bact clínica

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BACTERIOLOGIA CLÍNICA
PROF. RODRIGO LIRA
Biologia bacteriana
Células bacterianas
GRAM POSITIVAS GRAM NEGATIVAS
3
Morfologia e Arranjo
4
Estruturas bacterianas
Formada por polissacarídeos
Proteção contra sistema
imune do hospedeiro
Adesão a superfícies
bióticas e abióticas
Dispostos no citoplasma
sintetizar proteínas
Dispostos no citoplasma
Carrega toda informação
somática da bactéria
Desorganizado (sem cromatina)
Material genético adquirido
Geralmente detentores de
mecanismos de resistência
Locomoção
5
Mecanismos de resistência
Genes adquiridos 
Bombas de efluxo
Expelem a molécula para fora da célula
Enzimas
Degradar a molécula
Alterar a molécula
Mudança conformacional
Alterar o alvo do antibiótico
Inibição da absorção de medicamentos
Proteína na membrana / parede modificada
aumentando a seletividade
6
Aquisição de resistência
Conjugação
Ligação entre duas células =
uma doa o gene de
resistência a outra
Transformação
A célula engloba material
genético livre oriundo (ou
não) de outra célula morta
Transdução
Por um erro no ciclo viral, a
bactéria introduz seu
próprio material genético
nos capsídeos virais durante
a produção e, após a lise, os
novos bacteriófagos
“infectam” uma nova célula
com genes da anterior. 
7
BACTÉRIAS CLINICAMENTE RELEVANTES
AGLOMERADO/
“CACHOS”
Staphylococcus spp.
S. aureus
S. epidermidis
S. saprophyticus
CADEIA
Streptococcus spp.
S. pneumoniae
S. viridans
S. pyogenes
S. agalactiae
Enterococcus spp.
E. faecalis
FORMADORA DE
ESPOROS
Bacillus spp.
B. anthracis
B. cereus
Clostridium spp.
C. perfringens
C. tetani
C. difficile
C. botulinum
NÃO - FORMADORA DE
ESPOROS
Corynebacterium diphtheriae
Listeria monocytogenes
Lactobacillus
DIPLOCOCO
Neisseria spp.
N. gonorohae
N. meningiditis
Moraxella catarrhalis
COCOBACILO
Brucella spp.
B. aborius
B. melitensis
-Haemophilous influenzae
-Borrdetella pertussis
-Pasteurella multocida
FERMETADORAS
DE LACTOSE
-Escherichia coli
-Klebsiella pneumoniae
-Serratia spp.
-Enterobacter spp.
-Citrobacter spp.
NÃO FERMETADORAS
DE LACTOSE
-Proteus sp..
-Salmonella spp.
-Shigella spp.
-Acinetobacter baumannii
-Pseudomonas aeruginosa
-Vibrio cholera
OUTRAS
-Helicobacter pylori
-Campylobacter jejuni
ATÍPICAS
-Chlamydia trachomatis
-Treponema pallidum
-Mycoplasma spp.
-Ureaplasma spp.
ÁLCOOL-ÁCIDO
RESISTENTES
Nocardia
Mycobacterium spp.
M. tuberculosis
M. leprae
GRAM POSITIVO GRAM NEGATIVO
COCOS BACILOS COCOS BACILOS OUTRAS
Por: Rodrigo Lira
8
Técnicas microbiológicas 
Coloração de Gram
10
Coloração de Ziehl - Neelsen
11
Técnicas de semeadura
Função
Fácil transporte em tubo
Bactérias com necessidade de oxigênio
(aeróbias)
Objetivo
Obter pequena massa de microrganismo
Armazenar culturas puras
Tubo fechado tem maior preservação
12
Técnicas de semeadura
Objetivo
Obter pequena massa de microrganismo
Avaliar motilidade 
Observar metabolismo
13
Técnicas de semeadura
Objetivo
Avaliar motilidade 
Observar metabolismo, principalmente de
amostras anaeróbicas
14
Técnicas de semeadura
Objetivo
Obter colônias isoladas
Observar propriedades metabólicas
Mudanças da cor do meio ou colônia
Pigmentos
Hemólise, hidrólise
15
Técnicas de semeadura
Objetivo
Obter crescimento por toda extensão do
meio de cultivo
Formando um “tapete”
Utilizado principalmente nos testes de
suscetibilidade antimicrobiana
Disco - difusão (Kirby - Bauer)
16
Meios de cultivo
Seletivo Diferencial
Possui substâncias
inibidores de tipos
celulares (G+ / G-)
Corantes
Sais biliares
Soluções salinas
Possui substâncias que
auxiliam na identificação
no gênero/ espécie
bacteriana
Corantes
Indicadores de pH
X
18
Ágar nutriente
Não seletivo e Não diferencial
Meio nutritivo para crescimento
de múltiplos microrganismos não
fastidiosos
Composto por:
Ágar: Um polissacarídeo extraído de algas
marinhas, que atua como agente solidificante.
