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Monitoria de Histologia e Embriologia Geral Veterinária ➭ESTUDO DIRIGIDO REFERENTE AO 1º NPC ► INTRODUÇÃO À HISTOLOGIA/ PROCESSAMENTO HISTOLÓGICO 1. Discuta sobre a afinidade tintorial de uma célula. (Exemplifique: hepatócito ou neurônio, por exemplo) As estruturas celulares podem possuir caráter ácido ou básico. Quando uma estrutura tem caráter básico, dizemos que ela é acidófila. Uma estrutura de caráter ácido é chamada de basófila. No processamento histológico, o corante usado para estruturas basófilas é a hematoxilina e o que se usa para estruturas acidófilas é chamado de eosina. O núcleo do hepatócito possui caráter ácido, portanto ele é basófilo e se cora com hematoxilina. Já o seu citoplasma possui caráter básico, sendo ele acidófilo e corado com eosina. O neurônio é um exemplo de célula que possui tanto o citoplasma quanto o núcleo basófilos, corados com hematoxilina. 2. Descreva sucintamente as etapas do processamento histológico, explicando a importância de cada uma. (Ex. descalcificação – no caso de tecidos mineralizados, é necessária para evitar que a lâmina do micrótomo seja danificada e desse modo ocorram falhas nos tecidos). Coleta: remover amostras de tecido para realizar análise; Clivagem: corte macroscópico da amostra para ser armazenado em cassetes; Fixação: uso do formol,por exemplo, para interromper o metabolismo e preservar o tecido estudado, importante para evitar a digestão do tecido; Descalcificação: uso do EDTA para retirar as porções minerais do tecido, importante para não danificar a lâmina do micrótomo e evitar artefatos; Desidratação: uso de diferentes concentrações de álcool para retirar a água dos tecidos, importante pois em etapas posteriores serão usadas substâncias não miscíveis em água; Clarificação: uso do xilol para retirar o álcool do tecido, deixando o tecido mais claro, importante para permitir a adição da parafina; Impregnação: substituição do xilol pela parafina, importante para deixar o tecido mais rígido para o corte no micrótomo; Inclusão: o tecido é colocado em moldes de parafina líquida, também importante para o corte no micrótomo; Microtomia: uso do micrótomo para fazer cortes extremamente finos, importante para a observação no microscópio; Banho-maria e pescagem: banho de água quente importante para deixar o corte do tecido esticado, usa-se clara de ovo para prender o corte na lâmina; Coloração: uso de corantes como o H. E no tecido, importante para melhorar a visualização ao microscópio; Montagem: coloca-se uma gota de Bálsamo do Canadá no meio da lâmina, sobre o tecido, e em seguida a reveste com uma lamínula, importante para proteger o corte. 3. Diferencie a microscopia óptica da microscopia eletrônica. Cite o poder de resolução de cada uma. Na óptica, o material analisado pode ser vivo ou inerte, a imagem é gerada por meio de feixes luminosos e é colorida. Na eletrônica, o material é sempre inerte, a imagem é gerada pela passagem de feixes de elétrons e em preto e branco. A resolução da m. óptica é de 0,2 μm. A da m. eletrônica é de 0,1 nm. ► HIPÓFISE 1. Desenhe e descreva histologicamente a hipófise. Cite a sua localização, os tecidos, identifique as células que a compõe e as suas respectivas funções. Explique a relação desse órgão com a produção hormonal. ► SISTEMA REPRODUTOR MASCULINO 1. Quais são os componentes do sistema reprodutor masculino? Quais as funções desse sistema? São os testículos, os ductos genitais, as glândulas acessórias e o pênis. Tem como funções a produção de espermatozóides, a secreção de hormônios masculinos e, além disso,facilita a fertilização através da cópula. 