AULA 01 BACTERIO

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<p>29/08/2023</p><p>1</p><p>BACTERIOLOGIA</p><p>CLÍNICA</p><p>Professor: Eduardo Alves</p><p>CONCEITOS HISTÓRICOS</p><p>29/08/2023</p><p>2</p><p>Introdução</p><p>Antonie Van Leeuwenhoek (1723)</p><p>Comerciante de tecidos, cientista e</p><p>construtor de microscópios holandês</p><p>Introdução</p><p>A Microbiologia como conhecemos nos dias atuais só foi</p><p>possível quando no ano de 1674 o alemão Antony Van</p><p>Leeuwenhoek criou o primeiro microscópio. Ele usou este</p><p>pequeno equipamento criado por ele para observar pequenos</p><p>seres, em amostras de solo, rio, saliva e fezes, dos quais ele</p><p>nomeou como “animálculos”.</p><p>Antonie Van Leeuwenhoek</p><p>(1723)</p><p>29/08/2023</p><p>3</p><p>INTRODUÇÃO</p><p>Leeuwenhoek, escreveu diversas cartas para a Sociedade real inglesa descrevendo os</p><p>seres que ele via através de seu pequeno microscópio. Foram essas cartas que deram</p><p>início a Microbiologia, afinal, foram elas que permitiram que a sociedade tomasse</p><p>conhecimento da existência de pequenos seres microscópicos.</p><p>INTRODUÇÃO</p><p>A descoberta de Leeuwenhoek, fez com que surgisse duas teorias controversas:</p><p>A teoria da abiogênese (geração espontânea)</p><p>Abiogênese: Bactérias se formavam</p><p>espontaneamente a partir da matéria orgânica em</p><p>decomposição ou putrefação (matéria bruta, sem</p><p>vida):</p><p>Sapos poderiam brotar dos pântanos, vermes brotavam</p><p>das frutas</p><p>Fabricar ratos por geração espontânea, que consistia</p><p>em colocar grãos de trigo em camisas sujas e esperar</p><p>alguns dias</p><p>29/08/2023</p><p>4</p><p>INTRODUÇÃO</p><p>A descoberta de Leeuwenhoek, fez com que surgisse duas teorias controversas:</p><p>A teoria da biogênese</p><p>Surgiu para contrapor a ideia de que a matéria bruta</p><p>poderia originar um novo ser. Segundo a biogênese,</p><p>todos os seres vivos são originados de outros seres</p><p>vivos preexistentes, ou seja, um rato não pode nascer a</p><p>não ser de outro rato.</p><p>Bactérias estavam sempre presentes no ar.</p><p>CONCEITOS HISTÓRICOS</p><p>A teoria da Geração Espontânea</p><p>Para tentar acabar de vez com a ideia da abiogênese, muitos pesquisadores realizaram</p><p>experiências para tentar explicar a origem da vida.</p><p>Um dos primeiros experimentos foi realizado por Francesco Redi.</p><p>Foi um biólogo italiano.</p><p>Conhecido pelo seu experimento realizado em 1668.</p><p>29/08/2023</p><p>5</p><p>CONCEITOS HISTÓRICOS</p><p>A teoria da Geração Espontânea</p><p>Colocou carne no interior de frascos cobertos com gaze e em frascos descobertos. Com o tempo,</p><p>larvas surgiram no frasco aberto, mas nada aconteceu no frasco fechado. Redi percebeu a</p><p>visitação de moscas nos frascos abertos, o que sugeria que provavelmente as larvas eram alguma</p><p>fase de vida desse animal e não que as larvas surgiam a partir da carne.</p><p>CONCEITOS HISTÓRICOS</p><p>Esse experimento foi, sem dúvidas, um grande avanço para</p><p>a aceitação da biogênese.