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UniCesumar M.A.P.A – MICROBIOLOGIA CLÍNICA Nome: Cleiton Rodrigues Damaceno R.A: 22129579-5 Disciplina: Microbiologia Clínica INSTRUÇÕES PARA REALIZAÇÃO DA ATIVIDADE 1. Todos os campos acima (cabeçalho) deverão ser devidamente preenchidos. 2. O(A) aluno(a) deverá utilizar este modelo padrão para realizar a atividade. 3. Esta atividade deverá ser realizada individualmente. Caso identificada cópia indevida de colegas, as atividades de ambos serão zeradas. Também serão zeradas atividades que contiverem partes de cópias da Internet ou livros sem as devidas referências e citações de forma correta. 4. Para realizar esta atividade, leia atentamente as orientações e atente-se ao comando da questão. Procure argumentar de forma clara e objetiva, de acordo com o conteúdo da disciplina. Certifique-se que tenha assistido aos vídeos de apoio disponíveis na Sala do Café. 5. Neste arquivo resposta, coloque apenas as respostas identificadas de acordo com as questões. 6. Após terminar o seu arquivo resposta, salve o documento em PDF e o nomeie identificando a disciplina correspondente, para evitar que envie o MAPA na disciplina errada. Envie o arquivo resposta na página da atividade MAPA, na região inferior no espaço destinado ao envio das atividades. FORMATAÇÃO EXIGIDA 1. O documento deverá ser salvo no formato PDF (.pdf). 2. Tamanho da fonte: 12 3. Cor: Automático/Preto. 4. Tipo de letra: Arial. 5. Alinhamento: Justificado. 6. Espaçamento entre linhas de 1.5. 7. Arquivo Único. ATENÇÃO VALOR DA ATIVIDADE: 3.5 Esta atividade deve ser realizada utilizando o formulário abaixo. Apague as informações que estão escritas em vermelho, pois são apenas demonstrações e instruções para te auxiliar, e, posteriormente, preencha todos os campos com suas palavras/imagens. 1) Diante dos dados clínicos e laboratoriais da paciente, RESPONDA: a) EXPLIQUE o princípio do teste de Nitrito na tira reativa e o que ele indica. R: O teste de nitrito na tira reativa é usado para detectar a presença de nitritos na urina. O princípio desse teste baseia-se na capacidade de algumas bactérias, especialmente Escherichia coli e outras enterobactérias, de reduzir nitratos (presentes na urina) a nitritos. A presença de nitritos na urina é indicativa de infecção bacteriana, pois nem todas as bactérias têm a capacidade de realizar essa conversão. Quando a tira reativa é imersa na urina, se a cor muda para um tom rosa ou vermelho, indica uma alta concentração de nitritos, sugerindo uma infecção do trato urinário (ITU) causada por bactérias que produzem nitritos. b) JUSTIFIQUE a utilização do ágar CLED na semeadura de urina. R: A utilização do ágar CLED ajuda na identificação de patógenos urinários, fornecendo uma base para distinguir entre bactérias que fermentam lactose e aquelas que não fermentam, além de reduzir o impacto dos sais na contagem bacteriana. O ágar CLED (Cysteine-Lactose-Electrolyte-Deficient) é um meio de cultura utilizado para o isolamento e a contagem de bactérias presentes na urina. Suas principais características são: • Deficiência em eletrólitos: O ágar CLED possui uma baixa concentração de sais, o que ajuda a prevenir o crescimento excessivo de bactérias, favorecendo a contagem mais precisa. • Indicação de lactose: Ele contém lactose, permitindo a diferenciação entre bactérias que fermentam lactose (como E. coli, que produz colônias amarelas) e aquelas que não fermentam lactose (como Proteus, que produz colônias não coloridas ou de outra cor). c) INTERPRETE os resultados do antibiograma, determinando se o isolado é sensível, resistente ou intermediário para cada antimicrobiano testado. R: Para interpretar o antibiograma, você precisa comparar os diâmetros dos halos de inibição com os valores de referência estabelecidos para determinar se o isolado é sensível, resistente ou intermediário a cada antimicrobiano. Vou fornecer uma interpretação geral com base nos valores comuns para cada antibiótico, embora os valores exatos possam variar um pouco dependendo das diretrizes específicas do laboratório ou da região. ANTIMICROBIANO DIÂMETRO DO HALO INTERPRETAÇÃO Amicacina: 20 mm