparición de parálisis de tipo espática. La forma vegetativa produce la exotoxina (tetanoespasmina) CLINICA Tétanos generalizado: 80%, 5 a 15 dias de la incubación va de 5 a 15 dias (a veces de 24 a 48 horas). Luego de este plazo los primeros músculos que se afectan son los maseteros generando trimus (el trismo tetánico es indolor, irreducible y espontáneo). La contracción de los maseteros junto a la de los músculos faciales produce la facies sandónica (mitad superior seria y mitad inferior risa). También hay rigidez de nuca y dificultad en la marcha. En los casos extremos hay contracción dolorosa de los músculos dorsales (opstóno) y rigidez abdominal. Es de notar que el paciente nunca pierde la conciencia por lo que padece un gran sufrimiento. En los casos fatales la muerte llega por agotamiento y falla respiratoria. Tétano localizado: hay compromiso de un grupo muscular determinado. Es poco frecuente y de buena evolución DIAGNÓSTICO: Es clínico y epidemiológico sumado al antecedente de falta de inmunización. El diagnóstico diferencial se plantea con la tetania por hipocalcemia, la rabia, la histeria, y procesos infecciosos periamigdalinos pro producir trismo (flemón periamigdalino) PRONOSTICO: Es malo en los extremos de la vida y en las formas sobreagudas, cuanto más corta la incubación peor el pronostico TRATAMIENTO: Se debe INTERNAR al enfermo en UCI (unidad de cuidaos intensivos) debe permanecer en reposo total, con monitoreo cardiopulmonar y vía aérea permeable. Debe hacerse el DEBRIDAMIENTO quirúrgico de ha HERIDA previa aplicación de ANTITOXINA (gamaglobulina humana) para evitar que se libera más toxina. Para erradicar la bacteria del foco se usan ANTIBIOTICOS como el metronidazol o la clindamicina. El paciente esta baja ARM (asistencia respiratoria mecánica) pero nunca por intubación (debido al riesgo de espasmo laríngeo) sino que se realiza traqueotomía, Vacuna antitetánica: - Esquema de vacunación nacional - Previene vacunado con el toxoide tetánico -vacuna DPT o antitetánica sola – CUADRUPLE O QUÍNTUPLE PENTAVALENTE – DTP - Triple bacteriana con dosis a los 2, 4, 6 y 18 meses con refuerzo a los 6 y 16 años y luego refuerzo cada 10 años como doble bacteriana. - En el caso de una herida se aplica el toxoide sumada a la antitoxina (es decir inmunidad activa y pasiva). - Embarazada vacuna en 5to y 7mo mes de embarazo - Una sola dosis cubre por un ano, si se agrega una segunda dosis al mes y una tercera al año cubre por 10 años, vale aclarar que la antitoxina solo se da en los casos donde hubo herida por lo que las dos últimas dosis es esquema citado solo van con el toxoide. Clostridium botulinum - Es una bacilo gram positivo - Móvil (posee flagelos peritricos) - Esporas ovales - Esporulación se produce a 20⁰ - 25⁰C en medio alcalinos - Crece en medio alcalinos y en anaerobios - Agar sangre produce β-hemolisis - Posse antígenos somáticos (O), de esporas y flagelares (H). 127 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti - Según la toxina que produce hay varios serotipos:A, B, C, Cb, D, E, F, G EPIDEMIOLOGIA: Fuente de intoxicación es la ingestión de conservantes o fiambre caseros Al alcanzarse el potencial redox adecuado la espora germina en el alimento y la forma vegetativa produce exotoxina Ingresa por la vía digestiva y difunde por vía humoral hasta las neuronas motoras. La toxina bloquea la liberación de acetilcolina dando como resultado unas parálisis fláccidas de los músculos esqueléticos. Se encuentra en suelo y sedimentos marino de todo el mundo. Lo brotes se produce por ingestión de conservas caseras. Los alimentos ácidos (tomate y cítricos), rara vez causan botulismo ya que la bacteria no produce la toxina a pH bajo. Los alimentos tienen aspecto y sabor normal. La toxina se absorbe por tubo digestivo (la enzimas digestivas