</p><p>29/08/2023</p><p>6</p><p>CONCEITOS HISTÓRICOS</p><p>John Needan, (1745): firmou que os seres vivos surgiam por geração</p><p>espontânea graças a uma “força vital”;</p><p>Caldo nutritivo -> frascos -> ferveu 30 minutos -> vedou com rolha de cortiça</p><p>(fechava os frascos após a fervura);</p><p>Depois de alguns dias apareceram alguns microrganismos no caldo;</p><p>Needan acreditava que a fervura e a vedação da rolha eram suficientes para impedir a</p><p>entrada de microrganismos</p><p>A teoria da Geração Espontânea</p><p>Foi um naturalista inglês, extremo</p><p>defensor da Abiogênese.</p><p>CONCEITOS HISTÓRICOS</p><p>Lazaro Spallanzani queria provar que alguns microrganismos conseguiam se</p><p>movimentar pelo ar e que eles poderiam ser eliminados com altas temperaturas, mas</p><p>que não poderiam surgir espontaneamente.</p><p>Se os recipientes que não estivessem bem vedados poderiam permitir a entrada de</p><p>microrganismos novos em uma determinada cultura, gerando a falsa impressão de vida</p><p>espontânea.</p><p>O cientista italiano provou que, com os recipientes bem vedados e com a realização de</p><p>uma fervura prolongada, a vida não seria capaz de surgir espontaneamente.</p><p>Spallanzani e Needham mantiveram essa controvérsia por muitos anos. A situação só foi</p><p>esclarecida mais tarde, já com os estudos de Louis Pasteur.</p><p>A teoria da Geração Espontânea</p><p>Foi um sacerdote católico, fisiologista italiano,</p><p>estudioso das ciências naturais.</p><p>29/08/2023</p><p>7</p><p>Lazaro</p><p>Spallanzani</p><p>John Needan</p><p>CONCEITOS HISTÓRICOS</p><p>CONCEITOS HISTÓRICOS</p><p>O experimento de Pasteur foi feito a partir de um caldo nutritivo</p><p>em um frasco de vidro. Posteriormente, o gargalo foi esticado</p><p>(frasco tipo “pescoço de cisne”) e o caldo nutritivo foi fervido</p><p>para matar todos os micro-organismos.</p><p>Com o tempo, observou-se que nada surgia no interior do</p><p>frasco. Entretanto, após a quebra do gargalo, houve a</p><p>proliferação de micro-organismos. Isso sugeria que no ar</p><p>existiam micro-organismos que, em contato com o líquido,</p><p>desenvolviam-se.</p><p>A teoria da Geração Espontânea</p><p>Foi um cientista francês, cujas descobertas tiveram enorme</p><p>importância na história da química e da medicina.</p><p>29/08/2023</p><p>8</p><p>A partir desses experimentos, a teoria da abiogênese caiu em descrédito e a</p><p>biogênese foi aceita pelos cientistas.</p><p>29/08/2023</p><p>9</p><p>Microrganismos podem estar na matéria não viva;</p><p>Podem ser destruídos pelo calor;</p><p>Métodos para impedir o acesso dos microrganismos</p><p>presentes no ar aos ambientes nutritivos.</p><p>Frasco original</p><p>Instituto Pasteur na França</p><p>29/08/2023</p><p>10</p><p>HISTÓRICO DA BACTERIOLOGIA</p><p>HISTÓRICO</p><p>Robert Koch</p><p>(1876)</p><p>Médico e</p><p>cientista</p><p>Fundadores da</p><p>microbiologia</p><p>Bactérias</p><p>causam doenças</p><p>Bacilo da</p><p>tuberculose</p><p>29/08/2023</p><p>11</p><p>HISTÓRICO</p><p>Até cerca de 1880 os microrganismos eram cultivados em meios líquidos;</p><p>Robert Koch e sua equipe introduziram os meios de cultura sólidos, os quais</p><p>permitiram o estudo de espécies isoladas (culturas puras), separando-as de</p><p>espécies contaminantes;</p><p>Placas de vidro de fundo achatado (Richard Petri).</p><p>HISTÓRICO</p><p>Detectou o bacilo da tuberculose (por coloração) em lesões</p><p>tuberculares de vários órgãos de humanos e animais doentes</p><p>Cultivou o bacilo em cultura pura a</p><p>partir de soro de indivíduos doentes;</p><p>A inoculação do bacilo isolado causou</p><p>tuberculose em roedores.