BACTERIOLOGIA - N2

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ESTUDO DIRIGIDO I N2 
Bacteriologia Clínica 
 
 
 
1. O que são bactérias e quais seus principais elementos de estruturas? 
São seres unicelulares que possuem, são procariotas(não possuem membrana 
celular). Os principais elementos de estruturas são: 
● cápsula → estrutura mucosa e é composta por polissacarídeos. localização 
externa a parede celular e confere defesa e maior resistência da bactéria 
● parede celular → confere forma, proteção e resistência à bactéria. formado por 
peptidoglicano (relacionado a gram +(grossa) ou - (fina)) 
● membrana plasmática → isola a célula do meio exterior, é constituída por 
membrana e lipídios e possui uma membrana seletiva que permite a entrada e 
saída de substâncias. PRODUÇÃO DE ENERGIA E DIVISÃO CELULAR 
● citoplasma → armazena os ribossomos, organela citoplasmática 
● flagelos → auxilia no movimento/locomoção da bactéria 
● pili→ mais fino que flagelo, responsável pela aderência e transporte do material 
genético 
 
2. As bactérias de importância médica são caracterizadas morfologicamente por 
quais características? 
tamanho → as mais estudadas medem de 0,5 a 1,0 um por 2 a 5 um 
forma 
arranjo → a divisão de um arranjo sempre ocorre no menor eixo 
 
!! todas essas características são hereditárias 
 
3. Como o tamanho de uma bactéria influencia? 
quanto menor a bactéria mais fácil é para ela absorver nutrientes, se reproduzir, adaptar 
e ter uma diversidade metabólica 
 
4. Como as bactérias acumulam nutrientes, água, proteínas …? 
 
 
de maneira geral, as bactérias utilizam transporte ativo ou passivo para capturar 
nutrientes do ambiente e também armazenar nutrientes(principalmente quando o 
ambiente é escasso) 
 
5. Quais são as morfologias existentes de bactérias? 
morfologias = formas 
Bastonetes ou bacilos 
Espirilos 
Cocos 
 
6. O que são BACILOS e quais suas características 
bacilos são bactérias em forma de bastão(cilíndricos) que podem ser largos ou curtos, 
geralmente em forma de vírgula 
Podem se encontrar das seguintes formas: 
● isolados 
● agrupados 
● aos pares → diplobacilos 
● em cadeia → estreptobacilos 
● lado a lado → paliçada (parece cabelo) 
 
 
7. O que são ESPIRILOS e quais suas características 
os espirilos se encontram em forma de espiral ou hélice e se apresentam sempre de 
forma isolada 
 
8. O que são COCOS e quais suas características 
os cocos possuem formato de esfera 
Podem se encontrar das seguintes formas: 
○ isolados 
○ agrupados 
○ aos pares → diplococos 
○ em cadeia → estreptococos (colar de pérolas) 
○ em forma aleatória → estafilococos (cacho de uva) 
○ 4 cocos unidos → tétrade 
 
 
○ 8 cocos unidos → sarcina 
 
9. Explique a principal diferença entre cocos, espirilos e bacilos 
a principal diferença entre eles se dá devido a morfologia da qual está ligada a 
patologia, metabolismo e características biológicas que cada um tem 
 
10. O que são os LACTOBACILOS e qual sua função 
São microorganismos do tipo bacilo gram positivo que atuam positivamente no nosso 
organismo auxiliando no processo intestinal. Sua função é transformar a lactose em 
ácido lático 
Produção de vitaminas: Alguns lactobacilos têm a capacidade de produzir 
vitaminas, como a vitamina K, que é importante para a coagulação do sangue 
 
