Métodos Biofísicos de Análise

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Métodos Biofísicos de Análise
- Soluções biológicas apresentam múltiplos componentes.
- Soluções qualitativas e quantitativas.
- Serve para separar e identificar soluções.
Identificação
- Espctrofotometria: Método de análise óptico mais usado nas investigações biológicas e físico-químicas. 
Um feixe de energia atravessa uma solução e a sua absorção ou emissão oferece informações sobre a 
qualidade ou a quantidade dos componentes do sistema.
- Cada substância absorve mais luz em um tereminado comprimento de onda (especificidade).
- É fundamental usar a luz monocromáticas que seja maior parte absorvida (sensibilidade). 
Tipos de espectrofotometria: Absorção, emissão, etc.
Espectrofotometria de absorção
1) Determinaçõa de quais comprimentos de ondas são absorvidos pelas substâncias (curva de absorção 
espectral).
2) Determinação da concentração de substâncias (relação concentração / absorção).
- Curva de absorção espectral: Identifica substâncias, grupamentos químicos, pureza da substâncias e o 
comprimento de onda para a dosagem de substâncias.
- Determinação da concentração de substâncias; Lei de Lamber-beer: A = EC;
- Determinação da concentração de substâncias: Curva de calibração (quando A não é linear em função da 
concentração, não podendo ser usado nem fator de calibraçnao, nem coeficiente de extinção). É obtida 
lendo-se as absorções de padrões de várias concentrações em um determinado comprimento de onda.
Espectrofotometria de emissão
- O sistema biológico é excitado e emite uma luz característica.
- Fotometria de chama: Usada exclusivamente para cátios. Excitaçnao da substância feita com 
aquecimento. Mede-se a intensidade da radiação emitida pelos átomo excitados. A substância em questão é 
destruída. Está sendo substituída pela espectrofotometria de absorção atômica.
Separação / Purificação
- Cromatografia (de adsorção, de partição, de filtração em gel, de troca iônica) e eletroforese.