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Universidade Estadual do Rio de Janeiro – UERJ Instituto de Biologia Roberto Alcântara Gomes - IBRAG Departamento de Histologia e Embriologia Departamento de Farmacologia e Psicobiologia Disciplina: Métodos Para o Estudo da Célula Prática N°: 03 Realizada em: 11/04/2019 Título da Prática: viabilidade ou contagem das células Introdução A viabilidade ou contagem das células é realizada através da câmara de Neubauer, que consiste em determinar um número de células em um volume específico de solução, essa técnica foi realizada através do microscópio no aumento de 20x. Nessa prática foi utilizado o corante azul de tripan 0,4 % nas células que estavam quase morrendo, pois quando as células estão morrendo ou já mortas, suas membranas ficam danificadas, permitindo a entrada do corante no interior da célula, deixando-as com a coloração azul. Essa prática foi uma continuação da prática anterior, que foi a de Cultura de Lavado de Macrófagos Obtido de um Camundongo. o objetivo foi conhecer a técnica de contagem de célula e viabilidade na câmara de Neubauer. Materiais e Métodos ● 10 Microlitros do corante azul tripan 0,4 % ● 10 Microlitros da solução de macrófagos ● pipeta ● câmara de Neubauer ● lamínula ● microscópio Nessa prática havia pouca quantidade de solução de Macrófogos, por esse motivo foi utilizado 10 microlitros de azul tripan em 10 microlitros de solução com os macrófagos, para a preparação da câmara de Neubauer, colocou-se a lamínula sobre a câmara e com uma pipeta foi coletada a solução é despejada na câmara. Após esse procedimento a câmara é levada ao microscópio no aumento de 20 vezes. Resultados ( imagem 1) é a amostra das células tingidas com o corante de azul tripan, na câmara de Neubauer. (imagem 2 ) Microscópio utilizado no aumento de 20 vezes para essa técnica. Conclusão Com a realização dessa prática, foi possível aprender como efetuar a viabilidade ou contagem das células por meio da câmara de Neubauer, como diluir o azul de tripan na solução que continha as células que estavam quase mortas. Referências bibliográficas https://kasvi.com.br/como-e-realizada-contagem-de-celulas/ http://www.ufrgs.br/labvir/material/contagem_celulas.pdf https://kasvi.com.br/como-e-realizada-contagem-de-celulas/ http://www.ufrgs.br/labvir/material/contagem_celulas.pdf