no la destruyen) y la tripsina pancreática aumenta su toxicad. PATOGENIA: - Toxina botulínica: se sintetiza gracias a la presencia de un fago temperado. Se absorbe en duodeno y llega al SNP por via linfática o sangre e inhibe la liberación de Ach en la placa neuromuscular lo que produce PARÁLISIS FLÁCCIDA - Toxina C2: ADP- ribosila la actina intracelular - Toxina C3: ADP- robosila una proteína intracelular que une GTP CLÍNICA: BOTULISMO: 3 TIPOS 1) Por intoxicación alimentaria: ingestión de alimentos contaminados con toxina preformada (frecuentemente son verduras escabechadas o conservas de pescado) a los que no les cambia el sabor. Los síntomas comienzan en 12 a 36 horas luego de la ingestión. Hay astenia, adinamia, laxitud y mareo, disminución de la salivación, sequedad de boca, faringe y lengua que no alivia con la ingesta de líquidos. Luego aparece los síntomas, debidos a la parálisis craneal, diplopía, disartria y disfagia. Esto es seguido de parálisis descendente simétrica y compromiso de músculo respiratorios. Además pude haber retención urinaria y distensión abdominal por el íleo paralitico (obstrucción intestinal por falta de motilidad). NO HAY FIEBRE Y LA CONCIENCIA ESTA CONSERVADA 2) BOTULIMOS DE HERIDA: se produce por el ingreso de espora en heridas. El cuadro es similar al alimentario pero se agrega fiebre por la infección de la herida el periodo de incubación es mayor (10 dias) ya que debe formarse la toxina y no hay síntomas digestivos. 3) Botulismo infantil: entre las 3 y 20 semanas de vida. C. botulinum coloniza el intestino y produce la toxina. La fuente más habitual es la miel de abejas contaminada con esporas por lo que no debe darse en menores 2 años. Las formas clínicas van desde cuadros en que el niño no aumenta de peso hasta formas con parálisis severa. DIAGNÓSTICO: Clínica: parálisis fláccida descendente simétrica, paciente lúcido y afebril y sin trastornos sensoriales. LCR y laboratorio normal. El electromiograma puede revelar alteraciones compatibles con botulismo Detecta presencia de grupos antigénico de la toxina botulínica por ELISA Y RIA en muestra de suero, lavado gástrico, materia fecal y alimentos sospechosos. Diagnóstico diferencial: con miastenia graves y Guillain- barre (parálisis ascendentes, alteraciones sensoriales y disociación albúmico- citológico en LCR) TRATAMIENTO: Suero equino polivalente – anti A, anti B, anti E- que actua solo contra la toxina circulante. Antibióticos como la penicilina para erradicar el clostridium del intestino. Recordar que la aparición de fiebre pueden indicar infección nosocomial. 128 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti PROFILAXIA: Control de alimentos y cuidados de heridas Clostridium difficle - Gran positivo - Toxina A: enterotoxina - Toxina B: citotoxina Clínica: Diarrea asociada al uso de ATB Colitis seudomembranosa Diagnóstico: Búsqueda de toxina: ELISA Cultivo selectivo Endoscopia Tratamiento: Metronidrazol Vancomicina 129 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ACTINOMYCETALES Genero Especie Enfermedad Mycobacterium Actinomyces Arachnia Nocardia Stretomyces Actinomadura Tuberculosis etc Israelli; naeslundii Arachnia Asteroides; brasiliebsus somaliensis madurae Tuberculosis Actinomicosis Actinomicosis Nocardiosis Actinomicetoma Actinomicetoma Actinomicetoma Actinomyces – Arachnia (trimetropima – sulfametaxazol) - Bacilo gram negativo, no esporulado - Microaerófilos – anaeróbios - Flora del tracto digestivo - Oportunista (ruptura de barreras) - Formación de granos • Actinomicosis: Proceso inflamatorio subagudo o crónico, pseudotumoral abscedado y fistulizado de localización: - Cervicofacial - Torácico - Abdominal - Pélvica Diagnóstico: 1) Exame clínico: búsqueda de GRANOS AZUFRE 2) Cultivo – médios anaeróbicos Aspecto clínico y