Como funcionam os Testes de gravidez

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Como funcionam os
Testes de gravidez?
ABC dos Imunoensaios, Hibridoma e
Testes Rápidos
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Afinal, o que é um Imunoensaio?
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Afinal, o que é um Imunoensaio?
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ADAPTADO DE: ARYAL, S. INTRODUCTION TO ANTIGEN-ANTIBODY REACTIONS. DISPONÍVEL EM:
.
I IMUNOCROMATOGRAFIA - PRINCÍPIOS
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ADAPTADO DE: AN INTRODUCTION TO THE DIFFERENT TYPES OF ELISA TESTS | INTEGRA. DISPONÍVEL EM:
.
Visualização
I IMUNOCROMATOGRAFIA - PRINCÍPIOS
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Anticorpos, contudo, não são visíveis a olho nu e, para permitir sua visualização, é
necessário que ou enzimas- Peroxidases ou Fosfatase Alcalina, por exemplo- ou
fluoróforos sejam acoplados a eles.
Assim, se há o sinal de fluorescência ou de cor, é possível concluir a presença de
do anticorpo de marcação e, portanto, do antígeno que ele reconhece*.
Visualização
I IMUNOCROMATOGRAFIA - PRINCÍPIOS
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I IMUNOCROMATOGRAFIA - PRINCÍPIOS
VÁZQUEZ-GUTIÉRREZ, JOSÉ L. ; LANGTON, MAUD, CURRENT POTENTIAL AND LIMITATIONS OF IMMUNOLABELING IN CEREAL GRAIN RESEARCH, TRENDS IN FOOD SCIENCE & TECHNOLOGY, V. 41, N. 2, P. 105–117, 2015.
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I IMUNOCROMATOGRAFIA - PRINCÍPIOS
Antisoros podem ser classificados como policlonais ou monoclonais de
acordo com a origem dos anticorpos ali presentes. Caso todos
reconheçam o mesmo epítopo, vindo de um mesmo clone de célula B,
trata-se de um antisoro monoclonal (mAbs), caso os anticorpos ali
reconheçam diferentes epítopos, trata-se de um antisoro policlonal.
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Hibridoma
Polyclonal and Monoclonal Antibody Production | Microbiology.
Disponível em: .
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I IMUNOCROMATOGRAFIA - PRINCÍPIOS
Imunocromatografia!
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MOJSIEWICZ-PIEŃKOWSKA, K. SIZE EXCLUSION CHROMATOGRAPHY A USEFUL TECHNIQUE FOR SPECIATION ANALYSIS OF
POLYDIMETHYLSILOXANES. GREEN CHROMATOGRAPHIC TECHNIQUES, P. 181–202, 13 NOV. 2013.
I IMUNOCROMATOGRAFIA - PRINCÍPIOS
Fase Móvel
Fase Estacionária
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I IMUNOCROMATOGRAFIA - ENSAIO
IMMUNOCHROMATOGRAPHY GUIDE - CREATIVE DIAGNOSTICS. DISPONÍVEL EM: .
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I IMUNOCROMATOGRAFIA - ENSAIO
IMMUNOCHROMATOGRAPHY GUIDE - CREATIVE DIAGNOSTICS. DISPONÍVEL EM: .
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I IMUNOCROMATOGRAFIA - ENSAIO
IMMUNOCHROMATOGRAPHY GUIDE - CREATIVE DIAGNOSTICS. DISPONÍVEL EM: .
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I IMUNOCROMATOGRAFIA - INTERPRETAÇÃO
IMMUNOCHROMATOGRAPHY GUIDE - CREATIVE DIAGNOSTICS. DISPONÍVEL EM: .
ADAPTADO DE: UNDERSTANDING LATERAL FLOW ANTIGEN TESTING FOR PEOPLE
WITHOUT SYMPTOMS. DISPONÍVEL EM:
.
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Ocorre em uma membrana de nitrocelulose, aproveita os princípios de
capilaridade, e os marcadores usuais são Nanopartículas de Ouro (AuNP) 
Labtest Diagnóstica | Teste Rápido COVID-19 Ag. Disponível em: . Acesso em: 9 jun. 2023.
I IMUNOCROMATOGRAFIA - PRINCÍPIOS
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A Imunocromatografia, também conhecida como Teste de Fluxo Lateral
é vantajosa por ser um teste:
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Rápido 
(5~30 minutos)
Prático
não necessita de especialistas ou de
um laboratório
Econômico
viabilizando testagem em
massa
I IMUNOCROMATOGRAFIA - VANTAGENS
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I IMUNOCROMATOGRAFIA - APLICAÇÕES
Adaptado de: SARS-CoV-2 coronavirus proteins. Disponível em:
.
Mesmo com o qRT-PCR sendo o
padrão-ouro para diagnóstico de
infecção por COVID-19, a
Imunocromatografia teve, por suas
particularidades, um grande papel
durante a pandemia de SARS-CoV2 
na busca pela presença de
antígenos virais.
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Exames Sorológicos podem avaliar, por exemplo, a presença de
anticorpos específicos em uma amostra de sangue, indicam que o
indivíduo, por exemplo, já foi infectado ou que está imunizado contra,
no caso, o COVID-19.