2. Qual a composição histológica do testículo e, mais especificamente, dos túbulos seminíferos? Relacione-a com as funções do órgão. O testículo é revestido pela túnica albugínea que é formada por tecido conjuntivo denso. Enovelados dentro do testículo estão os túbulos seminíferos que contêm o epitélio germinativo. Da porção mais externa do túbulo seminífero para a mais interna: células mióides, de Sertoli, espermatogônias, espermatócitos (I e II), espermátides e espermatozóides. Entre os túbulos seminíferos, há o insterstício onde estão as células de Leydig que produzem a testosterona. É no testículo que ocorre a formação dos gametas masculinos (espermatozóides), a partir das células da linhagem espermatogênica, e a produção do hormônio masculino (testosterona), assim o epitélio germinativo sofre divisões para a formação e diferenciação em espermatozóides. 3. Descreva o que é a espermatogênese e a espermiogênese. Espermatogênese: produção de espermatozóides ( processo que inclui divisão celular por mitose e meiose seguida pela espermiogênese). Espermiogênese: diferenciação das espermátides em espermatozóides (inclui formação do acrossomo, condensação e alongamento do núcleo, desenvolvimento do flagelo, perda da maior parte do citoplasma.) *Acrossomo - contém enzimas hidrolíticas como hialuronidades, neuraminidase, fosfatase ácida e protease; assim assemelha-se a um lisossomo. 4. Quais fatores influenciam a espermatogênese? Os hormônios são responsáveis pela espermatogênese, dentre eles está a testosterona que é secretada pelas células de Leydig e é essencial ao crescimento e a divisão das células germinativas na formação dos espermatozoides. O FSH é responsável por estimular a célula de Sertoli, já o LH tem como função estimular as células de Leydig; Estrogênios: são formados a partir das testosteronas pelas células de Sertori. Fica disponível para o amadurecimento do espermatozóide. Hormônio do crescimento: é necessário para controlar as funções metabólicas de fundo dos testículos. Promove a divisão inicial das próprias espermatogônias. Outro fator é a temperatura. 5. O que é a barreira testicular? Qual sua importância? A barreira hematotesticular é formada pelas células de Sertoli. Essa barreira protege as células da linhagem espermatogênica de substâncias do sangue, agentes nocivos e de reconhecimento imunológico pelos linfócitos. 6. Como ocorre o controle hipotalâmico-hipofisário no sistema reprodutor masculino? O hipotálamo é o centro regulador do organismo e a conexão entre sistema nervoso e sistema endócrino. Ele produz os hormônios que irão regular a atuação da hipófise e esta, por sua vez, estimulará as atividades nas gônadas. O hipotálamo produz o hormônio liberador das gonadotropinas que estimula a adeno-hipófise a produzir FSH e LH que irão atuar nos testículos. O LH (hormônio luteinizante) estimula as células de Leydig a produzir testosterona. O FSH (hormônio folículo estimulante) estimula as células de Sertoli a produzir e secretar a proteína ligante de andrógeno que faz o transporte da testosterona, essa proteína faz com que a testosterona se concentre nos túbulos seminíferos, onde é necessária para estimular a espermatogênese. 7. Qual a morfologia, a localização e a função (ou funções) das Células mióides, de Sertoli e as de Leydig? Sertoli: células piramidais que se estendem da lâmina basal ao lúmen do túbulo seminífero, elas formam a barreira hematotesticular e fagocitam partes celulares em excesso; Leydig: são poligonais, ficam no espaço intertubular, produzem hormônios andrógenos; Mióides: presentes na túnica própria do túbulo seminífero, realizam os movimentos contráteis que movem os espermatozóides. 8. Qual a importância do tecido intersticial para as células dos túbulos seminíferos? É importante para a nutrição das células dos túbulos seminíferos, para o transporte de hormônios e para a produção de andrógenos. 9. Qual o caminho percorrido pelos espermatozóides? Como se forma o sêmen? Condução dos espermatozoides do testículo até a uretra pélvica ou via espermática. Túbulos seminíferos ➭ túbulos retos ➭ rede testicular ➭ ductos eferentes ➭ ducto do epidídimo ➭ ducto deferente ➭ desemboca no colículo seminal na uretra pélvica. O sêmen é formado pela união das secreções dos ductos genitais e das secreções produzidas pelas glândulas genitais acessórias ( vesiculares, próstata e bulbouretrais)junto com os espermatozóides. 