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Nome: Wesley Braga N°Cartão: 00276061 Data: 10/09/21 
 
DETERMINAÇÃO DE GLUTATIONA REDUZIDA EM AMOSTRA 
BIOLÓGICA 
 
1. OBJETIVO DA AULA: Determinar as quantidades e concentrações de glutationa reduzida 
(GSH) em amostra de fígado de rato através do método de fluorescência. 
1.2 PRINCÍPIO DO MÉTODO: A glutationa reduzida reage especificamente com o O-
ftaldialdeído (OPA) produzindo um composto capaz de ser excitado num comprimento de 
onda específico de 350nm e emitir fluorescência em um comprimento de onda maior 
(420nm). Essa reação é pH alcalino dependente. 
 
 
 
2. RESULTADOS (Apresentar os cálculos detalhadamente) 
Curva Padrão: 
Tubos 
padrões 
 
Fluorescência 
Quantidade nmol F.C.P. 
nmol/UF 
F.C.M. 
nmol/UF 
1 194 0,375 1,93x10
-3 
 
2 389 0,75 1,92 x10
-3
 
3 743 1,5 2,02 x10
-3
 
4 1459 3 2,05 x10
-3
 2,015 x10
3
 
5 3690 7,5 2,03 x10
-3
 
6 6987 15 2,14 x10
-3
 
7 11830 30 2,53 x10
-3
 
 
Amostra: 
 
Amostra Fluores- 
cência 
Quantidade 
nmol 
Concentração 
nmol/mL 
 
Conc. Tecido 
nmol/g 
 
 Método 
Matemático 
Método 
Gráfico 
Método 
Matemático 
Método 
Gráfico 
Método do 
Fator Direto 
Método 
Matemático 
3,92 4,71 156,8 188,40 156,2nmol 1568 
 1947 
 
FD: 0,0403nmol/F 
 
 
 
 
 
 2 
 GRÁFICO: 
 
 
 CÁLCULOS: 
 
 
y = 413,37x 
R² = 0,988 
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
0 5 10 15 20 25 30 35
Fl
u
o
re
sc
ê
n
ci
a 
 
Quantidade (nmol) 
Curva Padrão do GSH 
 3 
 
 
 
 4 
 
 
 
 
 
3. DISCUSSÃO E CONCLUSÃO 
 A glutationa é um tripeptídeo que tem na sua constituição glutamato, cisteína e glicina. A 
GSH é um antioxidante que atua sobre as espécies reativas e radicais livres que provocam 
danos aos tecidos, onde esse GSH transforma-se em glutationa oxidada (GSSG) além de 
enzimas associadas ao seu metabolismo. 
A glutationa é importante como proteção antioxidante para os tecidos em todo o organismo, 
deve-se haver um equilíbrio entre a síntese de antioxidantes e espécies reativas sendo 
produzidas para preservação da homeostasia. 
Este experimento teve como finalidade determinar a quantidade de GSH no fígado através do 
método de fluorescência. Os resultados demonstraram alto valor de GSH devido ao fato de 
que o fígado é o centro integrador do metabolismo, fundamental para diversas rotas 
bioquímicas, incluindo o de biossíntese de GSH para ofertar aos demais tecidos, justificando 
assim esses valores.