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1 Antibiograma Aula prática 4 Disciplina: Microbiologia Professor: Dr. José Renato da Silva • Unidade de Ensino: 4 • Título da Aula Prática: Antibiograma • Competência: Aplicar a técnica de antibiograma por difusão em disco, interpretar perfis de sensibilidade bacteriana e correlacionar os resultados com a escolha racional da terapia antimicrobiana. • Resumo: Antibiograma pelo método de difusão em disco. Leitura dos halos de inibição. Classificação segundo BrCAST. Interpretação microbiológica e clínica dos perfis de sensibilidade de bactérias Gram positiva e Gram negativa. • Palavras-chave: Antibiograma; sensibilidade antimicrobiana; BrCAST; terapia direcionada; resistência bacteriana; difusão em disco. Objetivos � Padronizar o inóculo bacteriano pela escala de McFarland. � Realizar a semeadura em ágar Mueller-Hinton e aplicar os discos de antibióticos corretamente. � Medir os halos de inibição e classificá-los em sensível, intermediário ou resistente. � Reconhecer fenótipos de resistência bacteriana. � Correlacionar o perfil de sensibilidade com a escolha terapêutica. ANTIBIOGRAMA Identificar a SENSIBILIDADE ou a RESISTÊNCIA do microrganismo responsável pela infecção. Guia a escolha do antibiótico mais adequado e sua dosagem correta Importante no combate à espécies com capacidade de resistência e estudos epidemiológicos Fonte: Autor + IA (NotebookLM) 2 ANTIBIOGRAMA MIC (Concentração Inibitória Mínima) MBC (Concentração Bactericida Mínima) Fonte: Autor + IA (NotebookLM) ANTIBIOGRAMA Escala de McFarland Espalhamento (Semeadura) Cobrir toda a superfície sem deixar espaços vazios. SEMPRE USAR SWAB ESTÉRIL Turbidez de 0,5 na escala = Aprox. 1,5 x 108 células/mL Por que? Muitas bactérias = Halo falsamente pequeno Poucas bactérias = Halo falsamente grande Ágar Muller-Hinton: Garante a taxa de difusão adequada Fonte: Autor + IA (NotebookLM) ANTIBIOGRAMA – DIFUSÃO EM DISCO https://www.dme.ind.br/wp- content/uploads/BULA-DE-BANCADA- EDICAO-BrCAST-2025-SITE.pdf Acesse aqui o BrCAST - 2025 Fonte: Autor + IA (NotebookLM) MECANISMO DE AÇÃO DOS ANTIBIÓTICOS MORTE INIBIÇÃO Fonte: Autor + IA (NotebookLM) Limitações Fonte: Autor + IA (NotebookLM) Procedimento no Laboratório Virtual • Na Plataforma Algetec: - Antibiograma ID 534 3 Vídeo – Laboratório Virtual Antibiograma – Placa 1 Staphylococcus aureus Antibiótico Halo (mm) Classificação (BrCast) Tetraciclina 37 S Cefoxitina 30 S Azitromicina 15 R Sulfametoxazol 15 I Ciprofloxacina 37 I Linezolina 35 S Gentamicina 39 S Ampicilina 24 S Eritromicina 25 S Clorofenicol 11 R Rifampicina 20 R Clindamicina 26 S Antibiograma – Placa 1 Identificação do fenótipo de resistência ➡ Cefoxitina = Sensível (30 mm) Esse resultado indica: • ausência do gene mecA • presença de PBPs normais • cepa classificada como MSSA (sensível à meticilina) Portanto: β-lactâmicos são as melhores opções terapêuticas. Staphylococcus aureus Antibiograma – Placa 1 Staphylococcus aureus O S. aureus é o ponto de partida ideal para entender a interpretação de antibiogramas devido à distinção entre fenótipos: MSSA: S. aureus suscetível à meticilina MRSA: S. aureus resistente à meticilina Fonte: Autor + IA (NotebookLM) Antibiograma – Placa 1 Staphylococcus aureus 4 Antibiograma – Placa 2 Escherichia coli Antibiótico Halo (mm) Classificação (BrCast) Gentamicina 27 S Ciprofloxacina 36 S Sulfametoxazol 14 S Amoxic + Ác. Clavulânico 21 S Ceftriaxona 13 R Cefepime 35 S Amicacina 26 S Aztreonam 31 S Piperaciclina 15 R Cefoxitina 15 R Ceftrazidima 19 I Antibiograma – Placa 2 Escherichia coli A E. coli é o principal agente etiológico das infecções do trato urinário (ITU). Diferente do S. aureus, a interpretação aqui foca frequentemente na produção de enzimas que destroem antibióticos, conhecidas como Beta-lactamases. Fonte: Autor + IA (NotebookLM) Antibiograma – Placa 2 Escherichia coli A cepa apresenta: • amplo perfil de sensibilidade • resistência a β-lactâmicos específicos Isso não caracteriza multirresistência. Resistências importantes • Ceftriaxona → R • Piperacilina → R • Cefoxitina → R Esse conjunto sugere produção de β-lactamase Mas: • sensível a amoxicilina + clavulanato → inibição da enzima Antibiograma Fonte: Autor + IA (NotebookLM) CONCLUSÃO • O antibiograma é uma ferramenta essencial para determinar a sensibilidade bacteriana e orientar a terapia antimicrobiana de forma racional. • A padronização do inóculo pela escala de McFarland e o uso do ágar Mueller-Hinton são fundamentais para garantir resultados confiáveis. • A interpretação dos halos deve ser realizada com base em critérios padronizados, e não apenas pelo seu tamanho. • A análise do antibiótico marcador permite identificar fenótipos de resistência clinicamente relevantes, como MSSA e produção de β-lactamases. CONCLUSÃO • Nem todo antibiótico classificado como sensível é a melhor escolha terapêutica, sendo necessário considerar o espectro de ação e o sítio da infecção. • O perfil de sensibilidade difere entre bactérias Gram positivas e Gram negativas devido às suas características estruturais e mecanismos de resistência. • O antibiograma possibilita a transição da terapia empírica para a terapia direcionada, aumentando a eficácia do tratamento e reduzindo o desenvolvimento de resistência bacteriana.