Peptonas: Fontes de aminoácidos e peptídeos
essenciais para o crescimento celular.
Extrato de carne: Fornece vitaminas e minerais
necessários para o desenvolvimento dos
microrganismos.
Cloreto de sódio: Ajuda a manter a
osmolaridade do meio
Também encontrado em
forma líquida
19
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Ágar Mueller - Hinton
Preferencialmente utilizado em antibiogramas
Também encontrado em líquido para
determinar a Concentração Inibitória Mínima
(CIM / MIC)
Composto por:
O ácido hidrolisado de caseína e extrato de
carne fornecem aminoácidos, nitrogênio,
minerais, vitaminas, carbono e outros
nutrientes
O amido atua como substância protetora
contra moléculas tóxicas que podem estar
presentes no meio. A hidrólise do amido
durante a autoclavagem fornece uma pequena
quantidade de glicose, a qual é uma fonte de
energia
E o ágar é o agente de solidificação
Não seletivo e Não diferencial
20
Ágar Sangue
Não seletivo e Diferencial
Composição:
Ágar: Serve como base sólida para o crescimento de
microrganismos.
Sangue: Geralmente de carneiro ou cavalo, que fornece
nutrientes essenciais, como hemoglobina e fatores de
crescimento, cruciais para o desenvolvimento de
patógenos. 
Peptonas e Extrato de Levedura: Fontes adicionais de
nitrogênio e vitaminas que promovem o crescimento
microbiano.
Propriedades:
Identificação de Patógenos: Permite a
diferenciação de bactérias com base em suas
propriedades hemolíticas, ajudando na
identificação de organismos patogênicos, como os
gêneros Streptococcus e Staphylococcus. 
Observação de Hemólise: A presença de
hemólise pode indicar a produção de enzimas
hemolíticas por certas bactérias, permitindo a
classificação em alfa-hemolíticas, beta-hemolíticas
ou gama-hemolíticas
Versatilidade: O meio pode ser modificado para
atender a diferentes necessidades, como a adição
de antibióticos para testar a resistência bacteriana
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Ágar CLED
Cystine - Lactose - Electrolyte Deficient
Não - seletivo e Diferencial
Características:
Utilizado para amostras do trato genitourinário
Ausência de eletrólitos = previne crescimento e
espalhamento de Proteus sp. (atrapalha o resultado)
Lactose = diferencial = Bactérias que fermentem forma
colônias amarelas. Enquanto aquelas que não
fermentam ficam incolores ou azuis
Azul de Bromotimol = indicador de pH
Cistina = nutriente 
Bactérias:
Enterobactérias
Pseudomonas
Estafilococos
Candida sp.
22
Ágar EMB
Eosine Methylene Blue
Composto por:
Extrato de carne: fornece nutrientes essenciais
Peptona: fonte de nitrogênio
Lactose e Sacarose: carboidratos fermentáveis
usado na diferenciação entre bactérias que
fermentam e as que não fermentam
Eosina e azul de metileno: corantes que inibem
o crescimento de Gram-positivas e ajudam na
diferenciação das colônias
Seletivo e Diferencial
23
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Ágar MacConkey
Seletivo e Diferencial
Propriedades:
Lactose: carboidrato fermentável
Peptonas: fonte de nutrientes fornecendo
aminoácidos
Sais biliares: inibidores das Gram positivas
Cristal violeta: também inibidor das Gram
positivas
Cloreto de sódio: mantém o controle
osmótico
Vermelho neutro: indicador de pH, mudando
a cor do meio após fermentação
Bactérias:
Enterobactérias
Escherichia coli
Klebisiela sp.
