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Prova Impressa GABARITO | Avaliação II - Individual (Cod.:1523407) Peso da Avaliação 2,00 Prova 107611164 Qtd. de Questões 10 Acertos/Erros 10/0 Nota 10,00 No estudo metabolômico necessita-se da comparação do perfil de metabólitos entre distintas amostras, o que implica que o objetivo do estudo seja previamente definido para direcionar a extração quando ela for necessária, especialmente nos casos em que se deseja quantificar os metabólitos, pois cada solvente irá extrair um perfil diferenciado de metabólitos. Após a extração, os solventes devem ser evaporados para evitar contaminação nas etapas de fracionamento, detecção e quantificação. Sobre as técnicas para quantificação de metabólitos, associe os itens, utilizando o código a seguir: I- Cromatografia gasosa - espectrometria de massas (GC-MS). II- Cromatografia líquida-espectrometria de massas (LC-MS). III- Ressonância magnética nuclear (RMN). ( ) Essa técnica permite a detecção simultânea dos diferentes tipos de metabólitos, não degradando as moléculas e permitindo que a amostra seja recuperada para análises posteriores. ( ) Técnica mais indicada para o fracionamento de composto apolares e de menor peso molecular, associada à espectrometria de massas. ( ) Técnica acoplada à espectrometria de massas, indicada para compostos polares, de maior peso molecular ou que não possam ser submetidos ao aumento de temperatura. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: A II - I - III. B Nenhuma das alternativas está correta. C I - II - III. VOLTAR A+ Alterar modo de visualização 1 D I - III - II. E III - I - II. Conhecendo estes conceitos básicos e sabendo que o processo de recombinação gênica que acontece na meiose é um processo ordenado em eucariotos, é possível inferir a frequência em que essa recombinação ocorre para cada um dos genes e, assim, determinar sua posição relativa no cromossomo. Sobre a recombinação cromossômica, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas: I- Genes heterozigotos não geram nova conformação de alelo, uma vez que ambos os alelos são iguais. PORQUE II- Genes homozigotos apresentam dois genes diferentes que podem se apresentar como dominantes ou recessivos. Assinale a alternativa CORRETA: A As asserções I e II são verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I. B A asserção I é uma proposição falsa e a II é uma proposição verdadeira. C A asserção I é uma proposição verdadeira e a II é uma proposição falsa. D As asserções I e II são falsas. E As asserções I e II são verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I. Existem diferentes técnicas de ionização que podem ser aplicadas aos peptídeos, sendo as principais delas a ionização/dessorção a laser assistida por matriz (MALDI) e a ionização por eletro spray (ESI). 2 3 Sobre os processos de ionização utilizados nas análises de proteômica, assinale a alternativa CORRETA: A A ionização ESI utiliza cristais que são bombardeados por laser, sendo sublimados (convertidos em fase gasosa) e ionizados durante o processo. B A ionização ESI é considerada agressiva por desnaturar amostras peptídicas. C Nenhuma das alternativas é correta. D A ionização por MALDI permite degradação de moléculas como DNA e proteínas. E A ionização por MALDI é considerada branda, sendo aplicável a moléculas sensíveis como DNA e proteínas. A genômica estrutural é o estudo da estrutura propriamente dita do genoma, sendo seu principal objetivo atrelado à possibilidade de manipulação de fragmentos do DNA ou de seus genes in loco. Sobre a genômica estrutural, associe os itens, utilizando o código a seguir: I- Mapas cromossômicos de alta resolução. II- Mapas cromossômicos de baixa resolução. III- Mapas cromossômicos físicos. ( ) A primeira etapa se baseia na ocorrência de um alelo que não esteja presente no mapa cromossômico, em uma região com marcadores já mapeados. Dessa forma, pode-se definir em qual cromossomo aquele novo alelo ocorre. ( ) A segunda etapa determina a posição dos genes dentro de cada cromossomo, fornecendo informações mais precisas sobre esses gene e marcadores no genoma. ( ) A terceira etapa aplica diferentes técnicas determinando um mapa físico do genoma e ocorre o sequenciamento. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 4 A Nenhuma das alternativas está correta. B I - II - III. C II - I - III. D I - III - II. E III - II - I. [Laboratório Virtual - RT-PCR] Segundo o sumário da aula prática, a transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR – reverse transcription polymerase chain reaction) é um método de biologia molecular utilizado desde o início da década de 1980. A partir de conhecimentos em virologia baseados em enzimas responsáveis pela replicação viral, os cientistas estudaram a atividade da enzima transcriptase reversa (RT – reverse transcriptase). Sobre os reagentes utilizados na reação de RT-PCR, analise as sentenças a seguir: I- Amostra de RNA e Transcriptase reversa. II- Primer F, primer R e OligoDT. III- Buffer e MgCl2. IV- dNTP, Taq DNA polimerase e indutor de RNAse. Assinale a alternativa CORRETA: A As sentenças I e II estão corretas. B As sentenças I, II e III estão corretas. C As sentenças III e IV estão corretas. 