Prévia do material em texto
Gabrie lla D ias HEMATOLOGIA (Análises quantitativas e qualitativas da série vermelha) HEMATOPOIESE Hemácias: as hemácias madura apresentam o formato bicôncavo com o centro achatado - Na visualização microscópica, o meio será mais claro que a borda As hemácias jovens não apresentam as mesmas características, são células maiores que possuem núcleo. Produção de células vermelhas a partir do rubriblasto, unidade formadora de colônia. Metarrubrícitos: último estágio de células nucleadas. As hemácias jovens são maiores que as hemácias maduras. → Quanto mais jovem for a célula, maior ela será. Reticulócitos e Policromatófilos são, na verdade, a mesma célula, a única diferenciando-se apenas na forma como são visualizados. Ao solicitar um hemograma e utilizar um corante panótico rápido, chamamos essa célula de policromatófilo. Já ao realizar a contagem de reticulócitos, empregamos o corante Novo Azul de Metileno, que revela os resíduos de organelas presente nessas células. Na coloração panótica, também é possível visualizar essas células; no entanto, não é um corante ideal para realizar a contagem celular. ERITRON É o conjunto de todas as células em diferentes estágios de produção na medula óssea, incluindo aquelas em proliferação, em maturação e aquelas que migraram para a corrente sanguínea após saírem da medula óssea. Ao passarem pelos capilares e chegarem aos tecidos, as hemácias transportadoras de oxigênio liberam o oxigênio para as células. Em seguida, as hemácias retornam à circulação para alcançar os pulmões e adquirir mais oxigênio. Aproximadamente após 120 dias, as hemácias começam a perder sua flexibilidade e sua membrana plasmática sofre alterações, tornando a célula mais rígida. Ao passarem pelos capilares sinusóides do baço, essas hemácias são detectadas e removidas da circulação por fagocitose. A partir das hemácias fagocitadas pelos macrófagos, é possível recuperar as proteínas e o ferro, sendo eliminado apenas o grupo heme através da bilirrubina. • Éritron é o conjunto de todas as hemácias presentes no organismo, tanto as hemácias maduras, quanto aquelas que são removidas pelo baço. • No hemograma é possível examinar apenas as hemácias circulantes HEMOGRAMA Análise quantitativa das células vermelhas - Número de hemácias - Dosagem de hemoglobina - Valor de hematócrito → Cálculo dos índices hematimétricos (VCM, HCM, CHCM) RDW: índice fornecido pelos contadores automatizados Os exames realizados exclusivamente por sistemas automatizados de contabilidade fornecem apenas dados para análises quantitativas, não sendo abrangentes o bastante para serem considerados um hemograma completo, fornecendo apenas a contagem de células sanguíneas. • Por meio da contagem de hemácias, da dosagem de hemoglobina e da porcentagem de hematócrito, é possível calcular os índices hematimétricos. ANÁLISES QUANTITATIVAS Contagem de hemácias (x106 /𝜇L) Dosagem de hemoglobina (mg/dL) Hematócrito (%) • Contagem manual na câmara de Newbauer • Dosagem manual por espectrofotometria • Medição de microcentrífuga • Contagem automatizada • Dosagem automatizada • Cálculo automatizado Gabrie lla D ias 1) NÚMERO DE HEMÁCIAS Para a contagem de hemácias, os contadores automatizados oferecem um resultado mais assertivo do que a contagem manual pela câmara de Newbauer. • A dosagem de hemoglobina é feita por um teste bioquímico e a leitura é realizada por espectrofotometria. - Permite o cálculo de hemoglobina por hemácia - Os contadores automatizados nos fornecem um resultado mais rápido e mais preciso da contagem de hemoglobinas. • A utilização de máquinas é mais eficaz tanto para a contagem de hemácias quanto para a dosagem de hemoglobina. No caso do hematócrito, a máquina não faz a medição direta; em vez disso, apenas calcula-o com base no tamanho das hemácias e das plaquetas. • A medida do hematócrito é feita em microcentrífuga • Antes de passar a amostra na máquina, devemos sempre realizar a homogeneização da amostra por inversão por aproximadamente 8 vezes. → Alguns laboratórios já apresentam o homogenizador Padrão-ouro: Adotar a contagem automatizada dos dois primeiros parâmetros e realizar a medição do hematócrito separadamente, sem considerar o valor da máquina. 