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Unidade I CITOLOGIA Prof. Francisco Kuchinski Células são estruturas diminutas. Apresentam tamanho na ordem de micrômetros. O estudante da área de Ciências Biológicas deve adaptar-se à nomenclatura de dimensões celulares. Observe as representações abaixo: 1 mm = 1 cm/10 1 µm = 1 mm/1000 1 nm = 1 µm/1000 1 Å = 1 nm/10 Unidades de medidas 1 milímetro contém 1.000 micrômetros. 0,5 milímetros contêm 500 micrômetros. 1 mm = 1.000 µm e 0,5 mm = 500 µm. O diâmetro da célula sanguínea denominada de glóbulo vermelho é de aproximadamente 7 µm. Tipo de exame clínico: hemograma Com base no hemograma, há por milímetro cúbico: na mulher acima de 16 anos – 3,9 até 5,0 milhões/mm3; no homem acima de 16 anos – 4,0 até 5,5 milhões/mm3; glóbulos vermelhos – micrócitos e macrócitos. Unidades de medidas Glóbulos vermelhos / hemácias / eritrócitos, com base na microscopia eletrônica de varredura e na microscopia de luz. Unidades de medidas biolamina.blogspot.com portaldoprofessor.mec.gov.br Do autor Importância / aplicação das dimensões dos glóbulos vermelhos O Valor Corpuscular Médio – VCM no diagnóstico de anemias: O que são micrócitos e macrócitos? Resposta: hemácias com diâmetros, respectivamente, inferior e superior a 7 µm. Importância: anemias microcíticas – ferropriva e talassêmicas; anemias macrocíticas – perniciosa e megaloblástica. Unidades de medidas O espermatozoide apresenta comprimento de 65 µm. JUNQUEIRA & CARNEIRO. Biologia celular e molecular. 12ª ed., Rio de janeiro: Guanabara Koogan, 2013 Unidades de medidas No microscópio óptico composto / microscópio de luz, com aumento de 100 x (ocular de 10 x e objetiva de 10 x), o campo observado é de 1,5 mm – portanto, de 1.500 µm. Unidades de medidas www.biologiacientifique.blogs Do autor Do autor Um estudante, ao observar uma determinada célula, com aumento de 100 x no microscópio óptico composto, visualizou algumas partes fundamentais como núcleo e citoplasma. Ao passar para o aumento máximo de 1.000 x, apenas notou a presença do núcleo ocupando todo o campo. Pergunta-se: qual é o tamanho aproximado deste núcleo? a) 1.500 µm. b) 750 µm. c) 500 µm. d) 375 µm. e) 150 µm. Interatividade Um estudante, ao observar uma determinada célula, com aumento de 100 x no microscópio óptico composto, visualizou algumas partes fundamentais como núcleo e citoplasma. Ao passar para o aumento máximo de 1.000 x, apenas notou a presença do núcleo ocupando todo o campo. Pergunta-se: qual é o tamanho aproximado deste núcleo? a) 1.500 µm. b) 750 µm. c) 500 µm. d) 375 µm. e) 150 µm. Resposta I. Exame in vivo: estuda células vivas com o uso de corantes especiais (verde Janus, azul de Trypan) e com o emprego do Microscópio de Fase. II. Exame post mortem: estuda células mortas, já fixadas e conservadas com o uso de diferentes tipos de corantes e com o emprego de diversos tipos de microscópios. Nota – o uso dos termos corretos: 1. biópsia; 2. necropsia ou autópsia; 3. vivissecção. Observação: Comitê de Ética. Exames microscópicos de células e de tecidos É uma preparação post mortem. Objetivo(s) e seleção do material para técnica por H&E. Outros tipos de técnicas: citoquímicas e histoquímicas. Técnica do H&E, do Tricrômico de Masson e do T. de Mallory em relação a técnicas do PAS, de Gomori, de Feulgen. Etapas e tempo de realização das técnicas. Garantia da conservação do material é dado pelo tratamento químico ou físico do material (fixação). Técnica histológica de rotina pelo método de coloração hematoxilina e eosina (H&E) 1. Seleção do material. 2. Anestesia e obtenção do material por vivissecção. 3. Fixação do material (fragmento de órgão). 4. Desidratação do material (da peça). 5. Diafanização. 6. Impregnação. 7. Emblocamento ou inclusão. 8. Microtomia e banho-maria. 9. Desparafinação e coloração. 10. Montagem da lâmina. Etapas da técnica histológica de rotina Alguns materiais permanentes utilizados na técnica histológica de rotina – H&E Fonte: todas do autor 1. Domínio / experiência no preparo dos fixadores, corantes e outros tipos de reagentes. 