Determinação de Paracetamol e AAS por Eletroforese Capilar

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Universidade Federal de São Paulo - Campus Diadema
Análise Instrumental II
Eletroforese capilar (CE): Determinação de paracetamol e ácido acetilsalicílico (AAS) em comprimido Doril
Giovanna Souza - 113495
Jéssica Portugal - 84641
Myrian Morihara - 55852
Diadema, 2019
1) Estimar a ordem de migração dos compostos. Justifique a resposta.
Ordem de migração: A cafeína sai junto com o fluxo eletrosmótico. Após isso, o paracetamol sai primeiro, e após isso, o ácido acetilsalicílico. 
2) Identificar o fluxo eletrosmótico.
A parede do capilar é feita de sílica, e revestida com polimida. Como a otimização foi realizada em um experimento anterior, sabe-se que que o tetraborato pH = 9 é suficiente para separar esses compostos (eletrólito de corrida). A parede do capilar, composta por silanol, com pKa em torno de 3,5, que em pH = 9 estará quase totalmente dissociado, e por isso a parede do capilar está toda na forma de ânion. Ao aplicar um potencial positivo, (o fluxo) os cátions da solução vão se mover sentido à janela de detecção, carregando todos os compostos introduzidos no plug de amostra. A separação vai ocorrendo pela diferença de mobilidade, as substâncias vão sentir a radiação proveniente da lâmpada de UV-VIS, que ao passar pela fibra óptica, vão absorver um comprimento de onda e gerar o sinal. A fonte aplica a tensão na amostra, por meio do fio de platina, e é formado um campo elétrico.
3) Baseado nos valores de pKa e condições experimentais, justifique a ordem de migração dos compostos.
As migrações dependem da magnitude das constantes de dissociação do soluto (pKa) e determina a predominância relativa das espécies num determinado pH. Neste experimento foi utilizado um tampão com pH 9. Nesse pH, o AAS que possui pKa 3,41 encontra-se cerca de 99% na forma ionizada, e o paracetamol com pKa 9,46 encontra-se cerca de 40% na forma ionizada. Conforme esquema abaixo, observa-se que o AAS, por estar totalmente iônico, deslocou-se completamente para o lado positivo, visto que a parede do capilar está negativamente carregada (devido ao silanol em pH 9), sendo assim a última substância a ser carregada pelo fluxo. Já o paracetamol, que estava numa proporção aproximada de 50% na forma iônica, tem uma atração menos intensa com o pólo positivo, sendo menos resistente ao fluxo, gerando o primeiro a ser detectado, por migrar primeiro no sentido do detector (pólo negativo).
 
4) Explique porque não é possível a visualização da cafeína
A cafeína, por possuir pKa = -1,16, fica 100% em sua forma neutra no pH=9, não tendo nenhuma interação/atração com os íons presentes na parede do capilar. Dessa forma, não há resistência, e a cafeína sai junto com o eletrólito de migração, e seu tempo de migração é o mesmo tempo do fluxo. Por convenção, não se quantifica qualquer substância que saia junto com o fluxo.
5) Quantifique o teor de paracetamol e AAS no comprimido de Doril 
Construíram-se as curvas de calibração para o paracetamol e AAS e encontraram-se as equações da reta para cada analito.
Equação da reta: y = 1873,1x + 1049,1 
R2 = 1
Equação da reta: y = 1506,8x + 701,17 
R2 = 0,9989
Para calcular as concentrações, utilizou-se a equação da reta correspondente ao analito, sendo x a concentração a ser encontrada e y a área do pico da amostra. Encontraram-se os valores da concentração do eppendorf e voltando a diluição, a concentração do balão. Foi necessário diluir 3x.
Após encontrar a massa dos analitos presentes em 20 mg, através da concentração do balão, calcularam-se as massas dos analitos para o peso total do comprimido.
	
	 Paracetamol (comprimido)
	AAS (comprimido)
	Área do pico
	159036
	187054
	Concentração eppendorf (mg/L)
	84,34514975
	123,674562
	Concentração balão (mg/L)
	253,0354493
	0371,023686
	Massa em 20 mg
	12,65177247
	18,5511843
	Massa em 1 comprimido (mg)
	457,9941634
	671,5528717
	Massa do comprimido utilizado (mg)
	724,0
	Dados do rótulo 
	 Paracetamol 
	AAS
	Massa (mg)
	250
	250