QUANTIFICAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DE FITONEMATOIDES (RELATÓRIO)

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UNIVERSIDADE TECNOLÓGICA FEDERAL DO PARANÁ
CURSO SUPERIOR DE TECNOLOGIA EM PROCESSOS QUÍMICOS
JULIANA FREITAS DO NASCIMENTO 
QUANTIFICAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DE FITONEMATOIDES
RELATÓRIO FINAL DE ESTÁGIO CURRICULAR OBRIGATÓRIO
APUCARANA
2017
JULIANA FREITAS DO NASCIMENTO
QUANTIFICAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DE FITONEMATOIDES
Relatório Final de Estágio Curricular Obrigatório apresentado à disciplina de Estágio Supervisionado do Curso Superior de Tecnologia em Processos Químicos da Universidade Tecnológica Federal do Paraná – UTFPR, como requisito parcial para obtenção do título de Tecnólogo.
Orientador: Prof. Dr. Fernando Alves da Silva
APUCARANA
2017
AGRADECIMENTOS
Agradeço primeiramente toda a minha família, especialmente aos meus pais João Silva do Nascimento e Christina M. Freitas do Nascimento, que foram importantes para que eu vencesse mais esta etapa de minha vida, agradeço por todo amor e que mesmo distantes, me deram o apoio e a força que eu precisava, nos momentos difíceis, para seguir em frente. Amo vocês!
A Deus por ter me dado oportunidade de viver uma experiência única, além de ter me presenteado com uma família em Apucarana. As irmãs mais diferentes que eu poderia ter, mas que aprendi a amar cada defeito e qualidade. Obrigada, Gesiara França, Caroline Borges e Diane Alves.
Ao Renan Sousa e Patricia Hamab, por sempre me apoiarem e incentivarem nos momentos de fraqueza e fragilidade, e por acreditarem sempre no meu sucesso. Gratidão!
A Laborfort pela oportunidade de crescimento profissional, principalmente à Fernanda Calsavara, a qual confiou na minha capacidade. A toda equipe, pelo conhecimento e paciência me instruindo para o bom aperfeiçoamento profissional. Agradeço em especial a Larissa Gonçalves, Andriane Meneguim e Juliana Schirmann, pelos valiosos conhecimentos passados ao longo deste período e que de alguma maneira ajudaram com a realização deste trabalho.
Ao professor Fernando Alves da Silva, por ter aceitado me orientar. Obrigada por todos os ensinamentos. Seu sucesso, profissionalismo e carisma são admirados por todos ao seu redor.
E a todos que direta ou indiretamente fizeram parte da minha formação.
Obrigada.
Lista de figuras
Figura 1- Análises realizadas pela empresa	10
Figura 2- Organograma da empresa	12
Figura 3- Organograma do setor de estágio	12
Figura 4 - Separação do solo e raiz	16
Figura 5- Etapas da extração de nematoides no solo pelo método de flotação centrífuga em solução de sacarose	17
Figura 6- A- Pesagem das raízes para extração de nematoides.; B- Uso do liquidificador para triturar as raízes	19
Figura 7- Lâmina de Peters	20
Figura 8- Microscópio estereoscópico	21
Figura 9- Desenho esquemático de lâmina de contagem de Peters	21
Figura 10- Gêneros de fitonematoides comumente encontrados: A- Pratylenchus spp.; B – fêmea adulta de Meloidogyne spp.; C- Helicotylenchus spp.; D- Heterodera spp.	22
SUMÁRIO
1	INTRODUÇÃO	5
2	PLANO DE ESTÁGIO	7
2.1	IDENTIFICAÇÃO DO ALUNO	7
2.2	EMPRESA	7
2.3	ESTÁGIO	7
2.4	SUPERVISOR DE ESTÁGIO NA EMPRESA	8
2.5	SUPERVISOR DE ESTÁGIO NA UNIVERSIDADE	8
2.6	ATIVIDADES PROGRAMADAS PARA O ESTÁGIO	9
3	ORGANOGRAMA DA EMPRESA	10
3.1	A EMPRESA	10
3.2	OBJETO DE PRODUÇÃO DA EMPRESA E MISSÃO	11
3.3	ORGANOGRAMA GERAL	11
3.4	ORGANOGRAMA ESPECÍFICO DO SETOR DE ESTÁGIO	12
3.5	ATRIBUIÇÕES DO SETOR ONDE FOI DESENVOLVIDO O ESTÁGIO	13
