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Escurecimento Enzimático em alimentos Prof. Drª Jessica Bezerra dos Santos Rodrigues Introdução Escurecimento oriundo de reações catalisadas por enzimas genericamente conhecidas como polifenoloxidases (PPOs). As enzimas e os seus substratos estão em compartimentos celulares diferentes. Durante o esmagamento, estes compartimentos são destruídos e as enzimas entram em contato com os compostos fenólicos oxidando-os rapidamente. Escurecimento Enzimático Formação de um pigmento escuro (melanina) nas frutas e vegetais devido a uma ação enzimática envolvendo compostos fenólicos. Escurecimento Enzimático Ocorre geralmente em frutas e vegetais A reação de escurecimento em frutas, vegetais e bebidas é um dos problemas principais na indústria de alimentos. 50% da perda de frutas tropicais no mundo é devida à enzima polifenoloxidase. A ação desta enzima resulta na formação de pigmentos escuros, frequentemente acompanhados de mudanças indesejáveis na aparência e nas propriedades organolépticas do produto, resultando em diminuição da vida útil e do valor de mercado. Participantes da reação Enzimas: polifenóis oxidases (PPO) e peroxidases (POD) Substrato: monofenol (fenol, ortocresol, tirosina), difenóis (ácido caféico, catecol, 3,4-diidroxifenilalanina), ácido clorogênico. Oxigênio Este processo é favorecido por danos físicos às frutas e vegetais como: cortes, descascamento, contusão, amassamentos, trituração. Consequências: Prejuízo econômico Alterações das características sensoriais dos produtos: Diminuição do valor nutritivo Escurecimento Enzimático Devido redução da disponibilidade da lisina, metionina, tiamina e outros nutrientes essenciais (ARAÚJO, 1999). Escurecimento enzimático Lindet (1895) O tecido injuriado escurece rapidamente, quando exposto ao ar, devido a conversão dos compostos fenólicos a melanoidinas marrons. Enzimas Polifenoloxidade Fenolase Polifenolase PPO e POD As Polifenóis oxidases são denominadas frequentemente de tirosinase, polifenolase, fenolase, catecol oxidase, creolase ou catecolase, dependendo dos substratos utilizados na reação de escurecimento dos tecidos vegetais. As Peroxidases realizam reação de oxidação de compostos fenólicos em presença de peróxido de hidrogênio. Escurecimento enzimático Fatores que influenciam a iniciação do escurecimento enzimático: Presença da enzima – ex.: Polifenoloxidase Presença do grupo prostético Cobre Presença do oxigênio Como controlar o Escurecimento Enzimático? Eliminação de um ou mais de seus componentes essenciais: O oxigênio A enzima O cobre ou o ferro do centro catalítico das enzimas O substrato Controlar as condições extrínsecas de armazenamento. Inativação térmica da enzima pelo uso do calor Branqueamento Pasteurização (HTST – high temperature short time) 80ºC por 8 segundos 80% da atividade enzimática é perdida; 90ºC por 8 segundos quase 100% da atividade enzimática é perdida. Como controlar o Escurecimento Enzimático? Modulação do pH: inativação da enzima a pH ≤ 4,0 As enzimas PPOs apresentam a faixa de pH ótimo entre os valores de 5,0 a 7,0; Eliminação do Oxigênio da superfície danificada do vegetal Utilização de embalagens impermeáveis,; Exclusão do oxigênio por injeção de nitrogênio; Prevenção de danos mecânicos provocados no tecido durante o transporte e armazenamento; Como controlar o Escurecimento Enzimático? Adição de substâncias inibidoras do escurecimento: Agentes antioxidantes, acidulantes, quelantes ou complexantes ou inibidores enzimáticos, atuando diretamente nas enzimas, nos substratos ou ainda nos produtos de reação. Como controlar o Escurecimento Enzimático? OBS.: Podem ser utilizados inibidores como sulfito de hidrogênio, cianeto, dentre outros. Mas não podem ser utilizados em grandes quantidades em sistemas alimentícios devido a problemas de toxicidade e formação de “off-flavours” Escurecimento enzimático desejável Dúvidas?