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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL II QUESTÕES DE FIXAÇÃO: 1 - Meningite bacteriana é uma inflamação que ocorre nas camadas dos tecidos que cobrem o cérebro, medula espinhal e o espaço preenchido pelos líquidos nas meninges. Essa infecção pode ser causada por diferentes organismos e em diferentes idades. O microrganismo mais comum para bebês recém-nascidos de até 4 semanas é: A - Streptococcus grupo B B - Salmonella spp C - Haemophilus influenzae D - Neisseria meningitidis E - Escherichia coli Resposta: Letra A Comentário: A causa mais comum de meningite em bebês com menos de 4 semanas de vida é o Streptococcus grupo B (especificamente a espécie Streptococcus agalactiae). Outros agentes possíveis nessa faixa etária incluem enterobactérias como a E. coli. À medida que a idade da criança aumenta, outros patógenos como H. influenzae, S. pneumoniae e N. meningitidis tornam-se mais frequentes. 2 - Um paciente internado na UTI com uso de cateter venoso central para administração de medicamentos apresenta um quadro com febre alta (38°C), diminuição da pressão arterial e aumento da frequência cardíaca. Suspeita-se de sepse e é solicitado uma hemocultura e uma cultura de cateter. Após alguns dias, o resultado liberado demonstra a presença de um bacilo gram-negativo identificado como Pseudomonas aeruginosa em todas as culturas (da coleta do braço direito e esquerdo) e da ponta de cateter. Diante deste quadro, qual a possível origem da infecção sistêmica? A - Infecção primária da corrente sanguínea. B - Infecção secundária da corrente sanguínea com foco primário no trato respiratório. C - Contaminação. D - Infecção da corrente sanguínea associada ao cateter. E - Infecção da corrente sanguínea com foco primário no trato urinário. Resposta: Letra D Comentário: O diagnóstico é confirmado quando a mesma bactéria (neste caso, Pseudomonas aeruginosa) é isolada tanto na ponta do cateter quanto nas hemoculturas periféricas (braço direito e esquerdo). · Por que não é contaminação? O crescimento em todos os frascos e na ponta do cateter indica uma bacteremia verdadeira. · O papel do Biofilme: Bactérias como a Pseudomonas têm alta capacidade de formar biofilmes em dispositivos invasivos, protegendo o microrganismo e permitindo sua disseminação contínua no sangue. 3 - Chlamydia trachomatis é uma causa comum de IST, é uma bactéria intracelular, seu cultivo envolve cultura do tipo: A - Cultura de células eucariontes das linhagens HeLa 229, McCoy ou BHK B - Ágar sangue ou ágar chocolate C - Ágar McConkey ou Ágar EMB D - Não é possível seu cultivo E - Caldo BHI Resposta: Letra A Comentário: A Chlamydia trachomatis é uma bactéria intracelular obrigatória, o que significa que ela não possui metabolismo independente para crescer em meios artificiais como Ágar Sangue ou Chocolate. Para seu cultivo, é necessário fornecer células vivas (linhagens eucariontes) para que ela possa invadir e se multiplicar. 4 - Analise as afirmativas abaixo com relação à coleta de sangue para o processo de hemocultura e assinale a alternativa correta. I. O sangue para hemocultura pode ser coletado através de punção venosa com agulha, seringa ou a vácuo. II. Não é recomendado que o sangue seja coletado de cateter. III. A coleta pode ser realizada antes e depois da administração do antibiótico, caso o paciente esteja tomando. A - Somente a afirmativa I é verdadeira. B - Somente a afirmativa II é verdadeira. C -Somente a afirmativa III é verdadeira. D - Somente as afirmativas I e II são verdadeiras. E - Somente as afirmativas I e III são verdadeiras Resposta: Letra D Comentário: · I (Verdadeira): A coleta pode ser feita por seringa e agulha ou, preferencialmente, por métodos a vácuo. · II (Verdadeira): A coleta via cateter deve ser evitada devido ao alto risco de contaminação pela microbiota do dispositivo, a menos que a suspeita seja de infecção do próprio cateter. · III (Falsa): A recomendação rigorosa é coletar antes da antibioticoterapia. Se o paciente já estiver medicado, a coleta deve ser feita imediatamente antes da próxima dose para garantir a menor concentração possível de antibiótico no sangue coletado. 