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Prévia do material em texto

• Trata-se de cultura de fezes; 
• Habibitualmente, é pesquisada a presença de agentes bacterianos mais comuns em nosso meio: 
→ Salmonella spp 
→ Shigella spp 
→ Alguns sorotipos de E.coli 
→ Campylobacter 
Nesse caso, é importante que sejam mencionados na solicitação médica, para direcionarmos o diagnóstico. 
→ Yersinia ssp 
→ vibrio cholerae 
• 1 a 2g (equivale a 1 colher de sobremesa) no início do quadro diarreico; 
• Coletar antes de antibioticoterapia; 
• Fezes sem conservantes devem ser encaminhadas ao laboratório à temperatura ambiente (20-25°C) e processadas 
em 1h após a coleta; 
• Fezes com conservante podem ser mantidas refrigeradas de 2 a 8°C por 24 a 48h. 
***Shigella não resiste à refrigeração. Não resiste muito tempo em meio sem conservante. 
GLICERINA TAMPONADA
Recomendada para Salmonella spp e Shigella spp, mas não para Campylobacter ou Vibrio spp, a não ser que seja 
suplementada com CaCl2. 
 CARY BLAIR 
Para Shigella e Vibrio cholerae. 
• Utilizado para inibir ou diminuir a quantidade de microrganismos da microbiota intestinal habitual das fezes e 
favorecer o desenvolvimento dos patógenos entéricos; 
• São usados na etapa de processamento inicial 
o Caldo GN: para Shigella e Salmonella 
o Selenito F: para Shigella e Salmonella 
o Tetrationato de Kauffman: melhor para Salmonella, exceto Typhi e Parathyphi 
Permitem o crescimento apenas de patógenos entéricos, inibindo as outras enterobactérias: 
→ SS (Salmonella-Shigella): seleciona Salmonella spp, e algumas vezes pode ser inibitório para Shigella spp 
 
Microbiologia Clínica 
→ HE (Hektoen Enteric): recomendado para Salmonella, Shigella e Vibrio 
→ XLD (Xilose-Lisina-Desoxicolato): para Salmonella e Shigella spp 
 
 
 
 
Ágar SS (Salmonella e Shigella). As colônias de salmonela irão crescer 
devido à produção de gás H2S 
 
 HE (Hektoen Enteric) recomendado para salmonela, shigella e víbrio. 
 
 
 Salmonella Shigella 
XLD (xilose-lisina-desoxicolato) para salmonela e shigella spp. 
• Meios diferenciais: utilizados para diferenciar bactérias fermentadoras de não fermentadoras. 
 
 
 
 
 
 
 
 Ágar Mac Conkey Ágar EMB 
 
→ COLÔNIAS LAC+ (COM COR) 
 
→ COLÔNIAS LAC– (INCOLORES) 
 
 Proteus spp (com swarmming ou véu) 
 
 
 Colônias H2S + 
 
 
 
 
 
• Não são recomendados para utilizar na rotina, já que não apresentam melhor custo/benefício em relação aos 
outros 
• São recomendados para uso em investigação de surtos de Salmonella spp, mas não para o isolamento de Shigella 
spp 
o VB (verde brilhante): isolamento de Salmonella, exceto Typhi e Paratyphi 
o Meio cromogênico: para Salmonela, inclusive, Typhi e Paratyphi 
 
 Meio VB Meio cromogênico 
 
→ Skirrow: base de agar sangue, soro lisado de cavalo e solução de antibióticos 
 
→ AS Campy: base de agar brucella com sangue de carneiro e solução de antibióticos 
 
 
→ Meio de Karmali: meio contendo carvão ativado e solução de antibiótico 
 
Salmonella, shigella e E. Coli devem ser pesquisadas quanto aos seus sorotipos através da realização de sorologia. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
• Provas bioquímicas de identificação bacteriana 
 
 
 
 
 
 
 
• Ágar TSI (triple sugar iron): 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
• SIM: 
 
 
Meio turvo → motilidade +; Meio límpido: motilidade -; 
→ Teste do indol: detecta a produção de indol pela bactéria em meio de cultivo contendo o aminoácido triptofano 
através da catálise da enzima triptofanase. 
▪ O meio de cultura deve conter triptofano e reagente de Kovac’s (amarelo), que reage com o 
indol produzindo um composto rosado; 
▪ Culturas com anel avermelhado na superfície são indol positivo; 
 
→ SIM com gás sulfídrico positivo: 
 
 
• Uréia: 
→ Determina a habilidade do microrganismo de degradar a uréia em duas moléculas de amônia pela ação 
da enzima urease. 
→ Em caso de reação positiva, irá ocorrer alcalinização intensa do meio, tornando-o rosa pink. 
 
 
 
 
 
 
 
• Citrato de Simmons: 
o Verifica a capacidade da bactéria de utilizar o citrato de sódio como única fonte de carbono, juntamente 
com sais de amônia como fonte de nitrogênio. 
o No caso de reação positiva, haverá alteração do pH, que se torna alcalino e provoca a viragem do 
indicador de pH (azul de bromotimol) para azul. 
 
• Lisina descarboxilase: 
o Se a bactéria for produtora dessa enzima, há liberação de CO2 e descarboxilação da lisina com produção 
de cadaverina (composto alcalino que neutraliza os ácidos produzidos na fermentação da glicose). 
Ocorre a viragem do indicador de pH novamente: o meio muda de amarelo e volta a ser púrpura (reação 
positiva). 
 
 
 
 
• Fenilalanina: 
o Algumas bactérias têm a capacidade de realizarem a desaminação oxidativa da fenilalanina através da 
enzima fenilalanina desaminase; 
o Como produto, formará o ácido fenilpirúvico, que, pode ser ácido, irá acidificar o meio; 
o Para a leitura da prova, é necessário a utilização de cloreto férrico a 10%, que irá revelar o resultado do 
teste; 
o Quando positivo: apresenta cor verde.

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