11. Em relação a estrutura da bactéria, explique o que é a membrana plasmática e 
quais suas funções? 
A membrana plasmática é uma camada lipoproteica que envolve o citoplasma da célula 
bacteriana → formada por uma bicamada fosfolipídica → molécula composta por uma 
cabeça polar hidrofílica(virada para fora) e cauda não polar hidrofóbica(viradas para o 
interior da membrana) 
 
moléculas hidrofóbicas não conseguem atravessar 
 
possui proteínas embutidas → integrais e periféricas e desempenham função de 
transporte, reconhecimento de sinais, ancoragem e atividade enzimática 
● integral: atravessam a bicamada 
● periféricas: ficam na superfície 
 
Funções: 
● barreira seletiva: ela permite a entrada e saída de substâncias de interesse e 
barram aquelas que serão prejudiciais a bactéria 
● receptora de sinais: ela auxilia a bactéria a visualizar o meio externos para 
respostas celulares adequadas (por ex, ela “ve” um perigo e manda sinal para 
que os demais componentes da bactéria faça algo) 
 
 
● ancoragem: serve como ponto de ancoragem de proteínas e moléculas que 
fazem parte das funções estruturais ou de suporte para a bactéria 
● comunicação celular: permite a interação entre as células bacterianas e o 
ambiente externo 
 
A estrutura da membrana plasmática é frequentemente descrita pelo modelo de mosaico 
fluido, onde as moléculas de fosfolipídios e proteínas são distribuídas de forma dinâmica, 
permitindo uma flexibilidade e fluidez essenciais para a função da membrana. 
 
 
12. Qual a diferença entre GRAM positivo e negativo? 
 
Ambas possuem PEPTIDEOGLICANO → Quimicamente, o peptidoglicano é um polímero 
formado por unidades repetidas de dois tipos de açúcares modificados, N-acetilglicosamina 
(NAG) e ácido N-acetilmurâmico (NAM), que estão interligados por cadeias de peptídeos. 
 
 
 POSITIVA: (imagem parede lisa) 
● parede: espessa 
● peptideoglicano(mureína) → 70% - 90% 
● ROXA/AZUL 
→ Podem conter outros componentes na parede celular, como ácidos teicóicos e ácidos 
lipoteóicos, que desempenham papéis adicionais na estabilidade da parede celular e na 
interação com o ambiente. 
 
 NEGATIVA: (imagem parede com variações) 
● parede: mais fina porém mais complexa 
● 3 camadas: 
○ externa: LPS 
 
 
○ periplasma (peptideoglicano) → possui enzimas e proteínas 
transportadoras 
○ interna: fosfolipídeos 
● membrana de LPS → incluindo maior resistência a antibióticos e a capacidade 
de evadir a resposta imune do hospedeiro. 
● ROSA/VERMELHA 
 
a parede é composta principalmente de peptidoglicano (mureína), mas também inclui uma 
membrana externa adicional composta por lipopolissacarídeos (LPS). é psicogênica (causa 
febre) e é utilizada na sorotipagem → relacionada a ATIVAÇÃO DO SISTEMA IMUNE 
 
LPS, que são compostos por três partes principais: 
- Lipídio A: tóxico É a porção lipídica ancorada na membrana externa da bactéria. O 
Lipídio A é composto por um ácido graxo, um oligossacarídeo central e um fosfato 
diócido. 
- Core Polissacarídeo: É uma região que liga o Lipídio A ao O-antígeno. O Core 
Polissacarídeo é altamente conservado dentro de uma espécie bacteriana e contribui 
para a estabilidade do LPS. 
- O-antígeno (Antígeno O): É a porção mais externa e variável do LPS, composta por 
cadeias polissacarídicas. O O-antígeno é responsável por conferir às bactérias 
Gram-negativas sua característica sorológica, permitindo sua identificação e 
classificação em diferentes sorotipos. 
 