10. Sobre as glândulas acessórias, cite-as e escreva quais suas funções. São elas, vesículas seminais, próstata e glândulas bulbouretrais. São produtoras de secreções essenciais para a função reprodutiva do macho. As vesículas seminais produzem uma secreção amarelada que contém substâncias importantes para os espermatozóides, como frutose, citrato, inositol, prostaglandinas e várias proteínas. Carboidratos produzidos pelas glândulas acessórias do sistema reprodutor masculino e secretados no líquido seminal constituem fonte energética para a motilidade dos espermatozoides. 11. Faça um desenho histológico do testículo, identificando todas as células que o constitui. ► SISTEMA REPRODUTOR FEMININO 1. Quais são os componentes do sistema reprodutor feminino? Quais as funções desse sistema? É constituído pelos ovários, pelas tubas uterinas, pelo útero, pela vagina e pela genitália externa. Tem como funções, produzir gametas femininos (ovócitos), manter um ovócito fertilizado ao longo das fases embrionária e fetal até o nascimento e também é responsável pela a produção de hormônios sexuais que controlam os órgãos do aparelho reprodutor e têm influência sobre outros órgãos. 2. Discorra resumidamente sobre o que é a menarca e sobre a menopausa. A menarca marca o início da atividade hormonal da fêmea, no qual o sistema reprodutor sofre modificações cíclicas em sua estrutura e em sua atividade funcional, controladas por mecanismos neuro- humorais. Já na menopausa, é o período em que as modificações cíclicas tornam-se irregulares e acabam cessando. 3. Desenhe os diferentes estágios dos folículos ovarianos, apontando todos os componentes dos mesmos. 4. Como o ovário é constituído histologicamente? Por que o ovário é considerado uma glândula mista? A sua superfície é coberta por um epitélio pavimentoso ou cúbico simples, o epitélio germinativo. Sob o epitélio germinativo, há uma camada de tecido conjuntivo denso, a túnica albugínea, que é responsável pela cor esbranquiçada do ovário. Abaixo da túnica albugínea, há uma região chamada cortical, na qual predominam os folículos ovarianos. A parte mais interna do ovário é a região medular, que contém tecido conjuntivo frouxo com um rico leito vascular. O limite entre a região cortical e a medular não é muito distinto. É considerado uma glândula mista pois possui função endócrina, produção e secreção de estrógeno pelas células da teca interna e produção e secreção de progesterona pelo corpo lúteo (glândula endócrina temporária). Mas também possui função exócrina, pois as células da granulosa produzem ácido hialurônico e a liberação do ovócito. 5. Discorra sobre o que é a atresia folicular e como reconhecer que um folículo sofreu este processo. É um processo de involução, por meio do qual a maioria das células foliculares e oócitos morrem e são eliminados por células fagocíticas. É importante salientar que folículos em qualquer fase de crescimento podem sofrer atresia. Características que ajudam a identificar: sinais de morte das células da granulosa, separação das células da camada granulosa de modo que fiquem soltas no líquido folicular, morte do ovócito vista pela alteração do núcleo e do citoplasma e o pregueamento da zona pelúcida. 6. Relacione o sistema reprodutor feminino com a glândula hipófise e o hipotálamo. O hipotálamo é o centro regulador do organismo e a conexão entre sistema nervoso e sistema endócrino. Ele produz os hormônios que irão regular a atuação da hipófise e esta, por sua vez, estimulará as atividades nas gônadas. O hipotálamo produz o hormônio liberador das gonadotropinas que estimula a adeno-hipófise a produzir FSH e LH que irão atuar nos ovários. O FSH (hormônio folículo estimulante) estimula o desenvolvimento dos folículos ovarianos e a síntese de estrógeno pelas células da granulosa. Já o LH (hormônio luteinizante) induz a ovulação e transforma a camada granulosa e a teca interna em uma glândula endócrina, o corpo lúteo. Este é formado após a liberação do ovócito, produz e secreta progesterona, hormônio esse que irá manter a gravidez. 