</p><p>29/08/2023</p><p>12</p><p>HISTÓRICO</p><p>O primeiro antibiótico (1928)</p><p>Descoberto por</p><p>acidente</p><p>Alexander</p><p>Fleming:</p><p>bacteriologista</p><p>escocês</p><p>Antes de ir de férias, se</p><p>esqueceu de colocar, como</p><p>habitualmente, as suas</p><p>placas de cultura no</p><p>frigorífico</p><p>Quando regressou ao seu laboratório</p><p>verificou que numa das placas havia um</p><p>halo transparente à volta de um pouco de</p><p>“bolor”, apercebendo-se imediatamente</p><p>que o fungo estava a produzir uma</p><p>substância bactericida (matava as</p><p>bactérias)</p><p>29/08/2023</p><p>13</p><p>É um importante antibiótico produzido</p><p>por fungos do gênero Penicillium.</p><p>Esse medicamento é utilizado para tratar</p><p>várias doenças causadas por bactérias</p><p>Mecanismo de ação dos</p><p>antibióticos</p><p>Os antibióticos atuam nas bactérias causando sua morte ou então impedindo sua multiplicação.</p><p>Para isso, eles atuam de diferentes formas nesses micro-organismos. Alguns dos principais</p><p>mecanismos de ação observados nos antibióticos são:</p><p>•Inibição da síntese de proteína;</p><p>•Alteração da parede celular bacteriana;</p><p>•Alterações na membrana plasmática;</p><p>•Inibição da síntese de RNA;</p><p>•Bloqueio da replicação e reparo do DNA.</p><p>29/08/2023</p><p>14</p><p>Antibióticos e resistência</p><p>bacteriana</p><p>A resistência bacteriana aos antibióticos é um problema de saúde grave nos dias atuais.</p><p>Esse fenômeno é responsável por um considerável aumento do número de mortes, uma vez</p><p>que se torna difícil encontrar um medicamento que seja eficiente contra bactérias resistentes.</p><p>ESTRUTURA BACTERIANA</p><p>29/08/2023</p><p>15</p><p>TIPOS DE CÉLULAS</p><p>Células procariontes</p><p>São mais primitivas. Representadas pelas bactérias e cianobactérias.</p><p>Além de membrana celular, possuem material genético disperso no citoplasma</p><p>(região chamada de nucleoide), ribossomos e plasmídeos (que são fragmentos do</p><p>DNA dispersos pelo citoplasma) e podem ter parede celular de polipeptideoglicano.</p><p>Não apresentam nem núcleo nem carioteca.</p><p>PROCARIONTE</p><p>29/08/2023</p><p>16</p><p>TIPOS DE CÉLULAS</p><p>Células</p><p>eucariontes</p><p>São células mais complexas e compartimentadas, presentes nos animais,</p><p>vegetais, fungos e protoctistas (protozoários e algas).</p><p>Além de membrana celular, possuem material genético contido</p><p>em um</p><p>núcleo (que é revestido pela carioteca), ribossomos e organelas</p><p>membranosas.</p><p>EUCARIONTE</p><p>29/08/2023</p><p>17</p><p>Representação de uma célula eucarionte do lado esquerdo e</p><p>uma célula procarionte do lado esquerdo.</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Membrana plasmática: separa o citoplasma do meio extracelular e apresenta</p><p>permeabilidade seletiva, ou seja, ela tem papel fundamental para o equilíbrio químico da</p><p>célula.</p><p>Organelas celulares:</p><p>• Núcleo: contém o DNA celular e controla as atividades da célula por meio dos genes;</p><p>• Nucléolos: localizam-se no interior do núcleo, onde há a síntese de ribossomos;</p><p>• Mitocôndrias: sua principal função é a de liberar energia gradualmente, das moléculas</p><p>de glicose e ácidos graxos;</p><p>• Vacúolos: são estruturas que armazenam substâncias diversas.