Prévia do material em texto
Bibliografia base: TORTORA, G.J., FUNKE, B.R., CASE, C.L. Microbiologia. Porto Alegre: Grupo A, 2017. Profa Dra Adriana Fiorini Aula 01 Características gerais dos fungos e métodos de identificação Universidade Federal do Paraná (UFPR) – Setor Palotina Disciplina: Microbiologia Geral Módulo: Micologia Das mais de 100 mil espécies conhecidas de fungos, apenas cerca de 200 são patogênicas aos seres humanos e aos animais. Estudo dos fungos: Micologia Classificação dos fungos - filogenia Ecossistemas terrestres e aquáticos, vivendo saprobicamente ou parasitando algas, anfíbios, outros fungos, animais microscópicos e, plantas superiores Todos os fungos que produzem zigósporos formados em zigosporângio de parede espessa, proveniente da conjugação de duas hifas haplóides Produzem seus esporos (ascósporos) em esporângios específicos chamados ascos. Pertencem inclusive a maioria das formas anamórficas, leveduras e formas liquenizadas. Este grupo engloba também a maioria dos fungos patogênicos para as plantas Engloba as espécies que produzem esporos numa estrutura em forma de bastão chamada basídio e também são chamados de basidiomicetos, o micélio é septado, dividido por paredes celulares, mas os septos ou paredes transversais são perfurados. Todos os representantes dessa divisão se reproduzem assexuadamente formando Glomerosporos como estruturas reprodutivas. Caracterizam-se por formar associação com raízes da maioria das famílias de plantas. Cadeia alimentar: decompõem a matéria vegetal morta, reciclando elementos vitais. Decompõem a parede celular vegetal (produzem enzimas extracelulares, como as celulases) Micorrizas: simbioses com plantas Algumas formigas cultivam fungos para quebrar a celulose e a lignina presentes nas plantas. Consumo (cogumelos) e na produção de alimentos (pão e ácido cítrico) e fármacos (álcool e penicilina) Importância benéfica dos fungos Principais itens para identificação de espécies fúngicas microscópicas Exame dos conídios Presença de um esporângio - zigomiceto. Características de hifas vegetativas (septadas, cenocíticas, hialinas ou dematiácias (pigmentadas) Características coloniais Reações bioquímicas Dimorfismo (alguns crescem como bolores quando cultivados em ágar dextrose Sabouraud a 25oC e como leveduras quando cultivadas em meios enriquecidos a 37oC. Antígenos produzidos por fungos dimórficos podem ser usados para identificação em testes imunológicos. Sondas específicas de ácidos nucleicos estão sendo desenvolvidas para identificação rápida e confiável de fungos dimórficos. Aspergillus spp. Penicillium spp. Estruturas vegetativas dos fungos microscópicos As colônias dos fungos são descritas como estruturas vegetativas porque são compostas de células envolvidas no catabolismo e no crescimento. Aspecto das colônias dos fungos filamentosos colônias algodonosas: aquelas que se assemelham com algodão, colônias furfuráceas: aquelas que lembram um punhado de substância farinácea espalhada em uma superfície, colônias penugentas: aquelas nas quais se evidenciam estruturas que lembram penas de aves dispersas na superfície do meio, colônias arenosas ou pulverulentas: aquelas que lembram areia de praia, colônias veludosas: aquelas que apresentam o aspecto de tecido aveludado, colônias membranosas: aquelas que são bem aderidas à superfície do meio de cultura, recobrindo-o como uma película, colônias glabrosas: aquelas com aspecto compacto, coriáceo, podendo ter superfície lisa ou irregular e sempre com ausência de filamento, ou seja, não algodonosa. Aspecto das colônias dos fungos filamentosos colônias veludosas: Aspecto das colônias dos fungos filamentosos colônias arenosas ou pulverulentas: Aspecto das colônias dos fungos filamentosos colônias glabrosas: Aspecto das colônias dos fungos filamentosos colônias furfuráceas: Aspecto das colônias dos fungos filamentosos colônias penugentas: Aspecto das colônias dos fungos filamentosos colônias algodonosas: Aspecto das colônias dos fungos filamentosos colônias membranosas: Stachybotrys chartarum Mofo negro – contaminante de ambientes úmidos Bolores (fungos filamentosos) e fungos carnosos Talo desses fungos (Hifas) - longos filamentos de