7. O que é a Ovulação? Como ocorre? Consiste na ruptura de parte da parede do folículo ovariano maduro, com a liberação do ovócito secundário, juntamente com a zona pelúcida e a corona radiata, que será capturado pela extremidade dilatada da tuba uterina. Ocorre devido ao pico de LH estimulado pela grande quantidade de estrógeno na corrente sanguínea. 8. O que é o corpo lúteo? O que ocorre com o corpo lúteo no período menstrual e no período de gravidez? É uma glândula endócrina temporária formada após a ovulação, no qual houve uma reorganização das células da granulosa e as células da teca interna. O corpo lúteo de menstruação é programado para secretar durante 10 a 12 dias. Caso não aconteça uma gravidez, as células se degeneram. A secreção decrescente de progesterona provoca a menstruação. Os restos desses corpos são fagocitados e os fibroblastos invadem a área produzindo uma cicatriz chamada corpo albicans. Já se caso ocorra uma gravidez, o embrião envia um sinal para o corpo lúteo, cujas células sintetizam gonadotropina (HCG), que resgata o corpo lúteo da degeneração, causa crescimento adicional e estimula a secreção de progesterona por pelo menos metade da gravidez. Quando se degenera, forma o corpo albicans bem maior que o da menstruação. A progesterona, além de manter a mucosa uterina, também estimula a secreção das glândulas uterinas, o que provavelmente é importante para a nutrição do embrião antes de a placenta se tomar funcional. 9. O que são as tubas uterinas? São dois tubos musculares de grande mobilidade que transportam os óvulos que romperam a superfície do ovário até a cavidade do útero. Uma de suas extremidades, o infundíbulo abre-se próximo ao ovário (ampola) e tem prolongamentos em forma de franjas, chamadas fímbrias, e a outra extremidade , a intramural, atravessa a parede do útero e se abre no interior dele. 10. O útero passa por várias fases no ciclo menstrual. Quais são as fases? O que acontece com o endométrio em cada fase? Faça uma relação hormonal. Depois da puberdade, os hormônios ovarianos estimulados pela adeno-hipófise fazem com que o endométrio passe por modificações estruturais cíclicas durante o ciclo menstrual. A menstruação consiste na descamação do endométrio, após esta vem a fase proliferativa (estrogênica). O estógeno induz a proliferação das células do endométrio e o desenvolvimento das células epiteliais das glândulas endometriais (que nesta fase são retilíneas). Depois vem a fase luteínica, que ocorre após a ovulação e é decorrente da ação de progesterona produzida pelo corpo lúteo. A progesterona continua estimulando as células epiteliais das glândulas endometriais que já tinham se desenvolvido na fase proliferativa. Uma caracterítica morfológica importante é que as glândulas se tornam tortuosas nesta fase. 11. O que é a placenta? Ela pode ser considerada um órgão endócrino? Discorra. É um órgão temporário que serve como local de trocas fisiológicas entre a mãe e o embrião/feto. Consiste em uma parte fetal (cório) e uma materna (desídua basal). Sim, pois durante a vida intrauterina do animal, a placenta tem também o papel de produzir hormônios como gonadotropina coriônica (HCG), tireotropina coriônica, estrógenos e progesterona. ► EMBRIOLOGIA GERAL 1. Desenhe as etapas do desenvolvimento embrionário, apontando os componentes e as características de cada uma. Mórula - primeiro estágio do desenvolvimento embrionário, ocorrem divisões mitóticas, surgimento dos blastômeros e há presença da zona pelúcia. Blástula - é chamado de disco embrionário bilaminar, pois há a divisão em epiblasto (que formará o ectoderma) e o hipoblasto (endoderma). Ocorre o desaparecimento da zona pelúcida, formação do blastocisto e implantação do embrião. Gástrula - disco trilaminar (mesoderma), início da morfonogênese, surgimento da linha primitiva, do nó primitivo e da notocorda. Nêurula - formação da placa neural e pregas neurais, tuboneural (junção das pregas), crista neural e formação dos somitos. 