epidemiológicos: • El Actinomicetoma: La lesión: presenta un gran edema, con presencia de absceso o ulceraciones de piel y presencia de fistulas, por la cuales drenan fluidos sanguíneos – purulentos. Tratamiento: - Penicilina - Trimetoprima sulfametoxazol Infecciones por B. anaeróbias: • Abscesso, amigdalino • Grangrena – flictenas • Tétanos – opistótonos 130 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Infecciones por B. Anaeróbias: Características: ✓ Presencia de gás ✓ Cirurgia previa ✓ Tejido necrótico o gangrenoso ✓ Mordedura animal o humana ✓ Proximidade a mucosa ✓ Endocarditis con cult. Aeróbicos negativos ✓ Tratamento com aminoglucósidos ✓ Bacteremia con icterícia ✓ Tromboflebitis séptica ✓ Gránulos sulfurosos ✓ Inf. Asoc. A tumor maligno ✓ Olor fétido Factores de patogenicidad estructural: Adesina: → fibrinas (Bacteroides) → LSP; hemaglutininas (Fnu, Pgi) → Prot. Superficiales (C. difficile) → Proteínas de membrana externa Capsula: → U a lamina, fibronectina, coagregación (se refiere a los microorganismos que forman o formarán la segunda capa sobre aquellos que están previamente adheridos a la película). → U. A mbr. Basal, colágeno → Hemoglutininas Infecciones por B. Anaerobios FACTORES PREDISPONENTES: Alteraciones de piel mucosas colonizadas. Tratamiento con aminoglucósidos Causas de Eh < - 120 mV. Disminución del riesgo sanguíneo local Cuerpos extraños. Sales de calcio. Extracción dental, cirugías Infección aerobia Necrosis por: traumatismo, infección, compuestos químicos (adrenalina, quinina, antinflamatorio), mordeduras. 131 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti LISTERIA CORINEBACTERIUM GARDENELLA Género Listeria Listeria monocytogenes Características: • Bacilos gran positivo • Anaerobia facultativa • Intracelular • No esporulados • Oportunista • Móvil (25⁰) con presencia de flagelos, inmóvil (37⁰) • Forma cocoide agrupada de a pares o cadenas • A veces produce una intensa reacción monocitica en sangre razón por la cual recibe su nombre • Diftoroide (deposición en forma de V o empalizada) • Desarrolla colonias beta hemolíticas en agar sangre • Catalasa positiva (diferencia de las estreptococos) • Oxidada negativa (diferencia de las corinebacterias) • Agar sangre: colonias β- hemolítico • Crece en varias temperaturas y en psicrofila (crece en alimentos congelados, ej salchica, fiabre) Determinantes de patogenicidad: 1) Estructurales: Antígenos flagelar H Antígeno somático O (serotipos) Serotipo 1 (hombre) Serotipo 2 y 3 (raros) Serotipo 4A y 4b (hombre) 2) Metabólico: Listeriolisina (hemolisina) permite la fisiopatogenia dentro de la célula Parasitismo intracelular facultativo (pose afinidade com macrófagos) Epidemiologia: Distribuciónmundial • Pueden colonizar a animales y al hombre • Se encuentra en los suelos, materia fecal en descomposición • Flora normal de los animales • Fuente de infección: ALIMENTOS - Leche pasteurizado, chocolatada – lácteos - Crema de leche - Lechuga - Ensalada de arroz - Pescados - Salame y salschichas - Carne de aves y vaca Afecta inmunodeprimidos, no a cualquier persona Puede causar meningitis, sepsis, corioamnionitis y muerte fetal La enfermedad se produce en embarazadas, recién nacidos, en mayores de 50 años o en inmunodeprimidos. 