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Questões Teórico-Prática de Microbiologia
1. A técnica de Técnica de Wirtz-Conklin é utilizada para coloração de esporos bacterianos, qual a necessidade do aquecimento da lamina com o corante verde malaquita para execução da técnica?
A parede do esporo constitui uma barreira eficaz contra a entrada e saída de substancias do esporo,mas por sua impermeabilidade, geralmente é refringente e de difícil coloração. A exposição prolongada ao verde malaquita e principalmente o aquecimento, permite a entrada do corante e a coloração do esporo por um verde intenso.
2. Qual a diferença de endósporo e esporo livre?
O endósporo corresponde ao esporo no seu início de formação, ainda na célula vegetativa. O processo de formação do esporo, o cromossomo duplica-se e uma das cópias cromossômicas produzidas é isolada do restante da célula e envolta por uma membrana plasmática. Após isso, há a formação de uma grossa parede em torno dessa membrana, constituindo o endósporo (assim chamado porque se forma dentro da célula). A outra porção do conteúdo celular é degradada e a parede é rompida, libertando o esporo. Em ambiente propício, o esporo se reidrata, reconstituindo uma nova bactéria, que passa a reproduzir-se por reprodução binária.
3. Qual a diferença de parede das bactérias gram positivas e gram negativas:
Na maioria das bactérias gram-positivas, a parede celular consiste de muitas camadas de peptideoglicano, formando uma estrutura rígida. Além disso, contém ácidos teicóicos, que consistem primariamente de um álcool e fosfato.
As paredes celulares das bactérias gram-negativas consistem de uma ou algumas camadas de peptideoglicana e uma membrana externa. A peptideoglicana está ligada a lipoproteínas na membrana externa e está no espaço periplasmático, um espaço entre a membrana externa e a membrana plasmática. As paredes gram-negativas não possuem ácidos teicóicos, mas sim de lipopolissacarídeos (LPS) e fosfolipídios
 
4. Qual a importância biológica na coloração de Gram?
Esta coloração permite distinguir os mais variados tipos de bactérias e que tipo de parede celular elas tem, estas bactérias tem também graus diferentes de virulência. As Gram-negativas, por exemplo, são constituídas por uma endotoxina denominada LPS (lipopolissacarídeo), que é causadora da patogenicidade. Já as Gram-positivas possuem a exotoxina rica em ácido lipoprotéico que confere aderência à bactéria.
5. Cite dois exemplos de bactéria gram + e um de gram -.
Gram-negativas: Escherichia coli, Salmonella e Shigella. 
Gram-positivos: Stafilococcus aureus e Streptococcus pyogenes.
6. Classifique as imagens de acordo com a forma, arranjo(predominante) bacteriano e coloração de gram:
esfafilococos gram positivos, dipobacilos, sarcinas. 
 
Estreptobacilos, diplobacilos gram negativos.
*LEMBRAR: NÃO EXISTEM ESTAFILOBACILOS, O ARRANJO DIFERENCIAL DOS BACILOS É O AGRUPAMENTO EM FORMA DE PALIÇADA.
7. Por que não é usada a coloração de Gram para diferenciação de micobactérias?
Porque na coloração de gram eu não tenho a diferenciação de bacilos ácido-álcool resistentes em rosa, que eu consigo visualizar na técnica de Ziehl. Na técnica de gram os BAAR não seriam visualizado ou no máximo fracamente corados.
8. Qual a importância do lugol na coloração de Gram ?
O iodo da solução de Lugol forma um complexo insolúvel com o corante primário(cristal de violeta ou azul de metileno), deixando-o com uma coloração mais intensa do que se estivesse livre, e sendo mais difícil de remover das células.
9. Em uma preparação para coloração de gram, um aluno após preparar um esfregaço bacteriano coloriu a lâmina com a fucsina, após o procedimento, lavou com um filete de água, retirou o excesso e aplicou o fixador de lugol. Lavando a lâmina em seguida, foi aplicado álcool 90º, lavando a lamina novamente e retirado o excesso de água com papel filme, após aplicado o corante cristal de violeta. Caso o esfregaço possuísse gram-negativas essas seriam visualizadas em coloração azul(arroxeada) nesse esfregaço? Justifique.
Sim, na técnica realizada foi invertido as ordem dos corantes pré-estabelecidos no protocolo da técnica de Gram, dando um resultado falso do esperado. Na coloração correta as gram-negativas deveriam ser evidenciadas em vermelho(cor de rosa).
10. Por que na coloração de Ziehl – Neelsen é necessário aquecer o corante Fucsina Fenicada? 
Para que a parede ácido micolico(ac. Graxos de cadeia longa encontrados na parede de micobactérias) por reação de calor se desestabilize e o corante consiga entrar. Para a coloração de Ziehl pode-se usar a fucsina fenicada, que é uma fucsina normal com adição de fenóis que facilitam a entrada na parede.
11. Qual a importância dos ácidos micólicos para as micobactérias?
É um importante fator de patogenicidade para as micobactérias. Responsáveis por aumentar a resistência aumentada do organismo ao dano e à desidratação por produtos químicos, e impedem a atividade eficaz de antibióticos hidrófobos, além disso, os ácidos micólicos permitem que a bactéria cresça prontamente para dentro de macrófagos, escondendo-se eficazmente do sistema imunológico do hospedeiro.
*LEMBRAR QUE: apesar de ter mico no nome os ácidos micólicos não tem qualquer relação com fungos.
12. Qual o objetivo da técnica Fontana de Tribondeau? 
Técnica para visualização de bactérias espiraladas, por uma Impregnação pelo nitrato de prata. Devido a sua parede delgada, os espiralados não são corados em gram, ou corados fracamente, por isso é utilizada a técnica especial de Fontana, para a deposição do nitrato de prata na parede dessa bactérias, tornando-as assim evidente na leitura microscopia. 
13. Qual a diferença de microbiota residente e transitória?
A microbiota residente é permanente no indivíduo, podendo ter sido ou não adquirida com o passar da idade, em condições de imunocompetência não costumam apresentar perigos ao seu hospedeiro, são fortemente aderidas e competem com a microbiota transitória, essa por sua vez entra em contato com o indíviduo, normalmente várias vezes ao dia, é fracamente aderida, e pode ser patógena, sobretudo em indivíduos imunosuprimidos, ou por outros fatores (corte na superfície da pele), que a ponham em contato com a circulação. 
14. O ácido micólico é um componente encontrado associado ao peptídeoglicano de qual das seguintes bactérias:
 A) Micobacterias;
 B) Estafilococos;
 C) Estreptococos;
 D) Escherichia coli;
 E) Salmonella;
 