2) DOSAGEM DE HEMOGLOBINA (Hb) - A hemoglobina é composta por uma porção proteica denominada de globina (duas cadeias α e duas β) e grupos heme, que contém o átomo de ferro. → Estrutura quaternária → As moléculas de oxigênio irão se ligar no átomo de ferro → Cada hemoglobina carrega 4 moléculas de oxigênio - Hemácias maduras apresentam cerca de 30% do volume do citoplasma ocupado por moléculas de hemoglobina. → Hemácias jovens e nucleadas participam ativamente na produção de hemoglobina, que continua sendo sintetizada até alcançar cerca de 30% do volume do citoplasma. → ⅓ da hemácia é feita de hemoglobina → A hemoglobina é responsável pela coloração vermelha das hemácias. Se uma hemácia apresentar uma coloração mais pálida, podemos concluir que ela contém menos hemoglobina. → A produção de hemoglobina não é capaz de exceder os 30%, pois esse valor representa a capacidade genética da célula. • A coloração da hemácia está diretamente relacionada à quantidade de hemoglobinas. • Em uma amostra, o aumento na quantidade de hemoglobina não se relaciona com cada célula individualmente, mas sim com uma maior quantidade de células na amostra. 3) HEMATÓCRITO (Htc) • Porcentagem de hemácias em um dado volume de sangue. → O valor do hematócrito na amostra A é de aproximadamente 47%, enquanto na amostra B o hematócrito é de aproximadamente 17%. → Um hematócrito baixo pode resultar de uma redução no número de hemácias ou ser consequência da administração excessiva de soro. → Um hematócrito alto, como observado na amostra C de 65%, pode ser resultado de um elevado número de células do paciente ou uma baixa quantidade de líquido presente, sendo a desidratação o fator mais comum nesses casos. • Micro hematócrito → Tubo capilar → Micro centrífuga → Permite a dosagem de proteínas plasmáticas, um exame diferencial no hemograma • O sobrenadante pode ser utilizado para a inspeção do plasma e para dosagem de proteínas plasmáticas em refratômetro → Se ocorrer lise de hemácias na amostra, a hemoglobina se dissolverá no plasma, resultando em uma coloração avermelhada. → A coloração do plasma nos permite identificar hemólise, icterícias e dentre outras alterações. → O sobrenadante inicial é o plasma mas; no entanto, se ocorrer a coagulação da amostra, o sobrenadante resultante será o soro. • Podemos utilizar uma fração do plasma para realizar a dosagem de proteínas plasmáticas no refratômetro. → Albumina, globulina, fibrinogênio… • As hemácias nas espécies domésticas apresentam tamanhos diferentes • Os cães têm o maior valor de hematócrito entre as espécies → As hemácias dos cães são maiores (semelhante as hemácias humanas) De acordo com o exemplo acima, o paciente não apresenta alterações nos dados quantitativos analisados. RESULTADO DO EXAME (LEITURA) A anemia é um sinal clínico, não sendo em si um diagnóstico de doença VCM - Volume corpuscular médio - Representa o tamanho das células - Dados quantitativos que informam a qualidade das células - Indica o volume médio das hemácias - Expresso em fentolitros (10-15 do litro) • Microcitose → Quando a medula óssea tenta hiper maturar a célula para que ela alcance a coloração ideal de 30% • Normocitose → Quando o tamanho da célula está de acordo com a espécie • Macrocitose → Presença de células jovens Espécie Htc (%) Caninos 37 - 55 Felinos 30 - 45 Equinos 32 - 57 Bovinos 24 - 42 Ovinos 25 - 45 Caprinos 21 - 38 Suínos 32 - 43 VCM = Ht * 10 fl ------------Hm Gabrie lla D ias • A macrocitose não acontece na veterinária → Anemia megaloblástica em humanos • A anisocitose não é identificada pelos índices hematimétricos. Apresenta células de tamanhos diferentes. → Pode conter normócitos e macrócitos, normocítos e micrócitos, etc. → Índice fornecido pelos contadores automatizados (RDW). • Quanto maior o índice RDW, maior será o grau de anisocitose presente na amostra, ou seja, maior a quantidade de células com tamanhos variados. HCM - Hemoglobina corpuscular média - Indica a quantidade média de hemoglobina de cada hemácia - Expresso em picogramas (10-15 g) - Informa a coloração da célula • Hipocromia → Baixa concentração de HCM, indica deficiência de hemoglobina na célula. •Normocromia → Indica que a quantidade de hemoglobina nas hemácias está dentro da normalidade → Não significa que o paciente está normal, ele pode apresentar uma baixa quantidade de hemácias. • Hipercromia* → Não significa a hiperprodução de hemoglobinas → Indica hemólise na amostra Exemplo: ao analisar uma amostra em um contador automático que indica 4 células, a máquina mostrará 16 moléculas