3 Provas bioquimicas

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2025.01
Curso: Biomedicina
Disciplina: Patologia clínica
Professora: Raquel Rezende dos Santos
Contato: raquel.santos@uva.br
Provas bioquímicas
➢ Identificação de microrganismos com base em suas características metabólicas, 
como produção de enzimas e reação a substratos específicos
➢ Emprega meios de cultura seletivos e diferenciais para identificação de 
microrganismos patogênicos
➢ Seletivo: permite o crescimento seletivo de determinadas espécies com base nas 
características bioquímicas
➢ Diferencial: apresenta um indicador, corante, para revelar se uma reação 
metabólica específica ocorreu
➢ Essencial em infecções bacterianas
https://publica.ciar.ufg.br/ebooks/iptsp/bacteriologia_humana/artigo_1.html
Pincipais provas bioquímicas
1. Fermentação de carboidratos: glicose, lactose, ...
Ex.: fermentação de lactose (Escherichia coli) vs. não fermentação de lactose (Salmonella sp.)
Ágar tríplice açúcar ferro (meio TSI)
Indica a fermentação de açúcares (glicose + lactose + sacarose)
Quando a bactéria fermenta apenas glicose, a quantidade de ácido 
produzido para viragem da coloração é baixa, provocando apenas 
viragem no fundo do tubo. Por outro lado, se a bactéria fermentar os 
três açúcares, a quantidade de ácido produzido é maior, provocando a 
viragem de todo o tubo. O meio ainda permite observar a 
precipitação de sulfato de ferro (FeSO4).
Pincipais provas bioquímicas
2. Citrato: avalia a capacidade da bactéria de utilizar o citrato de sódio como única 
fonte de carbono
Ágar Citrato Simmons
Pincipais provas bioquímicas
3. Produção de gás
A produção de H2S é uma prova bioquímica que permite diferenciar alguns patógenos do trato 
gastrointestinal. Utiliza-se meios de cultura como o Ágar TSI, meio SIM ou o meio LIA
Quando positiva, forma-se um precipitado negro.
Ex.: Enterobacteriaceae (como E. coli) pode produzir gás, o que ajuda na diferenciação 
Pincipais provas bioquímicas
4. Presença da enzima catalase para degradação do peróxido de hidrogênio
As bactérias que são catalase positiva levam à formação de bolhas de O2
Ex.: Staphylococcus sp. (catalase positiva) vs Streptococcus sp. (catalase negativa)
Pincipais provas bioquímicas
5. Presença da enzima coagulase 
As bactérias que são coagulase positiva, ao entrar em contato com plasma de coelho, convertem fibrinogênio 
em fibrina, gerando coagulação.
Ex.: Staphylococcus aureus (coagulase positiva)
Pincipais provas bioquímicas
6. Presença da enzima urease, que degrada a ureia, transformando-a em amônia e 
dióxido de carbono
Ex.: Helicobacter pylori, Cryptococcus neoformans, Proteus sp. (urease positiva)
Ágar ou caldo Ureia 
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de produzir a enzima urease
O meio de cultura apresenta ureia, uma vez que a bactéria produz urease irá consumir a ureia presente
Como indicativo da urease e consumo da ureia ocorre viragem da coloração
Pincipais provas bioquímicas
7. Descarboxilação de aminoácidos: teste para verificar se a bactéria pode 
descarboxilar lisina, uma característica de várias espécies de Enterobacteriaceae
Ágar lisina-ferro (meio LIA)
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de descarboxilar o aminoácido lisina
Detecta a presença das enzimas lisina descarboxilase e lisina desaminase
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de produzir H2S
Quando a bactéria possui a enzima lisina descarboxilação, ocorre 
alcalinização do meio, meio fica na cor púrpura. O meio ainda indica 
a capacidade, que certas bactérias apresentam, de produzir H2S.
8. Ágar Sulfeto de hidrogênio, indol e motilidade (meio SIM)
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de produzir sulfeto do hidrogênio (H2S)
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de metabolizar o aminoácido triptofano em indol
Indica a presença de flagelo ou estruturas que auxiliam o movimento
Pincipais provas bioquímicas
Ágar Sulfeto de hidrogênio, indol e motilidade (meio SIM)
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de produzir H2S
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de metabolizar o aminoácido triptofano em indol
Indica a presença de flagelo ou estruturas que auxiliam o movimento
Pincipais provas bioquímicas
9. Meio de Rugai com Lisina 
Permite apresenta uma série bioquímica contendo nove provas que são agrupados em um único tubo: 
reação de indol (IND), desaminação do aminoácido L-triptofano (LTD), fermentação da sacarose (SAC), 
produção de sulfeto de hidrogênio (H2S), produção de gás (GAS), hidrólise da ureia (URE), fermentação 
da glicose (GLI), descarboxilação da lisina (LIS) e motilidade (MOT)
Pincipais provas bioquímicas
10. Ágar fenilalanina
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de produzir ácido fenilpirúvico
O meio de cultura apresenta o aminoácido fenilalanina, uma vez que a bactéria produz a enzima 
fenilalanina desaminase irá produzir ácido fenilpirúvico, como indicativo da produção enzimática ocorre 
viragem da coloração
Pincipais provas bioquímicas
Outros meios seletivos e diferenciais
Caldo malonato
Indica a capacidade, que certas bactérias apresentam, de utilizar malonato como única fonte de C
Caldo vermelho de metila
Avalia o crescimento de bactérias que fermentam glicose por meio da via ácida mista (produzindo vários 
ácidos carboxílicos como o ácido fórmico, o ácido lático e o ácido acético) 
Caldo tioglicolato
Avalia o crescimento de bactérias aeróbias, anaeróbias e microaerofílicas 
Ágar Mac-Conkey
Permite o crescimento de bactérias gram negativas e lactose positiva
Ágar eosina azul metileno
Permite o crescimento de bactérias gram positivas e lactose positiva
Ágar manitol salgado
Permite o crescimento de Staphylococcus aureus
Ágar Salmonella-Shigella
Permite o crescimento e isolamento dos gêneros Salmonella sp. e Shigella sp.
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