Tipagem sanguínea PDF

Prévia do material em texto

14/05/2019
1
Antígenos eritrocitários
A membrana dos eritrócitos é portadora de vários
antígenos
Estes antígenos diferem entre indivíduos da mesma
espécie (aloantígenos)
Podem induzir resposta imune entre doador e
receptor
Há cerca de 30 sistemas de grupos sanguíneos
conhecidos, por exemplo, sistema ABO, Rhesus,
MNS, Lewis, Kell, Duffy
• O sistema ABO é o mais importante dos sistemas de grupos sangüíneos
no tocante as transfusões
• Os antígenos A, B e H compõe o sistema do grupo ABO
• O gene ABO está localizado no cromossomo 9 e tem três alelos, A B e O
• O alelo A codifica uma enzima que adiciona N-acetilglicosamina ao
antígeno H
• O alelo B codifica uma enzima que adiciona d-galactose ao antígeno H
• O alelo O não modifica o antígeno H
KARL LANDSTEINER
• Patologista e imunologista
• Nasceu em Viena, Austria
• Em 1901 descobriu o sistema ABO
• A classificação do sistema ABO é baseada na presença ou
ausência dos aloantígenos A e B
• Um indivíduo pode possuir em suas hemácias os dois antígenos,
um ou ambos os antígenos podem estar ausentes
ISOAGLUTININAS
• Os anticorpos para os antígenos A e B estão normalmente
presentes no soro de indivíduos que não possuem esses antígenos
em suas hemácias
TIPAGEM ABO EM LÂMINA 
REAÇÃO DE HEMAGLUTINAÇÃO
• O teste identifica os antígenos A ou B em hemácias usando o
princípio da aglutinação
• Essa técnica é a tipagem ou classificação direta e é executada
combinando as células com um anti-soro conhecido
14/05/2019
2
Pesquisa de antígenos presentes nas hemácias
Tipagem sanguínea
MATERIAL
• Lâmina de microscópio limpa
• Soro anti A
• Soro anti B
Técnica
• Colocar uma gota do soro anti A no lado esquerdo da lâmina
• Colocar uma gota de soro anti B no lado direito da lâmina
• Colocar uma gota de sangue em cada lado da lâmina
• Misturar o sangue com os respectivos soros usando o canto de uma
lâmina de microscopia
• Fazer a leitura da reação
Hemácias
aglutinadas
Ausência de aglutinação
LEITURA DA REAÇÃO
Sistema ABO
Qual é o grupo?
14/05/2019
3
Uma em cada 250 mil pessoas possui um fenótipo extremamente raro de sangue, o
Falso O
Essa condição, também conhecida como Bombaim, local onde foi descrito pela
primeira vez em 1952, faz com que as hemácias do individuo sejam desprovidas
dos antígenos ABH normais
Indivíduos “Bombay” não possuem o antígeno “H” comum aos grupos
sanguíneos conhecidos (A, B, AB e O).
Devido a um anticorpo anti-H produzido por estes indivíduos, testes de
compatibilidade apresentam resultados fortemente positivos contra todos os
doadores do grupo “O”, daí a expressão “Falso O”.
O indivíduo com sangue Falso O acaba tornando-se incompatível com todos os
doadores que não sejam “Bombay”.
www.einstein.br/noticias/noticia/saiba-o-que-sangue-falso-o
• Grupo Rh foi descoberto na década de 40 por Landsteiner e
Wiener
• Relataram que o soro de coelhos anti-hemácias de Macacus
rhesus aglutinava as hemácias de 85% dos induivíduos
• Há mais de 45 antígenos do sistema Rh presentes na superfície das
hemácias, sendo os 5 mais importantes D, C, c, E, e.
• O principal antígeno do sistema Rh é o D
• As hemácias que possuem o antígeno D são Rh(D)positivas e as
que não tem o antígeno D são Rh(D) negativas
• Alguns indivíduos tem uma forma de antígeno D com fraca
expressão – variante Du
14/05/2019
4
Sistema Rh
TÉCNICA
• Colocar uma gota do soro anti Rh (D) no centro lâmina
• Colocar uma gota de sangue na lâmina
• Misturar o sangue com o soro usando o canto de uma lâmina de 
microscopia
• Fazer a leitura da reação
Não aglutina: Rh-
Aglutina: Rh +
TIPAGEM ABO e Rh EM LÂMINA 
REAÇÃO DE HEMAGLUTINAÇÃO
Anti D Rh positivo
Rh negativo
LEITURA DA REAÇÃO
• Qual é o grupo?
