Respostas de Enzimologia

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Sobre as metodologias de purificação aplicadas para enzimas de interesse industrial, analise as afirmativas a seguir e assinale-as com V (verdadeiro) ou F (falso):</p><p>(  ) A técnica de salting in aplica uma solução com baixa concentração de sais para promover a agregação de proteínas na matriz (fase estacionária) devido a interações iônicas. Após a aplicação de um gradiente de sal, a enzima adsorvida na matriz é liberada.</p><p>(  ) A filtração em membrana é uma metodologia de concentração de biomoléculas na qual a solução é bombeada tangencialmente ao longo da superfície da membrana. Na microfiltração, na ultrafiltração e na nanofiltração, as enzimas de interesse são separadas com base no tamanho, aplicando um gradiente de pressão.</p><p>(  ) A cromatografia de exclusão molecular é aplicada para separar moléculas de acordo com o seu tamanho. Enzimas com maior massa molecular percorrem a coluna de forma mais lenta, enquanto enzimas de menor tamanho são eluídas rapidamente.</p><p>(   ) A cromatografia por afinidade permite a separação de biomoléculas de acordo com a afinidade biológica pelo ligante presente na matriz. Enzimas podem ser separadas nesse tipo de cromatografia aplicando um composto não reativo análogo ao substrato.</p><p>(  ) As cromatografias de exclusão molecular e de interação hidrofóbica são dependentes da hidrofobicidade da molécula de interesse. Ambas utilizam um gradiente de solvente orgânico ou uma solução de alta força iônica como eluente.</p><p>Assinale a alternativa que contenha a sequência correta de V e F:</p><p>Alternativas:</p><p>F – V – F – V – F.</p><p>CORRETO</p><p>F – V – F – V – V.</p><p>F – F – F – V – F.</p><p>V – V – V – F – F.</p><p>V – F – F – V – V.</p><p>Código da questão: 71669</p><p>2)</p><p>As enzimas são biocatalisadores essenciais nas indústrias alimentícias e farmacêuticas, na síntese orgânica e na recuperação do meio ambiente, por exemplo. No entanto, geralmente as propriedades enzimáticas precisam ser aprimoradas antes de sua implementação em escala industrial. Um método útil é a imobilização de enzimas em suportes.</p><p>Sobre a imobilização enzimática, assinale a alternativa correta.</p><p>Alternativas:</p><p>Enzimas imobilizadas por ligações de hidrogênio e interações hidrofóbicas estão fortemente adsorvidas no suporte, sendo caracterizadas, portanto, como uma imobilização do tipo irreversível.</p><p>Os principais componentes de um sistema enzimático imobilizado são a enzima, o substrato e o método de imobilização.</p><p>Como consequência da imobilização, as enzimas tornam-se mais susceptíveis à inibição durante as aplicações.</p><p>A imobilização por encapsulação é o método aplicável para todas as enzimas por não promover alteração na estrutura enzimática.</p><p>A imobilização é um método que torna as enzimas insolúveis, facilitando sua recuperação e possibilitando a reutilização.</p><p>CORRETO</p><p>Código da questão: 71672</p><p>3)</p><p>O ___________ é um componente fundamental na imobilização, pois suas características influenciam nas propriedades da enzima imobilizada. As resinas cromatográficas, como a DEAE-Sepharose, são exemplos de _____________ utilizados na imobilização por ______________. O alginato é um tipo de ___________ utilizado para imobilização de enzimas pelo método de aprisionamento, por exemplo.</p><p>Assinale a alternativa que completa adequadamente as lacunas:</p><p>Alternativas:</p><p>Polímero orgânico; suportes inorgânicos; ligação iônica; polímero sintético.</p><p>Suporte; suportes inorgânicos; ligação covalente; polímero natural.</p><p>Método de imobilização; polímeros naturais; adsorção física; suporte inorgânico.</p><p>Método de imobilização; polímeros sintéticos; reticulação; suporte inorgânico.</p><p>Suporte; polímeros sintéticos; ligação iônica; polímero natural.</p><p>CORRETO</p><p>Código da questão: 71673</p><p>4)</p><p>Uma pesquisadora deseja separar duas enzimas por cromatografia de troca iônica, seguida por exclusão molecular. No pH da fase móvel a ser utilizado na coluna, a enzima A possui uma carga final de –5 e massa molecular de 50 kDa, enquanto a enzima B tem carga final de 7 e massa molecular de 100 kDa.