3.6	PROCESSO DE SELEÇÃO PARA O ESTÁGIO	14
4	RECURSOS DISPONIVEIS PARA A REALIZAÇÃO DO ESTÁGIO	15
4.1	MÁQUINAS, EQUIPAMENTOS E SOFTWARESUTILIZADOS	15
4.2	LABORATóRIOSLABORATÓRIOS	15
4.3	EQUIPE DE TRABALHO	16
4.4	INTER-RELAÇÃO COM OUTRAS ÁREAS DA EMPRESA	16
5	Atividades desenvolvidas	17
5.1	Separação do solo e raiz	17
5.2	Extração de FITONEMATOIDES de amostra de solo	17
5.3	EXTRAÇÃO DE FITONEMATOIDES DE RAÍZES	18
5.4	preparo de placas	20
5.5	CONTAGEM E IDENTIFICAÇÃO DOS FITONEMATOIDES	21
6	DIFICULDADES ENCONTRADAS	24
7	ÁREAS DE IDENTIFICAÇÃO COM O CURSO	25
8	CONCLUSÃO	26
INTRODUÇÃO
Os nematoides são vermes microscópios que a habitam o solo, água doce e salgada, além de animais e órgãos vegetais parasitados. Nos solos agrícolas existem diferentes gêneros e espécies de nematoides, os quais se alimentam de bactérias e fungos, colaborando na decomposição e reciclagem de nutriente. Porém, existem nematoides que se alimentam diretamente das raízes das plantas, causando doenças ou não (EMBRAPA). Há dificuldades para a diagnose das nematoses, devido os sintomas serem confundidos com os de outras causas doenças, como o nanismo, murcha e deficiência nutricional, por exemplo. É essencial identificar as espécies para se buscar informações para o controle racional e econômico (OLIVEIRA; SANTOS; CASTRO, 2016)	Comment by Fernando Alves: Ou diagnóstico?	Comment by Fernando Alves: Sei que você pegou isso da referência, mas pareceu tão estranho para mim falar num controle econômico! Por que? Gastos com medicamentos? Seria isso? Se possível, tente dar uma breve explicada nisso Ju. Nada grande, coisa de 1 linha só!
Os fitonematoides, sendo nematoides que parasitam apenas sobre plantas, são identificados pela morfologia ao serem examinados no microscópio. O reconhecimento dos gêneros é feito com relativa facilidade, porém o de espécies apresenta maior dificuldade, devido a poucos caracteres taxonômicos distintos (OLIVEIRA; SANTOS; CASTRO, 2016). Estes parasitas possuem estilete bucal, o qual retira as substancias nutritivas das plantas e possibilita a injeção de substâncias tóxicas no interior da célula vegetal (EMBRAPA).
A maioria dos fitonematoides passam todo seu ciclo de vida no solo e parasitam as raízes, bulbos e tubérculos. Há vários gêneros de fitonematoides relacionados aos cultivos agrícolas, porém nem todos são responsáveis por prejuízos significativos dea culturas (EMBRAPA). Os fitonematoides semi-endoparasitos e ectoparasitos introduzem a parte anterior do corpo ou somente o estilete nas células vegetais para a retirada de nutrientes. Os gêneros Rotylenchulus, Tylenchulus, Helicotylenchus, Xiphinema, Belonolaimus, Longidorus, Trichodorus e Hemicycliophora são exemplos de nematoides desse grupo. ; eEnquanto os fitonematoides endoparasitos invadem as raízes, alimentando-se das células e migrando no interior dos tecidos radiculares ou estabelecendo sítios especializados. São exemplos de nematoides desse grupo: Pratylenchus, Radopholus, Hirschmanniella, Meloidogyne, Heterodera e Globodera diagnose (OLIVEIRA; SANTOS; CASTRO, 2016).	Comment by Fernando Alves: Muito específico para uma introdução, acho que não é necessário
De forma geralIndependente da classificação, as plantas parasitadas ficam enfraquecidas em razão da retirada de nutrientes pelos fitonematoides, os quais são responsáveis pelos ferimentos, lesões, formação de sítio de alimentação próximoa dos tecidos vasculares que reduzem a capacidade de as raízes absorverem água e nutrientes. (OLIVEIRA; SANTOS; CASTRO, 2016).
Os fitonematoides são considerados como um dos principais patógenos agrícolas. A partir do momento em que a área de plantio é infestada, a erradicação do patógeno torna-se praticamente impossível. A aplicação de nematicidas contribui para a contaminação ambiental e a intoxicação de seres humanos e outros animais. Por isso, o princípio da exclusão é o mais importante quando se pensa no controle patógeno, e as medidas de controle visam apenas àa redução dos nematoides no solo. O controle biológico de fitonematoides é uma opção ecologicamente desejável, e em muitos casos foi empregado com sucesso, principalmente envolvendo a aplicação de fungos, nematófagos e bactérias (FERRAZ et al., 2001).
Neste contexto, eEste trabalho tem como objetivo apresentar as atividades realizadas no laboratório Laborfort, o qual realiza análises agrícolas, enfocando as análises de fitonematoides.	Comment by Fernando Alves: Sugestão:
“Neste contexto, este trabalho tem como objetivo apresentar as atividades práticas de estágio realizadas no laboratório Laborfort, que é responsável pela análise físico-químicas e microbiológicasde amostras agrícolas, com o enfoque em análise de fitonematoides.
PLANO DE ESTÁGIO
IDENTIFICAÇÃO DO ALUNO
Nome: Juliana Freitas do Nascimento
Código do aluno na UTFPR: 1594320
E-mail: jufreitasn@gmail.com
Semestre e Ano de ingresso: 1°/2014
EMPRESA
Nome: Laborfort Análises Químicas 
Razão Social: Laborfort Análises Químicas Ltda.
CNPJ: 08.637.420/0001-95
Área de Atuação: Análises Agronômicas Nacionais e Internacionais 
Endereço: Avenida Brasil, n° 2310
Bairro: Parque Industrial II
CEP: 86890-000
Cidade: Cambira
Estado: Paraná
Nome do responsável pelo estágio: Fernanda Calsavara Martines
Telefone da área do responsável pelo estágio: (43) 3436-8369 
ESTÁGIO
Área de atuação: Prestação de Serviços em Análises Agronômicas 
Setor: Laboratório de Análises Químicas 
Data de início do estágio: abril
Data prevista para o fim do estágio: julho
Período do dia em que trabalha: das 9:50h às 16:50h
Carga horária semanal: 30 horas semanais
SUPERVISOR DE ESTÁGIO NA EMPRESA
Nome: Fernanda Calsavara Martines
Formação Acadêmica na Graduação: Química Industrial na Universidade Norte do Paraná
Cargo: Química responsável
Departamento ou setor que trabalha: Laboratório Químico
Responsabilidades do departamento ou setor que trabalha: desenvolvimento, pesquisa e gerenciamento da produção.
Telefone: (43) 3436-8369
Fax: (43) 3436-8369
E-mail: laborfort@laborfort.com.br
ATIVIDADES PROGRAMADAS PARA O ESTÁGIO
As atividades desenvolvidas no laboratório foram propostas pela supervisora de estágio na empresa, e estão descritas na Tabela 1.:
Tabela 1 – Plano de estágio
	Atividades a serem realizadasrealizadas	Comment by Fernando Alves: Ju, só para não ficar “perdido”, faça um comentário sobre essas atividades, concluindo essta tabela.
Tipo: “A sequencia de atividades foi pré-definida pela supervisora de estágio, de tal forma que segue os padrões de identificação dos fitonematóides. Tais atividades são realizadas no laboratório da empresa desde sua implantação, o que permite reduzir o tempo na análise e gastos com materiais de consumo no laboratório. Além disso, a proposta da realização de diferentes atividades possibilitou uma maior aplicação de procedimentos analíticos e o conhecimento do processo de identificação de fitonematoides como um todo.”
O que acha?
PS: você sabe em qual procedimento a Laborfort se baseia? É da Embrapa?