</p><p>Células eucariontes</p><p>29/08/2023</p><p>18</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Citoplasma: é envolto pela membrana plasmática e é formado pela matriz,</p><p>organelas;</p><p>Citosol: contêm moléculas de água e diversos íons, aminoácidos, enzimas que</p><p>têm papel na síntese e degradação de carboidratos, ácidos graxos,</p><p>aminoácidos e outras substâncias;</p><p>Cromossomos e DNA: maior quantidade de DNA, e seus cromossomos</p><p>apresentam histonas e ficam separados do citoplasma pelo envoltório nuclear</p><p>(informações genéticas).</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Complexo de Golgi: formado por diversas vesículas achatadas e circulares e relacionado</p><p>com a síntese de carboidratos;</p><p>Retículo Endoplasmático Rugoso: síntese de proteína;</p><p>Retículo Endoplasmático Liso: síntese de lipídios;</p><p>Lisossomos: contem enzimas hidrolíticas envolvidas na digestão celular</p><p>29/08/2023</p><p>19</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Células procariontes</p><p>Cromossomos: não são separados do citoplasma por membrana. O material genético consiste em uma</p><p>molécula simples de DNA com proteínas (não-histonas).</p><p>Plasmídeos: são moléculas de DNA extra</p><p>cromossomal capazes de se reproduzir</p><p>independentemente do DNA</p><p>cromossômico. Carregam consigo</p><p>informações genéticas e até mesmo genes</p><p>responsáveis por inúmeros casos de</p><p>restrição a drogas</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Citoplasma: contém numerosos polirribossomos, que são ribossomos</p><p>ligados à moléculas de RNA mensageiro. A região onde se localiza o</p><p>material genético denomina-se nucleóide.</p><p>Ribossomo: estrutura responsável pela produção</p><p>de proteínas.</p><p>Pilus: possibilita a fixação da bactéria ao meio;</p><p>29/08/2023</p><p>20</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Flagelo: possibilita a locomoção da célula;</p><p>-Monotríqueo (único flagelo polar);</p><p>-Lofotríqueo (dois ou mais flagelos em um pólo da célula);</p><p>-Anfitríqueo (um tufo de flagelos em cada extremidade da célula);</p><p>-Peritríqueo (flagelos distribuídos por toda célula).</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Parede celular: de consistência rígida, é sintetizada no citoplasma e adere à superfície</p><p>externa da membrana celular.</p><p>Composta por uma rede macromolecular de peptideoglicano, cuja parte sacarídica é</p><p>constituída de dois açúcares, N-acetilglicosamina(NAG) e N-acetilmurâmico (NAM)</p><p>29/08/2023</p><p>21</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Cápsula: reveste a célula externamente</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>Esporos: Estruturas formadas pelas bactérias por um processo denominado esporulação, ou</p><p>esporogênese quando submetidas a condições ambientais desfavoráveis (como escassez de</p><p>nutrientes ou de água);</p><p>O cromossomo duplica-se e uma das cópias cromossômicas produzidas é isolada do</p><p>restante da célula e envolta por uma membrana plasmática. Em ambiente propício, o esporo</p><p>se reidrata, reconstituindo uma nova bactéria.</p><p>29/08/2023</p><p>22</p><p>COMPOSIÇÃO CELULAR</p><p>São muito relevantes para áreas de Medicina</p><p>e indústria alimentícia: contaminar alimentos</p><p>e provocar doenças.