Salmonella spp. 24
Ágar Bile Esculina
Seletivo e Diferencial
Propriedades:
Sais biliares: inibe Gram positivas,
exceto Enterococcus spp.
Esculina: indicador, pois quando
metabolizado pela bactéria, é
convertido em Glicose e Esculetina, e
essa reage com os íons férricos e
promove cor escura, preta. 
Íons Férricos: incolores até reagirem
com a esculetina oriunda do
metabolismo da esculina
Utilizado na coprocultura
Identificação de Enterococcus spp.
25
Ágar Manitol Salgado
Seletivo e Diferencial
Identificação de Staphylococcus aureus
Swab de pele e fluidos corporais
Propriedades
Manitol: um tipo de açúcar que serve
como fonte de carbono
Cloreto de sódio (sal): em alta
concentração (7,5%), que inibe o
crescimento de muitas bactérias não
halotolerantes
Vermelho de fenol: indicador de pH,
muda de cor em resposta à acidez,
permitindo a visualização da fermentação
do manitol
26
Bateria Bioquímica para
Enterobacteriaceae
CITRASE
CITRATO
HIDRÓXIDO
DE AMÔNIO
AUMENTA pH
Ágar Citrato de Simons
Meio sólido inclinado
Semeadura: Estria no bisel
Função: Avaliar metabolismo de citrato
(única fonte de carbono)
Indicador de pH: Azul de bromotimol
CITRATO
PERMEASE
CITRATO
CITRATO
Escherichia coli
Shigella deysenteriae
Shigella sonei
Klebisiella pneumoniae
Klebisiella oxytoca
OBS: Se houver crescimento de
colônia, mas não haver mudança de
cor, a prova é POSITIVA
28
Ágar Fenilalanina
Meio sólido inclinado
Semeadura: Estria no bisel
Função: Avaliar capacidade de formar
ácido fenilpirúvico
Revelador: Cloreto férrico
Fenilalanina
Desaminase
Fenila
lanina Ácidofenilpirúvico
Complexo
verde
Cloreto Férrico+
Escherichia coli
Salmonella spp.
Shigella deysenteriae
Shigella sonei
Klebisiella pneumoniae
Klebisiella oxytoca
Família Proteae
Proteus sp.
Morganella sp.
Providencia sp.
29
Lisina
Descarboxilase
Cadaverina
+ CO2
Ornitina
Descarboxilase
Putrescina
+ CO2
Descarboxilases
Meio sólido inclinado (Lisina)
Meio semissólido (Ornitina) 
Semeadura: 
Picada e estria em meio inclinado
Picada em profundidade
Função: Avaliar a presença de
descarboxilases
Indicador de pH: Púrpura de
Bromocresol
Contém carboidratos para
acidificação primária, necessária
para ativar a enzima
LIA
MIO
30
Possui três avalições em um único tubo:
Sulfeto
Sulfeto de hidrogênio (H2S) reage com
íons férricos formando um precipitado
escuro
Indol
Após adição do Reativo de Kovacs (p -
dimetil - benzoldeído), se mostra como
um anel rosa no topo do meio
Motilidade
Turbidez do meio, evidenciando
locomoção da bactéria
Tiossulfato
Redutase
H2S
Tiossulfato
de Sódio
Triptofanase
IndolTriptofano
SIM
Sulfide - Indol - Motility
Meio semissólido
Semeadura:
Picada em profundidade
31
TSI
Triple Sugar Iron
A B C D E F
AL/ÁC + H2S
ÁC/ÁC + H2S
AL/ÁC
AL/ÁC + gás
ÁC/ÁC
Puro
Possui três açúcares:
Glicose (0,1%)
Lactose (1%)
Sacarose (1%)
Possui:
Peptonas
Tiossulfato de Sódio
Vermelho de fenol
(indicador de pH)Semeadura:
Picada e estria em ágar inclinado
Leitura:
Pico alcalino e base ácida: fermentou somente glicose (acidificando) (tendo gás ou
não), passou oxidar peptona (alcalinizando)
Pico e base ácidos: fermentou glicose e continuou fermentou os outros açúcares
Produção de H2S: área ácida
32
Ureia
Urease
+ CO2
Amônia
Ureia
Líquido
Função:
Notar mudança de cor pela
alcalinização do meio
Contém:
Ureia
Vermelho de fenol (indicador de pH)
33
Família
Enterobacteriaceae
Escherichia coli
Bactéria causadora de infecções
em quase todos os tecidos
Sangue (Sepse e choque por
endotoxina)
Infecções sistêmicas
Gastrointestinal
Geniturinário
Pulmões (UTI)
Meningites (Neonatos)
Em gastroenterite, possui 6 subgrupos:
E. coli enterotoxigênica (ETEC)
toxinas termolábeis e termoestáveis
diarreia líquida
E. coli enteropatogênica (EPEC)
Adesão e dano no epitélio intestinal
Diarreia líquida com muco
E. coli enteroinvasiva (EIEC)
Invasão das células do epitélio do Int. Grosso
Diarreia líquida com sangue e muco
E. coli enterohemorrágica (EHEC)
Produção de STX, hemolisina
Adesão e dano no epitélio
Diarreia sanguinolenta
E. coli enteroagregativa (EAEC)
Adesão ao epitélio em padrão de “tijolo empilhado”
Produção de toxina termolábel
Diarreia líquida e mucoide
E. coli difusamente aderente (DAEC)
Adesão ao epitélio em padrão difuso
Diarreia líquida
Bateria bioquímica:
TSI: ác/ác sem H2S
Citrato -
Indol +
Lisina +
Ornitina: V
Fenilalanina -
Ureia -
Motilidade: V
35
Salmonella spp.
Taxonomicamente, possui 6 espécies
Salmonella enterica subesp enterica
> 2400 sorovares
Salmonella Typhi = Febre Tifoide
Salmonella Typhimurium, Enteritidis,
Agona, Infantis... = Salmonelose
Salmonelose regride normalmente entre 5 a 7 dias
Uso de antibiótico em casos graves, idosos, infecção
sanguínea, necessidade de internação
Cefalosporina de 3ª geração
Flourquinolonas 
Sintomas: dores abdominais,
diarreia semissólida a líquida,
sangue (casos graves)
Salmonella spp.
TSI: al/ác com H2S
Citrato: V
Indol -
Lisina +
Ornitina +
Urease -
Fenilalanina -
Motilidade +
36
Shigella spp.
Taxonomicamente,
possui 4 espécies
S. dysenteriae
S. flexneri
S. boydii
S. sonnei
Bioquimicamente
inertes
Todas causam diarreia sanguinolenta
Invadem o epitélio do Int. Grosso
Formam microúlceras 
Shigella dysenteriae
TSI: al/ác sem H2S
Citrato -
Indol: V
Lisina -
Ornitina -
Urease -
Fenilalanina -
Motilidade -
Shigella sonnei
TSI: al/ác sem H2S
Citrato -
Indol -
Lisina -
Ornitina +
Urease -
Fenilalanina -
Motilidade -
37
Klebsiella spp.
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella oxytoca
Causa pneumonia primária 
Casos graves
Necrose extensiva
Hemorragia
Causa Colite Hemorrágica Associada
a Antibióticos (AAHC)
Uso de penicilina,
cefalosporinas e quinolonas 
Sintomas
Diarreia sanguinolenta
Cólicas abdominais graves
Klebsiella oxytoca
TSI: ác/ác sem H2S
Citrato +
Indol +
Lisina +
Ornitina -
Urease +
Fenilalanina -
Motilidade -
Klebsiella pneumoniae
TSI: ác/ác sem H2S
Citrato +
Indol -
Lisina +
Ornitina -
Urease +
Fenilalanina -
Motilidade - 38
Proteus spp.