132 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Fisiopatología: - Ingresa por vía oral, tiempo de incubación varia de 2-6 semanas La bacteria llega al intestino ingresa a la célula (esta bacteria es un patógeno intracelular, lo que justifica porque causa enfermedad en individuos con trastornos de la inmunidad celular). Luego atraviesa la mucosa y se disemina por via linfática hacia la circulación para alcanzar cualquier órgano, sin embargo, tiene tropismo por el SNC y la placenta. De comporta como un parasito intracelular facultativo y puede servir dentro de leucocitos mononucleares. Diseminación principalmente al SNC (meningitis), hígado y placenta. Captados por mácrofagos y células plasmáticas, pero escapa del fagosoma y alcanza el citoplasma por acción de una hemolisina Listerolisina O y dos fosfolipasas C que destruyen la membrana endosómica. En citoplasma se replica, división celular en una hora - Libera la Proteína Acta, que causa ruptura de la célula. Hace replicaciones y aumenta su efecto invasivo. - Diseminación celular a célula Pose sideróforos que le permiten captura hierro de la transferrina y que posee un material endotóxico en la pared celular que estimula anticuerpos, que intervienen en la lisis de eritrocitos. Infecciones y grupos de riesgos Inhibidores de las bombas de protons, ejemplo el omeprazol hace que disminuya la acidez y las bacterias aprovecha para causar la enfermedad Factor de virulencia: Internalinas (superficie de las bacterias) - InIA: adherencia - InIB: sinalización - InIC: pseudópodes Listeriolisina O: forma poros Fosfolipasa C: degrada fosfolipidos ActA: polímeros de actina/ propulsión en el citoplasma Permease: nutrición de la bacteria 133 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Listeriosis: Monocitosis por estimulación de monocitogénesis 1. Pústulas en piel 2. Abscesos localizados 3. Conjuntivitis 4. Aneurisma de aorta bacteriano 5. Uretritis 6. Aborto séptico 7. Septicemia 8. Meningitis 9. Meningoencefalitis 10. Mononucleosis infecciosa Bacteriemia: hipotensión, fiebre, mialgia, escalofríos En la mujer embarazada: la infección predomina en el tercer trimestre de embarazo, debido a la deficiencia inmunocelular que se da en esta etapa. Produce un cuadro llamado “listeriosis asociada a gestación” que se manifiesta como enfermedad febril con mialgias, artralgias, cefalea y lumbalgia. A veces se asocia vómito, diarrea y nauseas. El modo de transmisión es la ingestión de alimentos contaminados, que provoca infección sistémica con compromiso de la placenta (corioamnionitis). En algunos casos se puede producir parto prematuro, muerte fetal o infección precoz en el recién nacido. El diagnostico se hace mediante hemocultivo (el aislamiento por cultivo vaginal o rectal no es diagnóstico). Las mujeres con listeriosis diagnosticada durante la gestación tienen un pronóstico clínico favorable tras la antibioticoterapia o el parto. En neonatal: La infección se produce durante el paso por el canal del parto. La aspiración del liquido amniótico infectado contribuye a la patogenia. La enfermedad se caracteriza por sepsis, dificultad respiratoria, lesión cutánea y el síndrome de granulomatosis infantiseptica, que consiste en abscesos diseminados que afectan el hígado, bazo, suprarrenales y pulmones principalmente. En los bebes con enfermedad neonatal de comienzo tardío es más probable que se desarrolle meningitis que en los de comenzó precoz. Inmunodeprimidos y ancianos: se produce sepsis, meningitis y endocarditis. La infección se da por ingestión de alimentos contaminados Diagnostico: Cultura: Tinción de gran, BG+ en LCR de recién nacido: - Sangre, LCR, o liquido amniótico - Aislamiento en cultivo - Agar triptosa, y pruebas bioquímicas: catalasa+, reducción de nitrato negativo. - Muestra: conjuntiva, garganta, cavidad nasal, SNC, sangre, meconio del feto, fluido amniótico y placenta - Cultivo en agar sangre con enriquecimiento a 4⁰C: se forman colonias betahemolíticas - Identificación bioquímica y serológica. Tratamiento: Sensible a betalactámicos, penicilina, ampicilina + gentamicina Posible resistencia: cefalosporinas, macrolideos, fluroquinolonas, tetraciclinas Profilaxis: evita alimentos crudos y de origen dudosa. L. monosytogenes, E. coli k1 y S. agalactiae, son los principales agentes etiológicos de las meningitis en lactantes de 0 a 2 meses. 