2. Manipulação cuidadosa no laboratório de técnicas. 3. Uso correto de vidrarias e reagentes. 4. Equipamentos e vestuário apropriados, além de concentração no trabalho que é desenvolvido. 5. Sugestão: estagiar em laboratório de anatomia patológica. Diversos procedimentos – técnica por H&E O núcleo celular é ácido, logo, possui afinidade por corante básico, a hematoxilina; já o citoplasma é alcalino, possui afinidade pelo corante eosina. Quimicamente, os ribossomos são constituídos por ácido ribonucleico (RNA). Pergunta-se: qual das organelas citoplasmáticas é evidenciada pelo corante hematoxilina? a) Golgi. b) Mitocôndrias. c) Retículo Endoplasmático Agranular ou Liso (REAg / REL). d) Retículo Endoplasmático Granular ou Rugoso (REG / RER). e) Centríolos. Interatividade O núcleo celular é ácido, logo, possui afinidade por corante básico, a hematoxilina; já o citoplasma é alcalino, possui afinidade pelo corante eosina. Quimicamente, os ribossomos são constituídos por ácido ribonucleico (RNA). Pergunta-se: qual das organelas citoplasmáticas é evidenciada pelo corante hematoxilina? a) Golgi. b) Mitocôndrias. c) Retículo Endoplasmático Agranular ou Liso (REAg / REL). d) Retículo Endoplasmático Granular ou Rugoso (REG / RER). e) Centríolos. Resposta Pode ser realizada de diferentes maneiras, com base nos aspectos: 1. morfológicos, fisiológicos, embriológicos, genéticos, histológicos e patológicos; 2. com base no nos graus de diferenciação e maturidade – lábeis, estáveis e permanentes; 3. com base no graus de individualidade – livres, federadas, anastomosadas, sincícios e plasmódios. Classificação de células eucarióticas Lábeis: epiteliais das mucosas e da pele. Estáveis: ósseas, hepáticas, pancreáticas. Permanentes: neurônios e fibras musculares cardíacas. Livres: leucócitos e hemácias. Federadas: fibroblastos, osteócitos. Sincícios: fibras musculares estriadas esqueléticas. Tipos de células Células vegetais: de sustentação, de condução, da epiderme, do meristema e do parênquima. Células animais: epiteliais, conjuntivas, musculares e nervosas. Células somáticas: constituintes de uma parte do corpo, possuem 46 cromossomos (são diploides – 2n). Células gaméticas / germinativas: células reprodutoras, possuem 23 cromossomos (são haploides – n). Células haplóides: espermatozoide e oócito. Células diplóides: melanócito, macrófago, miócito, neurônio. Células-tronco: embrionária, do cordão umbilical, da medula óssea, entre muitas outras. Nomenclatura celular (outras denominações) Células e tecidos – microscopia óptica (de luz): lábeis e federadas Fonte: todas do autor Células e tecidos – microscopia óptica: lábeis, estáveis, permanentes, livres, federadas, anastomosadas e sincícios Fonte: todas do autor Células e tecidos – microscopia óptica: estáveis, federadas, diploides, haploides Fonte: todas do autor Qual alternativa abaixo indica corretamente e respectivamente células classificadas como: livre, haploide, permanente e estável? a) Leucócito, espermatozoide, neurônio e osteoblasto. b) Espermatozoide, leucócito, neurônio e osteoblasto. c) Neurônio, espermatozoide, osteoblasto e leucócito. d) Neurônio, espermatozoide, leucócito e osteoblasto. e) Leucócito, espermatozoide, osteoblasto e neurônio. Interatividade Qual alternativa abaixo indica corretamente e respectivamente células classificadas como: livre, haploide, permanente e estável? a) Leucócito, espermatozoide, neurônio e osteoblasto. b) Espermatozoide, leucócito, neurônio e osteoblasto. c) Neurônio, espermatozoide, osteoblasto e leucócito. d) Neurônio, espermatozoide, leucócito e osteoblasto. e) Leucócito, espermatozoide, osteoblasto e neurônio. Resposta Conceitode: protoplasma e paraplasma. O protoplasma apresenta componentes químicos: a) inorgânicos – água e saís minerais; b) *orgânicos – proteínas, carboidratos, ácidos nucleicos e lipídios. (*) principais. Célula eucariótica – principais constituintes químicos Constituída por dois gases na proporção de 2:1. Sua fórmula química é: H2O e apresenta-se nos três estados da matéria. É o constituinte mais