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1 CROMATOGRAFIA Professora Patricia Farias Estudo Dirigido I – Discussão e Resposta de Questões 1ª Questão - Num cromatograma em papel, o corante E133 (azul brilhante) desloca-se 6,0 cm da origem, enquanto a linha do solvente desloca-se 10,0 cm. Qual é o valor do Rf para esse corante? Resposta: 6,0cm/10,0cm = 0,60 2ª Questão - Num cromatograma em papel, um pigmento presente num extrato vegetal aquoso percorreu 7,5 cm e o solvente utilizado percorreu 10 cm. A) Qual é o valor do Rf para o pigmento? Resposta: 7,5cm/10,0cm = 0,75 B) A amostra (pigmento) apresenta melhor afinidade com a fase móvel ou com a fase estacionária? Resposta: A amostra apresenta maior afinidade com a fase móvel, uma vez que seu deslocamento decorrente da interação com a fase móvel foi consideravelmente elevado (75% do deslocamento da fase móvel). Valores de Rf superiores a 0,5 evidenciam maior afinidade de polaridade da amostra com a fase móvel. Valores de Rf inferiores a 0,5 indicam maior afinidade de polaridade com a fase estacionária. 3ª Questão Dois cromatogramas de uma mesma substância são obtidos utilizando-se a mesma fase móvel e o mesmo tipo de fase estacionária. O tempo de corrida (ou tempo de eluição), do primeiro cromatograma foi de 10 minutos e do segundo, 20 minutos. Os valores de Rf são diferentes? Explique sua resposta. Resposta: Não se pode comparar os valores de Rf dos experimentos, pois os mesmos UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO CENTRO DE BIOCIÊNCIAS DEPARTAMENTO DE BIOFÍSICA E RADIOBIOLOGIA 2 foram realizados com diferentes tempos de corrida. Para comparar os valores de Rf dos dois cromatogramas, todos parâmetros envolvidos na obtenção dos dois cromatogramas, teriam que ser iguais. Não apenas para experimentos/ análises em Cromatografia, mas para quaisquer experimentos/análises, para que os resultados possam ser comparados, os parâmetros envolvidos necessariamente precisam ser iguais. 4ª Questão - Considerando as seguintes amostras: a) chá preto; b) azeite de dendê sugira uma fase móvel para um experimento de cromatografia em papel para cada uma das amostras. Resposta: a) chá preto: solvente polar, como por exemplo: água ou etanol. b) azeite de dendê: solvente apolar, como por exemplo: hexano 5ª Questão – Cite ao menos duas vantagens e duas desvantagens da Cromatografia Planar. Resposta: Vantagens: A cromatografia planar envolve técnicas simples que não requerem instrumentação de alto custo e/ou complexidade, não exige treinamento técnico especializado por parte do(a) operador(a). Além disso, pode ser aplicada a testes rápidos diversos tais como: teste de gravidez, diagnóstico de Covid-19, presença de corantes alimentícios, etc. Desvantagens: ocorrência de agentes que podem induzir a erros; baixa reprodutibilidade.