Intermediário ou resistente Amoxicilina-ácido clavulânico: 52 mm Sensível Cefalexina: 18 mm Intermediário ou resistente Cefepima: 32 mm Sensível Ceftriaxona: 28 mm Sensível Ciprofloxacino: 28 mm Sensível Ertapenem: 30 mm Sensível Gentamicina: 26 mm Sensível Meropenem: 38 mm Sensível Norfloxacino: 26 mm Sensível Trimetoprima/Sulfametoxazol: 18 mm Intermediário ou resistente 2) Sendo assim, RESPONDA: a) De acordo com o Material Didático Digital (MDD) da Microbiologia, e os resultados obtidos nos seus testes, IDENTIFIQUE o gênero e espécie do isolado. R: basicamente o gênero identificado foi o Staphylococcus da espécie Staphylococcus Epidermidis. b) EXPLIQUE o princípio dos testes de catalase, coagulase e manitol e os cuidados que devem ser tomados durante sua execução. R: Teste Catalase Princípio: O teste de catalase é usado para identificar a presença da enzima catalase em uma amostra bacteriana. A catalase é uma enzima que quebra o peróxido de hidrogênio (H₂O₂) em água (H₂O) e oxigênio (O₂). Quando H₂O₂ é adicionado a uma cultura bacteriana que contém catalase, você verá a formação de bolhas de oxigênio. Cuidados: • Tipo de Amostra: Use uma colônia fresca da placa de cultura para o teste. • Reagente: Utilize peróxido de hidrogênio (H₂O₂) com uma concentração usual de 3%. • Manuseio: Adicione o H₂O₂ diretamente na colônia bacteriana ou numa lâmina onde a colônia foi previamente misturada com uma gota de água. • Tempo: Observe a formação de bolhas imediatamente após a adição do H₂O₂. Se não houver bolhas, o teste é negativo. Teste Coagulase Princípio: O teste de coagulase é usado para identificar a bactéria Staphylococcus aureus. A coagulase é uma enzima que causa a coagulação do plasma sanguíneo. No teste, a presença da coagulase pode ser verificada de duas maneiras: o teste de coagulase livre e o teste de coagulase ligada. Teste de Coagulase Livre (ou Teste de Coagulase de Tubo): • O plasma é misturado com a cultura bacteriana em um tubo de ensaio. • Se a bactéria produz coagulase, o plasma se coagula formando um gel. Teste de Coagulase Ligada (ou Teste de Coagulase de Lâmina): • É realizado colocando uma gota de plasma sobre uma lâmina e misturando com uma colônia bacteriana. • A coagulação ocorre rapidamente se a coagulase estiver presente. Cuidados: • Tipo de Amostra: Utilize culturas frescas e puras para evitar resultados falsos. • Tempo de Incubação: No teste de tubo, observe a coagulação após 4 horas, mas algumas cepas podem demorar até 24 horas. • Controle: Inclua um controle positivo e um controle negativo para garantir a validade do teste. Teste Manitol Princípio: O teste de manitol é usado para identificar a capacidade de uma bactéria de fermentar o açúcar manitol. Um meio de cultura, geralmente o Ágar Manitol Salgado, contém manitol e um indicador de pH (como o vermelho fenol). Se a bactéria fermenta o manitol, o meio muda de vermelho para amarelo devido à produção de ácido. Cuidados: • Tipo de Meio: Utilize o meio de Ágar Manitol Salgado, que é seletivo e diferencial. Ele contém sal, o que inibe a maioria das bactérias não estafilocócicas. • Tempo de Incubação: Incube as placas por 24-48 horas a 37°C. • Leitura: Verifique a mudança de cor no meio. Uma cor amarela indica fermentação de manitol; se não houver mudança, a bactéria não fermenta manitol. c) INTERPRETE o resultado do teste do tubo germinativo, sugerindo o provável patógeno. R: O teste do tubo germinativo é utilizado principalmente para a identificação de Candida albicans. Quando uma amostra de levedura é incubada em soro humano ou bovino por cerca de 2 a3 horas a 37°C, C. albicans forma estruturas chamadas tubos germinativos, que são projeções alongadas que se assemelham a hifas. Interpretação: • Resultado Positivo: Se o teste do tubo germinativo for positivo, com a observação de tubos germinativos sob o microscópio, o patógeno mais provável é Candida albicans. Este resultado sugere que a infecção fúngica presente no paciente é causada por esta espécie específica de levedura. • Resultado Negativo: Se não forem observados tubos germinativos, isso pode indicar que a levedura não é C. albicans ou que o método de teste não foi