 
13. Do que é composto o envoltório bacteriano 
 MEMBRANA CITOPLASMÁTICA + PAREDE CELULAR 
 
14. Como funciona a coloração de grama? 
São utilizados corantes. 
O cristal violeta é uma molécula corante que tem afinidade pela parede celular das 
bactérias. Ele se liga aos componentes da parede celular, especialmente ao 
peptidoglicano. Após essa coloração a amostra passa por lugol que auxilia a fixação da 
cor e após isso é utilizado o descolorante (álcool) que retira a cor da bactérias gram 
 
 
negativas e depois é utilizado um corante safranina que dá coloração rosa/ azul as 
bactérias gram positivas 
 
15. O que é microbiota? 
comunidade de microrganismos que habitam a pele e membranas mucosa de indivíduos 
saudáveis → extremamente complexa e diversificada e estão relacionados a: 
● Digestão de Alimentos: Muitas bactérias no trato gastrointestinal humano 
auxiliam na quebra de alimentos complexos e na absorção de nutrientes, 
contribuindo para a digestão. 
● Produção de Vitaminas e Metabólitos 
● proteção contra patógenos 
● modulação do sistema imunológico 
 
16. quai são os principais tipos de microrganismos no trato gastrointestinaldo 
humano 
○ Lactobacillus: São bactérias Gram-positivas que produzem ácido láctico e são 
conhecidas por promover a saúde intestinal, auxiliando na digestão da lactose e 
na prevenção do crescimento de bactérias patogênicas. 
○ Clostridium: Este é um gênero diverso que inclui várias espécies, algumas das 
quais são benéficas para o intestino, como Clostridium butyricum, que produz 
ácidos graxos de cadeia curta importantes para a saúde intestinal, enquanto 
outras podem ser patogênicas, como Clostridium difficile, que pode causar 
infecções intestinais. 
○ Bifidobacterium: São bactérias Gram-positivas conhecidas por serem 
componentes importantes da microbiota intestinal saudável, especialmente em 
bebês amamentados. Eles produzem ácidos graxos de cadeia curta e ajudam a 
modular o sistema imunológico 
○ Escherichia coli (E. coli): Embora certas cepas de E. coli possam ser 
patogênicas e causar doenças, muitas cepas são comensais normais do 
intestino e desempenham funções importantes na produção de vitaminas e na 
competição com bactérias patogênicas. 
○ Helicobacter pylori: Este é um patógeno Gram-negativo associado à gastrite e 
úlceras pépticas. Embora seja considerado patogênico, sua presença no trato 
 
 
gastrointestinal humano é complexa e pode ter efeitos protetores contra doenças 
gastrointestinais. 
 
COLORAÇÃO 
Claro, vou explicar o processo passo a passo da coloração de Gram: 
1. Preparação da Amostra 
● A coloração de Gram é comumente realizada em amostras de bactérias obtidas de 
culturas puras ou esfregaços de amostras clínicas. 
● Para preparar um esfregaço, uma pequena quantidade da cultura bacteriana é 
espalhada em uma lâmina de vidro e deixada secar ao ar. 
2. Fixação do Esfregaço 
● O esfregaço é fixado passando a lâmina rapidamente pela chama de um bico de 
Bunsen ou aplicando uma solução fixadora, como metanol, por alguns segundos. 
3. Coloração Primária: Cristal Violeta 
● A lâmina é coberta com cristal violeta, um corante roxo, e deixada em contato por cerca 
de 30 segundos. 
● O cristal violeta penetra nas paredes celulares de todas as bactérias, tornando-as todas 
de cor roxa. 
4. Lavagem 
● O excesso de corante é lavado com água corrente ou com uma solução salina 
fisiológica. 
5. Fixação do Corante Primário 
● O corante é fixado nas células com a aplicação de um mordente, geralmente uma 
solução de lugol (iodo). 
● O lugol forma complexos com o cristal violeta, aumentando a aderência do corante às 
paredes celulares das bactérias. 
 