Anti A Anti B Anti D
Anti A Anti B Anti D
Anti A Anti B Anti D Anti A Anti B Anti D
Sistema ABO e Rh
14/05/2019
5
FREQÜÊNCIA DE GRUPOS ABO
Quase 90% da população brasileira tem sangue dos tipos A ou O
Os glóbulos vermelhos (eritrócitos ou hemácias) têm uma identidade que
permite a classificação do sangue em A, B, AB e O.
No Brasil, os grupos mais comuns são o O e o A, que abrangem 87% da
população. O B responde por 10% e o AB, por apenas 3%.
Japoneses, por exemplo, têm mais sangue B.
O tipo sanguíneo também é identificado pelo fator Rh positivo ou negativo.
Cerca de 85% das pessoas têm Rh positivo.
24/10/2011
http://g1.globo.com
Outros grupos sanguíneos e anticorpos importantes
O anticorpo Kell (anti-K) é o mais comumente encontrado 
Um terço de todos os aloanticorpos não ABO, não Rh são anti-K
Pacientes que tem anticorpos contra antígenos de outro grupo 
sanguíneo devem receber sangue Kell negativo
Mulheres grávidas que necessitem de transfusão de sangue devem 
receber sangue Kell negativo dos grupos ABO e Rh adequados
Card-ID
“DiaClon ABO/D + Reverse grouping for patients”
• A, B, DVI-, ctl / A1, B
• Determinação dos grupos sanguíneos ABO/Rh em 
combinação com a prova reversa
• Identificação do Produto: 50092
Introdução 
• Os soros-teste Anti-A e Anti-B são necessários para comprovar a
presenção ou ausência de antígeos A/B em eritrócitos humanos.
• A determinação do grupo sanguíneo ABO exige a realização da
prova reversa utilizando plasma ou soro para confirmar a
determinação correta dos antígenos ABO.
• Para a prova reversa são utilizados eritrócitos com especificidade
conhecida, a fim de detectar a presença ou ausência das
isoaglutininas Anti-A e Anti-B.
• Diferenças entre a determinação de antígenos e a prova reversa
exigem testes adicionais.
• O card ID “DiaClon ABO/D + reverse grouping for patients” permite
a determinação do grupo sanguíneo e determinação do RhD.
• A determinação deve ser realizada numa amostra recentemente
colhida, ou em conformidade com os critérios de aceitação do
procedimento laboratorial local.
• As amostras de sangue devem, de preferência, ser colhidas em
anticoagulante citrato, EDTA ou CPD-A.
• Plasma ou soro podem ser utilizados para a prova reversa.
• O soro deve ser bem limpo por centrifugação a 1500 g durante 10
minutos antes de ser utilizado, a fim de evitar resíduos de fibrinas
que poderiam interferir na reação.
14/05/2019
6
Reação de hemaglutinação em gel
• O teste é realizado em tubos contendo partículas de gel de
acrilamida dextran combinadas com diluente ou reagente.
• Dependendo do teste, utiliza-se gel neutro (sem reagente) ou gel
contendo reagente espeífico (por exemplo, soro anti-A).
• Na superfície do gel adiciona-se uma suspensão das hemácias
do paciente (prova direta).
• Na prova indireta adiciona-se uma suspensão de hemácias
conhecidas (comerciais) com soro do paciente (prova reversa).
• Após centrifugação faz-se a leitura da reação.
• As células que não sofrem aglutinação passam pelo gel, enquanto
as células que sofrem aglutinação permanecem suspensas no gel.
• O teste em gel está baseado no princípio da centrifugação
controlada das hemácias através do gel.
• ID-Card “DiaClon ABO/D + Prova Reversa” com 3 microtubos
contendo anticorpos monoclonais anti-A , anti-B e anti-D.
• O microtubo ctl é o controle negativo.
• Dois microtubos com gel neutro servem para a realização da prova
reversa, utilizando hemácias A1 e B (suspensão de hemácias a
0,8%), fornecidas pelo fabricante.
Anti-A Anti-B Anti-D
Controle negativo
Gel neutro
para prova
reversa com
hemácias A1
e B e soro do
paciente.
Preparação das amostras de sangue
• Suspensão de hemácias para determinação ABO/D
• Preparar a suspensão de hemácias a 5% em ID-Diluent 2 (fornecido 
pelo fabricante). Usar imediatamente.
500 µL do 
diluente
+ 
25 µl do 
concentradode hemácias 
ou 50 µl de 
sangue total
Suspensão de 
hemácias a 5%
• Se o plasma ou soro não forem utilizados de imediato após a
separação, devem ser guardados no máximo 48 horas a uma
temperatura de 2-8 °C, ou estocar a -20ºC.
