Processamento do RNA

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23/09/2021
Professor Arthur
Processamento de RNA e
controle pós transcricional
Revisando 
→ Formação de RNA - oubonucleosédeos 5- trifosfato IATP , GTP , CTPe UTP )
são unidos para a formação de RNA e quem faz é a RNA - polimerase
MRNA
*
importante agora
|
üo
RNA passa perto da cauda
>
e os fatores da cauda ( proteínas)
ÉÊ alteram o RNA se eles
interagirem .
TF #Jogaria
→ A polimerase está livre na célula e para que ela leia , os TF recrutam .
→ TF- Fatores de transcrição que ctrazem a polimerase - estimulam a transcrição .
TF - f.atores de transcrição
✓ v
Fatores específicos Fatores gerais
→ Região promotora au TATA boa = onde se liga a polimerase
Fatores gerais de transcrição .
- Fatores específicos - chamam os fatores gerais para iniciar
LTFIB recruta e TFIH ativa pela fosforilação da cauda ( andar)
proteínas ligadas
para ativa
a transcrição
Enhancer
| O
O ☐ Mediador !
-
TATA bou
começa aGatona má transcrição
fatoresfatores específicos gerais
→ Interação dos fatores específicos e fatores gerais :
- Mediador
- Dobra do DNA para interagir
→ Fatores gerais - estão sempre na células , mas só são chamados pelos específicos
→ Fatores específicos - pode ou não estar na célula . se estiver pode também
estar inativo e se ativar em determinado pH , temperatura , etc .
mais longe da região promotora
Processamento do mRNA
→ Enhancer - também conhecido como intensificadores do processo
transcriúonal
, pois ele estimula mais a transcrição .
ao
DNA de
dupla
hélice
Não precisa
amadurecer
só sai pronto .
pré - MRNA <
MRNA - formado durante o processo de transcrição e conforme ele vai
crescendo
,
ele vai também sendo alterado para ir para o citosol .
L Ele precisa sofrer uma série de alterações para se tornar maduro ( fazer tradução) .
→ Eucariontes - precisa sair do núcleo para ler , MRNA precisa ser modificado
→ Procarionte - não tem núcleo , m RNA já sai pronta
Capeamento e Poliadenilação
→ cauda da polimerase = tem uma série de
complexos proteicas associados, sendo 3 principais:
- fatores de capeamento .
- fatores de splicing
- fatores de pdiadenilaçáo .
→ Esses fatores alteram o RNA a medida
que ele vai se formando .
L fazem interações .
→ Os fatores de capeamento passam para o
5 '
RNA na extremidade 5
"
.
Obs ? O RNA é processado conforme ele é formado . ( Imagem verde errada)
1° Ocorre capeamento , quepe 5
'
, portanto é colocado na região 5 !
2° Depois pdiadenilação , na região 3
'
Capeamento
Processo de adição do quepe 5’:
→ Quando os fatores de
•
capeamento encontram
a região 5
'
, eles se
deslocam para lá .
SEREI ÷ .r nome dago.DE estrutura :
> O RNA vai ter aproximadamente 25
nucleotídeos quando o quepe 5
'
for
acrescentado
.
→ quando ocorre
a interação com
a cauda da polimerase
Metil -
tranferase
coloca
> O quepe é um nucleotídeo de
guanina modificado , ou seja , ele é
um GTP modificado .
GTPmodificado = 1- metilguanoiena
L
-
Enzimas dos fatores de capeamento :
I- Fosfatase - remove 1 fosfato do RNA formado da extremidade 5 !
I - guaniltransferase - acrescenta a molécula de GTP, de cabeça para baixo .
II - Metiltransferase - adiciona um grupo metil tal }) , ficando um GTPmodificado .
Poliadenilação
→ Exemplo capeamento :
I . Fosfatase
I
Aff I . Adiciona GTP
@ #
.
Adiciona - CH } modificou
o GTP
P P P
E ✗
1-
EI
#
×
CM 3
→ Sempre tem que ter aapeamento , em todas as moléculas de RNA .
L se não tiver o RNA será degradado .
RNA
> depois que corta-÷:-.-art
pdiadenieação sjff.uaÃo
acrescenta a cauda
poli - A .
FEITAao• ãgÉ¥á { meio" .^ te
corta o⑨ RNA
3' por
exonuclease
Cauda
PoliaA
Obs? O que sobra
depois de cortar é
→ Fatores de pdiadenilação - são proteínas da cauda da polimerase . degradado.
L Esses fatores se ligam ao sítio de pdiadenilação e caminham de encontrar o
sinal de poliadenilação , terminação CA , para cortar o RNA nesse local .
→ cauda Pdi- A - no local que foi cortado , fica um - OH
_
livre
.
Neste local então
,
é acrescentado um grupo poli
- A com mais ou menos 200 inalador denucleotídeos
de adenina .
Obs! sinal de termino do procariotas - é o próprio sítio de pdiadenitação
d.
÷::*:á
polimerase
se
solta
CA
corta
sinal de
> pdiadenila
É V | > nucleotídeo deadenina =
colocar ATP e
sítio de
pdiadenilação tirar 2 fosfatos
enzima
→ Poli - A - polimerase - enzima que coloca a cauda poli- A lo Aduanas)
L Também é obrigatório ter , se não tiver ele é degradado .