 
6. Lavagem 
● Qualquer excesso de mordente é lavado novamente com água corrente ou solução 
salina. 
7. Decoloração 
● A lâmina é submersa em um agente descorante, geralmente álcool ou acetona, por 
cerca de 10-20 segundos. 
● Este passo é crítico, pois remove o corante das células Gram-negativas, enquanto as 
células Gram-positivas mantêm o corante devido à sua parede celular mais espessa. 
8. Lavagem 
● O agente descorante é cuidadosamente lavado com água corrente ou solução salina. 
9. Coloração Contraste: Safranina 
● A lâmina é então coberta com safranina, um corante vermelho, e deixada em contato 
por cerca de 30 segundos a 1 minuto. 
● A safranina é uma contra-coloração que colore as células Gram-negativas de vermelho, 
enquanto as células Gram-positivas permanecem roxas devido ao corante primário. 
10. Lavagem Final 
● O excesso de safranina é lavado com água corrente ou solução salina. 
11. Secagem 
● A lâmina é deixada secar ao ar ou pode ser delicadamente seca com ar comprimido. 
12. Observação Microscópica 
● O esfregaço corado é então observado sob um microscópio óptico com aumento de 
1000x. 
● As bactérias Gram-positivas aparecem de cor roxa, enquanto as Gram-negativas 
aparecem de cor vermelha ou rosa. 
 
 
A coloração de Gram é uma técnica fundamental em microbiologia utilizada para classificar as 
bactérias com base na estrutura da parede celular. A distinção entre Gram-positivas e 
Gram-negativas é crucial para o diagnóstico bacteriano e a determinação do tratamento 
antibiótico adequado. 
Cada substância utilizada na coloração de Gram desempenha um papel específico e 
fundamental para o processo. Aqui está a importância de cada uma delas: 
1. Cristal Violeta (Corante Primário): 
● Importância: O cristal violeta é o corante primário na coloração de Gram. 
● Função: Ele penetra nas paredes celulares de todas as bactérias, resultando em uma 
coloração inicial de todas as células de roxo. 
● Destaque das Células: A coloração inicial permite a visualização das bactérias sob o 
microscópio após a aplicação do corante. 
2. Solução de Lugol (Mordente): 
● Importância: O lugol atua como mordente no processo de coloração de Gram. 
● Função: O lugol forma complexos com o cristal violeta, aumentando a aderência do 
corante às paredes celulares das bactérias. 
● Fixação do Corante: Isso ajuda a fixar o cristal violeta nas células, tornando-as menos 
suscetíveis à remoção durante os passos subsequentes da coloração. 
3. Álcool ou Acetona (Agente Descorante): 
● Importância: O álcool ou acetona atua como agente descorante na coloração de Gram. 
● Função: O agente descorante remove o corante das células Gram-negativas, enquanto 
as células Gram-positivas retêm o corante. 
● Diferenciação de Bactérias: Esse passo é crucial para diferenciar entre os dois tipos 
de bactérias com base na composição da parede celular. 
4. Safranina (Contra-corante): 
● Importância: A safranina é o contra-corante na coloração de Gram. 
 
 
● Função: Ela é aplicada após a etapa de decoloração para corar as células 
Gram-negativas que perderam o corante primário. 
● Realce da Coloração: Isso permite a visualização das células Gram-negativas em uma 
cor contrastante (vermelho ou rosa) em relação às células Gram-positivas. 
Resumo: 
● Cristal Violeta: Cora todas as células inicialmente de roxo. 
● Solução de Lugol: Aumenta a aderência do corante primário às células. 
● Álcool ou Acetona: Remove o corante das células Gram-negativas. 
● Safranina: Contra-corante que cora as células Gram-negativas em uma cor 
contrastante. 
Cada substância desempenha um papel específico e crucial no processo de coloração de 
Gram, permitindo a diferenciação entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas com base 
na composição de suas paredes celulares. 
Função do Álcool na Coloração de Gram: 
1. Diferenciação entre Bactérias Gram-positivas e Gram-negativas: 
○ O álcool é aplicado após a etapa de fixação e coloração primária com cristal 
violeta e lugol. 
○ Ele age como um agente descorante, removendo o corante roxo das células 
Gram-negativas. 
2. Remoção Seletiva do Corante: 
○ As células Gram-positivas retêm o corante primário (cristal violeta-lugol) devido à 
sua parede celular mais espessa e complexa. 
○ No entanto, as células Gram-negativas, com suas paredes celulares mais finas, 
são incapazes de reter o corante após a aplicação do álcool. 
3. Resultados da Decoloração: 
○ Após a decoloração com álcool, as células Gram-positivas mantêm sua cor roxa 
original, enquanto as células Gram-negativas perdem a cor e ficam descoradas. 
4. Diferenciação Microscópica: 
○ Essa etapa de decoloração permite a diferenciação visual entre as bactérias 
Gram-positivas e Gram-negativas sob o microscópio. 
 
