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BACILOS GRAM POSITIVO Isabela Peixoto Doutoranda-Biotecnologia- UFBA Msc. Biotecnologia-UFBA Biomédica-EBMSP BACILOS GRAM + Existem quatro gêneros de bacilos gram-positivos de importância médica: Bacillus, Clostridium, Corynebacterium e Listeria. Bacillus e Clostridium formam esporos, ao contrário de corynebacterium e Listeria. Os membros do gênero Bacillus são aeróbios, enquanto aqueles do gênero Clostridium são anaeróbios. Esses bacilos gram-positivos também podem ser diferenciados com base em seu aspecto, quando corados pela coloração de Gram: As espécies de Bacillus e Clostridium são mais longas e coram-se mais intensamente que as espécies de Corynebacterium e Listeria. As espécies de Corynebacterium exibem morfologia similar a uma clava, isto é, são mais delgadas em uma extremidade do que na outra. As espécies de Corynebacterium e Listeria exibem caracteristicamente morfologia bacilar em forma de V ou L. BACILOS GRAM + BACILOS GRAM + BACILOS GRAM+ FORMADORES DE ESPOROS BACILOS GRAM+ ÑÃO FORMADORES DE ESPOROS Bacillus Clostridium Corynebacterium diphtheriae Listeria monocytogenes BACILLUS Existem duas espécies de Bacillus de importância médica: Bacillus anthracis e Bacillus cereus. Catalase +; aeróbicos facultativos; formam esporos em condições de aeróbicas. B. anthracis B. anthracis causa antraz, que é comum em animais, mas raro em humanos. A doença em humanos exibe três formas principais: cutânea, pulmonar (inalação) e gastrintestinal. B. anthracis é um bacilo gram-positivo grande, com extremidades retas, comumente observado em cadeias Possuem cápsula antifagocitária é composta por d-glutamato. É imóvel, enquanto outros membros do gênero são móveis. A toxina do antraz é codificada em um plasmídeo, enquanto a cápsula de poliglutamato é codificada em um plasmídeo distinto. Os esporos do organismo persistem por anos no solo. B. anthracis Os humanos são mais frequentemente infectados por via cutânea, pulmonar ou gastrointestinal. A patogênese baseia-se principalmente na produção de duas exotoxinas: fator de edema: provoca aumento na concentração intracelular de AMP cíclico. Isso causa extravasamento de fluido a partir da célula para o espaço extracelular, manifestando-se como edema. fator letal: clivagem da fosfoquinase que controla o ciclo celular, inibe o crescimento celular B. anthracis A típica lesão do antraz cutâneo é uma úlcera indolor com uma escara negra (crosta, casca). O edema local é acentuado. A lesão é denominada pústula maligna. O antraz pulmonar também conhecido como “doença dos selecionadores de lã”, inicia-se com sintomas inespecíficos. Esse quadro progride rapidamente para mediastinite hemorrágica, efusões pleurais sanguinolentas, choque séptico e óbito B. anthracis Os sintomas do antraz gastrintestinal incluem vômito, dor abdominal e diarreia sanguinolenta. A mediastinite hemorrágica e a meningite hemorrágica são complicações severas de risco à vida. B. anthracis Diagnóstico: Gram: grandes bacilos gram-positivos em cadeias; Os esporos usualmente não são observados em esfregaços de exsudato; Colônias não hemolíticas são formadas em ágar sangue, com textura viscosa. B. anthracis B. cereus B. cereus causa intoxicação alimentar, Os esporos presentes em grãos, como arroz, resistem à ação do vapor e da fritura rápida. Os esporos germinam quando o arroz é mantido aquecido por muitas horas (p. ex., arroz frito reaquecido). A porta de entrada é o trato gastrintestinal. B. cereus produz duas enterotoxinas; Existem duas síndromes: (1) uma exibe curto período de incubação (4 horas) e consiste principalmente em náusea e vômitos, semelhante à intoxicação alimentar estafilocóccica; (2) a outra exibe período de incubação longo (18 horas) e caracteriza-se por diarreia aquosa não sanguinolenta, similar à gastrenterite por clostrídios. B. cereus Diagnostico laboratorial: Geralmente não é realizado. Tratamento: Limita-se ao tratamento sintomático. Cultura: colônias acinzentadas, opacas, bordas irregulares e beta hemolíticas, móvel. B. cereus Clostridium Existem quatro espécies de importância médica: Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Clostridium perfringens (que causa gangrena gasosa ou intoxicação alimentar) e Clostridium difficile. Todos os clostrídios são bacilos gram-positivos, anaeróbios e formadores de esporos C. tetani Os esporos são amplamente distribuídos no solo, e a porta de entrada geralmente é um sítio de ferimento, por exemplo, o local onde um prego penetra no pé. O tétano neonatal, quando o organismo penetra por um ferimento infectado no umbigo ou associado à circuncisão. C. tetani A toxina tetânica (tetanospasmina) é uma exotoxina produzida por células vegetativas no sítio do ferimento. Essa toxina polipeptídica é transportada intra-axonalmente ao sistema nervoso central, onde se liga a receptores de gangliosídeos, bloqueando a liberação de mediadores inibitórios (p. ex., glicina) nas sinapses espinais. O tétano caracteriza-se por intensos espasmos musculares: Trismo : ecorrente da contração rígida dos músculos da mandíbula, impedindo a abertura da boca, uma expressão facial característica, conhecida como riso sardônico; Opistótono: arqueamento pronunciado das costas decorrente do espasmo dos fortes