Questões de PCR e qPCR

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QUESTÕES
1. Entre as vantagens dos métodos moleculares aplicados ao diagnóstico estão:
a) Custo
b) Sensibilidade e precisão
c) Necessidade de pessoal treinado
d) Simplicidade
e) Padronização
2. Em relação aos testes moleculares é correto afirmar que:
a) Nunca detectam DNA vacinal
b) Necessitam de infraestrutura para sua execução
c) Podem detectar apenas organismos viáveis
d) Inibidores não interferem nos resultados
e) As amostras podem ser coletadas para análise em qualquer fase da doença
3. Em relação a reação em cadeia da polimerase a fase na qual ocorre a duplicação da fita de DNA é:
a) Hibridação
b) Desanturação
c) Ligação
d) Anelamento
e) Extensão
4. Quais os cuidados necessários a coleta de sangue para análise em testes moleculares
a) EDTA pode inibir PCR
b) Apenas o soro pode ser utilizado
c) Nenhum cuidado os constituintes do sangue reservam o material
d) Heparina inibe PCR
e) DMSO inibe PCR
5. Num teste diagnóstico molecular o DNA de vários patógenos sanguíneos podem ser detectados simultaneamente em uma única reação, como por exemplo micoplasmas e os vírus da FIV e FELV. Esta técnica é chamada de:
a) PCR Nested
b) PCR simplex
c) PCR multiplex
d) PCR RFLP
e) Maldi-TOFF
6. Entre as vantagens do PCR Nested
a) maior sensibilidade que o convencional
b) menor custo que o convencional
c) detecta apenas micro-organismos vivos
d) fácil desenho
e) menos tempo necessário que a PCR convencional para obtenção dos resultados
7. Em relação a técnica de RT-PCR é correto afirmar que:
a) RNA pode ser utilizado como molde na amplificação genética
b) A DNA polimerase converte o cDNA em RNA
c) Pode ser utilizada para diagnóstico do vírus da panleucopenia felina
d) Poder ser utilizado no diagnóstico do vírus da cinomose
e) A transcriptase reversa converte cDNA em RNA
8. Permitindo o acompanhamento em tempo real bem como a quantidade de DNA presente em uma amostra o PCR quantitativo utiliza qual principio
a) Sondas fluorescentes que se ligam ao DNA amplificado
b) Taq DNA polimerase geneticamente modificada
c) Utiliza raio laser de alta potencia
d) Utiliza apenas RNA como molde
e) Utiliza nucleotídeos quimioluminescentes
9. O teste de qPCR é muito útil para monitorar e evolução de qual dos seguintes patógenos:
a) Staphylococcus spp.
b) Cryptococcus spp.
c) Vírus da FIV
d) Vírus da Panleucopenia felina
e) Infecção por Erlichia spp.
10. Entre as aplicações dos testes moleculares na medicina veterinária está o diagnóstico de que categoria de micro-organismos:
a) fastidiosos
b) vírus de DNA
c) vírus de RNA
d) bactérias gram positivas 
e) bactérias gram negativas
11. Qual a função do Cloreto de Magnésio (MgCl2)?
a) Mantém o pH ótimo da reação, garantindo que a atividade enzimática ocorra em condições ácidas
b) Favorece a hibridização do primer
c) Atua como cofator da Taq DNA Polimerase
d) Realiza a síntese da nova fita de DNA 
e) Impede a degradação do DNA 
12. Por que o DNA deve ser submetido a temperatura de 95 ºC durante os ciclos de PCR? 
a) A alta temperatura de 95ºC é necessária para adicionar íons metálicos ao DNA, que são essenciais para a amplificação
b) A temperatura de 95ºC é usada para evaporar contaminantes presentes na mistura de PCR, garantindo uma reação mais limpa
c) A alta temperatura causa a quebra das ligações de hidrogênio entre as bases complementares das duas fitas de DNA. Isso separa as fitas duplas de DNA em fitas simples, tornando-as acessíveis para os primers se ligarem
d) O DNA deve ser submetido a 95ºC para transformar a estrutura do DNA de dupla hélice para uma forma de tripla hélice, que é mais fácil de amplificar
e) O DNA é aquecido a 95ºC para ativar a fluorescência natural das moléculas de DNA, o que ajuda na detecção durante a PCR