	Frequência de execução
	Separação do solo e raiz
	Diariamente
	Extração de fitonematoides do solo
	Diariamente
	Extração de fitonematoides da raiz
	Diariamente
	Preparação das placas
	Diariamente
	Quantificação e identificação 
	Diariamente
Fonte: Autoria própria
ORGANOGRAMA DA EMPRESA
A EMPRESA
Este trabalho foi desenvolvido em uma empresa que realiza análises de solo, fertilizantes, tecidos vegetais, além de bromatológicas e nematoides.
A Figura 1 representa todas as análises agronômicas realizadas.	Figura 1- Análises realizadas pela empresa
Fonte: Gestão da empresa	Comment by Fernando Alves: Ficaram pequenas as letras né!!! 
Chatice minha novamente (kkkk), mas será que não dá pra dividir em dois?
Eu inverti o organograma, para ficar vertical. O que acha? Para reduzir textos, vc pode usar o símbolo dos elementos químicos tbm... N, K, P, Na, S...
O laboratório Laborfort foi fundado em 2007 na cidade de Cambira – PR. Trata-se de um laboratório de análises químicas que preza pela prestação de serviços com qualidade e tecnologia.
Os dados são interpretados por meio de determinações analíticas e após a avaliação dos resultados pode ser indicada a necessidade nutricional da planta e, assim, efetuar a correção do solo com adubação e calagem, se necessário.	Comment by Fernando Alves: Quais determinações analíticas? Apenas cite algumas utilizadas lá... tipo Embrapa, Adolfo Lutz, Resolução Conama...
Ju, a parte físico-química pode fazer adubação e calagem? E se for pragas? Agrotóxicos? Comente a “resolução” do problema para o caso biológico...
OBJETO DE PRODUÇÃO DA EMPRESA E MISSÃO
A empresa Laborfort oferece serviços técnicos e científicos em análises químicas referentes àas atividades agrícolas, a. Além de serviços em análises de alimentos, ambientais e agronômicas, visando a maior produtividade do setor. A empresa busca ser referência em questão de qualidade e confiabilidade, apresentando seus resultados de forma rápida e precisa, atendendo sempre as necessidades de seus clientes.
Os valores da empesa são:
· Aumento de precisão em seus resultados por meio de inovações tecnológicas;
· Colaboradores comprometidos e capacitados para a realização do trabalho;
· Respeito ao meio ambiente, prezando por sua conservação;
· Busca pela superação nos processos;
· Prestação de serviços de boa qualidade e alto padrão.
ORGANOGRAMA GERAL
A empresa Laborfort possui uma organização formal, representada graficamente pelo seu organograma apresentado na Figura 2, descrevendo a disposição dos órgãos ou setores, a hierarquia e as relações de comunicação existentes. Os setores e colaboradores possuem atividades pré-definidas, porém, dependendo da necessidade e volume de análises, permite a cooperação entre os setores, promovendo o aumento de sua eficiência.
Figura 2- Organograma da empresa
 
Fonte: Gestão da empresa
ORGANOGRAMA ESPECÍFICO DO SETOR DE ESTÁGIO
O setor específico no qualdo estágio foi realizado é denominado pela empresa de L o laboratório de Nnematoides. Nesteo laboratório, o supervisor está diretamente relacionado ao estagiário, como representado na Figura 3. 
Figura 3- Organograma do setor de estágio
 
Fonte: Gestão da empresa
Os estágios são supervisionados pela química industrial Fernanda Calsavara Martines, que direciona e coordena as atividades a serem realizadas no laboratório. A maior proximidade com o supervisor permitiu que problemas rotineiros na empresa fossem resolvidos em conjunto, desenvolvendo um maior perfil profissional.
ATRIBUIÇÕES DO SETOR ONDE FOI DESENVOLVIDO O ESTÁGIO
O estágio foi realizado no setor de nematoides. As análises realizadas neste setor são foram a separação de raiz e solo, extração de nematoides da raiz e do solo, além da preparação deas placas para contagem em microscópio, e identificação dos fitonematoides. Porém, o laboratório possui outros setores que iniciam ou finalizam o processo de análise, que são:
· Setor de recebimento e cadastramento das amostras: onde se realiza o recebimento de todo material a ser analisado pelo laboratório, além de realizar o cadastramento assegurando o total controle das amostras.
