COOMBS DIRETO

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COOMBS DIRETO 
SINONÍMIA: TAD (Teste Direto de Antiglobulina), 
Anticorpos bloqueadores; Anticorpos univalentes; 
Aglutininas hiperimunes ou de albumina. 
PRINCÍPIO: 
Os anticorpos (Ac) ditos incompletos “imunes” , quando em contato com hemácias que contenham o antígeno (Ag) 
correspondente, fixam-se na membrana das mesmas, bloqueando o Ag; não têm, entretanto, a capacidade de 
aglutinar estas hemácias. O soro de Coombs (soro antiglobulina humana) é capaz de promover a aglutinação dessas 
hemácias, ditas sensibilizadas. Através do Teste de Coombs Direto podem-se evidenciar os Ac contra Ag dos 
eritrócitos, isto é, se “in vivo” há Ac incompletos “aderidos” a membrana eritrocitária. 
APLICAÇÃO CLÍNICA: O teste de Coombs Direto (CD) é útil para  diagnóstico da Doença Hemolítica do RN (DHRN); 
diagnóstico da Anemia Hemolítica autoimune (AHAI); investigação da sensibilização da hemácia causada por drogas; 
investigação de reações transfusionais. 
MÉTODO: Aglutinação em tubo. 
AMOSTRA: Sangue total (EDTA); jejum mínimo de 4 horas. 
PROCEDIMENTO: 
Preparar a “papa de hemácias”  Lavar uma pequena porção (1mL) de sangue total em um tubo cônico graduado. 
 Completar com 5mL de salina fisiológica 0,9% 
 Centrifugar a 2000 RPM / 3 minutos 
 Retirar o sobrenadante (pipeta de Pasteur) – repetir o procedimento por 3 vezes. 
Preparar suspensão de hemácias 3%  5ml de salina fisiológica + 150µL da papa de hemácias 
1 2 tubos de Khan: Adicionar 2 gotas da suspensão de hemácias + 1 gota do soro de Coombs + 1 gota de Albumina 
2 Homogeneizar 
3 Centrifugar 2000 RPM / 2 minutos 
4 Homogeneizar e observar (contra a luz) a presença ou ausência de aglutinação. 
5 Incubar os tubos (tampados) em banho-maria 37°C / 15 minutos 
6 Centrifugar 2000 RPM / 2 minutos  Homogeneizar e observar (contra a luz) a presença de aglutinação. 
LEITURA/INTERPRETAÇÃO: 
Não há aglutinação  NEGATIVO 
Presença de aglutinação  POSITIVO 
SIGNIFICADO CLÍNICO: 
O resultado positivo indica a presença de hemácias sensibilizadas por Ac, podendo estar presentes em: Doença 
hemolítica do recém-nascido (DHRN); Doença hemolítica autoimune (DHAI) e Reação hemolítica transfusional. 
EXAMES RELACIONADOS: Aglutininas Anti-Rh; Reticulócitos; Série vermelha. 
LIMITAÇÕES/INTERFERENTES: 
Amostras com hemólise, coágulos ou micro coágulos, lipemia, desproporção entre o volume do sangue e 
anticoagulante, acondicionamento em temperaturas superiores a 25°C e inferiores a 2°C, demora no 
encaminhamento da coleta para o laboratório e não homogeneização após coleta.