Documento microbiologia

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<p>Centro Universitário Brasileiro</p><p>Microbiologia</p><p>Profº: Barbara Chagas</p><p>Alunos: Caroline Alves Bezerra</p><p>Joice Rafaela N. De Barros</p><p>Danilo Pastor do Nascimento</p><p>Joel Azevedo M. De Azevedo</p><p>Wellington J. Alves Pacheco</p><p>Dagmar de Souza M. Neto</p><p>João Paulo F. O. de Souza</p><p>Tema : Métodos de coloração usados em bacteriologia médica .</p><p>Técnicas de Gram e de zieehl-neelsen</p><p>Método de coloração de Gram</p><p>Qual a finalidade?</p><p>A coloração de Gram é uma técnica que permite diferenciar as bactérias em Gram positivas ou Gram negativas, sendo útil para adequar o tratamento de alguns tipos de infecção. Esta técnica é normalmente feita como rotina no laboratório e faz parte do exame de bacterioscopia. Além da coloração das bactérias, a coloração de Gram também permite observar a forma da bactéria e as características da sua parede celular. No resultado da coloração de Gram, as bactérias Gram positivas são identificadas com a cor azul, enquanto as Gram negativas apresentam uma coloração rosada ou arroxeada. O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias gram-negativas não o fazem.</p><p>Etapas da coloração de gram :</p><p>1. Confeccionar o esfregaço;</p><p>2. Fixação: As bactérias são fixadas na lâmina pelo calor.</p><p>3. Corar com cristal de violeta por 60 segundos;</p><p>4. Lavar com esguicho de água destilada;</p><p>5. Cobrir com Iodo de Gram ou Lugol por 60 segundos;</p><p>6. Lavar com esguicho de água destilada;</p><p>7. Descorar com álcool a 95%, ou acetona, 10-20 segundos;</p><p>8. Lavar com esguicho de água destilada;</p><p>9. Corar com fucsina por 20 segundos</p><p>10. Lavar com água destilada, secar e observar ao microscópio.</p><p>Resultados: Gram (+) coram de roxo, gram (-) cor de rosa.</p><p>Aplicação e Beneficio :</p><p>De fato a metodologia irá ajudar na identificação de uma infecção bacteriana, determinando qual é o tipo de bactéria. Em outras palavras, a diferenciação das bactérias Gram-negativas e Gram-positivas permite ao médico determinar um tratamento eficaz ao paciente, dessa forma aplicando a terapia adequada em cada caso.</p><p>Mesmo que nem todas as bactérias possam ser diferenciadas através da coloração de Gram, com certeza a metodologia tem grande aplicação no diagnóstico clínico e pesquisa biológica.</p><p>Métodos de coloração Ziehl-Neelsen</p><p>Qual a finalidade ?</p><p>A coloração ou técnica de Ziehl-Neelsen, abreviada na literatura muitas vezes como ZN, é uma técnica de coloração de bactérias mais agressiva que a técnica de Gram, sendo usada em bactérias que não são bem coradas com esta técnica, como os bacilos da lepra e da tuberculose, as bactérias dos gêneros Mycobacterium e Nocardia, entre outros. Foi desenvolvida por Fran Ziehl e posteriormente melhorada por Friedrich Neelsen, no final do século XIX.</p><p>Etapas da coloração:</p><p>11. Confeccionar o esfregaço seguindo as técnicas atuais de biossegurança[5];Cobrir a lâmina com fucsina fenicada 0,3%(o mordente é o ácido fénico);</p><p>12. Aquecer a lâmina até à emissão de vapores (é importante não deixar ferver);</p><p>13. Aguardar 3 minutos e repetir o processo de aquecer a lâmina outras 3 vezes;</p><p>14. Lavar com água corrente;</p><p>15. Cobrir a lâmina com álcool-ácido 3% até descorar totalmente o esfregaço;</p><p>16. Lavar com água corrente;</p><p>17. Cobrir a lâmina com azul de metileno durante 1 minuto;</p><p>18. Lavar com água corrente;</p><p>19. Secar;</p><p>20. Observar em imersão.</p><p>Resultados: Algumas bactérias não se coram adequadamente pelos métodos tradicionais de coloração. Dessa forma, o método de Ziehl-Neelsen, proposto por Franz Ziehl e aprimorado por por Friedrich Neelsen ainda no século XIX, é capaz de dividir as bactérias em dois grandes grupos: as álcool-ácido-resistentes e as não álcool-ácido-resistentes.</p><p>O método de coloração de Ziehl-Neelsen é utilizado para a detecção dos bacilos álcool-ácido-resistentes (BAAR). A alta concentração de ácidos micólicos em sua parede celular, faz com que a estrutura dessas bactérias tenha propriedades hidrofóbicas, tornando-as evidentes apenas quando submetidas a técnicas de colorações especiais. Notoriamente, as microbactérias apresentam-se na forma de bacilos, sutilmente curvos ou retos, álcool-ácido-resistentes.</p><p>Aplicações e Benefícios</p><p>As técnicas de coloração ácido-resistente, desenvolvidas inicialmente por Paul Ehrlich se baseiam na presença de ácidos micólicos, como as voltadas para a identificação do Mycobacterium tuberculosis pela coloração de Ziehl Neilsen e Kinyoun.</p><p>Os esporos de Encephalitozoon cuniculi são coloridos com a coloração de Ziehl-Neelsen, os quais também apresentam afinidade com fucsina e azul de toluidina e a coloração azul de toluidina-fucsina. A coloração de Ziehl-Neelsen também encontra aplicação no diagnóstico de um fungo causador de dermatites assim como de feohifomicoses chamado Curvularia lunata.</p>