134 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Género Corinebacterium Corynebacterium diphteriae - Hay vacuna Características; Gran positivas pertenece al grupo de los actinomicetales Bacilos (irregular) -BGPI No esporulados y no capsulados Inmóviles Aerobio estricto (corinebacterium diphteriae), otros anaerobio facultativo Catalasa positiva Granulación metacromática en las extremidades Pose acido micólico: importante para crescimento y resistência Son pleomórficos: muestran extremos abultados, pareciéndose a una clava, se observan agrupados formando letras: L, V, X o caracteres chinos. Presentan granulaciones metacromáticas, estos son denominados cuerpos de babel – Ernst (rojos) Las veces hemolítica Producen acido láctico y fermentadores de azucares Crecimiento en: - Agar sangre - Agar cisteína – telurito - Agar suero -telurito: colonias negras rodeadas de halo amarronado (el telurito inhibe el desarrollo de otras bacterias y la cisteína es degradada dando un color marrón por acción de la cisteínas) Determinantes de patogenicidad: En general No se disemina y permanece en la puerta de entrada (mucosa y respiratoria y lesiones cutánea) si embargo posee la capacidad de invadir epitelios y producir inflamación local. ➔ Estructurales: Pared celular (rigidez y protección) Composición química: 1) Arabinosa 2) Galactosa 3) Acido meso dia amino piválico (meso-DAP) 4) Acido micólico (igual a Mycobacterium) 135 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti ➔ Metabólico: Exotoxina A- B (lesión en sitio de colonización y citólisis) Toxina sintetizada por acción de un fago. Consta de 3 regiones 1) Región de unión A receptor hístico (factor de crecimiento epidérmico en células cardiacas y nerviosas) 2) Región B de translocación (facilita el acceso a la región A al interior de la célula) 3) Región A de catálisis (inactiva al factor de Elongación 2 del ribosoma, que ensambla residuos peptídicos de la futura proteína) El resultado neto es la interrupción del anabolismo celular y muerte del celular DIFTERIA: Hombre es en único reservorio Toxi- infección, la toxina es importante causador de la enfermedad Se transmite por medio de aerosoles de microgotas respiratorias y por contacto con secreciones respiratorias o exudado de lesiones cutáneas Afecta principalmente a los niños Es de vacunación obligatoria en argentina – y no reduce la probabilidad de que un individuo sea portador, sin embargo el cuadro desarrollado es menos severo. Cutánea y respiratoria. Después del periodo de incubación de 2 a 4 dias se presenta como faringitis o amigdalitis con aparición simultaneade exudado fibrinosopurulento (seudomembranoso) que puede cubrir parte de las amígdalas, úvula, paladar blando y faringe. La membrana blanco grisace que se produce por acción de la toxina sobre el epitelio esta formada por un coagulo de fibrina, eritrocitos. Células epiteliales necrotizadas otros detritus celulares y bacterias. La remoción mecánica de esta seudomembrana revela una submucosa sangrante y edematizada. Corazón puede causa miocarditis y SN polineuritis (debilidad proximal de los miembro) Difteria cutánea: Colonización de piel Liberación de toxina Formación de la pápula Progreso de la pápula a ulcera con psedomembrana Necrosis eventual del tejido Abocado Difteria respiratoria Colonización de la faringe (incubación de 2 a 6 días) – faringitis purulenta Liberación de la Tóxina (faringitis purulenta) Formación de la PSEUDOMEMBRANA (se elimina por expectoración si hay tratamiento) Oclusión respiratoria (fiebre, dificultad respiratoria, arritmia cardiaca, coma) Muerte “cuello de toro’ Forma invasivas: - Endocarditis - Osteomielitis - Artritis - Absceso - Neumonía - Sepse 136 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Formas clínicas CLÁSICA Pseudomembranosa TOXEMIA Síntomas