Sinal de
7 pdiadenização
A
CA - saio de pdiadenização
( clivagem
)
já
ÊÉÃAAAAÍf
-
cauda
poli A
enzima
poli- A
- polimerase
mãos
Splicing
-
sinal de Pdiadenilaaão - são regiões (AAUAA) que se ligam os fatores
de pdiadenização .
L Esses fatores andam até encontrar o sítio de pdiadenização .
→ sítio de pdiadenilação (CA) - é onde ocorre a clivagem ( corte) e lá também
acontece o acréscimo da cauda pdi - A 1200 aderimos)
enzima = Pdi- A polimerase
→ Esse processo ocorre no MRNA .
pequeno grande
→ Íntronr - regiões não codificamter
→ Éxonv - regiões codificamter
Obs I Em procarionte não tem isso
→ Temor mais éons
inovação
- forma
aeça
of corte
- sequência de início
do
úntron - cortou
- sequência final do
úntron - cortar
- onde forma
a alça juntam ou
degradas
éxons
→ Alça = junção do GU com o ponto de ramificação . (A)
L
a guanina do GU se junta com a adenina do ponto de ramificação .
faz o processo de splicing são pequenos RNAs
1
Obs ! spliaossomos
estão na cauda da
polimerase
V1 - reconhece
a
sequencia
de
ínicio
V2 - liga
ao
portãofiação
→ spliceossonos - responsável por todo o processo de splicing . Contém : pequenos
RNA nucleares ( V1
,
V2
,
V4
,
V5 e V6 ) + proteínas
→ Spliaossomor = ribonuchoproteínas = pequenos RNAN nucleares + proteínas
chegam
juntos
V6/ v5 - ficam ligados
na região de
início
V4 / V1 - saem do
m RNA
V6 interação
> com
o V2 .
> sinalizam que
houve
splicing e retirada
dos ínlronr
V6 e U2 formam
a
> estrutura em alça
-
p
clivagem > clivagem
do
(vs)
do início final do éntron µ
vivam e
já formam dar
alças porYEON
degradado
1- V1 reconhece a sequência de início e vem V2 e se liga ao ponto de ramificação .
2- Chegam V4 / V6 e V5 , quando ligam ao sítio de início e sai o v4 e V1 .
3- V6 e U2 interagem , diriam o início e formam uma alça .
4- V5 diva o final do úntron .
5- A alça de únhowr é degradada e os éons se juntam .
6- No local que os éons se juntam é colocado uma proteína EJC para
sinalizar que houve o splicing .
>
complementar
>complementar
→ Pequenos RNAS ( u) - se ligam ao RNA pois eles tem uma
sequência complementar ao local de ligação.
Auto-splicing
Splicing alternativo 
pregos ex : Mitocondrial '
EX : Planta
A clivagem é
nucleotídeo
livre feita pelas
interações dos
éxons
.
- clivagem é feita
pelas interações
entre os éons .
sem spliciossomo e sem alça sem spliciossomor
→ Auto - splicing : um mitocondriais e plantas . (cauda)
L Quem faz é o próprio RNA , já em humanos são as proteínas da polimerase .
era para estar então somente Isso leva
gg
µ
ligado o v5 para
→
cortará no → éxons junto
poder ocorrer a
pólio do clivagem
do final
Mótimo AG
ver
40
GU
, GG Af
foi
• w¥F;ÉÉ depende da célula
Esse processo de
remoção de éons
junto com ínlrons
leva a uma maiorwww.mfnas geradas.
Edição do mRNA
→ splicing alternativo - retiradas de intenso de maneiras diferentes .
L Quando tem proteína ligada ao sítio final ( AG) ele corta no próximo AG e com
isso os úxonn vão junto .
L Aumentam a variabilidade de proteínas que podem ser geradas .
Obs! Mesmo quando o wón vai junto há a formação de alça
→ se os únhonr não forem removidos o RNA vai ser degradado .
>
surgem de processo
de edição .
ao
dormir
APOB Apo
B
"
→ Mesmo o RNA estando pronto , ele ainda pode passar por edições são elas :
-
Desanimação : 1- Adenina → Iosina
2- citosina → urãiea
} enzima desaminaser
→ Apolipoprotlínasr - Apo B100 - VLDL e LDL } vem do mesmo
RNA
,
mas
→
APOBIOO - nãoeditada
são processadas de maneiras
APOB48 - qpuilomiohns . diferentes ( edição ) APOB
48 - editada
Degradação de RNA
Transporte do mRNA
função de
etonucleoese - tanto 5
'
→- 3
'
V quanto 3
'
v. 5
'
→ Degradam :
comMto |proteico - Alças ( íntrons)- errorsubstâncias
passam no L
Obs ? Tem função de etonu
-
centro para serem Chase , mas o nome dela é :
degradadas . EXOSSOMO nuclear
→ Erro - já é degradado no núcleo ( antes mesmo de ir para o
citoplasma)
apoio
o
→ RNA maduro - sai pelo poro nuclear para ser traduzido no citoplasma .
L só passa se tiver com as estruturas completas .
Estruturas essenciais:
- sinalizam que houve a colocação da cauda pdi -A ( pdiadenização )
algumas proteínas ficam grudadas ao quepe-5
'
para sinalizar
que houve o capeamento
- sinalizam que houve a retirada dos íntronsr , houve speicing ( proteínas EJC)
→ Splicing - pode acontecer depois de sintetizada ou assim que
já vai saindo já vai tirando os úntronn .
bs! No citosd troca a proteína de capeamento por um fator de
iniciaçãopara a síntese proteica .