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Genética Bacteriana Genoma: Informação genética de uma célula (cromossomos e plasmídeos) Cromossomos: Estruturas contendo o DNA que transportam fisicamente as informações hereditárias (genes) Genes: Segmentos de DNA que codificam os produtos funcionais da célula (exceto alguns vírus... RNA) Cromossomo Bacteriano • Molécula de DNA fita dupla e circular; • Disperso no citoplasma; • Haploides (único conjunto de genes); • Contém as informações essenciais para a sobrevivência celular; • O DNA da E. Coli possui aproximadamente 4,6 milhões de pares de base com 1 mm de comprimento; • O cromossomo ocupa 10% do volume celular; • O DNA é superenovelado; • Participação das seguintes enzimas no superenovelamento-Enzimas: Topoisomerase- Topoisomerases de Classe 1 e classe 2 (DNA girases) e DNA girase: superenovelamento negativo do DNA. A replicação sempre ocorre no sentido 5’ para 3’. Revisão| Terminação • Proteína tus: liga-se à terminação, bloqueando o avanço da forquilha de replicação; • Topoisomerase de classe IV parCE: promove a separação dos círculos interligados; • Taxas de mutações baixas: 10-8 a 10-11 • Mecanismos de revisão por atividade exonuclease: DNA pol I e pol III Expressão Gênica| Procariotos Transcrição: a informação genética é copiada do DNA, em uma sequência de bases de RNA (RNAm); Tradução: a célula utiliza a informação codificada do RNA para sintetizar proteínas específicas, com participação dos RNAt e RNAr; Síntese de Proteínas| Tradução • Trata-se da decodificação da linguagem de ácido nucléico e conversão para a linguagem de proteínas; • O RNAm está organizado em tríades denominados códons; • A sequência de códons em uma molécula de RNAm determina a sequência de aminoácidos que estarão nas proteínas a ser sintetizada; • Cada códon codifica um aminoácido específico. Procariotos| Controle Pré-Transicional • Mecanismos de controle genético que regulam a transcrição do RNAm e a síntese de enzimas; • Repressão: mecanismo regulador que inibe a expressão gênica; • Indução: mecanismo que ativa a transcrição de um gene; • Modelo operon, formulado na década de 1960 por Francis Jacob e Jacques Manod: Catabolismo da Lactose em E. Coli (operon Lac) Variabilidade Genética Mutação • Alteração nas sequências de bases do DNA sem aquisição de genes de outro micro- organismo; • Processo vertical| Replicação do cromossomo Recombinação • Alteração no genótipo ocorre pela aquisição do material genético de outro micro- organismo; • Processo horizontal| Transformação| Transdução| Conjugação; Causa das Mutações Espontâneas: Mudanças naturais na estrutura do DNA; Erros durante a replicação; Induzidas: Mudanças no DNA causada por substâncias, condições ambientais ou radiação; Ultra violeta, radiação gama, óxido nitroso... Recombinação Gênica • Troca de genes entre moléculas de DNA para formar uma nova combinação gênica; • Contribuiu para o aumento da diversidade genética dos micro-organismos (evolução microbiana); • Recombinação mais benéfica que mutação: Menor probabilidade de alterações negativas nos genes; permite uma característica adaptativa positiva; Conjugação • Transferência gênica com contato célula-célula; • Transferência é unidirecional (doadora | receptora); • Depende do fator F de fertilidade • Presente célula doadora F+ • Ausente célula receptora F- • Pili sexual: finas extensões ocorre a transferência de material genético Transformação • Processo que requer a captação do DNA do ambiente e a sua incorporação ao cromossomo bacteriano ou plasmídeos; • Micro-organismos ambientais lisados disponibilizam material genético ao meio ambiente; • Importante via de troca genética entre micro-organismos de diferentes espécies; • Células que captam DNA: células competentes. Transdução • Processo de transferência de material genético por meio de bacteriófagos; • Requerimentos: Fago degrade o cromossomo bacteriano; Empacotamento não específico de DNA; Genes bacterianos se recombinem. Plasmídeos| Bacterianos • Elemento genético circular além do cromossomo. • Menor que os cromossomos; • Replicam independentemente do cromossomo; • Carregam informação genética não essencial à célula; • Conferem vantagem adaptativa; • Plasmídeos de resistência: terapia antimicrobiana • Carreiam genes que exercem influência no fenótipo da célula; • Plasmídeos de resistência: ameaça à terapia antimicrobiana; DNA móvel| Elementos Transponíveis • São segmentos distintos de DNA que se movem como unidade, no interior de uma molécula de DNA; • Inseridos em cromossomos, plasmídeos ou genoma viral; • São replicados quando a molécula de DNA do hospedeiro é replicada; • Podem afetar a expressão de outros genes; • Denominados: Sequencias de Inserção (IS) e Transposons Sequências de Inserção (IS): • São elementos simples que carreiam apenas os genes envolvidos na transposição; • Possui repetições invertidas; • Único gene envolvido: transposase • Importância: mutação, inserção de plasmídeo e variação de fase de leitura. Transposons: • Estruturas maiores e mais complexas; • Gene tnp reconhece as repetições invertidas e desloca o segmento de DNA para outro sítio; • Codificam genes de resistência a drogas, sínteses de toxinas e enzimas degradativas