PRÁTICA Microscopia 2024

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DISCIPLINA- BIOLOGIA CELULAR 
PROF, CAVALCANTE 
ROTEIRO DA AULA PRÁTICA – MICROSCOPIA 
 
 
INTRODUÇÃO 
 
Leitura - A célula é um pequeno mundo, totalmente cercada por uma fronteira bem controlada, 
que regula tudo o que entra e sai. O acesso às estruturas internas de uma célula pode se dá de 
diferentes formas. Algumas funcionam como portas giratórias de lojas ou bancos, que permitem 
atravessar a fronteira num piscar de olhos; noutras, torna-se necessário a aplicação de uma 
força para provocar a entrada e saída de qualquer coisa. Há um constante trânsito de matéria-
prima e de energia nas fronteiras da célula, uma vez que sua vida depende quase totalmente 
dos produtos importados do ambiente. De fato, há alguns produtos internos que são exportados 
e, segundo se sabe muito requisitado no exterior. O ambiente celular é muito organizado, 
principalmente o grupo dos eucariontes. 
As células eucarióticas são bem maiores e muito bem organizadas. O citoplasma é 
entrecortado por uma rede de tubos e canais membranosos, onde ocorrem a produção e o 
transporte de diversas substâncias consideradas importantes para o funcionamento e a 
manutenção da mesma. Há também diversas organelas citoplasmáticas, estruturas que atuam 
em funções específicas, como a produção de energia e a digestão de substâncias dentro delas. 
 
 1) ESTRATÉGIA: Observação de células vegetais e animais com a utilização do microscópio 
através da formação de grupos de alunos 
 
 2) OBJETIVOS ESPECÍFICOS: 
 
- Verificar que a célula é a unidade estrutural e de função dos seres vivos. 
- Conhecer a constituição das células eucarióticas animais e vegetais. 
- Identificar as diferentes estruturas constituintes das células animais e vegetais. 
- Distinguir células animais de vegetais. 
- Aprender a manusear o microscópio óptico. 
 
 3) MATERIAIS: 
 
- Água destilada - Estilete - Pinça - Palito - Lâminas - Lamínulas 
- Conta Gotas - Azul de metileno- Cebola – cultura de microrganismos - folhas 
- Papel de limpeza - Placa de Petri - Microscópio - lâminas prontas 
 
 4) PROCEDIMENTOS: 
 
MICROSCÓPIO ÓPTICO 
Componentes mecânicos 
 
13. Tubo ou canhão – suporta a ocular na extremidade superior 
2. Revólver – suporte das lentes objetivas, permite trocar a lente objetiva rodando sobre um 
eixo 
4. Parafuso macrométrico – permite movimentos verticais da grande amplitude da platina 
 
 
5. Parafuso micrométrico – permite movimentos verticais lentos de pequena amplitude da 
platina para focagem precisa da imagem 
6. Platina – base de suporte e fixação da preparação, tem uma abertura central (sobre a qual é 
colocada a preparação) que deixa passar a luz. As pinças ajudam à fixação da preparação. A 
platina pode ser deslocada nos microscópios mais modernos, nos antigos tinha que se mover a 
própria amostra, segura pelas pinças. 
9. Charriot - Associada à platina, cuja função é movimentar a lâmina no plano horizontal. Ele 
possui dois controladores dispostos um sobre o outro, lateralmente à platina promovendo a 
movimentação da peça. 
10. Pé ou base – apoio a todos os componentes do microscópio (abaixo da fonte luminosa) 
11. Braço – fixo à base, serve de suporte às lentes e à platina 
Componentes ópticos 
1. Lente ocular – cilindro com duas ou mais lentes que permitem ampliar a imagem real 
fornecida pela objetiva, formando uma imagem virtual mais próxima dos olhos do observador. 
As oculares podem ser de diferentes ampliações sendo a mais comum de 10x. A imagem 
criada pela ocular é ampliada, direita e virtual 
3. Lente objetiva – conjunto de lentes fixas no revolver, que girando permite alterar a objetiva 
consoante a ampliação necessária. É a lente que fica mais próxima do objeto a observar, 
projetando uma imagem real, ampliada e invertida do mesmo. As objetivas secas, geralmente 
com ampliação de 04x, 10x, 40x, são assim designadas porque entre a sua extremidade e a 
preparação existe somente ar. As objetivas de imersão (ampliação até 100x), pelo contrário, 
têm a sua extremidade mergulhada em óleo com o intuito de aumentar o poder de resolução da 
objetiva: como o índice de refração de óleo é semelhante ao do vidro o feixe de luz não é tão 
desviado para fora da objetiva. 
7. Fonte luminosa – atualmente utiliza-se luz artificial emitida por uma lâmpada incluída no 
próprio microscópio com um interruptor e algumas vezes com um reostato que permite regular a 
intensidade da luz. Os modelos antigos tinham um espelho de duas faces: a face plana para 
refletir luz natural e a face côncava para refletir luz artificial. 
8. Condensador – sistema de duas lentes (ou mais) convergentes que orientam e distribuem a 
luz emitida de forma igual pelo campo de visão do microscópio 
12. Diafragma – regula a quantidade de luz que atinge o campo de visão do microscópio, 
através de uma abertura que abre ou fecha em diâmetro (semelhante às máquinas fotográficas) 
 