músculos extensores dorsais. C. tetani Não há diagnóstico microbiológico nem sorológico. Os organismos raramente são isolados a partir do sítio do ferimento. C. tetani produz um esporo terminal, isto é, um esporo na extremidade do bacilo. Isso confere ao organismo o aspecto característico de uma “raquete de tênis”. Vacinação obrigatória, vacina de toxoide. C. tetani C. botulinum Os esporos, amplamente distribuídos no solo, contaminam vegetais, carnes e mel. A toxina é relativamente termolábil, sendo inativada pela fervura do alimento por vários minutos. Contato pelo ferimento ou alimento. Ação da toxina: bloqueia a liberação de acetilcolina. C. perfringens C. perfringens causa duas doenças distintas, gangrena gasosa e intoxicação alimentar, dependendo da via de entrada no corpo: Gangrena gasosa ou fascite necrotizante: Os esporos estão localizados no solo; as células vegetativas são membros da microbiota normal do cólon e da vagina. Está associada a ferimentos de guerra, acidentes automobilísticos e de motocicleta e abortos sépticos A toxina alfa (lectinase), que danifica as membranas celulares, incluindo aquelas de eritrócitos, o que resulta em hemólise. Enzimas degradativas produzem gás nos tecidos. Esfregaços de amostras de tecido e exsudato exibem grandes bacilos gram-positivos. As colônias de C. perfringens exibem uma zona dupla de hemólise no ágar sangue. C. perfringens Causa colite pseudomembranosa (placas amarelo-esbranquiçadas) na mucosa do cólon associada a antibiótico, é a causa mais comum de diarreia nosocomial. Os antibióticos suprimem os membros da microbiota normal sensíveis ao fármaco, permitindo que C. difficile se multiplique e produza as exotoxinas A e B. Diagnóstico: detecção de toxinas por testes imunológicos. C. difficile Corynebacterium diphtheriae C. diphtheriae causa difteria. As corinebactérias são bacilos gram-positivos que exibem forma de clava. Organismos toxigênicos como não toxigênicos são encontrados no trato respiratório superior, sendo transmitidos por gotículas disseminadas pelo ar. A toxina diftérica inibe a síntese proteica pela ADP-ribosilação do fator de elongação 2 (EF-2), afeta todas as células eucarióticas, independentemente do tipo tissular, mas não tem efeito sobre o fator análogo em células procarióticas. A resposta do hospedeiro a C. diphtheriae consiste em Inflamação local na garganta, com um exsudato fibrinoso, que forma a pseudomembrana rígida, aderente e acinzentada, característica da doença; Corynebacterium diphtheriae Os outros aspectos são inespecíficos: febre,faringite e adenopatia cervical. Há três complicações marcantes: (1) Extensão da membrana até a laringe e traqueia, causando obstrução da via aérea; (2) Miocardite acompanhada de arritmia e colapso circulatório; (3) Fraqueza ou paralisia, especialmente dos nervos cranianos. A paralisia dos músculos do palato mole e da faringe pode levar à regurgitação de fluidos pelo nariz. Neurite periférica afetando os músculos das extremidades tambémocorre. Corynebacterium diphtheriae Diagnóstico: Cultivo em ágar sangue; Cultivo em meio placa de telurito: contém um sal de telúrio, o qual é reduzido a telúrio elementar no interior do organismo apresentando a coloração negra-acinzentada do telúrio na colônia, e corresponde a um critério indicador de diagnóstico Corynebacterium diphtheriae O tratamento de escolha é a antitoxina, anticorpo que se liga e neutraliza a toxina diftérica. O tratamento com penicilina G ou uma eritromicina é também recomendado Corynebacterium diphtheriae Listeria monocytogenes Causa meningite e sépsis em recém-nascidos, e m grávidas e em adultos imunossuprimidos. Bacilo gram-positivo, organizado em forma de V ou L; O organismo exibe um movimento incomum em cambalhota que o diferencia das corinebactérias, as quais são imóveis. Transmitido aos humanos principalmente pela ingestão de produtos lácteos não pasteurizados, carnes malcozidas e vegetais crus. As infecções por Listeria ocorrem em duas situações clínicas: no feto ou recém-nascido como resultado da transmissão transplacentária ou durante o parto, em mulheres grávidas e adultos imunossuprimidos, especialmente pacientes submetidos a transplante renal. Listeria monocytogenes Ao penetrar na célula, o organismo produz listeriolisina, permitindo seu escape do fagossomo para o citoplasma, e ´possui crescimento intracelular. A infecção durante a gravidez pode causar aborto, parto prematuro sépsis durante o período periparto. Os recém-nascidos e imunossuprimidos podem apresentar meningite aguda. A gastrenterite causada por L. monocytogenes caracteriza- se por diarreia aquosa, febre, cefaleia, mialgia e cólicas abdominais, porém pouco vômito. Listeria monocytogenes Diagnóstico: As colônias em uma placa de ágar sangue produzem uma zona estreita de beta-hemólise, similar à hemólise de alguns estreptococos. Colônias pequenas e cinzas. Listeria monocytogenes Questão norteadora Compare as características de infecção que causa e método diagnóstico de Listeria monocytogenes e Corynebacterium diphtheriae. Compare as características de infecção que causa e método diagnóstico das cepas de Bacillus de importância médica. Compare as características de infecção que causa e método diagnóstico das cepas de Clostridium de importância médica.