5 - A produção de gás sulfídrico ou sulfeto de hidrogênio é uma das provas bioquímicas responsáveis pela diferenciação de alguns patógenos do trato gastrointestinal. Os meios de cultura utilizados nesta prova incluem o Ágar TSI, meio SIM ou o meio IAL, que, quando positivo, forma um precipitado negro. Entre os principais patógenos associados a quadros diarreicos, assinale quais apresentam positividade nestes testes. A - Salmonella e E. coli. B - E. coli e vibrio. C - C. difficile e Salmonela. D - Compylobacter e C. difficile. E - E. coli e C. difficile. Resposta: Letra C Comentário: A produção de H2S é detectada quando a bactéria libera enxofre, que reage com íons de ferro no meio (TSI, SIM ou IAL), formando um precipitado negro. · Salmonella spp.: É o principal enteropatógeno Gram-negativo positivo para esta prova. · Clostridium difficile: Também apresenta positividade para este teste. · E. coli: É tipicamente negativa para a produção de H2S, o que ajuda na sua diferenciação da Salmonella em triagens de coprocultura. 6 - Durante o crescimento bacteriano no processo de coprocultura, é preciso de uma confirmação para o enteropatógeno através de testes bioquímicos. Qual o teste que analisa o metabolismo bacteriano para obtenção de energia por via oxidativa ou fermentativa? A - Teste de oxidase B - Fermentação de açúcares C - Produção de Indol D - Degradação de Ureia E - Prova vermelho de metila Resposta: Letra B Comentário: O teste de fermentação de açúcares é utilizado especificamente para determinar se o metabolismo bacteriano para obtenção de energia ocorre por via oxidativa (aeróbica) ou fermentativa (anaeróbica). · Mecanismo: Bactérias fermentadoras produzem ácido como subproduto, o que altera o pH do meio e muda sua coloração (ex: de vermelho para amarelo no Ágar TSI). · Diferenciação: Esse teste é vital para distinguir enterobactérias (que fermentam a glicose) de bacilos não-fermentadores. 7 - Para diagnosticar uma IST é necessário passar por metodologias específicas para cada microrganismo. Alguns patógenos são intracelulares, algumas vezes é necessário cultivos de outra linhagem celular juntamente com a bactéria e outra forma de chegar ao diagnóstico são por testes imunológicos. De qual patologia estamos nos referindo: A - Chlamydia trachomatis B - Escherichia coli C - Neisseria gonorrhoeae D - Trichomonas vaginalis E - Mycoplasma hominis Resposta: Letra A Comentário: A questão descreve as características biológicas da clamídia. Por ser uma bactéria intracelular obrigatória (vive dentro da célula do hospedeiro), ela não cresce em meios de cultura comuns. · Cultivo: Exige o uso de linhagens de células eucariontes, como McCoy, HeLa 229 ou BHK, onde a amostra é inoculada sobre a superfície dessas células. · Diagnóstico Alternativo: Devido à complexidade do cultivo, utilizam-se frequentemente testes imunológicos e, principalmente, testes moleculares (PCR). 