de hemoglobinas (considerando 4 moléculas de hemoglobina por célula), o que confirma normocitose e normocromia. Em outra amostra, se houver o rompimento de 2 hemácias e a contagem de hemoglobinas resultar em 2 células e 16 hemoglobinas, teremos uma média de 8 hemoglobinas por hemácia. Teoricamente, essa média poderia ser classificada como hipercromia, pois há 4 células para 8 hemoglobinas, mas essa alteração se deve ao rompimento das 2 hemácias. CHCM - Concentração de hemoglobina corpuscular média - Indica a concentração de hemoglobina em cada hemácia → A partir do hematócrito → Mais sensível para detectar a hemólise na amostra • Expresso em gramas por decilitro ou % • Hipocromia • Normocromia • Hipercromia (hemólise) → O CHCM não indica hipercromia pois, a hipercromia não irá existir, ele indicará hemólise na amostra PACIENTE: cão, akita, fêmea castrada, 4 anos de idade → Hemácias microcíticas e normocrômicas • Hemácias menores que o normal • A raça Akita apresenta uma microcitose idiopática, uma característica sem causa definida e sem complicações associadas. • Sempre analisar na objetiva com o óleo de imersão para conseguirmos observar os detalhes celulares. • Quanto maior o ângulo, mais curto será o esfregaço • Uma das principais fontes de erro na análise de esfregaço é a realização de maneira grosseira e o uso da região mais densa para a análise. A análise deve ser feita na parte caudal da lâmina, onde as células estão mais uniformemente distribuídas e em menor quantidade. AVALIAÇÃO EM LÂMINA • Qualitativa: presente/ausente • Semiquantitativa: discreta/moderada/ severa (+/ ++ / +++) → Ideia da quantidade, não é o valor absoluto Exemplo: presença de quantidade discreta de corpúsculos de negri Exemplo²: microcitose abundante ANÁLISE QUALITATIVA - Leitura da lâmina Observar variações: 1) No arranjo celular 2) No tamanho das células (VCM) 3) Na coloração celular (HCM e CHCM) 4) Na morfologia celular 1. Variações no arranjo celular (comportamento) Roleaux • Formação em colunas - Hemácias empilhadas • Associação com fibrinogênio e globulinas - Reação de inflamação aguda - Excesso de fibrinogênio e globulinas • Pode estar presente no sangue de equinos, felinos e suínos sadios - Características das espécies • Artefato - sangue refrigerado ou sangue armazenado por mais tempo Auto Aglutinação • As hemácias formam aglomerados • Doenças imunomediadas (presença de anticorpos aderidos à superfície das hemácias que levam à aglutinação das células) - Os anticorpos são os responsáveis por promover a adesão das hemácias umas às outras. • Deve ser diferenciada do Rouleaux (observação + teste da solução salina) - Ao misturar a solução salina com a amostra que apresenta apenas o Rouleaux, ele irá se dispersar devido à diluição do fibrinogênio à amostra, o que impede que as hemácias se aglomerem em colunas. Se jogarmos salina em uma amostra com auto aglutinação, a aglutinação irá permanecer pois a solução salina não é capaz de romper a ligação entre anticorpos. → Não é um teste muito utilizado 2. Variações no tamanho das células Microcitose • Quase sempre resultante da deficiência de ferro → Única situação em que a anemia será tratada com a suplementação de ferro → A ausência de ferro está relacionada a microcitose e hipocromia. Macrocitose • Presença de eritrócitos policromatófilos (reticulócitos) HCM = Hb * 10 pg ------------ Hm CHCM = Hb * 100% -------------- Ht ANÁLISES QUALITATIVAS Análise de esfregaço sanguíneo por microscopia de luz (1000x) Gabrie lla D ias Anisocitose • Variação no tamanho das hemácias • Pode indicar a presença de macrócitos (VCM aumentado), microcitose (VCM diminuído) ou ambos (VCM normal). • RDW: índice de anisocitose → Quanto menor o índice de anisocitose mais semelhantes são as células. 