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Questões sobre replicação do DNA 1) O que significa primer, e porque os primers são necessários para a replicação do DNA? Primer é um oligonucleotideo de RNA que permite o inicio da replicação da fita 3’ – 5’, ela é sintetizada pela primase, e é importante pois, a DNA polimerase precisa de uma extremidade 3’ livre para iniciar a replicação, o que é possibilitado pelo primer. 2) O que são helicases e topoisomerases? Helicase é a enzima que promove a abertura da dupla-helice do DNA, o tranformando em duas fitas simples permitindo que as fitas sejam replicadas. A topoisomerase é uma enzima que promove a quebra de algumas ligações no dna, fazendo com que a molecula não quebre e nem embole. 3) Por que a síntese de DNA é contínua em um filamento e descontínua no filamento oposto? A DNAPolimerase precisa de uma extremidade 3’ livre, e como a fita de baixo da molecula é em sentido 3’- 5’ a DNApol não consegue sintetizar, para isso é produzido os primers, introduzindo a extremidade 3’ e permitido a sintese. Sendo assim a fita de “baixo” sempre precisara de varios primers para continuar a sua replicação, enquanto a fita de “cima”, é continua, não precisando de iniciadores. Ao decorrer do processo esses primers são retirados, substituídos por sequências de nucleotídeos completamentares e fixadas com a enzima Ligase. 4) A taxa de replicação em bactérias corresponde a 450 nucleotídeos por segundo, enquanto em mamíferos é de 45 nucleotídeos. Quais as conclusões que podemos retirar desta informação? Em mamíferos a informação genética encontra-se compactada com muitas proteínas, o que não acontece com as bactérias, na qual seu cromossomo não é compactado, tornando então mais rápido sua replicação. 5) O isótopo radioativo do nitrogênio N15 pode ser usado para marcar radioativamente compostos que possuam nitrogênio na sua composição, como é o caso dos ácidos nucleicos. Uma cultura de Escherichia coli cresceu em um meio contendo exclusivamente N15 até que todo o DNA estivesse marcado. Então transferiu-se a colônia para um meio contendo nitrogênio comum N14 e deixou-se que crescesse por, exatamente, duas gerações. Fazendo-se então uma avaliação do DNA, quanto deveria ser encontrado contendo: a) Somente N15? 0% b) Híbrido (uma fita N14 e outra N15)? 50% c) Somente N14? 50% 6) Faça um esquema mostrando as diferenças entre a replicação conservativa, semiconservativa e dispersiva: