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Boa noite!
BCL 0308-15 Bioquímica: 
estrutura, propriedade e funções de biomoléculas
Prática 3: Aminoácidos: estudo da estrutura e 
propriedades ácido-base.
Prof. Dr. Paulo de Avila Junior
Objetivos
- estudar aspectos estruturais dos aminoácidos e suas 
propriedades tamponantes;
- determinar experimentalmente os valores de pKa 
dos grupos do aminoácido glutamato;
- realização de titulação ácido base; e
- encontrar o ponto isoelétrico do aminoácido 
glutamato.
Atenção
Metade dos grupos fará a titulação do ácido glutâmico 
com NaOH e outra metade com HCl.
Durante a aula, os resultados deverão ser 
compartilhados entre os grupos, de modo que cada 
grupo possua resultados referentes às titulações dos 
aminoácidos com NaOH e HCl.
Favor um(a) integrante do grupo me 
encaminhar por e-mail até 3ª feira 29/10 
os resultados obtidos e as análises 
realizadas:
paulo.avila@ufabc.edu.br
Próxima aula (31/10): sala 303-3
mailto:paulo.avila@ufabc.edu.br
Fórmula básica de um aminoácido 
protéico 
(R = grupo ou cadeia lateral)
H-CH3 CH4
Equilíbrios químicos
+
+
+
+
libera prótons
libera prótons
+
+
recebe prótons
recebe prótons
Definições de ácido e base
Brönsted-Lowry (se aplica a qualquer solvente)
Ácido: substância que libera prótons
Base: substância que recebe prótons
Par conjugado NH3 / NH4
+
Par conjugado H2O / OH-
Lembrando, numa reação ácido base, com [H+] > 10-7
H2O(l) H+
(aq) + OH-
(aq)
10-7 10-7
Com concentração de H+ maior que 10-7, o equilíbrio é
deslocado no sentido de formação de água
Água pura a 25oC → [H+] = [OH-] = 10-7 mol/L
Kc = [H+].[OH-] → Kc . [H2O] = [H+].[OH-]
[H2O] Kw = [H+].[OH-]
Kw = 10-7. 10-7 = 10-14 (25oC)
Constante do produto iônico da água
Para saber qual a forma predominante do 
aminoácido:
1. Equação de Henderson-Hasselbalch;
pH = pKa + log [A-]
[HA]
pH = pKa + log [base conjugada]
[ácido conjugado]
2. Qual o pH do meio; e
3. pKa
Exemplo de titulação de aminoácido: alanina
Valores de pKa se referem à alanina (R = CH3)
Adição de
ácido 
Adição de base 
pKa dos aminoácidos [pKa = - log(Ka)]
Marzocco e Torres, Bioquímica Básica, p.5, 2ª ed., 1999.
Eficiência de uma solução tampão
Faixa de pH: faixa de tampão
Estão representadas todas as formas químicas 
possíveis da alanina em solução aquosa?
São representadas as estruturas predominantes 
da alanina em solução aquosa em cada meio (pH)
pH9,8
→ Não é ordem de ionização (são equilíbrios químicos)
A curva de titulação de glutamato (prática de hoje) seria a 
idêntica à da alanina, com duas regiões de tamponamento?
pKa dos aminoácidos [pKa = - log(Ka)]
Estão representadas todas as formas possíveis do 
glutamato em solução aquosa?
Titulação de aminoácido: glutamato
pK1(COOH) = 2 pKR(COOH) = 4 pK2(NH3
+
) = 9
→ São apresentadas as estruturas predominantes
Em pH 9
→ São apresentadas as estruturas predominantes
Titulação de aminoácido: glutamato
pK1(COOH) = 2 pKR(COOH) = 4 pK2(NH3
+
) = 9
→ Não é ordem de ionização (são equilíbrios químicos)
Somatório de cargas na molécula
pK1(COOH) = 2 pKR(COOH) = 4 pK2(NH3
+
) = 9
+1 0 -1 -2
Titulação de aminoácido: glutamato
pK1(COOH) = 2 pKR(COOH) = 4 pK2(NH3
+
) = 9
0 pI = 2+4 = 3
 2
Determinação do ponto isoelétrico
pI = pK1 + pK2
 2
pI = 2,3 + 9,8
 2
Procedimentos (titulação com base)
Para isso:
- Transferir 50 mL de uma solução 0,01 mol/L da solução 
de aminoácido no béquer de 100 mL;
- Inserir o eletrodo do pHmetro (devidamente calibrado) 
no tubo, fazer a medida do pH e anotar o valor.
Procedimentos (titulação com base)
- Completar uma bureta de 25mL com solução de NaOH 
0,125 mol/L;
- Iniciar a titulação adicionando porções de 0,5 mL do 
titulante e verificar o pH após cada adição;
- Agitar com cuidado a mistura titulada e então aferir o 
pH.
Procedimentos (titulação com base)
- Efetuar adições sucessivas até que o pH do meio 
apresente valor a partir de 12;
- Após isso, lave o eletrodo com água destilada e 
coloque-o imerso na solução tampão de 
armazenamento do eletrodo;
- Descartar a solução de NaOH da bureta e lavá-la com 
água destilada para iniciar a segunda titulação.
pH 12 está fora da região de tamponamento
Procedimentos (titulação com ácido)
- Transferir 50 mL de uma solução 0,01 mol/L da solução 
de aminoácido no béquer de 100 mL;
- Inserir o eletrodo do pHmetro (devidamente calibrado) 
no tubo, fazer a medida do pH e anotar o valor;
- Completar uma bureta de 25mL com solução de HCl 
0,125 mol/L, iniciar a titulação adicionando porções 
de 0,5 mL do titulante e medir o pH após cada adição;
- Agitar com cuidado a mistura titulada e então aferir o 
pH.
Procedimentos (titulação com ácido)
- Efetuar adições sucessivas até que o pH do meio 
apresente valor próximo à 1 (observar pka(-COO-));
- Após isso, lave o eletrodo com água destilada e 
coloque-o imerso na solução tampão de armazenamento 
do eletrodo.
pH 1,5 está dentro da região de tamponamento
Bons estudos!
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	Slide 2
	Slide 3
	Slide 4
	Slide 5: Fórmula básica de um aminoácido protéico (R = grupo ou cadeia lateral) H-CH3 CH4
	Slide 6: Equilíbrios químicos
	Slide 7
	Slide 8
	Slide 9
	Slide 10
	Slide 11
	Slide 12
	Slide 13: Exemplo de titulação de aminoácido: alanina
	Slide 14: pKa dos aminoácidos [pKa = - log(Ka)]
	Slide 15
	Slide 16
	Slide 17
	Slide 18
	Slide 19: A curva de titulação de glutamato (prática de hoje) seria a idêntica à da alanina, com duas regiões de tamponamento?
	Slide 20
	Slide 21: pKa dos aminoácidos [pKa = - log(Ka)]
	Slide 22
	Slide 23: Titulação de aminoácido: glutamato
	Slide 24: Titulação de aminoácido: glutamato
	Slide 25: Titulação de aminoácido: glutamato
	Slide 26: Titulação de aminoácido: glutamato
	Slide 27: Titulação de aminoácido: glutamato
	Slide 28: Somatório de cargas na molécula
	Slide 29: Titulação de aminoácido: glutamato
	Slide 30: Determinação do ponto isoelétrico pI = pK1 + pK2 2
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