abundanteda matéria viva e a sua quantidade no organismo vai depender de vários fatores, como: grau de evolução, idade, metabolismo celular. Constitui a fase dispersante do sistema coloidal (solvente). Catalizador das reações químicas e com função homeotérmica. É um veículo condutor de substâncias entre as células. Mantém o equilíbrio osmótico das células vegetais pelos mecanismos de plasmólise e de turgescência. Constituintes inorgânicos: água Composto químico que resulta da ação de um ácido sobre uma base (reação de salificação ou neutralização). Os sais mais frequentes são cálcio, fósforo, cloro, sódio e potássio; e os menos encontrados são de iodo, ferro, e magnésio. São funções dos sais: intervir no equilíbrio osmótico da célula, fazendo variar a sua concentração; regular o equilíbrio ácido-básico (controlar o pH / função denominada de tampão). Constituintes inorgânicos: sais minerais Constituem o substrato da matéria viva, são compostos nitrogenados, resultantes da polimerização de aminoácidos e com função mista, pois apresentam dois radicais, o amínico e o carboxila, respectivamente, -NH2 e -COOH. Há proteínas simples: por hidrólise, originam só aminoácidos. Há proteínas conjugadas: por hidrólise, originam, além dos aminoácidos, outras substâncias (grupos prostéticos) como a glicose. Proteoglicanas: são proteínas conjugadas que não formam cadeias ramificadas. Exemplo: glicosaminoglicanas com e sem o radical sulfato. Glicoproteínas: são proteínas conjugadas que formam cadeias ramificadas. Constituintes orgânicos: proteínas A reação entre álcool + ácidos graxos = lipídio + água. A reação entre álcool + lipídio = triglicerídeos. Funções: estrutura da matéria viva, como fonte energética, isolamento térmico dos animais e, ainda, reserva orgânica. Notas Ácidos graxos são derivados da série de hidrocarbonetos saturados de cadeia aberta. Triglicerídeos são éster de glicerina, no qual grupos hidroxílicos são esterificados com um ácido graxo. Ácido + álcool éster + água. Constituintes orgânicos: lipídios Apresentam quimicamente: C, H e O; função é energética. Vegetais / autótrofos: CO2 + H2O forma carboidrato + O2. Animais / heterótrofos: C6H12O6 + O2 forma CO2 + H2O + ATP. Importância biológica da glicose: respiração celular. Animais: glicose: solúvel / glicogênio / concentração osmótica. Vegetais: polimerização da glicose em amido. Isômeros da glicose: frutose e galactose (monossacarídeos). Hexoses e pentoses. Dissacarídeos: sacarose e maltose são hidrossolúveis e doces. Polissacarídeos: glicogênio, amido e celulose não são hidrossolúveis e nem doces. Constituintes orgânicos: carboidratos Nucleotídeos formam ácidos nucleicos: DNA, RNA. H3PO4 + pentose + base nitrogenada = nucleotídeo. Nucleotídeos constituem o DNA e o RNA. Pentose no DNA (desoxiribose) e no RNA (ribose). Bases nitrogenadas: purínicas = adenina (A) e guanina (G). Bases nitrogenadas: pirimidínicas = citosina (C) e timina (T). Bases nitrogenadas: DNA = A/T e G/C – RNA = A/U e G/C. U = Uracila – base pirimidínica do RNA. DNA: comanda o funcionamento celular e transmite a informação genética. RNA: constitui-se no códon/RNAm, nos ribossomos/RNAr e no RNAt. Constituintes orgânicos: ácidos nucleicos Compostos orgânicos e inorgânicos constituem a matéria viva (protoplasma). O mais abundante é a água, seguida das proteínas e dos lipídios. Cada composto possui função bem conhecida nos dias atuais. A glândula tiroide ou tireoide produz hormônios T3, T4 e a calcitonina. O T4 é denominado também de tiroxina. Qual é a natureza química do T4? a) Carboidrato. b) Lipídio. c) Glicoproteína. d) Sal mineral. e) Proteína. Interatividade Compostos orgânicos e inorgânicos constituem a matéria viva (protoplasma). O mais abundante é a água, seguida das proteínas e dos lipídios. Cada composto possui função bem conhecida nos dias atuais. A glândula tiroide ou tireoide produz hormônios T3, T4 e a calcitonina. O T4 é denominado também de tiroxina. Qual é a natureza química do T4? a) Carboidrato. b) Lipídio. c) Glicoproteína. d) Sal mineral. e) Proteína. Resposta ATÉ A PRÓXIMA!