Como funciona o microscópio óptico 
A intensidade da luz pode ser regulada diretamente através do reóstato que atua na própria 
fonte luminosa ou indiretamente através do condensador e do diafragma: a intensidade 
aumenta de se subir o condensador e abrir o diafragma e diminui se se descer o condensador e 
fechar o diafragma. 
A ampliação – número de vezes que a imagem é aumentada em relação ao objeto real – é 
função conjunta do poder de ampliação da objetiva e ocular utilizadas. A ampliação total é o 
produto da ampliação da objetiva pela ampliação da ocular (exemplo, ampliação da ocular 10x, 
ampliação da objetiva 20x, ampliação total é 10 x 20 = 200x. 
A imagem observada depende também do poder de resolução, isto é, a capacidade que as 
lentes têm de discriminar objetos muito próximos. O poder de resolução depende do 
comprimento de onda da luz utilizada, e o seu valor teórico para um microscópio óptico é de 
cerca de 0,2 µm – ou seja, dois objetos têm de estar pelo menos a uma distância um do outro 
de 0,2 µm para poderem ser discriminados ao microscópio óptico. Este valor, contudo, só é 
alcançável com lentes de elevada qualidade e preço! 
A preparação é colocada na platina e fixa com o auxílio das pinças. Com os parafusos 
existentes na platina move-se a preparação até esta estar sobre a abertura por onde passa a 
luz. Olhando através da ocular (monocular ou binocular, respectivamente com uma ou duas 
lentes) e com a objetiva de menor ampliação foca-se a imagem, preferencialmente no centro do 
campo de visão, utilizando os parafusos macrométrico e micrométrico. Após esta primeira 
focagem, podem-se utilizar objetivas de maior poder de ampliação, de forma sequencial 
repetindo todo o processo já descrito. A imagem final observada será ampliada, virtual e 
invertida. Dependendo do microscópio, em alguns casos, a imagem final pode ser direita e não 
invertida. 
Por exemplo, se utilizarmos uma preparação da letra F, tal como na figura, as imagens 
formadas pela objetiva e pela ocular são como descritas na figura 
 
Imagens obtidas por uma lente objetiva e ocular a partir de uma preparação com a letra F. As 
posições relativas da letra F são como se observariam ao microscópio. 
 
Lupa (microscópio estereoscópio) - 
Visualização de estruturas maiores como: 
partes de insetos, sistema reprodutor em 
flores, etc... 
 
 
 
Observação da mucosa bucal. (Figura1) 
 
Lave a boca com água corrente, antes da coleta do material para evitar resíduos alimentares, 
em seguida, Raspe a mucosa bucal com o auxílio de uma espátula de madeira ou palito. Com o 
material colhido fazer um esfregaço fino e transparente sobre uma lâmina seca. Deixar a lâmina 
secar movimentando-a no ar. Corar o material com azul de metileno durante 5 minutos. Cobrir 
com lamínula e observar ao microscópio com objetivas de 10x e 40x. Esquematizar o material 
observado. 
 