realizado adequadamente. Outras espécies de Candida, como C. tropicalis ou C. glabrata, não formam tubos germinativos sob as mesmas condições e podem requerer métodos adicionais de identificação. Portanto, um resultado positivo no teste do tubo germinativo é altamente sugestivo de infecção por Candida albicans. d) DESCREVA a execução do teste do tubo germinativo e como é feita sua leitura. R: Execução do Teste do Tubo Germinativo Preparação dos Reagentes e Materiais: o Soro: O teste é geralmente realizado usando soro bovino, embora também possa ser feito com soro humano. O soro fornece um ambiente rico em nutrientes e condições ideais para a formação de tubos germinativos. o Tubos de ensaio ou placas de cultivo: Utilizados para incubar as amostras. o Meios de cultura: Pode incluir um meio de cultura apropriado para a inoculação inicial do fungo. Inoculação do Fungos: o Cultivar o fungo: A amostra do fungo (geralmente de uma cultura em ágar ou de um líquido de cultura) é transferida para um meio de cultura apropriado para garantir o crescimento de colônias. o Preparar a suspensão: Faça uma suspensão do fungo em água estéril ou outro diluente estéril. A concentração da suspensão deve ser tal que um número adequado de células do fungo esteja presente para o teste. Preparação da Incubação: o Adicionar o soro: Coloque uma quantidade adequada de soro bovino (ou humano) em tubos de ensaio ou placas. o Inocular o soro: Adicione a suspensão do fungo ao soro no tubo de ensaio. A concentração deve ser tal que as células do fungo possam crescer e formar tubos germinativos. Incubação: o Temperatura e Tempo: Incube os tubos ou placas a 37°C por 2 a 4 horas. Esta temperatura e duração são ideais para a expressão da formação de tubos germinativos, que é uma característica importante para Candida albicans. Leitura e Interpretação dos Resultados Leitura do Teste: o Verificação Visual: Após o período de incubação, observe os tubos ou placas sob um microscópio ou a olho nu. A formação de tubos germinativos é visualizada como estruturas filamentosas que se estendem a partir das células do fungo. Essas estruturas se assemelham a pequenas hifas (filamentos fúngicos) e são distintas das colônias típicas. Interpretação dos Resultados: o Positivo para Formação de Tubos Germinativos: Se houver formação de tubos germinativos, isso indica que o fungo é Candida albicans ou uma espécie estreitamente relacionada. A presença de tubos germinativos é um bom marcador para esta espécie. o Negativo para Formação de Tubos Germinativos: Se não houver formação de tubos germinativos, isso sugere que o fungo não é Candida albicans. Outras espécies de Candida ou outros fungos podem estar presentes, e serão necessárias testes adicionais para a identificação. O teste do tubo germinativo é uma ferramenta útil, mas não é o único teste disponível para identificar espécies de Candida. Muitas vezes, é realizado em conjunto com outros testes para uma identificação mais completa e precisa. REFERÊNCIA https://brcast.org.br/. https://www.gov.br/anvisa/pt- br/centraisdeconteudo/publicacoes/servicosdesaude/manuais/manuais-de-microbiologia-clinica. https://www.gov.br/anvisa/pt- br/centraisdeconteudo/publicacoes/servicosdesaude/publicacoes/modulo-4-procedimentos- laboratoriais-da-requisicao-do-exame-a-analise-microbiologica-e-laudo-final https://brcast.org.br/ https://www.gov.br/anvisa/pt-br/centraisdeconteudo/publicacoes/servicosdesaude/manuais/manuais-de-microbiologia-clinica https://www.gov.br/anvisa/pt-br/centraisdeconteudo/publicacoes/servicosdesaude/manuais/manuais-de-microbiologia-clinica https://www.gov.br/anvisa/pt-br/centraisdeconteudo/publicacoes/servicosdesaude/publicacoes/modulo-4-procedimentos-laboratoriais-da-requisicao-do-exame-a-analise-microbiologica-e-laudo-final https://www.gov.br/anvisa/pt-br/centraisdeconteudo/publicacoes/servicosdesaude/publicacoes/modulo-4-procedimentos-laboratoriais-da-requisicao-do-exame-a-analise-microbiologica-e-laudo-final https://www.gov.br/anvisa/pt-br/centraisdeconteudo/publicacoes/servicosdesaude/publicacoes/modulo-4-procedimentos-laboratoriais-da-requisicao-do-exame-a-analise-microbiologica-e-laudo-final