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22, Uma loja de animais mantinha para venda 4 exemplares de Ara ararauna (arara azul-e-amarela) e alegava aos fiscais que os exemplares haviam nascido em cativeiro, a partir de um casal mantido em um criatório autorizado pelo IBAMA. Contudo, os fiscais do IBAMA suspeitaram se esses exemplares teriam nascido em cativeiro ou se teriam sido capturados na natureza. Para esclarecer a questão, colheu-se uma amostra de sangue de cada um dos animais e fez-se um teste para determinação de paternidade. O DNA foi extraído das células por processos químicos, fragmentado com enzimas de restrição, colocado sobre um gel suporte e submetido à corrente elétrica. A migração diferencial dos fragmentos forma bandas (faixas) de DNA no gel, que podem ser visualizadas por tratamentos específicos. O padrão de bandas é exclusivo de cada indivíduo. A ilustração a seguir representa um gel de eletroforese e contém o resultado do teste, com base nela responda o que se pode concluir através da análise da corrida.Requer resposta. Texto Multilinha. (10 Pontos) 33, ( Imagine que a imagem abaixo representa um gel de eletroforese para teste de paternidade. Para sua realização, foi feita coleta de material biológico da mãe, criança e suposto pai, purificação e extração do DNA, seguida da reação de PCR e posteriormente a eletroforese em gel. O que deve ser feito nas amostras para que haja a formação das bandas (fragmentos de DNA) e então poder compará-las entre os envolvidos? Porque é necessária realização da eletroforese em gel para que a análise possa ser feita?Requer resposta. Texto Multilinha. (10 Pontos) ) 44, A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica rotineira de laboratório usada para fazer muitas cópias (milhões) de uma região específica do DNA. Essa região do DNA pode ser qualquer objeto de interesse do pesquisador. As cópias “in vitro” são produzidas usando elementos básicos do processo de replicação natural do DNA. Sua versatilidade permite a aplicação em diversos materiais biológicos, aliada à rapidez de análise é outro diferencial da técnica. Analise as asserções abaixo que se referem a técnica de PCR e assinale V (para verdadeiro) ou F (para falso). ( ) O termiciclador atua expondo material biológico e os reagente a temperatura de desnaturação (95oC em cada ciclo), temperatura de anelamento dos Primers (está é variável, depende do primer utilizado) e temperatura de extensão (72oC). ( ) O PCR pode ser feito in vivo, neste caso não há necessidade de usar os reagentes e de ( fazer a coleta de material biológico. ( ) O termiciclador trabalha com alteração de temperatura, expondo material biológico a temperatura e quando utilizado não há necessidade de adicionar ao tubo a enzima Taq Polimerase. ( ) No termociclador a temperatura de desnaturação é de 90oC em cada ciclo, a temperatura de anelamento dos Primers é sempre de 52 oC e temperatura de extensão, 72oC.Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) ) V-V-F-F. V-F-F-F. F- V-F-V. V-F-V-F. F-F-F-F. 55, Todos os processos de desenvolvimento embrionário, diferenciação celular e controle das atividades metabólicas das células são controlados pelo DNA. A informação de “como fazer” um ser vivo está contida nele. Desde 1869, com a descoberta do DNA por Friedrich Meischer, passando pela publicação de James Watson e Francis Crick de 1953 que descreve o modelo em dupla hélice, utilizado até os dias atuais em que já se alcançou o ápice da biotecnologia, sente-se a necessidade de conhecer essa molécula tão relevante. Essa necessidade levou à busca por técnicas que possibilitassem a leitura exata da sequência que determina as características dos seres vivos. Então surgiu o sequenciamento de DNA, que é basicamente um conjunto de complexos processos químicos que tem por finalidade determinar a ordem em que as bases nitrogenadas, Adenina (A), Citosina (C), Timina (T) e Guanina (G), se dispõem no material genético dos organismos. Analise as afirmativas abaixo e assinale a que NÃO DESCREVE a informações verdadeiras sobre o sequenciamento de DNA:Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) Os desoxinucleotídeos e didesoxinucleotídeos utilizados no sequenciamento são moléculas idênticas exceto o fato de os didesoxinucleotídeos utilizados no sequenciamento automatizado serem moléculas com um marcador capaz de ser lido no sequenciador automático. No sequenciamento de DNA quando um didesoxinucleotídeo se encaixa na fita complementar a Taq Polimerase não completa a extensão da fita, formando assim um fragmento de DNA finalizado na posição onde o didesoxinucleotídeo foi encaixado. Não é possível realizar o sequenciamento de DNA de Sanger sem os didesoxinucleotídeos. Um didesoxinucleotídeo possui uma alteração no seu grupo hidroxila do carbono 3 da pentose, isso é o que o diferencia de um desoxinucleotídeo. No sequenciamento convencional de Sanger, após o sequenciamento é necessário fazer uma eletroforese em gel para analisar a posição dos nucleotídeos e sequenciá-los manualmente. 