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PCR Qualitativa e Quantitativa Clonagem e Bibliotecas Genômicas PCR qualitativa detecta presença, mas Enzimas de restrição fragmentam DNA para não quantidade do gene construção de bibliotecas qPCR mede expressão gênica em tempo Vetores transportam fragmentos de DNA ou real com precisão cDNA para clonagem PCR qualitativa não requer Bibliotecas de cDNA derivam do mRNA termociclador com leitura em tempo real convertido em DNA complementar qPCR é essencial para análises E. coli é hospedeira principal para quantitativas de expressão gênica replicação dos vetores clonados Biologia Hibridização FISH Técnicas de Hibridização Detecta mutações por Molecular Baseiam-se na complementaridade translocação cromossômica das bases nitrogenadas específica CGH array e FISH são técnicas Uso de sondas marcadas com para análise genômica fluoróforos para FISH usa sondas fluorescentes visualização para múltiplos genes simultâneos Fusão dos sinais DAPI é corante usado para fluorescentes indica mutação marcação do DNA em FISH genética Aplicada para diagnóstico de síndromes como a trissomia 21 Sequenciamento MinION Plataforma portátil que sequencia DNA por passagem em nano poros Extração e Purificação de Ácidos Nucleicos Enzimas ligadas ao DNA facilitam a passagem pelo poro para Replicação do DNA celular libera DNA/RNA para posterior purificação leitura DNA polimerase sintetiza igação do DNA/RNA a colunas específicas para Variações na corrente elétrica nova fita adicionando solamento indicam a sequência dos nucleotídeos na direção nucleotídeos 5'-3' avagem remove contaminantes e impurezas do material genético Permite sequenciamento rápido e Primase sintetiza primers luição recupera DNA/RNA puro para análises em campo, com alta precisão para iniciar a replicação do DNA ubsequentes Helicase separa as fitas de DNA rompendo pontes de hidrogênio Processo é altamente coordenado para garantir fidelidade genética