Proteus mirabilis
Proteus vulgaris
Comumente isolado de
amostras urinárias
Oportunista, paciente
imunossuprimidos
Amostra urinárias Proteus vulgaris
TSI: ác/ác com H2S
Citrato: V
Indol +
Lisina -
Ornitina -
Urease +
Fenilalanina +
Motilidade +
Proteus mirabilis
TSI: al/ác com H2S
Citrato: V
Indol -
Lisina -
Ornitina +
Urease +
Fenilalanina +
Motilidade + 39
E. coli Salmonella
S.
deysenteriae
S.
sonnei
K.
pnesumoniae
K.
oxytoca
P.
vulgaris
P.
mirabilis
GLICOSE (gás) + + - - + + + +
LACTOSE + - - - + + - -
SACAROSE v - - - + + + -
H2S - + - - - - + +
CITRATO -v - - + + v v
INDOL Sempre
positivo - V Sempre
negativo - + + -
40
E. coli Salmonella
S.
deysenteriae
S.
sonnei
K.
pnesumoniae
K.
oxytoca
P.
vulgaris
P.
mirabilis
LISINA + + - - + + - -
ORNITINA v + - + - - - +
UREIA - - - - + + + +
FENILALANINA - - - - - - + +
MOTILIDADE v + - + - - - +
41
Identificação laboratorial para
Cocos Gram positivos
Ágar Sangue
Não seletivo e Diferencial
Composição:
Ágar: Serve como base sólida para o crescimento de
microrganismos.
Sangue: Geralmente de carneiro ou cavalo, que fornece
nutrientes essenciais, como hemoglobina e fatores de
crescimento, cruciais para o desenvolvimento de
patógenos. 
Peptonas e Extrato de Levedura: Fontes adicionais de
nitrogênio e vitaminas que promovem o crescimento
microbiano.
Propriedades:
Identificação de Patógenos: Permite a
diferenciação de bactérias com base em suas
propriedades hemolíticas, ajudando na
identificação de organismos patogênicos, como os
gêneros Streptococcus e Staphylococcus. 
Observação de Hemólise: A presença de
hemólise pode indicar a produção de enzimas
hemolíticas por certas bactérias, permitindo a
classificação em alfa-hemolíticas, beta-hemolíticas
ou gama-hemolíticas
Versatilidade: O meio pode ser modificado para
atender a diferentes necessidades, como a adição
de antibióticos para testar a resistência bacteriana
43
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Diferencial entre Staphylococcus e Streptococcus
Catalase
44
Coagulase
Diferencial entre os Staphylococcus
Enzima extracelular
Bactéria se “recobre” de fibrina para
se proteger na corrente sanguínea
fagócitos
Ajuda na aderência e na formação de
biofilme
45
Hipurase
Contribui para o diagnóstico de
Streptococcus agalactiae
Ácido benzóico +
Cloreto férrico
46
Teste PYR
L - pirrolidonil - B -
naftilamida (disco)
Se impregna o disco com a colônia da
amostra
Umedecer com água destilada
Aguardar 5 min
Revelar com PYR reagente (p - dimetil -
cinamaldeído)
Observar coloração vermelha em até 1 min
47
pirrolidonil
aminopeptidase
Hidrólise
Teste CAMP
Determinante para diagnóstico de
Streptococcus agalactae
Em ágar sangue, realiza uma estria central de
Staphylococcus aureus
Perpendicular a ela, se faz estrias da amostra
Observar a formação de hemólise em forma
de seta
A B-hemolisina (S. aureus) possui
sinergismo com o fator CAMP (S.
agalactae) 48
OPTOQUIINA
BACITRACINA NOVOBIOCINA
SULFAMETOXAZOL -
TRIMETROPIM
Teste
Suscetibilidade
Staph. epidermidis
Staph. saprophyticus
Strep. pyogenes
Strep. agalactiae
Strep. pneumoniae
Grupo Viridans
Grupo C, F e G
49
Ágar DNAse
Coadjuvante para diagnóstico de S. aureus
Bactéria hidrolisa o DNA
Pela adição de HCl (ácido clorídrico) se
revela um halo ao redor da colônia
50
Ágar Manitol Salgado
Seletivo e Diferencial
Identificação de Staphylococcus aureus
Swab de pele e fluidos corporais
Propriedades
Manitol: um tipo de açúcar que serve
como fonte de carbono
Cloreto de sódio (sal): em alta
concentração (7,5%), que inibe o
crescimento de muitas bactérias não
halotolerantes
Vermelho de fenol: indicador de pH,
muda de cor em resposta à acidez,
permitindo a visualização da fermentação
do manitol
51
Ágar Bile Esculina
Seletivo e Diferencial
Propriedades:
Sais biliares: inibe Gram positivas,
exceto Enterococcus spp.