sistémicos MALIGNA “cuello de toro” arritmias INVASIVA Tejido profundo y sepsis ZOONÓTICA Exposición ocupacional o a leche CUTÁNEA Pseudomembranosa en la piel Diagnóstico: Es presuntivo es clínico, se debe pensar en difteria, ante un enfermo con dolor faríngeo, adenopatía, hinchazón cervical y febrícula, sobre todo si estas manifestaciones se acompañan de síntomas generales de impregnación toxica, ronquera, parálisis del velo del paladar y secreción nasal serosanguinolenta hay o no pseudomembranosa visibles. En cuanto se hace el diagnóstico clínico de empezarse en tratamiento con antitoxina diftérica. Diagnostico bacteriológico: tinción de Gram, cultivo en medio Loeffer (agar-suero coagulado), el agregado de telurio de k+ (agar de tinsdale) ayuda a reducir el número de contaminantes. - PCR - Teste de elek - Inmunocromatofrafia - Bacteriología Tratamiento: ➔ Objetivo: neutralización de la toxina y la eliminación de la bacteria ➔ Neutralización: mediante el suero antitoxina diftérica (neutraliza a toxina) – inmunización pasiva Toxoide diftérico (inmunogenicidad) – vacunación inmunización activa Son preparaciones absorbidas de inmunoglobulinas hiperinmunes ➔ Eliminación: penicilina, cefalosporinas, tetraciclinas y macrólidos Prevención - Higiene - Evita hacinamiento - Aislamiento del enfermo respiratorio - Vacunación: 1) Quíntuple pentavalente (difteria, tétano, pertusis (coqueluche), haemophilus influenzae tipo b y hepatites B) 2) Cuadruple: no tiene hepatites 3) Triple bacteriana (difteria, pertusis y tétano) Refuerzo cada 10 años 137 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Gardenerella vaginallis Características: o Pequeño cocobacilo o Gram variable: pared celular laminada o típica o Inmóvil o No capsulada, no formada espora o Anaeróbia facultativa o Afecta preferentemente a las mujeres: vaginosis bacteriana – generalmente no pose inflamación VAGINOSIS: - Alta prevalencia en mujeres de edad gestacional - No hay reacción inflamatoria - Presencia de un flujo vaginal blanco grisáceo, con presencia de pequeñas burbujas y olor fuerte - Asintomática - Está asociada a otras bacterias - Se transmite por actividad sexual Patogenicidad: Pili y actividad hemo aglutinante se adhiere a la células McCoy Disminución o desaparición de la flora lactobacilo = aumento de pH vaginal Lactobacilos = productores de peróxido de hidrogeno Diagnostico: MUESTRA: exudado vaginales: estudio bacterioscopico y en cultivo Se observa: abundantes bacilos cortos, escaso leucocitos Cultivo: agar sangre, colonias pequeña rodeadas de hemolisis beta Pap (papanicolaou) Tratamiento: - metronidazol - clindamicina 138 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti Practico micobactéria Carlos 45 años: Usted trabaja en un centro de salud y recibe a Carlos que consulta por presentar tos de 2 meses de evolución. Es maestro de tercer grado en el colegio del barrio. Casado con Beatriz de 46 años y tiene tres hijos: Juana de 21 años, Pedro de 17 y Ana de 13 años. Todos viven en la misma casa. Está preocupado porque no puede descansar bien. Su hijo Pedro ha comenzado con tos hace unos días. Carlos no toma actualmente ninguna medicación y no presenta otros problemas de salud. 1) Defina los problemas de salud que el paciente presenta en esta consulta. El paciente presenta síntoma característico de enfermedad respiratoria: tos de 2 meses de evolución 2) A parte de los síntomas que Carlos refiere ¿Sobre qué otros datos interrogarían? • Antecedentes familiares – enfermedades, casos de cáncer en la familia. • Hábitos personales - Si es tabaquista, si consume alcohol, si hace uso de algún fármaco. • Domicilio • otros síntomas: pérdida de peso, decaimiento, febrícula, sudoración nocturna, astenia, hemoptisis, dolor torácico, deterioro del sensorio, artritis monoarticular. • Epidemiologia:Si algún compañero estuvo enfermo, o presento síntomas parecidos. 