 
○ As células Gram-positivas aparecem de cor roxa, enquanto as células 
Gram-negativas aparecem descoradas. 
Importância da Decoloração: 
● A decoloração é um passo crítico na coloração de Gram, pois permite distinguir entre os 
dois tipos principais de bactérias com base na composição de suas paredes celulares. 
● Essa diferenciação é essencial para a classificação e identificação bacteriana, pois as 
características das paredes celulares estão intimamente relacionadas à resposta a 
antibióticos, patogenicidade e outras características importantes. 
Em resumo, o álcool na coloração de Gram atua como um agente descorante, removendo 
seletivamenteo corante das células Gram-negativas, permitindo a diferenciação entre os dois 
tipos de bactérias com base na retenção ou perda do corante. 
 
 
 
 
meio de cultura 
O meio de cultura é uma substância nutritiva na qual microorganismos, como bactérias, fungos 
e vírus, podem crescer e se reproduzir. Existem diferentes tipos de meios de cultura, cada um 
formulado para fornecer os nutrientes necessários para o crescimento de diferentes tipos de 
microrganismos. Aqui está uma explicação mais detalhada sobre o meio de cultura e sua 
importância: 
Composição do Meio de Cultura: 
1. Componentes Nutricionais: 
○ Os meios de cultura geralmente contêm fontes de carbono, nitrogênio, fósforo, 
enxofre, vitaminas e minerais essenciais para o crescimento microbiano. 
○ Exemplos de componentes nutricionais incluem peptona, extrato de carne, 
extrato de levedura, glicose, sais minerais, entre outros. 
2. Agar: 
○ O agar é frequentemente adicionado aos meios de cultura como um agente 
solidificante, fornecendo uma matriz gelatinosa na qual os microrganismos 
podem crescer em forma de colônias. 
3. Indicadores de pH e Substratos Seletivos: 
○ Alguns meios de cultura contêm indicadores de pH que mudam de cor quando 
há produção de ácidos metabólicos pelos microrganismos. 
○ Além disso, os meios seletivos contêm componentes que inibem o crescimento 
de certos tipos de microrganismos, permitindo a seleção de microrganismos 
específicos. 
Por que os Microrganismos Crescem no Meio de Cultura? 
● Os microrganismos crescem no meio de cultura porque este fornece os nutrientes 
essenciais necessários para seu metabolismo e crescimento. 
● O meio de cultura fornece uma fonte de energia (como carboidratos), compostos 
nitrogenados (como aminoácidos e peptídeos), vitaminas, minerais e água para os 
microrganismos. 
Importância na Formação de Colônias: 
 