Epiderme de Allium cepa (cebola) (Figura 2) 
 
Observação de células da epiderme do bulbo da cebola (Alliumcepa L.) Retire com uma pinça, 
uma porção da epiderme interna de uma escama do bulbo da cebola. Coloque-a sobre uma 
lâmina com uma gota de água. Cubra com lamínula. Observe ao microscópio e registre.. Repita 
o experimento com azul de metileno no lugar da água. Com papel de filtro, aspire na margem 
oposta até à infiltração do corante. Observe ao microscópio com objetivas de 10x e 40x e 
registre 
Fig.1 Fig. 2 
 
Observação de microorganismos (Infusão de protozoários) (Figura 3) 
Retirar uma gota da infusão e colocar em uma lâmina. Cobrir com uma lamínula e observar ao 
microscópio com objetivas de 10x e 40x. Esquematize as observações. 
Ovservação de estômatos em folha de Rhoeo discolor (Figura 4) 
Retire com uma pinça, uma porção da epiderme da folha de Rhoeo discolor, coloque sobre uma 
lâmina e acrescente uma gota de água. Cubra com a lamínula e observar ao microscópio com 
objetivas de 10x e 20x. Registre o resultado. 
Fig. 3 Fig. 4 
 
Observação de lâminas prontas 
Coloque uma de cada vez, as lâminas apresentadas pelo professor ao microscópio e examine 
com objetivas de 10x, 20x e 40x. Esquematize as observações 
 
Túbulos seminíferos Sangue de sapo Sangue humano 
Os túbulos seminíferos, também chamados de tubos seminíferos, localizam-se no testículo, 
que se alojam como novelos dentro de um tecido conjuntivo frouxo rico em vasos sanguíneos e 
linfáticos. 
É nos túbulos seminíferos que ocorre a produção de espermatozoides. Cada testículo possui de 
250 a 1000 túbulos que medem aproximadamente 150 a 250 µm de diâmetro e 30-70 
centímetros de comprimento cada um, sendo o comprimento combinado dos túbulos de um 
testículo de aproximadamente 250 metros. 
Os túbulos seminíferos são constituídos por uma parede conhecida como epitélio germinativo 
ou epitélio seminífero, que é envolta por uma lâmina basal e por uma bainha de tecido 
conjuntivo formado de algumas camadas de fibroblastos. A camada localizada mais 
internamente, que se encontra aderida à lâmina basal, é formada por células mioides achatadas 
e contráteis e que possuem características de células musculares lisas. As denominadas 
células de Leydig ou células intersticiais ocupam a maior parte do espaço entre os túbulos 
seminíferos. 
Os túbulos seminíferos consistem em dois tipos de células: células de Sertoli e células que 
constituem a linhagem espermatogênica. Estas últimas estão dispostas em 4 a 8 camadas e 
sua função é a produção de espermatozoides. A produção de espermatozóide é conhecida 
como espermatogênese, um processo que inclui divisão celular por mitose e meiose e a 
diferenciação final em espermatozóide, conhecida como espermiogênese. 
 
Constituição do sangue: 
 
Plasma 
 
O plasma representa a parte líquida do sangue. 
É constituído por água (cerca de 90%), sais minerais, substâncias orgânicas, glícidos, lípidos, 
vitaminas, proteínas e hormonas. 
Glóbulos vermelhos (hemácias ou eritrócitos) 
São células em forma de disco bicôncavo (eritrócito humano) que não possuem núcleo. 
Apresentam cor vermelha devido há presença de uma proteína, a hemoglobina, que possui 
ferro na sua constituição e que é responsável pelo transporte de gases como o oxigênio. 
As hemácias são as células mais abundantes do sangue e são elas que lhe dão a sua cor 
vermelha. 
 
 
Glóbulos brancos ou leucócitos 
São células com núcleo, maiores do que as hemácias, que desempenham um papel muito 
importante na defesa do organismo, protegendo contra micróbios e substâncias estranhas. 
 
 
 
 
 
 
Tipos de leucócitos 
 
Os leucócitos podem ser de vários tipos: neutrófilos, basófilos, eosinófilos, linfócitos e 
monócitos, agindo de formas diferentes na defesa do organismo. 
Os neutrófilos e monócitos são responsáveis pela fagocitose, ou seja, envolvimento e 
digestão de corpos invasores, que penetram no nosso corpo, como espinhos ou bactérias, por 
exemplo. 
Os basófilos e os eosinófilos combatem processos alérgicos. Os linfócitos produzem 
anticorpos para combater organismos estranhos, Os leucócitos podem atravessar as paredes 
dos capilares sanguíneos para penetrarem nos tecidos infectados. Este movimento é designado 
por diapedese. 
Plaquetas 
 
São pequenos cropúsculos, anucleados, que provêm da fragmentação de células 
especializadas. Desempenham a função de coagulação do sangue, participando na formação 
de um coágulo, quando há ruptura de vasos sanguíneos. 
 
 
 
 
 
Bom estudo!