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FATEC- Maio/ 2010 Professora Mirian Maya Sakuno
�Espectrofotometria é qualquer processo que utiliza 
a luz para medir as concentrações. 
�Colorimetria é qualquer processo que utiliza a cor 
para medir as concentrações. Em termos mais 
técnicos estamos falando da espectrofotometria de 
Ultravioleta vísivel (UV-vis) 
Luz Partícula 
Onda: As ondas luminosas consistem em 
campos magnéticos e elétricos oscilantes. 
c= νννν. λ λ λ λ 
c= velocidade da luz 
( 2,998x108 m/s no vácuo)
νννν= frequência
λλλλ= comprimento de onda
E= energia
h= constante de Planck
6,626x10-34J.s
E= h.νννν
E=h. . . . cccc
λλλλ
Fonte 
de luz
Seletor de 
comprimento de onda
(monocromador)
Amostra Detector 
de luz
Po P
bPo= energia radiante
P= energia radiante após passar na amostra
Sendo Po ≤P
Fonte 
de luz
Seletor de 
comprimento de onda
(monocromador)
Amostra Detector 
de luz
Po P
b
Po= energia radiante
P= energia radiante após passar na amostra
Sendo Po ≤P
�Trasmitância (T): é a fração de luz que passa na 
amostra. 
�Portanto T está entre 0 e 1, se multiplicarmos por 
100 teremos a % T.
T= P 
Po
Fonte 
de luz
Seletor de 
comprimento de onda
(monocromador)
Amostra Detector 
de luz
Po P
b
Po= energia radiante
P= energia radiante após passar na amostra
Sendo Po ≤P
A= -log T
1100,1
210,01
01001
A%TP/Po
Relação de T e A
A absorvância é muito 
importante porque ela é
diretamente proporcional 
à concentração, c, de 
espécies absorventes de 
luz na amostra.
Fonte 
de luz
Seletor de 
comprimento de onda
(monocromador)
Amostra Detector 
de luz
Po P
bA= ε.ε.ε.ε.bc
εεεε= absortividade molar (M-1cm-1)
b= caminho ótico
c= concentração 
bObs: A lei de Lambert-Beer é válida apenas 
para soluções diluídas (≤ 0,01 mol/L) !!!!
Exemplo: Encontre a absorvância (A) de 
uma solução 0,00240 mol/L de uma 
substância com coeficiente de 
absortividade molar (εεεε) de 313 M-1cm-1
numa célula de 2,00 cm de caminho óptico.
Lei de Lambert –Beer
A= ε.ε.ε.ε.b.c= 313 x 2 x 0,00240 = 1,5 
Etapas de uma análise por colorimetria
1. Preparação de uma curva padrão 
2. Preparação das amostras 
3. Leitura no espectrofotômetro 
4. Cálculos das concentrações através da curva padrão
Curva Padrão 
A curva-padrão corresponde à relação gráfica entre os valores de 
absorbância (A) e os de concentração. Com base na análise gráfica é
possível verificar a linearidade da reação e calcular um fator de conversão 
de valores de absorbância em concentração. 
Equação da reta : y= ax + b
A= a c + b
Ex: A= 0.5 c + 0,05 , isolando c= teremos 
c= (Aamostra- 0,05)/0,5
Preparação da amostra
Amostra diluída
Reagente
Desenvolvimento de cor
Leitura no espectrofotômetro
Soluções padrões de 
concentração conhecidas
Reagente
Desenvolvimento de cor
Leitura no espectrofotômetro
Curva padrão
Determinação da concentração 
através da curva padrão

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