</p><p>Sobre a purificação de enzimas, analise as assertivas a seguir e identifique as corretas:</p><p>I. Aplicando uma resina de troca iônica de cargas negativas, a enzima B irá interagir fortemente, enquanto a enzima A será eluída primeiro.</p><p>II. Na cromatografia por exclusão molecular, a enzima A terá seu percurso retardado e será eluída após a enzima B.</p><p>III. A enzima B irá se ligar fortemente à matriz trocadora de ânions na cromatografia de troca iônica e percorrerá lentamente a matriz da cromatografia de exclusão molecular, quando comparada à enzima A.</p><p>IV. Na SDS-PAGE, a enzima A migrará rapidamente no gel, enquanto a enzima B migrará lentamente.</p><p>V. No cromatograma da exclusão molecular, o pico I representará a enzima A, com menor tempo de retenção, e o pico II representará a enzima B, com maior tempo de retenção na coluna.</p><p>São verdadeiras:</p><p>Alternativas:</p><p>II, III e IV, apenas</p><p>I, II e IV, apenas.</p><p>III, IV e V, apenas.</p><p>I, II e III, apenas.</p><p>INCORRETO</p><p>I, II e V, apenas.</p><p>Código da questão: 71671</p><p>5)</p><p>Os inibidores de peptidases podem ser encontrados em peptídeos presentes no veneno de espécies peçonhentas. Juliana, engenheira de biotecnologia, está trabalhando com inibição enzimática de peptidases e verificou que o peptídeo X, isolado de uma espécie de escorpião, é caracterizado por se ligar ao sítio ativo da enzima, enquanto o Y, isolado de uma serpente, atua especificamente no complexo ES. Durante os experimentos da cinética enzimática, observou mudanças nos parâmetros cinéticos de acordo com o tipo de inibidor.</p><p>Sobre os experimentos de inibição enzimática realizados por Juliana, analise as assertivas a seguir e identifique as corretas:</p><p>I. Na presença do inibidor X, mais substrato será necessário para atingir Vmáx/2.</p><p>II. No inibidor X, o Km será menor do que o Km da enzima sem a presença do inibidor.</p><p>III. Na cinética com o inibidor X, a velocidade de reação atingirá a Vmáx similar ao observado na ausência do inibidor.</p><p>IV. Aumentado a [S], acarretará menor influência dos efeitos inibitórios de Y.</p><p>V.  O gráfico dos duplos recíprocos para um inibidor X apresenta intersecção em um mesmo valor de 1/Vmáx.</p><p>São verdadeiras:</p><p>Alternativas:</p><p>I, IV e V, apenas.</p><p>INCORRETO</p><p>I, II e III, apenas.</p><p>I, III e V, apenas.</p><p>III, IV e V, apenas.</p><p>II, IV e V, apenas.</p><p>Código da questão: 71666</p><p>6)</p><p>As enzimas de origem microbiana, vegetal e animal muitas vezes requerem um tipo de dilaceramento mecânico para liberar algumas biomoléculas para o meio extracelular. As metodologias de rompimento celular devem possibilitar a manutenção da estrutura tridimensional da proteína e preservar a atividade enzimática. Sobre as técnicas para rompimento celular, assinale a alternativa correta.</p><p>Alternativas:</p><p>O rompimento não mecânico é considerado mais agressivo para as células devido às altas tensões de cisalhamento e ao aumento da temperatura.</p><p>Enzimas de origem animal e vegetal são extraídas das células após filtração convencional.</p><p>No moinho de bolas, os produtos intracelulares são liberados devido à força de cisalhamento aplicada pelas esferas contra as células.</p><p>CORRETO</p><p>A etapas de clarificação possibilitam o rompimento celular para a liberação de enzimas</p><p>microbianas.</p><p>O tratamento enzimático é uma metodologia de rompimento mecânico que promove a lise da parede celular por ação de enzimas.</p><p>Código da questão: 71667</p><p>7)</p><p>A purificação de enzimas é realizada por meio de técnicas</p><p>subsequentes de</p><p>baixa e alta resolução, como precipitação na presença de sais e cromatografia</p><p>de troca iônica. Diante do exposto, leia e associe as colunas.</p><p>Assinale a alternativa que traz a associação correta entre as duas colunas:</p><p>Alternativas:</p><p>I-A; II-C; III-D; IV-B.