Esculina: indicador, pois quando
metabolizado pela bactéria, é
convertido em Glicose e Esculetina, e
essa reage com os íons férricos e
promove cor escura, preta. 
Íons Férricos: incolores até reagirem
com a esculetina oriunda do
metabolismo da esculina
Utilizado na coprocultura
Identificação de Enterococcus spp.
52
Cocos Gram positivos
Staphylococcus aureus
Microbiota da pele e mucosas
causa infecções quando essas
barreiras são quebradas
Como agente infeccioso:
Pele (foliculite)
Sistema cardiovascular
(endocardite)
Orofaringe (amigdalite e
pneumonias)
Tecido ósseo e cartilaginoso
(osteomielite e artrite séptica)
Gastrointestinal (intoxicação)
Cepa resistente:
MRSA - S. aureus resistente a meticiclina
Testes:
Catalase +
Coagulase +
Manitol +
DNAse +
Patógeno oportunista
54
Biofilme
Dispersão
Maturação
Desenvolvimento
Fixação
Adesão
Staphylococcus epidermidis
Microbiota da pele e mucosas
causa infecções quando essas
barreiras são quebradas
Patógeno oportunista
Possui facilidade em crescer em
utensílios médicos, como:
cateteres
acessos venosos
próteses Testes:
Catalase +
Coagulase -
Manitol -
DNAse -
Novobiocina S
55
Staphylococcus saprophyticus
Microbiota do trato geniturinário masc e fem
Frequente infecção urinária
Mulheres jovens e sexualmente ativas
Testes:
Catalase +
Coagulase -
Manitol -
DNAse -
Novobiocina R
Oportunista
56
Grupo A
Streptococcus pyogenes
Causador de doença médias a graves:
Faringite/ amigdalite
Erisipela
Febre escarlate/ Escarlatina (toxina
eritrogênica)
Fasciites necrozante (Comedora de Carne)
Febre reumática/ Glomerulonefrite
(sequelas de infecção prévia)
Língua em framboesa
Testes:
Catalase -
PYR +
Bacitracina S 57
Grupo B
Streptococcus agalactiae
Microbiota do trato gastrointestinal 
Podem colonizar o canal vaginal
Oferece risco ao neonato
Meningite e pneumonia neonatal e
sepse
Exame do cotonete na 35ª a 37ª
semana
Testes:
Catalase -
CAMP +
Hipurato +
Bacitracina R
58
Grupo C, F e G
Streptococcus sp.
Naturalmente de animais
Equinos = S. equis
Caninos = S. canis
Mas pode infectar humanos
Faringite
Bacteremia Testes:
Catalase -
Sulfametoxazol-
Trimetropim S
Oportunista
59
Grupo D
Enterococcus sp.
Microbiota intestinal, divididos entre:
Enterococos
E. feacalis
E. faecium
Não enterococos
S. bovis
S. equinus
Como patógenos
Bacteremia (bactéria no sangue)
Infecções urinárias
Prostatite
Endocardite
Testes:
Catalase -
Bile esculina +
PYR +
Cresc. em salina
6,5%
Testes:
Catalase -
Bile esculina +
PYR -
SEM cresc. em
salina 6,5% 60
Grupo Viridans
Microbiota oral:
S. mutans
S. mitis
S. salivarus
S. anginosus
S. sanguinis
Causadores de peridontite (Cárie)
em casos graves, há alcance de
corrente sanguínea (canal)
Invasão do SNC
Bacteremia
Endocardite
Infecção em demais orgãos
Testes:
Catalase -
Bile esculina -
Optoquina R
Oportunista
61
Streptococcus pneumoniae
Estão presente em 40 a 70% no
trato respiratório adulto
Oportunista
Além da pneumonia, podem
causar:
otite
sinusite
meningite
Testes:
Catalase -
Optoquina S
62
Manitol
DNAse
Novobiocina
Manitol
DNAse
Beta -
hemólise
Bacitracina
PYR
Grupo B
S. agalactiae
Bacitracina
CAMP
Grupo D
Bile esculina
PYR
PYR
Identificação laboratorial de Cocos Gram positivos
CATALASEStaphylococcus
Grupo A
S. pyogenes
COAGULASE
S. aureus
Pele, nariz
e períneo
S. epidermidis
Novobiocina S
S. saprophyticus
Pele e
cateter
R
Trato
urinário
Streptococcus
Ágar sangue
S
Orofaringe Trato
vaginal
Grupo C, F e G
Sulfametoxazol -
Trimetropim S
Encontrados em animais.
