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Faculdade Pitágoras de Imperatriz
 
Farmácia 
Universitária
 
Curso de Bacharelado em Farmácia
 
Estágio Supervisionado em Manipulação Alopática e Homeopática
 
 
Professor / Supervisor: João Paulo Bastos Silva
 
 
 
 Faculdade Anhanguera de Imperatriz
 
 
Curso de Bacharelado em Farmácia
 
Estágio Supervisionado em Análises Clínicas 
 
 
Professor / Supervisor: Bruno Ernâni 
 
 
 
 
 
ESTÁGIO DE ANÁLISES CLÍNICAS | FACULDADE ANHANGUERA DE IMPERATRIZ
 
 
 
Rua Barão do Rio Branco, n. 300 
–
 
Centro 
–
 
Imperatriz/MA 
-
 
Cep: 65.901
-
100
 / 
Telefone: (99) 2101
-
6000
 
PROCEDIMENTOS 
OPERACIONAIS PADRÃO
 
 
 
 
	
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO
	TÍTULO: 
	CÓDIGO: 
 01
	REVISÃO/ANO: 2024
	CLASSIFICAÇÃO: PROTOCOLO 
	Elaborado por: Àvila Gomes Aguiar da Silva 
	Data da criação:25/10/204
	Revisado por: 
 
 Cristina 
	Data da revisão: 28//10/2025
	Aprovado por: 
 
Maria Lúcia Reis 
	Data da aprovação:29 /10/2024
	Local de guardo do documento: Faculdade Anhanguera/pop
. 
 
	Objetivo (s): 
 
Determinar colesterol total (CT) e colesterol HDL em amostras;
 
1. OBJETIVO 
Determinar colesterol total (CT) e colesterol HDL em amostras;
2. RESPONSABILIDADES 
 Profissionais laboratório Auxiliares de laboratório, Bioquímicos, biomédicos, Farmacêuticos.
3. MATERIAIS NECESSÁRIOS 
· Fotômetro capaz de medir com exatidão a absorbância em 500 nm ou filtro verde (490 a 510 nm).
· Banho-maria mantido à temperatura constante (37 ºC).
· Pipetas para medir amostras e reagentes. 
· Cronômetro.
4. PROCEDIMENTOS OPERACIONAIS
Em um tubo de centrífuga, adicionar 0,25 mL de amostra e 0,25 mL do precipitante;
(ii) agitar vigorosamente durante 30 s;
(iii) centrifugar a 3 500 rpm por 15 min, para obter um sobrenadante límpido;
(iv) pipetar o sobrenadante imediatamente após a centrifugação, cuidadosamente, para não ressuspender o precipitado.
Em tubos de ensaio, adicionar os volumes de acordo com o quadro a seguir: 
	Sistema Tubos 
	 B (brancos)
	 P (padrão) 
	 A (amostra) 
	Amostra 
	 -
	 -
	 10uL
	Padrão (20mg/dl)
	 - 
	 10 uL 
	 - 
	Reagente enzimático 
	 1,0 mL
	 1,0 ml
	 1,0 ml
Observação:Para minimizar erros nas determinações analíticas, trabalhar em duplicatas.
homogeneizar as soluções dos tubos e levar ao banho-maria a 37 °C por 10 min;
(iii) ler absorbâncias em espectrofotômetro em 500 nm ou filtro verde (490 a 540 nm) e ajustar o zero com o tubo branco. 
Cálculo:
Absorbância da amostra __________ x (colesterol-HDL em mg/dL)
 Absorbância do padrão _________ 20 mg/dL
Observação: O resultado deve ser multiplicado por 2 pois a amostra foi diluída de 1:2 com o precipitante no início da técnica.
HDL-C (mg/dL) = Absorbância da amostra 
 ———————————–— x 40
 Absorbância do padrão
HDL-C (mg/dL) = Fator x absorbância da amostra
Fator = 40
—————————-
Absorbância do padrão
 
O perfil lipídico é definido pelas determinações de CT, HDL-C, TG e, quando possível, de LDL-C após jejum de 12 a 14 h.
A metodologia para determinação do LDL-C aplica a Fórmula de Friedewald, abaixo especificada:
LDL-C = CT - (HDL-C + VLDL-C) VLDL-C = TG / 5
A fórmula é limitada pela concentração de TG; só é aplicável se a mesma for inferior a 400 mg/dL.
5. REFERÊNCIA
LABTEST Diagnóstica – Colesterol Total (COD–ANA). Cat. 60-2/100. Instruções de uso Minas Gerais: Labtest Diagnóstica; rev. nov, 1998.
LABTEST Diagnóstica – Colesterol HDL (COD–ANA). Cat. 13. Instruções de uso. Minas Gerais: Labtest Diagnóstica; rev. maio, 1999.
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