66, O termo eletroforese descreve a migração de uma partícula carregada sob influência de um campo elétrico. Várias biomoléculas, como aminoácidos, peptídeos, proteínas, nucleotídeos, e ácidos nucleicos, possuem grupos funcionais ionizáveis e, portanto, adquirem carga positiva ou negativa em um determinado valor de pH. Assim, quando submetidos a um campo elétrico, essas partículas carregadas irão migrar para o cátodo ou ânodo, dependendo de sua carga líquida. O equipamento necessário para a eletroforese consiste basicamente de dois itens: uma fonte de tensão e uma unidade de eletroforese. As unidades de eletroforese estão disponíveis em duas formas, as quais permitem realizar migração na vertical ou na horizontal, cada uma com sua indicação. Analise com atenção as afirmativas abaixo e assinale a alternativa correta: I. Na eletroforese, os fragmentos migram de um polo a outro mesmo a cuba não estando ligada a um campo elétrico. II. Através da eletroforese é possível analisar o perfil de bandas entre indivíduos, sendo útil nos testes de paternidade e por exemplo. III. A taxa de migração das proteínas pode ser afetada pelo pH, força iônica e composição do sistema tampão usado.Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) II e III apenas. II apenas. III apenas. ( 77, No dia 28 de fevereiro de 2020, uma equipe de pesquisadores brasileiros de maioria feminina anunciou ter completado o sequenciamento do genoma do novo coronavírus, responsável pela pandemia do Covid-19. O grupo, coordenado pela médica Ester Sabino, diretora do Instituto de Medicina Tropical da USP, revelou o feito apenas 48 horas depois da detecção do primeiro caso da doença no Brasil. Analise as afirmativas abaixo e assinale V para a verdadeiro e F para falso: ( ) O sequenciamento genético trata-se de uma técnica que permite a identificação da sequência de nucleotídeos no fragmento estudado, sendo muito )I e II apenas. I e III apenas. ( importante por exemplo, no conhecimento do genoma de microrganismos e estudar seu comportamento, investigar mutações no genoma de microrganismos e na investigação de mutações gênicas em seres humanos. ( ) O sequenciamento genético proporciona conhecimento sobre o genoma de interesse porém ainda é um teste pouco realizado no mundo por sua prática não trazer informações relevantes. ( ) Não é possível fazer sequenciamento em amostras de pacientes com doenças hereditárias em que o DNA deve ser analisado.Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) ) V-F-F V-F-V F-F-F V-V-F V-V-V 88, A reação de PCR tem por objetivo multiplicar um trecho específico do DNA utilizando desoxinucleotídeos até um ponto em que sua concentração em dada solução seja tão alta que possa ser facilmente detectável por métodos simples e clássicos de separação e identificação de substâncias. KaryMullis na verdade propôs uma técnica que consegue resolver um grande problema da análise de ácidos nucléicos, sua baixa quantidade na maioria dos tecidos vivos. A multiplicação destes trechos específicos se dá alternando-se a temperatura de ensaio mimetizando o processo de duplicação que ocorre in vivo. Analise as afirmativas abaixo que descrevem sobre a reação de PCR Convencional e da Reação de PCR em Tempo Real. I) A reação de PCR convencional oferece um resultado quantitativo, ou seja, através deste método é possível avaliar a quantidade de carga viral na amostra investigada por exemplo. II) A reação de PCR em tempo real proporciona análise de dados quantitativos, se tornando assim uma ferramenta extremamente útil na análise das quantidades do DNA alvo investigado na reação. III) Na PCR convencional é necessário processar a amostra após a reação, normalmente realizando uma eletroforese em gel, assim é possível fazer a análise qualitativa dos resultados. IV) Na reação de PCR em tempo real dos dados são expressos de modo qualitativo, porém não é possível analisar a quantidade numérica de DNA alvo investigado na amostra analisada.Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) I apenas. II e III apenas. III apenas. II apenas. I e III apenas. 99, A PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) nos últimos anos, tem sido amplamente aplicada em centenas de procedimentos laboratoriais e considerada como o método de escolha no diagnóstico e caracterização molecular de diversos agentes bacterianos. A principal vantagem desta metodologia em relação à cultura é a redução do tempo de obtenção de resultados e a detecção do microrganismo sem necessidade de um cultivo prévio. Além disso, a PCR apresenta maior sensibilidade e especificidade que a cultura, representando um método laboratorial rápido e seguro. As cópias in vitro são produzidas usando elementos básicos do processo de replicação natural do DNA. Sua versatilidade permite a aplicação em diversos materiais biológicos, aliada à rapidez de análise que é outro diferencial da técnica. Assinale a alternativa correta.Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) A reação de PCR permite pesquisa e identificação de infecções mais precocemente mesmo que a carga viral esteja baixa, pois consiste em fazer cópias do DNA alvo proporcionando maior chance de detecção. Não é indicada em casos de suspeita de doenças virais. Testes de PCR Tempo Real são realizados somente para diagnóstico de mutações gênicas. Possui baixa sensibilidade, não indicado para diagnóstico de doenças virais por exemplo. A técnica de PCR é um método de amplificação (de criação de múltiplas cópias) de DNA que necessita ocorrer dentro de um organismo vivo. 1010, Nos seres humanos, há cerca de 3 bilhões de pares de bases de DNA no genoma, os quais devem ser copiados com precisão quando qualquer uma de seus trilhões de células se divide. A replicação do DNA é um processo semiconservativo, o que significa que cada fita na dupla hélice atua como modelo para a síntese de uma nova fita complementar. Esse processo ocorre através da atuação de diversas enzimas durante a replicação do DNA e da divisão da célula. Analise a frase abaixo e assinale a alternativa que corresponde ao preenchimento correto das lacunas ( abaixo. Para que a duplicação do DNA ocorra, é necessário _a dupla fita de DNA separando-as, encaixar um na fita complementar para que a _possa encaixar o nucleotídeos fazendo a extensão da nova fita.Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) ) Desnaturar, primer de RNA e DNA polimerase. Desnaturar, primer de DNA, Taq Polimerase. ( 1111, A Reação da Polimerase em Cadeia (PCR) mudou o curso da ciência e, hoje, esta técnica é tão importante que é difícil pensar em Biologia Molecular sem ela. Seu conceito básico, de amplificação de sequências específicas dos ácidos nucléicos, tem hoje aplicações em diversos campos na odontologia, tal como, ciência forense, histopatologia, diagnóstico microbiológico, entre outras. O objetivo da PCR é fabricar quantidade suficiente da região de interesse do DNA, de modo que essa possa ser analisada e utilizada de alguma outra maneira. Por exemplo, DNA amplificado por PCR pode ser enviado para sequenciamento, visualizado por eletroforese em gel, ou clonado em plasmídeo para futuros experimentos. Para realizar uma reação de PCR são necessários todos os componentes, EXCETO:Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) )Renaturar - primer de RNA - DNA polimerase. Desnaturar - primer de RNA, Taq Polimerase. Desnaturar - primer de DNA, DNA Polimerase. Primer de DNA. Nucleotídeos (DNTP’s). Taq polimerase. Primers de RNA. DNA extraído do material biológico a ser analisado. 1212, Gene é uma unidade fundamental, física e funcional da hereditariedade, constituída pelo segmento de uma cadeia de nucleotídeos responsável por determinar a síntese de uma proteína. Os genes presentes em eucariontes possuem uma sequência codificadora, regiões íntrons e sequências regulatórias. Analise atenciosamente as afirmativas abaixo e assinale a alternativa correta. I. As regiões éxons dos genes humanos são responsáveis por conter a sequência correta dos nucleotídeos para a produção de uma proteína. II. Os seres procariontes não possuem regiões ( éxons por não sofrerem mutações em seu genoma apesar do seu genoma ser maior do que dos humanos. III. O splicing de RNA consiste na remoção das regiões introns e ocorre ainda no núcleo das células. IV. Mutações em regiões íntrons alteram toda sequência de nucleotídeos para a produção de uma proteína, podendo culminar no desenvolvimento de uma célula neoplásica.Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) ) I e III apenas. I e IV. I apenas. III apenas. II e III apenas. 1313, O código genético das células individuais é responsável pelas características distintas observadas em todas as formas de vida. A informação genética nas células está contida nos ácidos nucleicos, DNA ou RNA. O ácido desoxirribonucleico (DNA) carrega o código genético da célula, enquanto o ácido ribonucleico (RNA) é uma molécula intermediaria que converte esse código em sequências definidas de aminoácidos em proteínas. O isolamento do DNA ou RNA é um processo de extração desse material que pode ser realizado em qualquer tipo de organismo e através de diferentes tipos de amostra. Assinale a alternativa correta:Requer resposta. Opção única. (5 Pontos) A obtenção de ácidos nucleicos (extração de DNA) deve ser feita para retirar da amostra elementos que não são de interesse na análise/teste que será feita e concentrar apenas os ácidos nucleicos que são o alvo da pesquisa. A extração de DNA é feita com o intuito de manter todos os elementos da amostra intactos. Independente da amostra e se a análise será feita em DNA ou de RNA, o protocolo de extração é sempre o mesmo. A obtenção de ácidos nucleicos é usada somente quando o ácido nucleico que será estudado é DNA. Não há comprovação de que os protocolos de obtenção de ácidos nucleicos são efetivos. Enviar