5 D As sentenças II e III estão corretas. E As sentenças I, II, III e IV estão corretas. A grande vantagem da utilização do RNA-seq é que, nesta tecnologia, não é necessário que se tenha prévio conhecimento do genoma ou dos transcritos que serão avaliados. Algumas das aplicações relacionadas a essa técnica são: a avaliação da expressão gênica diferencial, análise do perfil do transcriptoma e a investigação de SNPs. Com base nas etapas para do método da transcriptoma RNA-seq, ordene os itens a seguir: I- Fragmentar as moléculas por ação de enzimas de restrição, sonicação ou nebulização, formando fragmentos que serão ligados a adaptadores (pequenas sequências de nucleotídeos que indicam onde o sequenciamento deve ser iniciado em cada molécula). II- Isolar e fragmentar o RNA a ser sequenciado e convertê-lo em cDNA. III- Aplicar métodos de sequenciamento para sequenciar pequenas porções, compostas por 30 a 200 pb (pares de bases), de cada um dos fragmentos. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: A I - II - III. B I - III - II. C Nenhuma das alternativas é correta. D II - III - I. E II - I - III. A sigla CRISPR vem do inglês Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats e pode ser traduzida como grupos de repetições palindrômicas curtas e regularmente interespaçadas. Já o Cas 9 se refere à nuclease que se encontra associada ao sistema CRISPR. 6 7 Com base na técnica CRISPR-Cas9, analise as sentenças a seguir: I- Uma molécula de RNA guia (gRNA) é inserida em uma sequência maior de RNA. Quando em contato com o DNA, o gRNA se liga uma a sequência específica do DNA, indicando para a enzima Cas9 onde o DNA deve ser cortado. II- Os mecanismos de reparo de DNA presentes na célula é ativado e utilizado para a inserção, exclusão de pares de bases do DNA ou para efetuar a substituição de segmentos inteiros de DNA por segmentos de DNA personalizados. III- Os efeitos da edição do genoma em células e animais experimentais, pois essa ferramenta se mostra bastante promissora para o tratamento de doenças relacionadas a determinados genes, como a fibrose cística e a hemofilia, e para auxiliar no tratamento de outras doenças, como o câncer. Assinale a alternativa CORRETA: A Somente a sentença II está correta. B As sentenças II e III estão corretas. C As sentenças I e III estão corretas. D Somente a sentença I está correta. E As sentenças I, II e III estão corretas. Uma das descobertas mais intrigantes do projeto genoma humano foi identificar que somente uma pequena porcentagem de todo genoma codificava uma proteína. Com base nas sequências codificadoras e não codificadoras de proteínas, analise as sentenças a seguir:I- Sequências codificadoras são chamadas de éxons e são responsáveis por originar sequências de aminoácidos específicas, que corresponde a uma proteína. II- Sequências não codificadoras são denominadas de íntrons, não tendo função conhecida no genoma humano. III- Sequências reguladoras são aquelas denominadas como éxons, regulando quando e quanto de um gene será expresso. 8 Assinale a alternativa CORRETA: A As sentenças I, II e III estão corretas. B Somente a sentença II está correta. C Somente a sentença III está correta. D As sentenças I e II estão corretas. E As sentenças II e III estão corretas. [Laboratório Virtual - RT-PCR] A transcrição reversa é uma reação que ocorre pela ação da enzima transcriptase reversa ou RT. Essa enzima é uma DNA polimerase dependente de RNA, ou seja, ela é capaz de sintetizar uma fita de DNA utilizando como molde a fita simples de RNA. Sua descoberta se deu a partir da observação de que, quando os retrovírus, cujo material genético é um RNA, infectam um hospedeiro, o RNA viral é convertido em DNA. Sobre a técnica de RT-PCR, assinale a alternativa CORRETA: A Para o processo de transcrição reversa, são necessários oligonucleotídeos sintéticos e a enzima transcriptase reversa. B Nenhuma das alternativas está correta. C Nessa técnica, são utilizados somente os quatro dNTPs, a amostra de RNA e os cofatores enzimáticos. D Ao final da técnica, origina-se o RNA mensageiro, a partir do uso da enzima transcriptase reversa. E A técnica de RT-PCR utiliza a enzima Taq DNA polimerase que adicionará os nucleotídeos à dupla fita de RNA. 9 A função do genoma pode ser investigada por meio da supressão da função gênica e, para tanto, algumas técnicas podem ser aplicadas, como, por exemplo, a promoção de mutações gênicas diretamente no DNA, a interferência na expressão gênica com a utilização de RNA de interferência (iRNA). Sobre os RNAs de interferência (iRNAs), assinale a alternativa CORRETA: A Os iRNAs modificam a expressão ou tradução gênica, não afetando o DNA diretamente. B Os iRNAs promovem modificação permanente na expressão gênica. C Nenhuma das alternativas é correta. D A utilização do iRNAs alteram a expressão gênica diretamente no DNA. E O uso de moléculas de RNA conhecidas como microRNAs (miRNAs) se ligam a partes específicas do DNA e sinalizam para degradação do material genético. 10 Imprimir