</p><p>I-C; II-A; III-B; IV-D.</p><p>CORRETO</p><p>I-C; II-A; III-D; IV-B.</p><p>I-B; II-A; III-D; IV-C.</p><p>I-A; II- D; III-B; IV-C.</p><p>Código da questão: 71670</p><p>8)</p><p>As enzimas são moléculas orgânicas formadas, geralmente, por resíduos de aminoácidos, mas muitas também requerem pequenos compostos adicionais para que a catálise ocorra, denominados de cofatores enzimáticos. Os cofatores são moléculas orgânicas ou inorgânicas associadas às enzimas de forma permanente ou transitória e atuam como agentes ativadores das atividades enzimáticas.</p><p>Sobre os cofatores enzimáticos, assinale a alternativa correta.</p><p>Alternativas:</p><p>Uma apoenzima que necessita de Mg2+ para ser cataliticamente ativa é denominada de</p><p>coenzima.</p><p>A holoenzima é uma enzima funcionalmente ativa.</p><p>CORRETO</p><p>Coenzima é um componente químico inorgânico essencial para a enzima exercer sua atividade catalítica.</p><p>A apoenzima é a enzima associada ao seu cofator.</p><p>A maioria das vitaminas atua como coenzimas, transferindo prótons dos substratos para outras moléculas.</p><p>Código da questão: 71662</p><p>9)</p><p>Uma empresa do ramo de biotecnologia, voltada para a produção de enzimas de interesse industrial, analisou a imobilização da enzima pectinase, aplicada na clarificação de sucos, por adsorção física, aprisionamento e ligação covalente nos suportes resíduo de girassol, quitosana e casca de ovo ativada com glutaraldeído, respectivamente. Um dos experimentos principais foi investigar a reutilização do biocatalisador por diferentes ciclos operacionais, como apresentado no Gráfico.</p><p>Gráfico – Ciclo de reutilização da enzima pectinase imobilizada nos suportes resíduo de girassol, quitosana e casca de ovo.</p><p>Sobre a estabilidade operacional, analise as assertivas a seguir e identifique as corretas:</p><p>I. A pectinase reduziu sua atividade em resíduo de girassol após ser reutilizada por 8 ciclos devido a problemas difusionais relacionados à liberação do produto.</p><p>II. No suporte casca de ovo com glutaraldeído, a enzima reteve sua atividade enzimática após 8 ciclos possivelmente porque a imobilização por ligação covalente promove uma rigidez que dificulta a mudança na conformação nativa, mantendo-se, então, estável ao longo dos ciclos de reutilização.</p><p>III. No método de aprisionamento, pode ter ocorrido perda da atividade ao longo da reutilização devido ao vazamento da pectinase pelos poros da matriz.</p><p>IV. As ligações cruzadas entre as moléculas de pectinase imobilizada em quitosana foram desfeitas ao longo dos ciclos de reutilização, o que provocou a redução da atividade após 8 ciclos.</p><p>V. Na imobilização por adsorção, a perda progressiva da atividade enzimática pode ter sido causada devido à redução das forças das interações que promoviam a imobilização da enzima no suporte.</p><p>São verdadeiras:</p><p>Alternativas:</p><p>I, IV e V, apenas.</p><p>I, II e IV, apenas.</p><p>II, III e V, apenas.</p><p>CORRETO</p><p>II, III, IV e V, apenas.</p><p>I, III, IV e V, apenas.</p><p>Código da questão: 71676</p><p>10)</p><p>Inibidores são agentes que diminuem a atividade enzimática, interagindo com os grupos específicos da enzima responsáveis pela ação catalítica ou sua regulação. As inibições afetam a cinética e os mecanismos de reação das enzimas. Os inibidores atuam de diferentes formas de acordo com a ligação estabelecida e o local específico que interage com a enzima. Diante do exposto, leia e associe as colunas.</p><p>Assinale a alternativa que traz a associação correta entre as duas colunas:</p><p>Alternativas:</p><p>I-A; II-C; III-B</p><p>I-B; II-A; III-C.</p><p>I-A; II-B; III-C.</p><p>I-C; II-A; III-B.</p><p>I-C; II- B; III-A</p><p>INCORRETO</p><p>Parte inferior do formulário</p><p>image6.png</p><p>image7.png</p><p>image8.png</p><p>image9.png</p><p>image10.png</p><p>image11.png</p><p>image12.png</p><p>image13.png</p><p>image14.png</p><p>image1.png</p><p>image2.png</p><p>image3.png</p><p>image4.png</p><p>image5.png</p>