· Preparo de amostra: local onde se realiza a secagem em estufas e , moagem de amostras em estufas. Para o solo, faz-se a transferência de quantidade de amostra para extrações; e para tecido vegetal, realiza-se a pesagem.
· Laboratório de análises físicas: local que se realiza as análises granulométricas de cada amostra de solo.
· Laboratório de análises químicas: onde realiza-serealização de as análises químicas de acordo com o que foi pedido em cada amostra
PROCESSO DE SELEÇÃO PARA O ESTÁGIO
Entregou-se o currículo para a responsável do laboratório e foi realizada uma entrevista, onde foram decididos o horário e atividades a serem realizadas pelo estagiário.	Comment by Fernando Alves: Uhhn.... que estranho Ju!! Kkkk
Tenta melhorar essa parte... 
Exemplo: “O processo de seleção foi baseado em etapas definidas pela empresa.
Primeiramente, a empresa solicitou para os estagiários curriculum para análise. Em sequencia, um representante da empresa realizou uma apresentação geral da Laborfort, e, através de entrevistas, buscou identificar os objetivos de cada estagiário perante a empresa. 
A contratação como estagiário foi concluída ao apresentar os documentos que formalizam a relação empresa/universidade, especificando carga horária, período do estágio, remuneração (ou não), entre outros.
Isso é só um exemplo Ju, não sei se foi exatamente assim. Aproveite aquilo que vc acha que faz sentido...
RECURSOS DISPONIVEIS PARA A REALIZAÇÃO DO ESTÁGIO
MÁQUINAS, EQUIPAMENTOS E SOFTWARESUTILIZADOSDurante o período do estágio, foram utilizados os seguintes instrumentos para a realização das análises:
· Balanças analíticas, utilizadas para aferir massas em geral;
· Peneiras de 20 mesh e 500 mesh;
· Tubos de centrífuga de 50 mL;
· Centrífuga DAIKI Modelo L-450;
· Micropipetas;
· Microscópios Nikon Eclipse E200;
· Lupa OPTON TIM-2T.
Para o cadastramento dos resultados das análises:
· Allims Manager	Comment by Fernando Alves: É um software?
LABORATóRIOS
Utilizou-se apenas o laboratório de nematoides, porém a empresa possui outro laboratório analítico onde se desenvolve as seguintes atividades: análise de pH, carbono orgânico, alumínio, enxofre, boro, fósforo, macro e micronutrientes, sendo esses: cálcio, magnésio, potássio, cobre, ferro, manganês e zinco, além das analises bromatológicas.
EQUIPE DE TRABALHO
A equipe de trabalho foi constituída por 23 pessoas, entre elas, os responsáveis pelos setores do tecido vegetal e bromatológicas, fertilizante e solo, englobando os funcionários do administrativo, preparo de amostras, recepção e limpeza. Além da responsável química, a qual é responsável pelo controle de qualidade e dos demais funcionários, para os quais são distribuídos trabalhos específicos dentro do setor de análise química. 
INTER-RELAÇÃO COM OUTRAS ÁREAS DA EMPRESA
O maior convívio foi no laboratório de nematoides, o qual é composto por duas etapas essenciais: extração de fitonematoides, sendo do solo ou raiz e contagem e identificação dos nematoides. Esse setor é composto por três colaboradores na análise de fitonematoides e mais dois colaboradores no preparo da amostra.	Comment by Fernando Alves: Não entendi... essa frase vc não terminou...
Esse parágrafo tbm não faz sentido Ju...
Se ficar difícil, retira ele! Qual o objetivo deste tópico no seu relatório?
Atividades desenvolvidas
Separação do solo e raiz 
Para realizar a separação do solo e raiz, utilizoua-se o método de catação. Nesta etapa deve-se retirar todos os resquícios de raiz presentes no solo, para que esta não interfira na análise isolada de solo. 	Comment by Fernando Alves: Tem alguma norma que rege isso?