 
1. Colônias: 
○ Uma colônia bacteriana é uma população visível de microrganismos que se 
originou de uma única célula. 
○ Cada microrganismo presente na colônia se reproduz em um processo de 
divisão celular, formando uma estrutura macroscópica visível. 
2. Proliferação Celular: 
○ No meio de cultura, as bactérias se multiplicam por divisão celular, formando 
colônias que podem ser facilmente visualizadas a olho nu ou sob um 
microscópio. 
3. Identificação de Microrganismos: 
○ As características das colônias bacterianas, como tamanho, forma, cor, textura e 
padrões de crescimento, são importantes para a identificação e classificação dos 
microrganismos presentes no meio de cultura. 
Como as Colônias se Formam: 
1. Inoculação: 
○ As bactérias são inoculadas no meio de cultura por meio de técnicas de 
semeadura, como a estriação em placas de Petri ou a inoculação em tubos de 
ensaio. 
2. Multiplicação Celular: 
○ As bactérias se multiplicam através de divisão celular, formando uma colônia 
visível à medida que o número de células aumenta. 
3. Isolamento e Crescimento: 
○ À medida que as células bacterianas se multiplicam, elas formam colônias 
distintas que crescem e se expandem no meio de cultura. 
○ Cada colônia representa uma população clonal de microrganismos originada de 
uma única célula. 
O meio de cultura é uma ferramenta essencial em microbiologia, permitindo o crescimento, 
isolamento e identificação de microrganismos. A formação de colônias bacterianas em meios 
de cultura fornece informações valiosas sobre a composição e as características dos 
microrganismos presentes em uma amostra. 
 
 
 
A fixação na coloração de Gram é importante por várias razões: 
1. Preservação da Morfologia Celular: 
● A fixação ajuda a preservar a morfologia celular das bactérias durante o processo de 
coloração, evitando a deformação ou destruição das células. 
● Sem a fixação, as células bacterianas podem ser facilmente danificadas ou distorcidas 
durante os passos subsequentes da coloração. 
2. Adesão das Células à Superfície da Lâmina: 
● A fixação promove a adesão das células bacterianas à superfície da lâmina de vidro, 
facilitando a aplicação dos corantes e garantindo uma distribuição uniforme das células. 
3. Estabilização da Membrana Celular: 
● A fixação ajuda a estabilizar a membrana celular das bactérias, impedindo a perda de 
conteúdo celular e minimizando a ruptura celular durante a coloração. 
4. Prevenção de Contaminação e Dispersão Celular: 
● A fixação ajuda a evitar a contaminação cruzada entre as amostras e a dispersão das 
células durante os processos de coloração e lavagem. 
5. Facilitação da Visualização Microscópica: 
● A fixação facilita a visualização das células bacterianas sob o microscópio, garantindo 
uma distribuição uniforme das células e uma morfologia celular preservada. 
Métodos de Fixação na Coloração de Gram: 
● A fixação pode ser realizada de várias maneiras, incluindo o calor (passagem rápida 
pela chama do bico de Bunsen), fixadores químicos (como metanol ou álcool) e a 
fixação a frio (por exemplo, utilizando soluções de formalina). 
● A escolha do método de fixação depende do tipo de amostra, dos requisitos do teste e 
das preferências do laboratório. 
 
 
 
 
	1. Preparação da Amostra 
	2. Fixação do Esfregaço 
	3. Coloração Primária: Cristal Violeta 
	4. Lavagem 
	5. Fixação do Corante Primário 
	6. Lavagem 
	7. Decoloração 
	8. Lavagem 
	9. Coloração Contraste: Safranina 
	10. Lavagem Final 
	11. Secagem 
	12. Observação Microscópica 
	1. Cristal Violeta (Corante Primário): 
	2. Solução de Lugol (Mordente): 
	3. Álcool ou Acetona (Agente Descorante): 
	4. Safranina (Contra-corante): 
	Resumo: 
	Função do Álcool na Coloração de Gram: 
	Importância da Decoloração: 
	Composição do Meio de Cultura: 
	Por que os Microrganismos Crescem no Meio de Cultura? 
	Importância na Formação de Colônias: 
	Como as Colônias se Formam: 
	1. Preservação da Morfologia Celular: 
	2. Adesão das Células à Superfície da Lâmina: 
	3. Estabilização da Membrana Celular: 
	4. Prevenção de Contaminação e Dispersão Celular: 
	5. Facilitação da Visualização Microscópica: 
	Métodos de Fixação na Coloração de Gram: