ELISA

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ELISA 
O que significa a sigla ELISA no contexto de metodos laboratoriais?
a) Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
b) Enzyme-Linked Immuno-Sorbent Analysis
c) Enzyme-Linked Immune System Assay
d) Enzyme-Linked Internal System Analysis
Resposta: a) Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. ELISA e um metodo bioquimico utilizado para
detectar e quantificar antigenos ou anticorpos especificos em amostras biologicas, com base na
ligacao enzimatica.
Qual e o principio basico do teste ELISA?
a) Deteccao de moleculas com radioatividade
b) Reacao entre anticorpos e antigenos acoplados a uma enzima que gera sinal detectavel
c) Crescimento bacteriano em placas de Petri
d) Separacao de proteinas por eletroforese
Resposta: b) Reacao entre anticorpos e antigenos acoplados a uma enzima que gera sinal
detectavel. Essa reacao permite a identificacao e quantificacao especificas do analito.
Em um ensaio ELISA, qual o papel da enzima ligada ao anticorpo?
a) Servir como marcador fluorescente
b) Catalisar uma reacao que produz um sinal detectavel, geralmente uma mudanca de cor
c) Atuar como anticorpo primario
d) Degradar o antigeno
Resposta: b) Catalisar uma reacao que produz um sinal detectavel, geralmente uma mudanca de
cor, facilitando a visualizacao e quantificacao do resultado.
Quais sao as etapas fundamentais de um teste ELISA?
a) Preparacao da amostra, incubacao, lavagem, adicao de substrato e leitura de resultado
b) Centrifugacao, eletroforese, coloracao e visualizacao
c) Cultura celular, colheita, PCR e analise de gel
d) Fixacao, imunohistoquimica e microscopia
Resposta: a) Preparacao da amostra, incubacao, lavagem, adicao de substrato e leitura de
resultado. Essas etapas permitem o contato especifico do anticorpo com o antigeno e a deteccao
do sinal.
O que e um anticorpo primario em um teste ELISA?
a) O anticorpo que e ligado a enzima
b) O anticorpo que se liga diretamente ao antigeno da amostra
c) O anticorpo que e usado para lavar a placa
d) Um tipo especial de anticorpo fluorescente
Resposta: b) O anticorpo que se liga diretamente ao antigeno da amostra, identificando
especificamente o alvo do teste.
Qual e a funcao do anticorpo secundario no ELISA sandwich?
a) Lavar a placa
b) Ligar-se ao anticorpo primario e estar conjugado com uma enzima para detectar a reacao
c) Substituir o antigeno na reacao
d) Neutralizar o antigeno
Resposta: b) Ligar-se ao anticorpo primario e estar conjugado com uma enzima para detectar a
reacao, amplificando o sinal.
Em que situacao e mais adequado usar o ELISA do tipo competitivo?
a) Quando o antigeno tem multiplos epitopos acessiveis
b) Quando a concentracao do antigeno e muito alta na amostra
c) Para medir anticorpos em vez de antigenos
d) Quando o antigeno e pequeno e com um unico epitopo, dificultando o sandwich
Resposta: d) Quando o antigeno e pequeno e possui um unico epitopo, dificultando a formacao do
tipo sandwich.
Como e feita a leitura dos resultados em um teste ELISA?
a) Pela observacao direta da cor no fundo da amostra
b) Atraves de espectrofotometro que mede a absorbancia da reacao enzimatica
c) Por microscopia optica
d) Por eletroforese
Resposta: b) Atraves de espectrofotometro que mede a absorbancia da reacao enzimatica,
quantificando a intensidade da coloracao.
Quais sao os substratos mais comuns usados no ELISA para gerar sinal de cor?
a) DAB, TMB e ABTS
b) Gel de agarose e brometo de etidio
c) Cristais de prata e prata metalica
d) Azul de metileno e verde de metila
Resposta: a) DAB, TMB e ABTS. Esses substratos reagem com a enzima ligada ao anticorpo para
produzir uma cor que pode ser medida.
Por que e importante realizar a etapa de lavagem durante um teste ELISA?
a) Para remover anticorpos e antigenos nao ligados e evitar resultados falsos positivos
b) Para fixar o antigeno na placa
c) Para secar a placa apos a incubacao
d) Para alterar o pH da reacao
Resposta: a) Para remover anticorpos e antigenos nao ligados, evitando interferencia no resultado
e aumentando a especificidade do teste.
Qual e a diferenca entre ELISA direta e ELISA indireta?
a) ELISA direta utiliza anticorpos nao conjugados; indireta utiliza anticorpos conjugados
b) ELISA direta usa um anticorpo conjugado que se liga diretamente ao antigeno; indireta usa um
anticorpo primario nao conjugado seguido por um anticorpo secundario conjugado
c) ELISA direta e mais demorada que a indireta
d) ELISA direta usa fluorescencia; a indireta usa cor
Resposta: b) ELISA direta usa um anticorpo conjugado que se liga diretamente ao antigeno; ELISA
indireta utiliza um anticorpo primario nao conjugado seguido por um anticorpo secundario
conjugado, ampliando o sinal.
Qual e uma das principais vantagens do ELISA em relacao a outros metodos imunologicos?
a) Baixa sensibilidade
b) Alta especificidade e possibilidade de quantificacao
c) Exige poucos reagentes
d) Permite o uso de qualquer amostra sem preparo
Resposta: b) Alta especificidade e possibilidade de quantificacao, alem de ser relativamente rapido
e adaptavel a diferentes analitos.
Em que tipo de amostra o ELISA e comumente aplicado?
a) Apenas em fluidos corporais como sangue, soro e plasma
b) Em qualquer amostra biologica, incluindo fluidos, tecidos e culturas celulares
c) Somente em amostras solidas
d) Apenas em amostras ambientais
Resposta: b) Em qualquer amostra biologica, incluindo fluidos, tecidos e culturas celulares, desde
que o analito esteja presente e extraivel.
Qual enzima e frequentemente usada na conjugacao com anticorpos no ELISA?
a) DNA polimerase
b) Peroxidase de rabano (HRP)
c) Amilase
d) Lipase
Resposta: b) Peroxidase de rabano (HRP). Tambem e comum o uso de fosfatase alcalina, ambas
catalisando reacoes que geram sinal detectavel.
O que e uma curva padrao no contexto do ELISA?
a) Um grafico que representa a variacao do pH durante o ensaio
b) Um grafico que relaciona concentracoes conhecidas do analito com a intensidade do sinal para
quantificacao das amostras desconhecidas
c) Uma linha que indica o tempo de incubacao ideal
d) Uma tabela com temperaturas para armazenamento
Resposta: b) Um grafico que relaciona concentracoes conhecidas do analito com a intensidade do
sinal para permitir a quantificacao das amostras testadas.
Qual e o motivo para realizar o teste em duplicata ou triplicata no ELISA?
a) Para diminuir o consumo de reagentes
b) Para garantir maior confiabilidade e precisao dos resultados
c) Para acelerar o processo
d) Para facilitar a leitura dos dados
Resposta: b) Para garantir maior confiabilidade e precisao dos resultados, identificando erros
experimentais ou variacoes.
Por que o ELISA e considerado um metodo muito sensivel?
a) Porque utiliza anticorpos monoclonais de alta afinidade
b) Porque pode detectar concentracoes muito baixas de antigenos ou anticorpos devido a
amplificacao do sinal pela enzima
c) Porque e realizado em equipamentos caros
d) Porque usa corantes fluorescentes
Resposta: b) Porque pode detectar concentracoes muito baixas devido a amplificacao do sinal
enzimatico.
Quais as principais aplicacoes clinicas do ELISA?
a) Diagnostico de doencas infecciosas, deteccao de alergias, quantificacao de hormonios e
monitoramento de respostas imunologicas
b) Analise genetica, sequenciamento de DNA
c) Cultura de celulas e crescimento bacteriano
d) Diagnostico por imagem
Resposta: a) Diagnostico de doencas infecciosas, deteccao de alergias, quantificacao de
hormonios e monitoramento de respostas imunologicas.
O que pode causar resultados falso-positivos em um ensaio ELISA?
a) Contaminacao da amostra, reacoes cruzadas com anticorpos nao especificos, manipulacao
incorreta e insuficiente lavagem
b) Apenas o uso de amostras antigas
c) Uso de reagentes de alta qualidade
d) Temperatura ambiente constante
Resposta: a) Contaminacao da amostra, reacoes cruzadas e lavagem insuficiente podem gerar
resultados falso-positivos.
Em que circunstancias o ELISA e preferido em relacao a imunofluorescencia?a) Quando se busca alta especificidade e possibilidade de quantificacao simples em muitas
amostras simultaneamente
b) Quando se deseja analise visual qualitativa
c) Quando se trabalha com celulas vivas
d) Quando se busca analisar proteinas isoladas por eletroforese
Resposta: a) Quando se busca alta especificidade e possibilidade de quantificacao simples em
muitas amostras simultaneamente.
Por que e importante controlar a temperatura durante a incubacao do ELISA?
a) Para evitar degradacao da enzima e garantir reacoes consistentes
b) A temperatura nao e importante
c) Para acelerar o processo sem perder qualidade
d) Para manter o pH constante
Resposta: a) Para evitar degradacao da enzima e garantir que as reacoes de ligacao e catalizacao
ocorram adequadamente.
Qual e a funcao do bloqueio na placa do ELISA?
a) Evitar a ligacao nao especifica de proteinas as paredes da placa, reduzindo o fundo do ensaio
b) Aumentar a ligacao do anticorpo
c) Facilitar a coloracao da placa
d) Alterar o pH do meio
Resposta: a) Evitar a ligacao nao especifica de proteinas as paredes da placa, diminuindo
interferencias e aumentando a precisao.
Como se denomina o anticorpo usado para detectar anticorpos em uma amostra durante o ELISA?
a) Antigeno
b) Anticorpo secundario conjugado com enzima
c) Substrato
d) Enzima isolada
Resposta: b) Anticorpo secundario conjugado com enzima que reconhece o anticorpo presente na
amostra.
O que caracteriza o ELISA indireto?
a) O uso de anticorpo conjugado ligado diretamente ao antigeno
b) A utilizacao de um anticorpo primario nao conjugado e um anticorpo secundario conjugado que
reconhece o primeiro
c) A presenca de dois antigenos simultaneos
d) A deteccao por radioatividade
Resposta: b) Utiliza um anticorpo primario nao conjugado e um anticorpo secundario conjugado,
aumentando sensibilidade.
No teste ELISA, o que acontece se a placa nao for lavada adequadamente entre as etapas?
a) Resultados mais claros e precisos
b) Pode ocorrer alta interferencia, gerando falsos positivos ou negativos devido a anticorpos ou
enzimas remanescentes
c) O teste nao e afetado
d) Apenas o anticorpo primario e removido
Resposta: b) Alta interferencia, aumentando erros nos resultados.
O ELISA pode ser quantitativo, qualitativo ou semi-quantitativo?
a) Apenas qualitativo
b) Apenas quantitativo
c) Pode ser todos esses, dependendo do protocolo e do equipamento
d) Nao e possivel quantificar pelo ELISA
Resposta: c) Pode ser qualitativo, quantitativo ou semi-quantitativo conforme o metodo utilizado.
Qual o papel do controle positivo em um ensaio ELISA?
a) Confirmar que o teste esta funcionando corretamente, reagentes e protocolos foram aplicados
adequadamente
b) Confirmar o diagnostico do paciente
c) Nao tem papel importante
d) Substituir o antigeno da amostra
Resposta: a) Confirmar o funcionamento adequado do teste, evitando resultados falsos devido a
falhas tecnicas.
Em um ELISA sandwich, por que o antigeno e capturado entre dois anticorpos?
a) Para garantir maior especificidade e aumentar o sinal detectado
b) Para lavar o antigeno
c) Para acelerar a reacao
d) Para modificar o antigeno
Resposta: a) O antigeno fica capturado entre anticorpos diferentes, aumentando a especificidade e
sensibilidade do teste.
Como o ELISA contribui para o diagnostico precoce de doencas?
a) Detectando baixos niveis de anticorpos ou antigenos antes que sintomas aparecam
b) Somente para confirmar casos avancados
c) Usado apenas para testes de rotina
d) Nao e usado para diagnostico
Resposta: a) Por permitir deteccao sensivel e especifica, auxiliando no diagnostico precoce.
O que significa cross-reactivity (reatividade cruzada) em um teste ELISA?
a) Reacao do anticorpo com moleculas diferentes do alvo, podendo causar resultados
falso-positivos
b) Reacao exclusiva com o antigeno alvo
c) Falha na ligacao da enzima
d) Erro no preparo da amostra
Resposta: a) O anticorpo reage com moleculas similares ao antigeno, comprometendo a
especificidade.
Qual e a importancia do uso de placas de microtitulacao (placas de 96 pocos) no ELISA?
a) Permitir a realizacao simultanea de multiplas amostras e controles, aumentando a eficiencia
b) Diminuir o consumo de reagentes, mas nao permite multiplas analises
c) Sao usadas apenas para armazenamento
d) Nao tem importancia pratica
Resposta: a) Facilita a analise simultanea de diversas amostras e controles, tornando o processo
mais rapido e confiavel.
O que deve ser considerado ao escolher o tipo de anticorpo para um ensaio ELISA?
a) Afinidade, especificidade, e se sera monoclonal ou policlonal, pois isso afeta sensibilidade e
precisao
b) Apenas o preco do anticorpo
c) Se e fluorescente ou nao
d) Apenas o fabricante
Resposta: a) Afinidade e especificidade sao cruciais para garantir um resultado confiavel e
eficiente.
Em testes ELISA, qual e a importancia do controle negativo?
a) Mostrar que o sistema nao gera sinal na ausencia do antigeno ou anticorpo alvo, garantindo que
o resultado positivo e real
b) Confirmar o diagnostico positivo
c) Nao e necessario
d) Serve para calibrar o equipamento
Resposta: a) Garante que nao ha reacao nao especifica ou contaminacao, evitando falsos
positivos.
Por que o ELISA e considerado um metodo versatil?
a) Pode ser adaptado para detectar diferentes tipos de moleculas biologicas, desde proteinas ate
hormonios e anticorpos
b) Serve so para virus
c) E usado apenas para pesquisa basica
d) Nao e adaptavel a diferentes analises
Resposta: a) Porque pode ser modificado conforme o alvo, reagentes e protocolos, atendendo
varias necessidades.
Como a sensibilidade do ELISA pode ser aumentada?
a) Utilizando anticorpos monoclonais de alta afinidade e enzimas que geram sinal amplificado
b) Diluindo as amostras ao maximo
c) Diminuindo o tempo de incubacao
d) Ignorando a etapa de lavagem
Resposta: a) O uso de anticorpos de alta afinidade e substratos que geram sinais intensos melhora
a sensibilidade.
Em que area fora da medicina o ELISA tambem e amplamente utilizado?
a) Agricultura, para deteccao de pesticidas e contaminantes em alimentos
b) Engenharia civil
c) Geologia
d) Astronomia
Resposta: a) Na agricultura e controle de qualidade alimentar, para detectar substancias
indesejadas.
O que caracteriza o ELISA indireto em termos de etapas?
a) Apenas uma incubacao com anticorpo conjugado
b) Duas etapas de incubacao: anticorpo primario seguido por anticorpo secundario conjugado
c) Incubacao unica com antigeno conjugado
d) Nao usa anticorpos
Resposta: b) Duas etapas, aumentando sensibilidade e permitindo flexibilidade na escolha de
anticorpos.
O que e um falso-negativo no ELISA?
a) Quando o teste indica ausencia do antigeno ou anticorpo, mas ele esta presente na amostra
b) Quando o teste indica presenca, mas nao ha
c) Um erro do operador ao interpretar o resultado
d) Quando o resultado e muito claro
Resposta: a) Resultado incorreto que pode ocorrer por baixa sensibilidade, manipulacao
inadequada ou degradacao do analito.
Por que e importante o uso de reagentes de alta qualidade em ELISA?
a) Para garantir a reprodutibilidade, confiabilidade e evitar resultados erroneos
b) Apenas para diminuir custos
c) Reagentes nao influenciam no resultado
d) So para testes rapidos
Resposta: a) Reagentes de baixa qualidade podem gerar variabilidade e resultados imprecisos.
Qual a diferenca entre anticorpos monoclonais e policlonais no contexto do ELISA?
a) Monoclonais reconhecem um unico epitopo; policlonais reconhecem multiplos epitopos do
mesmo antigeno
b) Monoclonais sao mais baratos que policlonais
c) Policlonais sao produzidos em laboratorio, monoclonais nao
d) Nao ha diferenca
Resposta: a) Essa diferenca afeta a especificidade e sensibilidade do teste.
Quer que eu continue com mais perguntas para ampliar ainda mais esse conteudo?