3) ¿Qué estudios complementarios le solicita? Justifique su respuesta en cada caso. ✓ Hemograma: recuento de GR, GB, plaquetas ✓ Hepatograma: para ver cómo se encuentra las transaminasas (TGO, TGP), bilirrubinas, fosfatasa alcalina – porque puede haber tuberculosis extrapulmonar y porque se va administrar drogas que pueden producir trombocitopenia, o puede ser hepatotóxicas ✓ Urea, creatinina – para función renal ✓ Rx de Tórax – muy sensible, pero poco específica ✓ Estudios microbiológicos: Baciloscopia seriada del esputo: ante paciente sintomático es el primer método a emplearse. Es un procedimiento simple, económico y rápido para orientación diagnostica preliminar. Detecta la presencia de las micobacterias. Permite evaluar gravedad, infectividad del paciente y evolución bajo tratamiento. 1 bacilo por cualquier campo – diagnóstico certero, acompañado por Rx de tórax. • Cultivo - Lowenstein-Jensen (15 a 60 días para positivar) • Identificación • Antibiograma – testar las resistencias Prueba de la tuberculina o Mantoux: es una intradermorreacción, donde se agrega de manera subcutánea un derivado proteico modificado (antígeno) y se espera la respuesta celular que se va manifestar como una induración alrededor del lugar donde se inoculo el antígeno. Se lee después de 72h NO diagnostica enfermedad pero evidencia si la persona tuvo contacto/exposición a la micobacteria, siendo reciente o antiguo. 4) ¿Cuáles serían sus objetivos terapéuticos con este paciente? ▪ Hacer tratamiento efectivo del paciente logrando curación y recuperación del paciente, mejorando su calidad de vida. CURAR EL PACIENTE ▪ Realizar tratamiento directamente observado y supervisado, prevenir una recaída a tuberculosis o aún desarrollo de resistencia a drogas. ▪ Prevenir la muerte por tuberculosis activa, o sus secuelas. ▪ Evitar la transmisión de la enfermedad en la población. Segundo paso El resultado de los estudios son los siguientes: 5) La PT es de 11 mm ¿Cómo interpreta este resultado? Prueba de Tuberculina > o igual a 10mm a las 48-72h es considerada positiva (no significa tuberculosis activa). Significa que ha habido una primoinfección actual o pasada con micobacteria. > o igual a 5mm: infección para pacientes HIV+ La prueba me demuestra una respuesta de tipo celular. 6) El resultado de la baciloscopía: positivo ++ ¿Cómo lo interpreta y que conducta tomaría? Baciloscopia positiva ++ significa la presenciade 1 a 10 BAAR/campo en 50 campos microscópicos observado. Indica: Grado de infectividad del paciente. Se usa para hacer seguimiento de un paciente en tratamiento (se espera que baje) 139 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti • En esta prueba se cuenta las micobacterias que se colorean con tinción de Zieel Nelson • Muestra: esputo seriado – 3 muestras por 3 días consecutivos – expectoración profunda. • Es una prueba sencilla, económica, poco sensible pero muy específica. • Operador dependiente • Frente a este resultado debo iniciar el tratamiento empírico. Conducta adoptada 1. Hacer la identificación de especies y sensibilidad a antimicrobianos El cultivo especifico es conveniente solicitar: Solo cuando la baciloscopia es reiteradamente negativa, continúan los síntomas y hay imágenes sospechosas de tuberculosis. Cuando la baciloscopia continua positiva en paciente con 2 meses de tratamiento. Ante sospecha de TBC extrapulmonar. Niños con sospecha, inmunodeprimidos, personas de la salud, personas con antecedentes de tto antituberculoso 2. Internación y aislamiento del paciente para iniciar el tratamiento. 