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CONTAGEM DE CÉLULAS

Relatório de prática sobre contagem e viabilidade celular usando câmara de Neubauer e azul de tripan 0,4%. Descreve objetivo, materiais (10 μL azul + 10 μL suspensão de macrófagos, pipeta, lamínula, câmara, microscópio 20x), procedimento, imagens e referências.

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Universidade Estadual do Rio de Janeiro – UERJ
Instituto de Biologia Roberto Alcântara Gomes - IBRAG
Departamento de Histologia e Embriologia
Departamento de Farmacologia e Psicobiologia
Disciplina: Métodos Para o Estudo da Célula
Prática N°: 03 Realizada em: 11/04/2019
Título da Prática: viabilidade ou contagem das células
Introdução
A viabilidade ou contagem das células é realizada através da câmara de Neubauer, que
consiste em determinar um número de células em um volume específico de solução, essa
técnica foi realizada através do microscópio no aumento de 20x.
Nessa prática foi utilizado o corante azul de tripan 0,4 % nas células que estavam quase
morrendo, pois quando as células estão morrendo ou já mortas, suas membranas ficam
danificadas, permitindo a entrada do corante no interior da célula, deixando-as com a
coloração azul. Essa prática foi uma continuação da prática anterior, que foi a de Cultura
de Lavado de Macrófagos Obtido de um Camundongo.
o objetivo foi conhecer a técnica de contagem de célula e viabilidade na câmara de
Neubauer.
Materiais e Métodos
● 10 Microlitros do corante azul tripan 0,4 %
● 10 Microlitros da solução de macrófagos
● pipeta
● câmara de Neubauer
● lamínula
● microscópio
Nessa prática havia pouca quantidade de solução de Macrófogos, por esse motivo foi
utilizado 10 microlitros de azul tripan em 10 microlitros de solução com os macrófagos,
para a preparação da câmara de Neubauer, colocou-se a lamínula sobre a câmara e com
uma pipeta foi coletada a solução é despejada na câmara. Após esse procedimento a
câmara é levada ao microscópio no aumento de 20 vezes.
Resultados
( imagem 1) é a amostra das células tingidas com o corante de azul tripan, na câmara de
Neubauer.
(imagem 2 ) Microscópio utilizado no aumento de 20 vezes para essa técnica.
Conclusão
Com a realização dessa prática, foi possível aprender como efetuar a viabilidade ou
contagem das células por meio da câmara de Neubauer, como diluir o azul de tripan na
solução que continha as células que estavam quase mortas.
Referências bibliográficas
https://kasvi.com.br/como-e-realizada-contagem-de-celulas/
http://www.ufrgs.br/labvir/material/contagem_celulas.pdf
https://kasvi.com.br/como-e-realizada-contagem-de-celulas/
http://www.ufrgs.br/labvir/material/contagem_celulas.pdf

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