</p><p>Resistência a Autoclavagem;</p><p>Gênero Clostridium: tétano, gangrena gasosa</p><p>e botulismo.</p><p>MORFOLOGIA BACTERIANA</p><p>29/08/2023</p><p>23</p><p>TAMANHO CELULAR</p><p>Variam de 0,3 por 0,8 μm até 10 por 25 μm.</p><p>As espécies de maior interesse médico medem</p><p>entre 0,5 a 1,0 μm por 2 a 5 μm.</p><p>29/08/2023</p><p>24</p><p>MORFOLOGIA CELULAR</p><p>Esférica: Cocos Grupo homogêneo em relação ao</p><p>tamanho, sendo células menores (0,8 a 1,0 μm).</p><p>• Cilíndrica: Bacilos Forma de bastão, podendo ser</p><p>longos ou delgados, pequenos ou grossos, extremidade</p><p>reta, ou arredondada.</p><p>• Espiralada</p><p>=>Espirilos: possuem corpo rígido e se movem às</p><p>custas de flagelos externos.</p><p>=>Espiroquetas: são flexíveis e locomovem-se</p><p>provavelmente às custas de contrações do citoplasma</p><p>MORFOLOGIA CELULAR</p><p>Formas de transição</p><p>29/08/2023</p><p>25</p><p>MORFOLOGIA CELULAR</p><p>Arranjos COCOS</p><p>MORFOLOGIA CELULAR</p><p>Arranjos BACILOS</p><p>29/08/2023</p><p>26</p><p>MORFOLOGIA CELULAR</p><p>GRAM POSITIVAS</p><p>GRAM NEGATIVAS</p><p>BACTÉRIAS GRAM POSITIVAS</p><p>Várias camadas de peptidioglicano (cerca de 90% da parede)</p><p>Ácido teicoico (polissacarídeo ácido com resíduo de glicerol fosfato ou ribitol fosfato).</p><p>29/08/2023</p><p>27</p><p>BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS</p><p>Poucas camadas de peptidioglicano (cerca de 10%)</p><p>Membrana externa - Lipopolissacaríedo (LPS)</p><p>Proteínas: porinas, lipoproteínas</p><p>Espaço periplasmático – entre a membrana externa e membrana citoplasmática</p><p>29/08/2023</p><p>28</p><p>29/08/2023</p><p>29</p><p>CONTROLE BACTERIANO</p><p>29/08/2023</p><p>30</p><p>CONTROLE BACTERIANO</p><p>BREVE HISTÓRICO</p><p>O controle científico do crescimento microbiano começou somente há</p><p>cerca de 100 anos.</p><p>Pasteur levou os cientistas a acreditarem que microrganismos eram a</p><p>causa possível de doenças.</p><p>Na metade do século XIX iniciaram as primeiras práticas de controle</p><p>microbiano em procedimentos médicos – lavagem das mãos e técnicas</p><p>cirúrgicas assépticas.</p><p>CONTROLE BACTERIANO</p><p>BREVE HISTÓRICO</p><p>Em 1860, Joseph Lister, demonstra uma técnica para manter as incisões cirúrgicas livres de</p><p>contaminação pelos microrganismos, pois naquela época as infecções cirúrgicas eram frequentes.</p><p>Anos mais tarde, Pasteur e Charles Chamberland, criador da autoclave, em 1883,</p><p>demonstraram em que a esterilização pelo calor era de eficácia superior</p><p>29/08/2023</p><p>31</p><p>TÉCNICAS DE DESINFECÇÃO</p><p>Esterilização: É o processo que remove ou destrói todas as formas de</p><p>microrganismos incluindo endósporos.</p><p>Desinfecção: É o método capaz de eliminar muitos ou todos os</p><p>microrganismos patogênicos, porém não são capazes de eliminar</p><p>esporos.</p><p>29/08/2023</p><p>32</p><p>TÉCNICAS DE DESINFECÇÃO</p><p>Assepsia: Conjunto de técnicas aplicadas para prevenir a contaminação por microrganismos.</p><p>Ela permite manter um ser vivo ou um meio inerte, isento de bactérias.</p><p>Antissepsia: É o método no qual se previne a proliferação de microrganismos em tecidos vivos</p><p>com o uso de substância químicas, os anti-sépticos.