	
Figura 4 - Separação do solo e raiz
Fonte: Autoria própria 
Extração de FITONEMATOIDES de amostra de solo
Para a extração de fitonematoides de amostra de solo utiliza-se o método de flotação centrífuga em solução de sacarose. Retira-se umaNesse processo, uma alíquota de 100 cm³ é retirada da amostra e coloca-seda em um balderecipiente. Acrescenta-se, aproximadamente, 2 a 3 litros de água dea torneira, homogeneiza-se a amostra de solo em suspensão e quebram-se os torrões maiores, deixando-se em repouso por cerca de 10 minutos. A suspensão é então vertida Verte-se a suspensão sobre a peneira de malha igual a 20 mesh, a qual está sobre outra peneira de 500 mesh, e descarta-se o material retido na primeira peneira. Enxagua-se a segunda peneira até sair água límpida, retirando todo o solo (JENKINS, 1964).
Os fitonematoides e partículas retidos na peneira de 500 mesh são recolhidos em suspensão aquosa, em tubos de centrifuga de 50 mL com auxílios de jatos de pissete. Então, os tubos são balanceados e centrifugados a 1750 rpm por 5 minutos. 
Descarta-se o sobrenadante e limpam-se as paredes dos tubos;, a seguir, acrescenta-se a solução de sacarose com auxílio de pissete, dirigindo o jato para o fundo dos tubos, de modo a promover a ressuspensão do material sedimentado (JENKINS, 1964). 	Comment by Fernando Alves: Qual concentração? 
Após, a amostra é Centrifuga-secentrifugada novamente por 1 minuto, na mesma rotação, e passa-se o sobrenadante sobre uma peneira de 500 mesh, a qual lava-se com água de torneira. Recolhem-se os fitonematoides retidos, em suspensão aquosa, em tubos de centrifuga de 50 mL com auxílio de pissete com água. Após 40 minutos, examina-se a suspensão emno microscópio (JENKINS, 1964).
Figura 5- Etapas da extração de nematoides no solo pelo método de flotação centrífuga em solução de sacarose
Fonte: Autoria própria
EXTRAÇÃO DE FITONEMATOIDES DE RAÍZES
Este método de COOLEN e D”HERDE é indicado para a extração de fitonematoides endoparasitas a partir do material vegetal infectado, sendo raízes, folhas, sementes, tubérculos, etc.	Comment by Fernando Alves: Isso é uma referência? Se sim, não tem ano?
O procedimento inicia-se com o corte das Cortam-se as raízes e descartam-see dos caules. As raízes infectadas são lavadas e cortadas em pedaços de cerca de 1 cm; , em seguida, homogeneízam-se os fragmentos são homogeneizados e pesa-se uma alíquota de 10 gramas. (COOLEN; D’HERDE, 1972)	Comment by Fernando Alves: Achei o ano da referência acima! Auhahauahu
Coloca no começo do parágrafo tbm! 😉
Trituram-se as raízes, em alta rotação, emno liquidificador, por 15 segundos, em 1L de água, suficiente para cobrir os fragmentos. Então, passa-se a suspensão resultante numa peneira de 20 mesh sobre a de 500 mesh. Recolhem-se os fitonematoides e os fragmentos retidos na segunda peneira, em suspensão aquosa, em tubos de centrifuga de 50 mL com jatos de pissete. Acrescenta-se 1 cm³ de caulim, o qual comporta a raiz no fundo, e balanceiam-se os tubos e centrifuga-se por 5 minutos a 1750 rpm (COOLEN; D’HERDE, 1972).
A seguir, elimina-se o sobrenadante, limpam-se as paredes dos tubos e adiciona-se a solução de sacarose com jatos de pissetea dirigidos para o fundo. Centrigua-se novamente a 1750 rpm por 1 minuto, em seguida, verte-se o sobrenadante sobre uma peneira de 500 mesh e lavam-se fitonematoides retidos na peneira com água da torneira. Então recolhem-se os fitonematoides e após de 20 minutos pode ser examinada para identificação e contagem (COOLEN; D’HERDE, 1972).
Figura 6- A- Pesagem das raízes para extração de nematoides.; B- Uso do liquidificador para triturar as raízes
B 
A 
 Fonte: Autoria própria 
preparo de lâminas 
Após a extração dos fitonematoides de solo e raiz, reduz-se o liquido sobrenadante dos tubos de centrífuga para 5 mL, quando solo, e 10 mL quando raiz, obtendo-se uma diluição de 5 e 10 vezes, respectivamente. Esses valores são utilizados no cálculo final da contagem dos parasitas. 