3. Variações na coloração celular Hipocromia (hipocromasia) • Quantidade insuficiente de hemoglobina no interior das hemácias. • Região central ainda mais pálida (aumento gradual). • Quase sempre resultante da deficiência de ferro. • Macrócitos podem parecer hipocrômicos devido ao seu maior diâmetro Normocromia Hipercromia (hipercromasia) • Células que parecem estar mais coradas, dando a falsa impressão de que tem mais hemoglobina que o normal, o que na realidade não pode ocorrer devido ao limite da capacidade de produção. → Esferócitos são exceções Policromatofilia (policromasia) • Presença de reticulócitos (hemácias que se apresentam levemente azuladas nas colorações do tipo Romanowsky), sendo portanto células jovens. • Quando coradas com o novo azul de metileno essas células são denominadas de reticulócitos ( contagem de reticulócitos - quantificação). A presença de células grandes sempre estará relacionada a presença de células jovens 4. Variações na morfologia celular Poiquilocitoses • Presença de hemácias com formas anormais • Termo pouco útil, uma vez que engloba diversas formas anormais • Deve ser utilizado somente quando as alterações não puderem ser identificadas por termos mais específicos a) Esquisócitos (Esquistócitos) • São fragmentos de hemácias gerados por traumas intravasculares • Podem ser associados a: → CID (coagulação intravascular disseminada), quando as hemácias são “quebradas” pela fibrina polimerizada → Neoplasias vasculares (hemangiossarcoma) → Vasculites → Deficiência de ferro severa b) Acantócitos • Células de formato irregular, espiculadas, com projeções desiguais e desuniformes. • Podem ser observados em: → Distúrbios do metabolismo lipídico (ex. lipidose hepática em felinos) → Hemangiossarcomas c) Equinócitos • Células espiculadas também, porém com projeções numerosas e curtas. • Artefato de técnica - demora na secagem, excesso de EDTA ou sangue “velho”. → Normalmente não é relatado pois, na maioria das vezes é causada por uma deficiência na técnica • Podem ser observados também: → Em suínos saudáveis → Em cães com doença renal, linfossarcoma, após quimioterapia e envenenamentos por acidente ofídico d) Queratinócitos • Células em forma de “capacete”, que parecem ter um vacúolo. • Podem ser associados a: → Hemangiossarcoma, outras neoplasias, glomerulonefrite e doenças hepáticas. → Anemias severas e) Esferócitos • Células fortemente coradas com perda da palidez central • Apresentam o formato esférico devido a presença de anticorpos anti hemácias • Apresentam uma redução da área de superfície da membrana plasmática devido a fagocitose parcial (anticorpos anti- eritrocitários) - VCM normal. • Não apresentam a palidez central • Sugere destruição imunomediadasde hemácias ( anemia hemolítica - congênitas ou adquiridas) • Podem ser vistas também: → Após transfusão de sangue incompatível → Acidente ofídico e outras f) Codócitos (hemácias em alvo) • Aumento relativo da área de membrana em relação ao volume da célula → Como se a hemácia apresentasse uma quantidade maior de membrana e uma quantidade reduzida de hemoglobina • Concentração de hemoglobina no centro da célula • Quando parecem dobradas sobre si mesmas, essas células são denominadas de estomatócitos. • Podem ser associadas a: → Anemia severa → Doenças hepáticas → Doenças renais HEMOGRAMA CONTAGEM DE RETICULÓCITOS POLICROMATÓFILOS RETICULÓCITOS Gabrie lla D ias g) Excentrócitos • Aparentam ter a hemoglobina concentrada em um dos lados da célula • Podem ser associadas a: → Cetoacidose diabética → Intoxicação por agentes oxidantes como cebola, alho e acetaminofen. → Babesiose - Está relacionado a desnaturação da hemoglobina h) Dacriócitos • Hemácias em forma de lágrimas/gotas • Podem ser associados a: → Doenças mieloproliferativas → Deficiência de ferro → Artefatos de técnica (gotas na mesma direção) INCLUSÕES • Corpúsculos de Howell - Jolly - Remanescentes basofílicos do núcleo - Visualizados durante respostas a anemias (regenerativas) - Ao passar pelo baço, esses fragmentos são removidos. - Podem apresentar tamanhos variados e estar localizados em qualquer parte da célula • Corpúsculo de Heinz - Estruturas arredondadas e pálidas formadas pela desnaturação da hemoglobina (agentes oxidantes) - Normal em 5% das hemácias dos gatos. - Podem estar aumentados nos gatos com: → Linfossarcoma → Hipertireoidismo → Diabetes mellitus • Corpúsculo de Lentz - Degeneração hialina pelo acúmulo de partículas virais → Acúmulo de material proteico dentro das células e partículas do vírus da cinomose - Patognomônico da cinomose - Também podem estar presentes nos leucócitos • Hemácias Nucleadas - Liberação de hemácias jovens pela medula óssea nas anemias regenerativas - São contadas como leucócitos pelos contadores automatizados - Aves e répteis possuem hemácias nucleadas HEMOPARASITAS Anaplasma marginale Babesia sp Mycoplasma haemofelis TESTES HEMATOLÓGICOS ADICIONAIS • Contagem de reticulócitos • Mielograma HEMATOLOGIA(Análises quantitativas e qualitativas da série vermelha)