</p><p>Inibição do crescimento bacteriano x Destruição da bactéria</p><p>Bacteriostático Bactericida</p><p>29/08/2023</p><p>33</p><p>TÉCNICAS DE DESINFECÇÃO</p><p>Observação: é importante saber também o conceito de alguns agentes:</p><p>GERMICIDA – mata todos os microrganismos</p><p>FUNGICIDA – mata os fungos</p><p>BACTERICIDA – mata as bactérias</p><p>VIRICIDA – inativa os vírus</p><p>MÉTODOS DE CONTROLE</p><p>FÍSICOS</p><p>CALOR</p><p>Causa a morte microbiana através da desnaturação das proteínas (úmido) ou oxidação (seco).</p><p>A resistência ao calor varia entre diferentes micróbios.</p><p>CALOR SECO: ESTUFA CALOR ÚMIDO: AUTOCLAVE</p><p>29/08/2023</p><p>34</p><p>MÉTODOS DE CONTROLE</p><p>FÍSICOS</p><p>PASTEURIZAÇÃO</p><p>Pasteurização lenta: em que se aplicam temperaturas</p><p>mais baixas durante maior tempo (65°C por 30</p><p>minutos).</p><p>Pasteurização rápida: quando se aplicam</p><p>temperaturas mais altas (75˚C) durante alguns</p><p>segundos - HTST (High Temperature and Short Time)</p><p>ou "alta temperatura e curto tempo".</p><p>Pasteurização muito rápida, quando a temperatura</p><p>vai de 130˚C a 150˚C, durante três a cinco segundos</p><p>- UHT (Ultra High Temperature) ou "temperatura ultra-</p><p>elevada". Esterilização de alimentos</p><p>MÉTODOS DE CONTROLE</p><p>FÍSICOS</p><p>CHAMA DIRETA OU INCINERAÇÃO</p><p>Usado em laboratório para esterilização da alça de inoculação (bico de bunsen)</p><p>Método efetivo para esterilizar e eliminar papel, copos, sacos, bandagens contaminadas, material</p><p>hospitalar</p><p>29/08/2023</p><p>35</p><p>MÉTODOS DE CONTROLE</p><p>FÍSICOS</p><p>FILTRAÇÃO</p><p>Passagem de líquido ou gás através de um material</p><p>semelhante a uma tela com poros pequenos o suficiente</p><p>para reter os microrganismos. Usada</p><p>para esterilização de</p><p>materiais sensíveis ao calor: meios de cultura, enzimas,</p><p>vacinas, antibióticos.</p><p>MÉTODOS DE CONTROLE</p><p>FÍSICOS</p><p>RADIAÇÃO</p><p>Tem vários efeitos sobre as células, dependendo de seu comprimento de onda, intensidade</p><p>e duração.</p><p>Há dois tipos de radiação:</p><p>- Ionizante: raios gama, raio X e feixes de elétrons de alta energia</p><p>- Não ionizante: luz ultravioleta (UV)</p><p>29/08/2023</p><p>36</p><p>MÉTODOS DE CONTROLE</p><p>QUÍMICOS</p><p>DESINFETANTES</p><p>FENOL E COMPOSTOS FENÓLICOS: Usada por Lister (Século XIX) cirurgia asséptica;</p><p>Atualmente pouco utilizada – irrita a pele e odor desagradável;</p><p>HEXACLOROFENO: Ação antimicrobiana – lesão nas membranas plasmáticas, inativa enzimas</p><p>(desnatura proteínas).</p><p>CLOREXIDINA: Usada no controle microbiano na pele e membranas mucosas; ` Combinada a um</p><p>detergente ou álcool, é utilizada para a escovação cirúrgica das mãos e preparo pré-operatório.</p><p>IODO: É um dos antissépticos mais antigos e mais efetivos. Tem ação contra todos os tipos de</p><p>bactérias, muitos endósporos, vários fungos e alguns vírus.</p><p>MÉTODOS DE CONTROLE</p><p>FÍSICOS</p><p>ÁLCOOIS</p><p>Matam efetivamente as bactérias e os fungos mas não os endósporos e os vírus não</p><p>envelopados;</p><p>Ação antimicrobiana: desnaturação de proteínas, e rompimento de membranas através da</p><p>dissolução de lipídios;</p><p>Álcoois mais comumente usados: ETANOL e ISOPROPANOL.</p><p>A concentração ótima recomendada é de 60 a 95% - mesma eficiência – por isso utiliza-se</p><p>álcool 70%</p><p>29/08/2023</p><p>37</p><p>0brigado!</p>