Durante uma crise de saúde pública, como uma pandemia viral, o diagnóstico rápido e preciso de indivíduos infectados é crucial para o controle da doença. O método padrão-ouro para detectar a presença do material genético do vírus (que é de RNA nas amostras de pacientes é o RT-PCR (PCR de Transcrição Reversa), uma adaptação da técnica básica de PCR.
Qual é o princípio fundamental da técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) que a torna uma ferramenta indispensável para amplificar o DNA e detectar a presença de material genético de agentes infecciosos?
Amplificação (produção de múltiplas cópias) in vitro de uma sequência específica de DNA alvo a partir de uma quantidade mínima de molde, por meio de ciclos repetidos de desnaturação, anelamento (ligação de primers) e extensão (síntese de nova fita).
Separação eletroforética de fragmentos de DNA com base no tamanho, o que permite visualizar o genoma completo do agente infeccioso em um gel.
Hibridização de sondas de DNA a sequências-alvo específicas, utilizando a radioatividade para quantificar o número de códons presentes.
Clonagem de genes em vetores plasmídeos, permitindo que bactérias produzam a proteína viral em larga escala para uso diagnóstico.
Medição da emissão de luz fluorescente por um nucleotídeo modificado que se liga à cadeia de RNA viral, indicando a concentração do patógeno.
Ed
mês passado
O princípio fundamental da técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) que a torna indispensável para amplificar o DNA é a amplificação in vitro de uma sequência específica de DNA alvo a partir de uma quantidade mínima de molde. Isso é realizado por meio de ciclos repetidos de desnaturação (separação das fitas de DNA), anelamento (ligação de primers) e extensão (síntese de nova fita). Essa técnica permite a produção de múltiplas cópias da sequência alvo, facilitando a detecção de material genético de agentes infecciosos, como vírus.