2. Que estrutura do embrião é responsável pela nidação? Descreva como ocorre a implantação do embrião no útero. O sinciotrofoblasto. A zona pelúcida vai desaparecer e o blastocisto irá crescer e vai se ligar ao epitélio do endométrio. Logo em seguida, o sinciotrofoblasto vai invadir os tecidos endometriais e vai implantar o embrião no endométrio. 3. Cite um órgão formado a partir de cada folheto germinativo: - Ectoderma: hipófise - Endoderma: pâncreas - Mesoderma: ossos ► TECIDO EPITELIAL 1. Defina tecido epitelial e cite suas principais funções. Tem como características alta densidade de células, justaposição destas, pouca matriz extracelular, avascularização e junções intercelulares. Podem conter especializações de membrana como cílios, estereocílios e microvilos. O tecido epitelial ainda possui uma membrana basal, formada pela lâmina basal e fibras reticulares. Pode ser de dois tipos: epitélio de revestimento, que reveste superfícies, ou epitélio glandular,que realiza a secreção de substâncias. Oferece proteção, revestimento de superfícies (internas e externas), secreção, absorção e sensibilidade (ex. botões gustativos). 2. Sabendo que o glicocálix é uma camada frouxa de moléculas glicoprotéicas entrelaçadas situadas externamente à membrana plasmática das células epiteliais, descreva quais são suas funções. Ele oferece proteção contra lesões de natureza química e mecânica, é importante para a retenção de nutrientes e enzimas,além de ser essencial no reconhecimento e adesão entre as células. 3. Diferencie a lâmina própria da membrana basal. Lâmina própria é a camada de tecido conjuntivo localizada abaixo da membrana basal que serve de apoio para o tecido epitelial. A membrana basal é formada pela junção da lâmina basal (formada principalmente por colágeno tipo IV, laminina e proteoglicanas) e de fibras reticulares. 4. O tecido epitelial é constituído, principalmente, de células que interagem entre elas por meio de junções celulares. Desenhe células vizinhas e aponte cada junção celular, citando suas devidas funções. Zona de oclusão ou junção oclusiva: Tem como função vedar o espaço entre as células, impedindo o movimento de substâncias do ápice para a base das células como da base para o ápice. Zona de adesão ou junção aderente: Os filamentos de actina unem as células vizinhas, dando resistência ao atrito. Desmossomo: É uma estrutura em forma de disco sobreposta a uma estrutura identica presente na superfície da célula adjacente,possuindo a participação de filamentos de caderinas. É responsável por promover uma adesão bastante firme entre as células. Hemidesmossomo: Se assemelha ao desmossomo, fixando a célula epitelial à lâmina basal. Contudo, na placa de ancoragem dos hemidesmossomos, as placas são formadas por proteínas da família integrina. Junção comunicante ou junção gap: São formadas de conexinas e podem existir em qualquer local das membranas laterais das células epiteliais. Permitem o intercâmbio de moléculas entre as células. 5. Sabendo que algumas células epiteliais possuem modificações com a função de aumentar sua superfície ou mover partículas, cite quais são as estruturas especializadas que estão presentes na superfície livre das células epiteliais e em quais tipos de epitélio (órgão ou estrutura) elas se encontram. Microvilos: São pequenas projeções do citoplasma, de número variado, que têm como função auxiliar a absorção. São encontrados em células epiteliais do intestino delgado e dos túbulos proximais dos rins. Estereocílios: São prolongamentos longos e imóveis que aumentam a área de superfície da célula, facilitando o movimento de moléculas para dentro e para fora da célula. São comuns em células do revestimento epitelial do epidídimo e do ducto deferente. Cílios e flagelos: São prolongamentos longos dotados de motilidade. Possui dois microtúbulos centrais. Permitem uma corrente de fluído ou de partículas sejam impelidas em uma direção ao longo da superfície do epitélio. As células da traqueia são ciliadas e a única célula com flagelo é o espermatozóide. 