8 - De acordo com as recomendações de coleta de sangue para processo de hemocultura, analise as assertivas abaixo e assinale a alternativa CORRETA. Na coleta de sangue para hemocultura é recomendado no mínimo 2 frascos de sangue de cada braço do paciente, isso de acordo com a suspeita médica. PORQUE A retirada de amostras em locais diferentes aumenta as chances de detecção da bactéria e diminui a taxa de contaminação. A - A primeira assertiva está correta, mas a segunda está errada. B - A primeira assertiva está errada, mas a segunda está correta. C - Nenhuma das assertivas está correta. D - As duas assertivas estão corretas, mas a segunda não é uma justificativa correta da primeira. E - As duas assertivas estão corretas, e a segunda é uma justificativa correta da primeira. Resposta: Letra E Comentário Analítico: · Primeira Assertiva: É tecnicamente recomendado coletar, no mínimo, 2 frascos de sangue, podendo chegar a 4 dependendo da suspeita. · Segunda Assertiva(Justificativa): A coleta em sítios diferentes (como braço direito e esquerdo) é o procedimento padrão para aumentar a probabilidade de detecção do microrganismo e, crucialmente, para ajudar a descartar resultados que sejam fruto de contaminação da microbiota da pele. Se o patógeno crescer em apenas um dos braços, a probabilidade de ser contaminação é alta. 9 - Entre as diferentes bactérias causadoras de infecções gastrointestinais, temos a Salmonella spp. e Shigella. Seu crescimento e diagnóstico envolve o uso de meios de culturas apropriados. Entre os meios de cultura sólidos para o crescimento de Salmonela ou Shigella, podemos citar: A - Ágar Sangue e Ágar Chocolate. B - Ágar EMB e Ágar XLD. C - Ágar CIN. D - Ágar SS, Ágar Sangue ou Ágar XLD. E - Ágar SS, Ágar XLD ou Ágar HE. Resposta: Letra E Comentário: A pesquisa de Salmonella spp. e Shigella spp. na coprocultura exige meios altamente seletivos e diferenciais que inibam a microbiota normal e destaquem esses patógenos. · Ágar SS: Abreviação de Salmonella-Shigella. · Ágar XLD: Desoxicolato-Lisina-Xilose. · Ágar HE: Entérico de Hektoen. · Nota: O Ágar Sangue e Chocolate (citados na opção D) são meios enriquecidos, mas não são seletivos para patógenos entéricos Gram-negativos na rotina de fezes. 10 - Para a pesquisa de uma infecção bacteriana em uma hemocultura, é necessário colocar o sangue em contato com meio de cultura com nutrientes necessários para o crescimento do microrganismo. Um meio seletivo usado para pesquisa de bactérias Gram-negativas é: A - Ágar Chocolate B - Ágar Sangue C - Ágar MacConkey D - Caldo Columbia E - Caldo BHI Resposta: Letra C Comentário: O Ágar MacConkey é um dos meios mais utilizados no laboratório para o isolamento de bacilos Gram-negativos. Ele possui duas funções fundamentais que o tornam a escolha correta para esta questão: 1. Seletividade: Contém corantes (como o cristal violeta) e sais biliares que inibem o crescimento de bactérias Gram-positivas, permitindo apenas o crescimento de bactérias Gram-negativas. 2. Diferenciação: Contém lactose e um indicador de pH (vermelho neutro). Isso permite distinguir bactérias que fermentam a lactose (que formam colônias cor-de-rosa, como a E. coli) daquelas que não a fermentam (colônias incolores). Análise das Alternativas Incorretas · A - Ágar Chocolate: É um meio enriquecido (contém sangue hemolisado) que fornece nutrientes para bactérias exigentes (fastidiosas), mas não é seletivo; quase tudo cresce nele. · B - Ágar Sangue: Também é um meio enriquecido e diferencial (pela hemólise), mas permite o crescimento tanto de bactérias Gram-positivas quanto de Gram-negativas, não sendo, portanto, seletivo para um grupo específico. · D e E - Caldo Columbia e Caldo BHI: Estes são meios líquidos (caldos) altamente nutritivos usados nos frascos de colheita inicial para favorecer o crescimento de qualquer microrganismo presente no sangue, mas não possuem agentes seletivos para isolar apenas Gram-negativos.