células conectadas Hifas septadas e hifas cenocíticas Hifas de um único fungo em Oregon (um cogumelo), que se estendem por mais de 6,4 quilômetros quadrados. Hifa vegetativa e hifa reprodutiva ou aérea Condições favoráveis para sua formação geram o micélio Características gerais dos fungos Eucariotos, aclorofilados, possuem parede celular sem celulose, heterotróficos, possuem como material de reserva o glicogênio, parede celular de quitina manana, glucana. Podem ser unicelulares como as leveduras ou pluricelulares como os fungos filamentosos ou bolores e cogumelos. O que os diferenciam das plantas: Não sintetizam clorofila ou outro pigmento fotossintético. Não tem celulose na composição da parede celular (exceto fungos aquáticos) e não armazenarem amido como substância de reserva. Leveduras As leveduras são fungos unicelulares, geralmente não filamentosos, geralmente esféricos ou ovais. Algumas leveduras dimórficas podem se filamentar, sob determinadas condições, ex. Candida albicans. As leveduras de brotamento, como Saccharomyces, dividem-se de forma desigual. Algumas leveduras produzem brotos que não se separam uns dos outros; esses brotos formam uma pequena cadeia de células, denominada pseudo- hifa. Candida albicans adere-se às células epiteliais humanas na forma de levedura, mas requer pseudo-hifas para invadir os tecidos profundos. Leveduras – metabolismo As leveduras são capazes de realizar crescimento anaeróbio facultativo. Se houver acesso ao oxigênio, as leveduras respiram aerobiamente para metabolizar carboidratos, formando dióxido de carbono e água, Na ausência de oxigênio, elas fermentam os carboidratos e produzem etanol e dióxido de carbono. Fungos dimórficos Particularmente as espécies patogênicas, exibem dimorfismo. O dimorfismo em fungos patogênicos é dependente da temperatura: A 37°C, o fungo apresenta forma de levedura. A 25°C, forma de bolor (filamentoso) Sporothrix schenckii – causador da esporotricose Assexuados ou sexuados. Assexuados: são formados pelas hifas de um organismo. Quando esses esporos germinam formam hifas e tornam-se organismos geneticamente idênticos ao parental. Sexuados: resultam da fusão de núcleos de duas linhagens opostas de cruzamento de uma mesma espécie de fungo. Os organismos que crescem a partir de esporos sexuados apresentarão características genéticas de ambas as linhagens parentais. Esporos fúngicos zigósporo Exame de cabeças de esporos assexuados de fungos filamentosos microscópicos Esporangiósporos: Rhizopus spp. Artrosporos: Coccidioides immitis Clamidósporos: C. albicans Blastósporos: Candida abicans Fialósporos: Aspergillus Macroconídeos e microconídeos: dermatófitos Porósporos: Alternaria spp. Exemplos de esporos assexuados e principais representantes fúngicos: Esporangiósporos: Absidia spp. Artrósporos: Coccidioides immitis Geotrichium spp. Clamidósporos e Blastósporos: Candida albicans Fialósporos: Aspergillus Penicillium spp Macroconídeos e microconídeos: dermatófitos Porósporos: Alternaria spp. Outras imagens de esporos assexuados característicos. Meios de cultura mais utilizados na Micologia - Agar Sabouraud com cloranfenicol (leveduras e fungos filamentosos) - Agar PDA (batata-dextrose) (fungos filamentosos) - Agar Mycobiotic/Mycosel= agar seletivo para fungos patogênicos (uso restrito inibe vários fungos sensíveis à cicloheximida, inclusive leveduras) Exame “a fresco” entre lâmina e lamínula - Após clarificação com KOH (10 a 20%) – fungos causadores de dermatomicoses - Após coloração com tinta da China (nanquim) – Criptococcus spp. - Após coloração com lactofenol azul algodão – maioria dos fungos filamentosos Esfregaços: - Após coloração: Gram, Giemsa e outrasExame microscópico das amostras fúngicas Micromorfologia das principais espécies de Candida em Agar Fubá (existem mais de 200 sp) Candida albicans Candida krusei Candida parapsilosis Candida glabrata Candida tropicalis Meio de cultura: CHROMagar® Candida Sugere espécie conforme cor da colônia: Verde = C. albicans Azul = C. tropicalis Rosa = C. krusei Etc.. Branco = outras espécies e outros gêneros Alguns tipos de Conídios e espécies de fungos filamentosos Alguns tipos de Conídios e espécies de fungos filamentosos