Em humanos, orofaringe,
meningites, fasciites e
outros.
NaCl 6,5%
Enterococcus spp. Não -
Enterococcus spp.
Orofaringe e
Trato intestinal
Alfa / Gama-
hemólise
Grupo Viridans
Bile esculina
Optoquina R
S. pneumoniae
Optoquina
S
Microbiota
comensal da boca
Vias aéreasR
63
Identificação laboratorial
dos BGNNF
65
Teste oxidase
Citocromo
Oxidase
Coloração
púrpura
Tretametil - p-
fenilenodiamina
oxidação
Colônia isolado é posta numa fita ou
papel contendo um agente oxidável
Existindo a enzima, há
confirmação por cor
Tempo Ideal: A reação positiva ocorre
dentro de 5 a 10 segundos. (OBS: positivando
em 15s, o resultado é positivo lento.
Tempo Máximo: Colorações que surgem
após 30 a 60 segundos não devem ser
consideradas como positivas, pois a oxidação
natural do reagente pode gerar falsos
positivos.
66
Teste OF (Oxidação- Fermentação)
Classificação pelo metabolismo celular
Oxidação ou fermentação de glicose
Confecção e leitura feitas em duplas de
tubos
Em um é adicionado óleo mineral
para bloquear a entrada de O2
TSI
Triple Sugar IronA B C D E F
AL/ÁC + H2S
ÁC/ÁC + H2S
AL/ÁC
AL/ÁC + gás
ÁC/ÁC
Puro
Possui três açúcares:
Glicose (0,1%)
Lactose (1%)
Sacarose (1%)
Possui:
Peptonas
Tiossulfato de Sódio
Vermelho de fenol
(indicador de pH)Semeadura:
Picada e estria em ágar inclinado
Leitura:
Pico alcalino e base ácida: fermentou somente glicose (acidificando) (tendo gás ou
não), passou oxidar peptona (alcalinizando)
Pico e base ácidos: fermentou glicose e continuou fermentou os outros açúcares
Produção de H2S: área ácida
67
Lisina
Descarboxilase
Cadaverina
+ CO2
Descarboxilases
Meio sólido inclinado (Lisina)
Semeadura: 
Picada e estria em meio inclinado
Picada em profundidade
Função: Avaliar a presença de
descarboxilases
Indicador de pH: Púrpura de
Bromocresol
Contém carboidratos para
acidificação primária, necessária
para ativar a enzima
LIA
68
Ágar DNAse
Bactéria hidrolisa o DNA
Pela adição de HCl (ácido clorídrico) se
revela um halo ao redor da colônia
69
Ágar Bile Esculina
Seletivo e Diferencial
Propriedades:
Sais biliares: inibe Gram positivas,
exceto Enterococcus spp.
Esculina: indicador, pois quando
metabolizado pela bactéria, é
convertido em Glicose e Esculetina, e
essa reage com os íons férricos e
promove cor escura, preta. 