7) ¿Qué conducta terapéutica adopta? ¿Qué conducta toma con la familia de Carlos y con sus contactos en el ámbito escolar? El tratamiento de Carlos se divide en 2 fases: Fase inicial – Uso de 4 drogas combinadas en los 2 primeros meses - Isoniazida, Rifampicina, Pirazinamida y Etambutol. Segunda fase – Uso de 2 drogas por los 4 meses subsecuentes – Isoniacida, Rifampicina. Para la familia de Carlos y sus contactos en ámbito escolar es necesario informar la existencia de la enfermedad y realizar exámenes para descartar enfermedad. Se puede solicitar el teste de PPD, Rx de tórax. Contactos frecuentes – conviven con el paciente por menos 6h por días Contactos íntimos – pernotan con el paciente, viven en la misma casa, conviven más de 8hrs • Solicitar prueba de tuberculina y baciloscopia según el caso (PT > 10mm) • Profilaxis Tercer paso 8) ¿Qué conducta toma con Pedro ante la siguiente situación? Pedro le comenta que tiene tos y sudoración nocturna. No bajó de peso. Presenta una PPD de 10 mm y baciloscopía negativa. Radiografía de tórax: sin hallazgos significativos. Hubo contacto, pero hubo buena respuesta Se hace quimioprofilaxis con Isoniacida por 6 meses y se sugiere repetir la radiografia a los 3 meses. 9) ¿Cómo va a realizar el seguimiento del tratamiento? ¿Cuándo vuelve a solicitar una nueva baciloscopía? Se debe realizar seguimiento clínico del paciente por lo menos hasta 6 meses de tratamiento, con la finalidad de incentivar la toma de medicamentos, evaluar la toxicidad de las drogas, ajusta la medicación y solicitar controles bacteriológicos según corresponda. Se recomienda una nueva baciloscopia al finalizar la primer etapa del tratamiento, o sea, al final del segundo mes, y al completar al tratamiento. Seguimiento del tratamiento 2 mes baciloscopia: posibilidad de recidiva, abandono o fracaso – verificar si el número de cruces va disminuyendo Hepatograma, Hemograma, función renal Cuarto paso Durante el segundo mes de tratamiento, Carlos refiere molestias abdominales y sensación nauseosa. Le solicita transaminasa glutámico oxalacetica (TGO) y transaminasa glutámico pirúvica (TGP). El resultado es el siguiente: TGO: 98 UI/l (VN hasta 35 UI/L); TGP: 110 UI/L (VN hasta 45 UI/l). Resto del laboratorio sin alteraciones. 10) ¿Cómo interpreta estos valores? Los valores encuentran se elevados, TGO y TGP suelen ser indicadores sensibles a daño/afección hepático. 140 Microbiología 2ª ERA Vanessa Catto Gritti 11) ¿Cuál fármaco puede producir esta reacción adversa? Todos los fármacos antituberculosis (Isoniazida, Rifampicina, Pirazinamida) puede presentar como efecto adverso la hepatotoxicidade (nauseas, vómito, hepatitis, alteración de las pruebas de función hepática) 12) ¿Qué conducta toma? Si la elevación de los niveles de las enzimas hepáticas son asintomáticos no hay necesidad de interrumpir o alterar el esquema terapéutico. Pero si los valores enzimáticos sobrepasan en 3 veces los valores normales, si inician síntomas o hay presencia de icteria, se debe interrumpir al tratamiento y derivar el paciente a una unidad de referencia para acompañamiento clínico y laboratorio, adecuando el tratamiento. Hay que rotar la medicación ALGORITMO DIAGNÓSTICO – tuberculosis Muestras: • Lavado broncoalveolar – en niños y pacientes que no puede expectorar • Esputo diagnóstico I. Observación macroscópica: para ver si hay hemoptisis, moco II. Observación microscópica (fresco): sin coloración – observo cantidad de PMN, celulas. Hacer diagnostico diferencial: De manera paralela voy hacer diferentes coloraciones de acuerdo a mi sospecha. Coloración de Gram: cocos positivos – Streptococo neumoniae (agar sangre) bacilos gram negativos – Haemophilus influenza (agar chocolate) Coloración con tinta china: hongos Coloración de Giemsa Coloración de Ziehl Neelsen – para tuberculosis. En caso de Micobacterium tuberculosis III. Cultivo en Lowestern Jeensen: 15 a 60 días IV. Identificación V. Antibiograma: rifampicina, isoniazida, etambutol, streptomicina