15. São características das Micobactérias, exceto:
 a) Bacilos aeróbios estritos;
b) São esporulados e encapsulados;
c) Ligeiramente curvos ou retos e imóveis;
d) Resiste a ação de ácido e de álcool;
e) Parasitas intracelulares facultativos, pois sobrevive nos macrófagos; 
 
16. Qual a prova bioquímica é possível de ser usada para diferenciar Staphylococcus de Streptococcus ? 
A. Prova da Coagulase.
B. Prova de Gram.
C. Prova da Catalase.
D. Prova de Ziehl Neilsen.
Comentário: Enzima que degrada água oxigenada(peróxido de hidrogênio). Aquelas bactérias que produzem catalase vão degradar o peróxido, formando água e oxigênio livre, vou observar essa reação com a formação de bolhas e gases, ou seja, ela é catalase positiva.
17) Em relação a prova bioquímica da coagulase, marque a alternativa falsa. 
A. Presença de coagulase positiva é um indicador de maior patogenicidade. 
B. S. Aureus produz coagulase.
C. A coagulase provoca coagulação do plasma sanguíneo, por ativar protombrina, originando trombina. A trombina transforma o fibrinogênio em fibrina, criando coágulos de fibrina que irá proteger contra células de defesa.
D. S. saprophyticus e S. epidermides são frequentemente referidos como estafilococos coagulase-positivos. 
 D)Falso, um dos fatores do S. Aureus ser mais patogênico é justamente por ser o principal a apresentar coagulase. 
 
18) Cite 2 exemplos de métodos de controle microbiano por calor úmido sem pressão:
Pasteurização e fervura.
19) Sobreos métodos de controle microbiano assinale V ou F:
 (F) A autoclave é um método de calor seco com pressão onde o material é submetido de 15 a 20 min à 121ºC em 1 atm.
(V) A incineração causa esterilização por queima real do material contaminado.
(F) A radiação UV lesa em nível de DNA os micro-organismos, tendo alto poder de penetração.
 (V) A água em ebulição faz desinfecção em 15 minutos a 100ºC.
(V) A filtração faz esterilização por retenção mecânica dos micro-organismos em filtros especiais.
(F) São métodos eficazes para eliminação de esporos: Autoclave, radiação ionizante(raio-x), incineração e pasteurização.
20) Em relação aos fungos, responda a alternativa correta:
 A) Fungos podem existir na forma de levedura e outros na forma de hifa(filamentosos), quando um fungo pode ter as duas características é chamado de transmorfico.
 B) Leveduras são fungos pluricelulares.
 C) A massa ou conjunto de hifas que formam um corpo ou colônia de um bolor é chamada de Micélio.
 D) As leveduras que formam os conídios são os chamados conidióforos. 
20) Qual a importância do teste de Snyder para o estudo da microbiologia da doença cárie ? Justifique. 
Utilizado para a avaliação da atividade acidogênica e acidúrica das bactérias orais. Tendo então relação com o processo de estabelecimento da doença cárie. 
Como é realizado:
 Meio com glicose e indicador de pH (BROMOCRESOL - diferenciador)
 as bactérias produzem ácido a partir da glicose, esse ácido vai baixar o pH e mudar a cor do indicador do pH que era verde para amarelo, isso ocorre se a bactéria tem atividade cariogênica, se não tem, o tubo continua verde, pois tem atividade nula.
 VERDE:
 SEM CÁRIE
 pH =5 (sem estar semeado)
 Atividade Cariogênica Insuficiente ou Ausente
 AMARELO
 FORMA CÁRIE
 Vira ácido (pH menor que 5)
 EM:
 24h: atividade ACENTUADA
 48h: atividade MODERADA
 72h: atividade PEQUENA 
 Maior quantidade de Lactobacillus e Streptococcus