Para a preparação da lâmina de Peters, é necessário misturar a amostra utilizando a micropipeta ou pipeta de Pasteur, retirando em seguida uma alíquota do liquido reduzido, de forma que preencha os quadrantes sem presença de bolhas de ar. 
Em seguida, a lâmina é fixada no microscópio estereoscópico para a leitura.
Figura 7- Lâmina de Peters
 Fonte: Autoria própria
quantificação E IDENTIFICAÇÃO DOS FITONEMATOIDES
Realiza-se a contagem de fitonematoides no microscópio estereoscópico com luz transmitida, nos quais fixam-se as lâminas. A lâmina de Peters é composta por duas lâminas sobrepostas, sendo o vão formado entre elas o local onde a amostra é colocada. A lâmina de baixo é formada por quadrantes, que servem para orientar o analista durante a quantificação. Inicialmente, identifica-se um dos cantos da lâmina, percorrendo a linha horizontal da base até seu fim, subindo o feixe de luz até encontrar a outra linha horizontal pertencente ao mesmo quadrante, visto que não é possível fazer a contagem no quandrante inteiro de uma só vez.	Comment by Fernando Alves: Cantos ou quadrantes?
Figura 8- Microscópio estereoscópico
 
 Fonte: Autoria própria
Para obtenção da população total, o número de fitonematoides contados de cada gênero deve ser multiplicado pelo volume da suspensão. O resultado final, no entanto, deve ser dado relacionando o volume de solo ou do peso da raiz. (BEZOOIJEN, 2006; SOUTHEY,1986)
Figura 9- Desenho esquemático de lâmina de contagem de Peters 
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
 Fonte: Autoria própria
Inicialmente é realizada a identificação do fitonematoide a partir da presença do estilete bucal, utilizado para extrair a seiva das plantas. Uma vez classificado como fitonematoide, énecessário analisar características específicas da forma do estilete, corpo e cauda para identificar o gênero.
Figura 10- Gêneros de fitonematoides comumente encontrados: A- Pratylenchus spp.; B – fêmea adulta de Meloidogyne spp.; C- Helicotylenchus spp.; D- Heterodera spp.
D 
C 
B 
A 
Fonte: Autoria própria
DIFICULDADES ENCONTRADAS
A principal dificuldade encontrada foi realizar de forma ágil as análises para entregar o laudo dentro do prazo, pois se trata de um procedimento que necessita de prática para identificar com precisão os gêneros dos fitonematoides, os quais possuem estruturas similares.	Comment by Fernando Alves: Entretanto, as dificuldades permitiram uma ampliação dos conhecimentos teóricos obtidos durante o curso. No estágio, a inserção do estudante na prática faz com que tais dificuldades se transformem em crescimento profissional...
Blá blá blá... ok, eu sei que isso não agregou nada Ju, mas em cada tópico, tente “concluir” o tópico. Assim não ficam itens perdidos ao longo do texto...
Escreva da forma que vc achar melhor :D
ÁREAS DE IDENTIFICAÇÃO COM O CURSO
As áreas relacionadas com o curso foram:
· Microbiologia: manuseio do microscópio e lupa;	Comment by Fernando Alves: Olocooo!! Só isso??? Ashuaiuasha
E processos de separação? Moagem, peneiramento, lixiviação, secagem... isso tudo são operações unitárias... kkkkk
Aumenta isso aí menina
kkkkkkkkkk
· Química geral: base para realização dos cálculos necessários para o preparo de soluções;
· 
CONCLUSÃO
O desenvolvimento do estágio realizado no laboratório de nematoide proporcionou, conhecimento das sobre rotinas do laboratório, além de experiência e aprendizado com uma análise não habitual na universidade.	Comment by Fernando Alves: Ju, outra coisa que vc precisa colocar na conclusão, é sobre a conclusão do relatório...
Este documento que vc redigiu... qual a conclusão dele?