Além da Utilidade Epidemiológica na pesquisa para análise de fatores
como a soroconversão, possui também valor diagnóstico em casos
suspeitos, não sendo recomendado para ser usado na população geral.
I IMUNOCROMATOGRAFIA - APLICAÇÕES
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DISPONÍVEL EM:
. ACESSO
EM: 16 JUL. 2024.
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Testes rápidos de
gravidez, buscam a
presença de β-hCG por
meio da
Imunocromatografia
SMITH, D. J. GUIDE TO PREGNANCY HORMONES. DISPONÍVEL EM: .
I IMUNOCROMATOGRAFIA - APLICAÇÕES
23D’HAUTERIVE, S. P. ET AL. HUMAN CHORIONIC GONADOTROPIN AND EARLY EMBRYOGENESIS: REVIEW. INTERNATIONAL
JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES, V. 23, N. 3, P. 1380, 1 JAN. 2022.
I IMUNOCROMATOGRAFIA - APLICAÇÕES
A Gonadotropina
Coriônica Humana (hCG)
é uma glicoproteína de
36~41 kDa composta por
duas subunidades.
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Vamos praticar?
3
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Técnica extremamente versártil, podendo ser
aplicada em células em suspensão, em cultura, em
tecidos ou até em organismos como um todo.
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Imunofluoerescência
Mesmas etapas de fixação e tratamento do
objeto de estudo que na Imunohistoquímica
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Imunofluoerescência
KALSER, S. DIRECT VS INDIRECT DETECTION IN MICROSCOPY. DISPONÍVEL EM: .
Anticorpos conjugados com fluoróforos, como
Isotiocianato de fluoresceína (FITC)
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II IMUNOFLUORESCÊNCIA - REQUISITOS
IBIDI. Confocal Microscopy | Principle & Applications | ibidi. Disponível em: .
Olympus Fluorescence Microscope. Disponível em: . Acesso em: 16 jul. 2024.
Requer equipamentos
especializados para visualização
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A Imunofluorescência possui vantagens intrínsecas, como:
II IMUNOFLUORESCÊNCIA
Amplificação do Sinal
Excelente Sensibilidade
Multiplexação
RASHID, R. et al. Highly multiplexed immunofluorescence images and single-cell data of immune markers in tonsil and lung cancer. Scientific Data, v. 6, n. 1, dez. 2019.
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II IMUNOFLUORESCÊNCIA - APLICAÇÕES
Diagnóstico
RASHID, H. et al. Oral Lesions in Autoimmune Bullous Diseases: An Overview of Clinical Characteristics and Diagnostic Algorithm. American Journal of Clinical
Dermatology, v. 20, n. 6, p. 847–861, 16 jul. 2019.
23DENARDO, D. G. et al. CD4+ T Cells Regulate Pulmonary Metastasis of Mammary Carcinomas by Enhancing Protumor Properties of Macrophages. Cancer Cell, v. 16, n. 2, p. 91–102, ago. 2009.
Pesquisa
II IMUNOFLUORESCÊNCIA - APLICAÇÕES
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22 A
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NG, Q. X. et al. The Performance of Lateral Flow Tests in the Age of the Omicron: A Rapid Systematic Review. Life, v. 12, n. 11,
p. 1941, 21 nov. 2022.
WANG, J. J. et al. Rapid Lateral Flow Tests for the Detection of SARS-CoV-2 Neutralizing Antibodies. Expert Review of
Molecular Diagnostics, p. 1–8, 2021.
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Diagnosis by the Detections of SARS-CoV-2 Antigen and Anti-SARS-CoV-2 Antibodies. Diagnostics, v. 11, n. 10, p. 1760, 24 set.
2021.
MBOUMBA BOUASSA, R.-S. et al. Analytical performances of the point-of-care SIENNATM COVID-19 Antigen Rapid Test for
the detection of SARS‐CoV‐2 nucleocapsid protein in nasopharyngeal swabs: A prospective evaluation during the COVID-19
second wave in France. International Journal of Infectious Diseases, mar. 2021.
LIS, K. From Cereal Grains to Immunochemistry—What Role Have Antibodies Played in the History of the Home Pregnancy
Test. Antibodies,v. 12, n. 3, p. 56, 1 set. 2023.
D’HAUTERIVE, S. P. et al. Human Chorionic Gonadotropin and Early Embryogenesis: Review. International Journal of
Molecular Sciences, v. 23, n. 3, p. 1380, 1 jan. 2022.
HALL, J. E. Guyton and hall textbook of medical physiology. 13. ed. [s.l.] Elsevier, 2016.
IM, K. et al. An introduction to Performing Immunofluorescence Staining. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), v. 1897,
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MURPHY, K. M. et al. Janeway’s immunobiology. 9th. ed. [s.l.] New York London Gs, Garland Science, Taylor & Francis Group,
2017.
RASHID, H. et al. Oral Lesions in Autoimmune Bullous Diseases: An Overview of Clinical Characteristics and Diagnostic
Algorithm. American Journal of Clinical Dermatology, v. 20, n. 6, p. 847–861, 16 jul. 2019.
II REFERÊNCIAS
Muitíssimo Obrigado!
Dúvidas?