13. Por que a reação tem que ser submetida a 72 ºC durante os ciclos de PCR?
a) Para inativar enzimas indesejadas na mistura de reação
b) Para garantir que os primers se liguem a fita de DNA molde
c) Para desnaturalizar completamente o DNA em fitas simples
d) Para que ocorra a sintetiza a nova fita de DNA complementar à fita molde
e) Para prevenir a degradação do DNA pelas enzimas presentes na mistura de reação
14. O que é cDNA?
a) cDNA é um tipo de RNA sintetizado a partir de uma molécula de DNA 
b) cDNA é uma molécula de DNA sintetizada a partir de um molde de RNA mensageiro (mRNA) por meio da enzima transcriptase reversa
c) cDNA é um ácido nucleico encontrado principalmente em bactérias
d) cDNA é uma proteína usada na síntese de DNA
e) cDNA é um tipo de ácido nucleico encontrado no núcleo das células animais
15. Qual enzima é usada para transforma RNA em DNA?
a) Taq DNA Polimerase
b) DNA Polimerase reversa 
c) RNA ligase 
d) Transcriptase reversa 
e) RNA polimerase
16. Qual a diferença da PCR, qPCR e RT-PCR?
a) PCR: É uma técnica usada para identificar elementos químicos em uma amostra. qPCR: Utiliza uma enzima chamada "Quirase" para amplificar o DNA em tempo real, permitindo a quantificação precisa do DNA alvo. A RT-PCR: É uma técnica que permite a amplificação o DNA complementar (cDNA) a partir de moléculas de RNA e clonagem direta de células humanas
b) PCR amplifica DNA in vitro, útil para detectar e quantificar segmentos específicos de DNA. Já a qPCR é uma variação da PCR que permite monitorar a amplificação de DNA em tempo real, permitindo a quantificação precisa do DNA alvo. RT-PCR amplifica o DNA complementar (cDNA) a partir de moléculas de RNA, permitindo a detecção e quantificação de RNA específico, sendo útil em estudos de expressão gênica
c) PCR é uma técnica usada para transformar proteínas em DNA. A qPCR utiliza primers que se ligam ao RNA em vez de ao DNA, Já a técnica de RT-PCR é uma técnica que amplifica DNA a partir de uma amostra de sangue
d) PCR é uma técnica usada para separar proteínas com base em sua carga elétrica. A qPCR: Detecta mutações genéticas através de um processo de coloração dos fragmentos de DNA e a RT-PCR é uma técnica usada para medir a temperatura de reações químicas em tempo real
e) PCR: É uma técnica que usa radiação ultravioleta para amplificar o DNA. A qPCR: Realiza a amplificação do DNA através de um processo de imunocoloração. RT-PCR: É uma técnica usada para detectar micro-organismos patogênicos no solo
17. O diagnóstico laboratorial de várias doenças infecciosas pode ser realizado por meio de técnicas moleculares. Para algumas doenças virais, a determinação da Carga Viral é imprescindível para o acompanhamento e tratamento do paciente. Qual técnica molecular é utilizada para a determinação da carga viral?
a) Nested PCR
b) PCR RFLP
c) Real Time PCR
d) PCR Convencional
e) PCR multiplex
18. A cinomose, uma doença de alta ocorrência em determinadas regiões. Assinale a alternativa correspondente ao método de diagnóstico molecular utilizado para essa enfermidade. 
a) RT-PCR
b) PCR em Tempo Real 
c) PCR multiplex 
d) PCR
e) PCR RFLP
19. A RT-PCR é uma técnica utilizada em biologia molecular para determinar os níveis de expressão de:
a) DNA
b) RNA
c) Proteínas
d) Vírus
e) Anticorpos
20. Para o diagnóstico molecular de doenças virais, depara-se tanto com vírus cujo material genético é constituído de DNA, quanto com vírus constituído de RNA. Para o diagnóstico de viroses causadas por vírus do tipo RNA, que tipo de método molecular deve ser utilizado?
a) RT-PCR
b) PCR em Tempo Real 
c) Nested PCR
d) PCR
e) Hibrização in situ
21. Atualmente estão disponíveis diversas metodologias para o diagnóstico de doenças infecciosas na medicina veterinária. Assinale a alternativa que corresponde a enfermidades que podem ser diagnosticadas exclusivamente pela técnica de PCR em Tempo Real.
a) Leishmaniose Visceral Canina (LVC), cinomose, erliquiose canina e felina 
b) Leptospirose, toxoplasmose, brucelose
c) Cinomose, Leishmaniose Visceral Canina (LVC),
d) Parvovirose, cinomose, tuberculose bovina
e) Raiva, brucelose, raiva