• Antes de utilizar, deixe os reagentes atingirem a temperatura
ambiente.
• Amostras positivas e negativas conhecidas (controles) devem ser
incluídas.
• O Card-ID deve indicar o número ou dado únicos do doente ou
doador, conforme o caso.
14/05/2019
7
Técnica
• Retirar a película de alumínio de todos os microtubos
necessários segurando o Card-ID na posição vertical.
• Usar a pipeta e introduzir 50 µL de “ID-DiaCell A1 no microtubo
5
• Usar a pipeta e introduzir 50 µL de “ID-DiaCell B” no microtubo
6
• Adicionar 50 µL de plasma/soro nos microtubos 5 e 6.
Recomenda-se uma incubação de 10 minutos à temperatura
ambiente
• Adicionar 10 ou 12,5 µL da suspensão de eritrócitos do
paciente nos microtubos 1 a 4 (A, B, D, ctl).
50 µL de “ID-
DiaCell A1 +
50 µL de soro
50 µL de “ID-
DiaCell B + 50 
µL de soro
10 µL da suspensão de 
eritrócitos
• 7. Centrifugar o card ID durante 10 minutos na ID centrifuga.
• 8. Ler as reações
Não reagente
Hemácias no fundo do 
tubo
Reagente
Hemácias formando uma 
linha na parte superior do gel
14/05/2019
8
Inteligente, persistente,
reservado, honesto, 
criativo, sensivel, calmo, 
paciente, amoroso…
A 
B 
AB 
O 
Tipo A
• Temperamento: reservado, discreto, cauteloso e indeciso.
• Relacionamentos: Faz de tudo para manter a harmonia nos grupos
de que faz parte. Tende a se preocupar demais com os outros e por
isso é dedicado a quem ama. Não resiste a uma declaração sincera.
• Carreira: tipo persistente, gosta de ordem e é perfeccionista.
Consegue se dar bem em trabalhos que exigem atenção a detalhes.
• Melhores carreiras: contador, bibliotecário, advogado, economista, 
escritor.
• Saúde: Mais sujeitos a doenças cardiovasculares, diabete e câncer.
• Famosos tipo A: Britney Spears e Adolf Hitler.
Tipo B
• Temperamento: Só age de acordo com a própria vontade e detesta
ser controlado. De mente aberta, respeita opiniões diferentes.
• Relacionamentos: Demonstrar o que sente e é sensível. Apesar de
gostar de saber o que é importante na vida do parceiro, detesta
romantismo exagerado.
• Carreira: É pouco convencional e muito criativo, honesto, cheio de 
energia para o trabalho e perseverante. 
• Melhores carreiras: detetive, jornalista, artista, artesão, psiquiatra.
• Saude: cuidado com enfermidades causadas por virus e bacterias
• Famosos tipo B: Jack Nicholson, Leonardo Di Caprio e Paul
McCartney.
Tipo AB
• Temperamento: Mistura características dos tipos A e B. Às vezes 
parece ter dupla personalidade e muda de opinião de uma hora 
para outra. É racional ao extremo, crítico e percebe bem o caráter 
das pessoas.
• Relacionamentos: Sente-se atraído por gente espirituosa, no amor e 
na amizade.
• Carreira: Tem o dom de conseguir fazer várias coisas ao mesmo 
tempo e é ótimo estrategista. É muito organizado.
• Melhores carreiras: gerente, negociador, relações-públicas, 
professor e advogado.
• Saúde: Mais s ujeito a ter problemas cardiovasculares, diabete, 
câncer e doenças causadas por vírus e bactérias.
• Famosos tipo AB: Jackie Chan, Marilyn Monroe e Mick Jagger.
14/05/2019
9
Tipo O
• Temperamento: calmo e paciente, sabe como controlar suas
emoções. É determinado e autoconfiante, talvez por causa de seu
talento para pensar de forma direta e descomplicar a vida.
• Relacionamentos: Com pessoas estranhas é um tanto desconfiado, 
mas com os amigos e a família é bastante carinhoso. Gosta de 
sentir-se valorizado.
• Carreira: O poder o atrai e ele não se intimida em lutar para
conquistá-lo. Muito competitivo, sabe liderar e fica muito à vontade
no papel de chefe. Normalmente especializa-se em algum assunto
e destaca-se na área.
• Melhores carreiras: contador, político, vendedor, terapeuta.
• Saúde: Mais vulnerável a doenças relacionadas à falta de dopamina 
no cérebro, como depressão e obesidade, além de hipotireoidismo 
e úlceras.
• Famosos tipo O: Rainha Elizabeth, John Lennon e Elvis Presley.
O B R I G A D O