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Beta-HCG ● Os resultados dos testes imunológicos devem estar associados a exames clínicos ● IgA secretora ● IgM: pentamérica ● Detecção da gonadotrofina coriônica humana em testes imunológicos, na metodologia a gonadotrofina atua como um antígeno ● Sensibilidade: quanto maior a capacidade de detectar pequenas concentrações, mais sensível é o teste Testes Imunológicos ● Testes de precipitação- não são muito sensíveis, pois é necessário que haja muitos antígenos e anticorpos - Meio líquido: o Ag e o Ac se ligam. Quando há poucos Ag e Ac ligados o produto continua sendo solúvel. Com o aumento da quantidade de Ag e Ac o peso molecular aumenta e o complexo antígeno-anticorpo deixa de ser solúvel e precipita - Meio gelificado 1. Imunodifusão radial simples: faz-se um furo no meio da placa, o antígeno do meio da placa se espalha pelo gel e se liga ao anticorpo formando halos 2. Imunodifusão radial dupla: gel sem anticorpo incorporado. Em um orifício coloca o anticorpo e no outro o antígeno, ambos começam a se encontrar e formam linhas de precipitação 3. Imunoeletroforese: separação de ag e ac ● Aglutinação: 500X menos anticorpos que a precipitação - Forma agregados visíveis - O ag é aderido em uma partícula grande e o ac se liga - direta: o Ac já está naturalmente na superfície da partícula a ser aglutinada - passiva/indireta: o ag ou ac é colocado artificialmente em uma partícula específica - Beta-HCG: quando aglutina o resultado é positivo - Ignição da aglutinação p/ B-HCG: quando não aglutina é positivo - Látex aglutinação (forma uma “areia” no resultado positivo) - Hemaglutinação (“tapete”: positivo, “botão”: negativo) - VDRL: floculação- complexo de cardiolipina e colesterol Diferença da precipitação: a aglutinação se liga na bactéria (por ex) interia, na precipitação a ligação é só no Ag ● Imunofluorescência - Ac conjugados e fluorocromos - fluorescência direta caracteriza ag- fluorocromo ligado a anticorpo anti-ag - fluorescência indireta caracteriza ac ● ELISA - Resposta: formação de cor - Reação ag-ac monitorada pela medida da atividade enzimática - Um dos reativos está imobilizado numa fase sólida, enquanto o outro reagente está ligado a uma enzima - quando mais intensa a cor, mais anticorpo - possibilidade de definir a classe do anticorpo que faz a positividade ● Radioimunoensaio - Semelhante ao ELISA. A diferença é que a sensibilidade é maior - Resposta: emissão de radiação - Custo alto, vida média dos reagentes, risco operacional ● Quimiluminescência - Baseados na emissão de luz produzida em algumas reações químicas de oxidação - Pode haver distinção de IgM ou IgG ● Ensaios Imunocromatográficos - Detecção de Ag ou Ac- no teste de gravidez o Ac é marcado HCG ● A porção beta confere especialidade imunológica (a porção alfa é encontrada em outros hormônios) ● Produzida pelas células do sinciciotrofoblasto da placenta durante a gravidez ● Estimula a produção de progesterona e estrógeno pelo corpo lúteo ● Permitirá a manutenção da receptividade uterina ● Marcador tumoral ● A partir do 7º-11º dia após a ovulação o HGC aumenta ● Pico de concentração entre 8-10 semana após último ciclo menstrual