“Foi possível apresentar o organograma, funções de cada responsável, análises e procedimentos realizados...e os resultados alcançados: crescimento profissional, melhoria em técnicas analíticas...”
Infelizmente, você não pode apresentar os laudos da empresa (acredito que eles não permitam né?) 
Então, foque no seu resultado pessoal do estágio (qualificação, crescimento... entre outros).
Conclui-se que o programa de estágio na Laborfort favoreceu: a qualificação profissional, pois a empresa ajudou a desenvolver capacidades técnicas e práticas de um analista; emocional e, principalmente, social, permitindo a prática de trabalhar em equipe, respeitando as diferenças e visualizando os benefícios que este exercício ocasiona; além de oferecer novos conceitos sobre a indústria e o ramo em que atua, unindo química, biologia e agronomia.
REFERÊNCIAS
BEZZOIJEN, V.J. Methods and techniques for nematology. Wageningen University, UR. 112p., 2006.
COOLEN, W.A.; D’HERDE, C.J. A method for the quantitative extraction of nematodes from plant tissue. Ghent State Agriculture Research Centre, 1972.
FERRAZ, S.; DIAS, C.R. & FREITAS, L.G. 2001. Controle de nematoides com práticas culturais. In: ZAMBOLIM, L. (ed). Manejo Integradi-Fitossanidade: Cultivo protegido, pivô central e plantio direto. Viçosa. Editora UFV, pp. 1-52.
JENKINS, W.R. A rapid centrifugal-flotation technique for separating nematodes from soil. Plant Disease Reporter, v.48, p692, 1964.
SOUTHEYM J.F. Principles of sampling for nematodes. In: Laboratory methods for work with plant and soil nematodes. London: Ministry of Agriculture Fisheries and Foods. Her Majety’s Stationery Office, 1986, 202p.
OLIVEIRA, C.M.G.; SANTOS, M.A.; CASTRO, L.H.S. Diagnose de Fitonematoides. Campinas, Millennium Editora, 2016.
Análise Química de Solo
Tecido Vegetal e Bromatológicas
Análise Física de Solo
Análise de Fertilizante
Nitrogênio, Fósforo, Potássio, Alumínio, Cálcio, Magnésio, Enxofre, Boro, Zinco, Cobre, Ferro, Mangânes, Sódio, Cobalto, Molibdênio
Granulometria, Silite, Argila, Areia
Nitrogênio, Fósforo, Potássio, Alumínio, Cálcio, Magnésio, Enxofre, Boro, Zinco, Cobre, Ferro, Mangânes, Sódio, Cobalto, Molibdênio
Análise de corretivo
Análise de fitonematoides
Granulometria, Eficiência Relativa, Poder Relativo, Neutralização Total, Óxido de Cálcio, Carbonato de Cálcio
Contagem, Identificação dos Gêneros
Macronutrientes 
Micronutrientes
Macronutriente secundário
Cálcio, pH, Magnésio, Potássio, Hidrogênio, Alumínio, Fósforo (Resina), Matéria Orgânica, Fósforo (Mehlich-1)
Boro, Zinco, Cobre, Ferro, Mangânes, Sódio
Condutividade Elétrica, Fósforo Remasnecente
Proprietário
Responsáveis Técnicos
Cadastro de Amostras
Supervisor de preparo de amostras
Supervisor de análise de Solo
Controle de Qualidade
Supervisor de análise de Fertilizantes
Supervisor de análise de Tecido Vegetal e Bromatológicas
Supervisor de análise de Nematoides
Proprietário
Responsáveis Técnicos
Cadastro de Amostras
Supervisor de preparo de amostras
Supervisor de análise de Solo
Controle de Qualidade
Supervisor de análise de Fertilizantes
Supervisor de análise de Tecido Vegetal e Bromatológicas
Supervisor de análise de Nematoides
Proprietário
Responsáveis Técnicos
Cadastro de Amostras
Supervisor de preparo de amostras
Supervisor de análise de Solo
Controle de Qualidade
Supervisor de análise de Fertilizantes
Supervisor de análise de Tecido Vegetal e Bromatológicas
Supervisor de análise de Nematoides
Auxiliares e Analistas Químicos
Responsáveis Técnicos
Estagiário
Supervisor de análise de Nematoides
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