Íons Férricos: incolores até reagirem
com a esculetina oriunda do
metabolismo da esculina 70
71
Ágar cetrimide
Meio ideal para visualização dos
pigmentos da P. aeruginosa
Seletivo
Cetrimide é um agente tensoativo
Inibe crescimento de Gram + e agentes competidores,
favorecendo a Pseudomonas aeruginosa
Bacilos Gram Negativos
Não - Fermentadores
Aeróbios estritos
Incapazes de fermentar carboidratos
Degradam pela via oxidativa
BGNNF
Apresentam baixo metabolismo em
comparação às Enterobacteriaceae
Identificação bioquímica complexa
Macroscopia, microscopia e morfologia são essenciais
Aspecto de colônias (formato e consistência)/
pigmentos/ cresc, em ágar MK/ morfologia (bastão,
arranjo, motilidade) 73
Encontrados naturalmente no ambiente,
mas capazes de colonizar indivíduo
saudáveis, uma vez que são oportunistas
Patogenicidade
Infecção hospitalar (nosocomiais)
Enfermarias
Prematuros/ Queimaduras/
Geriátrica/ Cirúrgica
Objetos
Cateteres/ Nebulizadores/ Sondas/
Respiradores
Equipe médica
Principal meio de transporte e
colonização
Fatores de risco
Imunossupressão
Tratamento longo com corticoide
Implantação de corpo estranho
Cateteres, válvulas, lentes
Agravantes:
Terapia intensiva
mais de 40 anos
Patógenos oportunistas
74
Pesudomonas aeruginosa
Mais frequentes nas amostra clínicas
Especialmente em Fibrose Cística
Genética autossômica recessiva
Produção de mucoviscosidade nos pulmões
Obstrução das vias aéreas
75
Bastonetes, móveis, altos produtores de biofilme
Possui pigmento (piocianina, pioverdina)
Agente infeccioso:
Queimaduras
Trato respiratório
Trato urinário
Bacteremia
Testes:
TSI: al/al
Oxidase: +
Gram: bacilos
Motilidade: +
Cetrimide: esverdeado
OF-glic: oxidativo
Polimixina B: S
Imipenem: V
76
Acinetobacter spp.
Testes:
TSI: al/al
Oxidase: -
Gram: cocobacilos
Motilidade: -
OF-glic: inerte/
oxidativo
Polimixina B: S
Imipenem: V
Cocobacilos, imóveis, altos produtores de biofilme
Segundo patógeno mais frequente nas amostras clínicas
Dentre as espécies, A. baumannii tem presença em
80% dos casos
Integrante do grupo das IRAS
ABRC - A. baumannii resistente a carbapenêmicos
Oportunista, muitas cepas resistentes
Acomete:
Infecções nosocomiais
Trato respiratório
Infecções supurativas em
qualquer órgão
77
Stenotrophomonas maltophilia
Testes:
TSI: al/al
Oxidase: - (positiva lenta)
Gram: bacilos
Motilidade: +
Lisina +
OF-glic: oxidativo
Polimixina B: S
Imipenem: R
Infecções raras, mas potencialmente graves
Bacilos móveis
Infecção:
Nosocomiais
Pneumonias
Bacteremias
Epiteliais/ feridas
Complexo Burkholderia cepacia
78
Testes:
TSI: al/al
Oxidase: - (positiva lenta)
Gram: bacilos
Motilidade: +
Lisina +
OF-glic: oxidativo
Polimixina B: R
Imipenem: S
B. cepacia
B. cenocepacia
B. multivorans
Outras
Variam de uma colonização simples a uma infecção
grave
pneumonia e sepse
Síndrome cepacia condição crítica da
infecção onde há queda da função pulmonar
principalmente na Fibrose Cística
Cepas multidroga resistentes
Pseudomonas
aeruginosa Acinetobacter spp.
Stenotrophomonas
maltophilia
Complexo
Burkholdelia cepacia
TSI al/al al/al al/al al/al
OXIDASE + - - (POSITIVA
LENTA)
- (POSITIVA
LENTA)
MOTILIDADE + - + +
PIGMENTO pioverdina - - -
LISINA - - + +
OF - GLICOSE oxidativo
inerte/
oxidativo oxidativo oxidativo 79
Pseudomonas
aeruginosa Acinetobacter spp.
Stenotrophomonas
maltophilia
Complexo Burkholdelia
cepacia
ÁGAR DNAse - - + -
BILE ESCULINA - - + v
ÁGAR
CETRIMIDE
esverdeado com
flourescência NT NT NT
POLIMIXINA B S S S R
IMIPENEM V V R S
80