5 Sem - Micro 03_03_2022

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03/03/2022 
 
Diagnóstico laboratorial de micobactérias 
Micobactérias - São responsáveis pela hanseníase e pela tuberculose. 
Mycobacterium tuberculosis é o principal agente etiológico, mas existem 
outras espécies. 
 
População de risco/risco relativo/carga entre os casos novos: 
Indígenas - 28 – 1,2% 
Pessoas com HIV –28 – 9,8% 
Pessoas privadas de liberdade- 28 – 8,3% 
Moradores em situação de rua – 56 – 6,9% 
Com a pandemia, os casos de tuberculose foram menores. 
 
Formas de tuberculose mais comuns: 
1. Tuberculose pulmonar 
2. Tuberculose respiratória extrapulmonar 
3. Tuberculose do sistema nervoso 
4. Tuberculose de outros órgãos 
5. Tuberculose miliar 
 
Parede celular: 
 
 
 
- É uma bactéria que consegue fugir do sistema imune, driblando as 
estruturas dos macrófagos e dominando-o. 
- Há a diminuição de produção de IL-12 e interferon. 
- Inibição da maturação e acidificação do fagossomo 
- Acesso da bactéria ao citoplasma. 
 
Bacilífero - paciente que está eliminando bactéria. 
 
Diagnóstico Laboratorial: 
 
Coleta de escarro por expectoração. 
 
Obtido após esforço de tosse, o volume ideal é de 5 a 10mL. 
Amostras contendo apenas saliva não devem ser aceitas. 
 
- Recipiente: descartável, boca larga, estéril, transparente e 
identificado com todos os dados do paciente. 
- Coleta: Deve ser realizada pelo próprio paciente, de preferência 
em local aberto ou sala bastante arejada. Coletar de preferência 
pela manhã, ao despertar. 
 
EXAMES: 
 
Baciloscopia 
- Exame de execução rápida, fácil e de baixo custo. 
- Identifica os indivíduos que estão eliminando os bacilos e são 
portanto, fontes de infecção. 
- Serve para acompanhar a eficácia do tratamento. 
- Para o exame se positivo estima-se que são necessários entre 
5.000 e 10.000 bacilos por mL de escarro. 
- Sensibilidade em torno de 65%. 
 
- Confecção do esfregaço 
- Fixação 
- Coloração 
 
Leitura da lâmina: Micobactérias apresentam-se como bacilos delgados, 
ligeiramente curvos, corados em vermelho. O fundo do esfregaço fica 
azul. 
 
São lidos no mínimo 100 campos em objetiva de maior aumento. 
 
 
 
 
Cultura: 
- Mais sensível que a baciloscopia. Requer de 10 bacilos por mL de 
escarro para o exame ser positivo. 
- Diagnóstico mais precoce da doença. 
- Permite o estudo posterior do microrganismo (tipagem molecular, 
sensibilidade aos antimicrobianos) 
- Procedimento mais demorado. 
 
Meios de cultura: 
- Lowentein-Jensen 
- 7H10 e 7H11 (sólidos) 
- 7H9 (líquido) 
 
Incubação e Leitura: 
- Descontaminação (eliminar outras bactérias) com solução com 
três substâncias: citrato, hidróxido de sódio e N-acetilcisteína 
- Incubação semeados a 37 graus. 
- Continuar observando a cultura por 6 semanas. 
 
Resultado: 
Colonias de cor creme ou vermelhas, rugosas, desenvolve-se na 
superfície do meio e não alteram a cor do meio. 
 
 
 
 
 
Teste tuberculínico (PPD) 
Compra-se um frasco com antígenos de micobactéria, então injeta-se 
no paciente 100ul no antebraço do paciente e depois de dois dias 
observa-se se forma alguma fissura na pele. Se houver, é positiva e 
indica que o paciente já teve em algum momento contato com a 
bactéria. 
Se o carocinho pro maior que 10mm – positivo 
Pessoas com HIV e não vacinadas com BCG, maior que 5mm – positivo 
 
 
 
 
Xpert MTB/Rif ou TRM (Teste rápido molecular) 
Teste de PCR e tempo real para diagnóstico molecular da tuberculose e 
da resistência à rifampicina. 
Implantado no SUS desde 2015. 
Demora em torno de 2hr 
Quando as fitas esquentam, soltam as fitas de DNA e pela temperatura 
detecta a resistência à rifampicina, o que dá o diagnóstico. 
É colocado um reagente na amostra - extração de DNA - é colocado em 
um frasco com reagentes (primers, tampões, etc) - coloca-se no 
dispositivo para medir temperatura, fluorescencia e etc. 
O teste molecular não substitui a baciloscopia para acompanhamento 
do tratamento. 
 
 
 
Identificação das micobactérias 
- Testes bioquímicos 
- HPLC 
- Moleculares 
- Comerciais (GEN-PROBE, INO-LIPPA) 
- In-house (PCR-RFLP) 
- Sequenciamento genético do gene do RNA ribossomal 16S, 
genes HSP65 e RPOB 
 
Teste de sensibilidade aos antimicrobianos (antibiograma) 
- Indicado quando há suspeita de resistência, por abandono, 
falência de tratamento ou por contato com demais pacientes 
resistentes. 
- Indicado na vigilância epidemiológica da resistência. 
 
 
Sistema automatizado 
- Realizado por máquinas 
 
 
 
 
Resistência 
 
- MultirresistenteS (MDR) 
Resistente à isoniazida e rifampicina. 
Estimativa de 2016: 480 mil casos no mundo. 
 
- Extensamente resistente (ER) 
Resistência à isoniaziada e rifampicina e a fluoroquinolona e mais uma 
medicação injetável (amicacina, capreomicina ou canamicina) 
O Tuberculo adiquire resistência aos antibióticos apenas por mutação e 
não por transdução, conjugação ou transformação (as resistências das 
bactérias da tuberculose, fazem mutação por elas mesmas). 
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Hanseníase 
 
Conhecida antigamente como “lepra”. 
 
É sábido que a susceptibilidade ao M. leprae possui influência genética. 
Assim, familiares de pessoas com hanseníase porruem maior chance 
de adoecer. 
 
Descrição: 
- Doença infecciosa bacteriana crônica que acomete a pele e 
nervos periféricos. 
- Transmitida via aérea 
- Manifestações da doença variam: 
- Multibacilar (lepromatosa) - presença de multiplas lesões 
cutâneas, infiltrado de nervos periféricos e das lesões da pele, 
grande número de bacilos e pela presença de poucos linfócitos T 
nas lesões. 
- Paucibacilar (Tuberculóide) - pequeno número de lesões, poucos 
bacilos, proliferação e recrutamento de linfócitos T, que 
contribuem para o controle da infecção. 
 
De acordo com a OMS: 
 
Caso de hanseníase: 
-> Lesões cutaneas 
-> Envolvimento de nervos 
-> Esfregaço positivo para bacilos. 
 
Até 5 lesões: Paubacilar. 
Mais de 5 lesões: Multibacilar. 
 
Aspectos históricos: 
 
Características gerais: 
- Doença infecto-contagiosa; 
- Evolução lenta (pode durar mais de 20 anos); 
- Sinais e sintomas dermatoneurológicos (lesões na pele e nos 
nervos periféricos); 
- Pode acarretar incapacidades e deformidades: 
- Doença curável. 
 
Nervos acometidos: 
 
Agente etiológicos: 
As bactérias se acham melhor nas bordas das bactérias