6. Cite todos os tipos de tecidos epiteliais de revestimento. Exemplifique local de ocorrência de cada um. Epitélio pavimentoso simples: no endotélio dos vasos sanguíneos e nos alvéolos pulmonares. Epitélio cúbico simples: nos túbulos renais e no revestimento externo do ovário. Epitélio cúbico simples com microvilos: no túbulo contorcido proximal dos rins. Epitélio cilíndrico simples: no estômago glandular. Epitélio cilíndrico simples com microvilos: no intestino delgado. Epitélio pseudoestratificado cilíndrico com estereocílios : no epidídimo. Epitélio pseudoestratificado cilíndrico ciliado: na traqueia. Epitélio estratificado cúbico: no folículo ovariano primário multilaminar e nos ductos das glândulas sudoríparas. Epitélio estratificado pavimentoso queratinizado: na epiderme (pele) Epitélio estratificado pavimentoso não-queratinizado: no esôfago Epitélio estratificado cilíndrico: na uretra e na conjuntiva ocular. Epitélio de transição: no trato urinário, bexiga. 7. O que é metaplasia? Cite um exemplo deste processo. Em casos de situação atípica, um tipo de tecido epitelial pode se transformar em outro. Esse processo, quando reversível, é chamado de metaplasia. A metaplasia é uma modificação benigna e não se restringe apenas a tecidos epiteliais, podendo também ocorrer em tecidos conjuntivos. Tabagistas que fumam grandes quantidades de cigarros, o epitélio pseudoestratificado cilíndrico ciliado que reveste seus brônquios pode transformar-se em um epitélio estratificado pavimentoso. 8. Quais as características, as funções e as origens embrionária e tecidual do epitélio glandular? Ele é constituído por células que apresentam como atividade característica a produção e o armazenamento de secreções. Esse epitélio forma órgãos denominados glândulas que sintetizam, armazenam e secretam proteínas, lipídios ou complexo de carboidratos e proteínas. Ele origina-se dos três folhetos germinativos, o ectoderma, mesoderma e endoderma, ocorre uma proliferação dos epitélios de revestimento com invasão no tecido conjuntivo subjacente. 9. Classifique e defina todos os tipos de glândulas. Dê exemplos. Glândulas endócrinas - liberam suas secreções diretamente no sangue e não possuem contato com o epitélio de revestimento que as originou. Podem ser cordonal (hipófise) ou vesicular (tireóide). Glândulas exócrinas - liberam a secreção através de ductos, possuem contato com o epitélio de revestimento que as originou. Podem ser unicelular (célula caliciforme) ou multicelular (glândula sebácea,por exemplo). Podem ser holócrina (sebácea), merócrina (algumas sudoríparas, lacrimal) ou apócrina (glândula mamária). Além disso, podem ser tubulosas (sudoríparas - tubulosa enovelada simples), acinosas ou alveolares (glândulas sebáceas) ou túbulo-alveolar (glándula mamária e submandibular). Podem também apresentar ductos simples (ex. sudoríparas) ou compostos (ex. glândula mamária). 10. Qual o componente e o mecanismo das secreções liberadas pelas glândulas abaixo? - Sebáceas: Conteúdo lipídico. Holócrina (a secreção é liberada juntamente com toda a célula). - Sudoríparas: Conteúdo aquoso com sais minerais. Apócrina (a secreção é liberada com parte do citoplasma apical) ou merócrina (somente a secreção é liberada, sem perda de outro material celular). - Submandibulares: Conteúdo glicoproteíco e protéíco. Ácino mucoso, ácino seroso e ácino misto. - Tireóide: Conteúdo coloidal/ tireoglobulina e iodo. Glândula endócrina vesicular. - Pâncreas: Conteúdo proteíco e polipeptídico. Ácinos pancreáticos (serosa) e Ilhotas de Langerhans (hormônios insulina e glucagon). - Célula caliciforme: Conteúdo mucígeno (muco). Merócrina (somente a secreção é liberada, sem perda de outro material celular). - Glândula mamária: Leite (constituído por carboidrato, proteína e lipídio). Apócrina (a secreção é liberada com parte do citoplasma apical). 11. O que sãocélulas mioepiteliais? São células epiteliais com características de fibras musculares, pois possuem uma grande quantidade de actina em sua constituição. Sua função é se contrair em volta da porção secretora ou condutora da glândula e assim ajudar a impelir os produtos de secreção para o exterior.