Prévia do material em texto
UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE MICROBIOLOGIA I ALUNA: TAÍSE SILVA DO NASCIMENTO RELATÓRIOS DE AULAS PRÁTICAS RELATÓRIO AULA PRÁTICA 1: OBSERVAÇÃO DE MICROORGANISMOS NO MICROSCÓPIO. OBJETIVOS Observar e identificar microorganismos eucariontes e procariontes para diferenciar estruturas e diferenças de cada um. MATERIAIS UTILIZADOS Lâminas e microscópio DESCRIÇÃO DA PRÁTICA Foram observados diferentes estruturas de organismos eucariontes e procariontes como a seguir: Microorganismos eucariontes podem possuir: Hifas contínuas e septadas, micro conídeos, corpos de frutificação, podendo ser pluricelulares ou unicelulares. (Ex: Fungos). Microorganismos procariontes podem ser: Gram negativos ou Gram positivos, Cocos, bacilos, espirilada, vribrião. RESULTADOS ESPERADOS Saber diferenciar fungos de bactérias pela suas estruturas. REGISTRO E IMAGENS BIBLIOGRAFIA: TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, C.L. MICROBIOLOGIA, 12ª Ed. Artmed, 2017. RELATÓRIO AULA PRÁTICA 2: PREPARO DE MEIO DE CULTURA OBJETIVOS Preparar o meio de cultura, ou seja, deixar o ambiente nutritivo e próprio para que os microrganismos ( bactérias e fungos ) possam se desenvolver/multiplicar. MATERIAIS UTILIZADOS Frasco de meio de cultura, água destilada, balança, placa de petri, frasco de vidro apropriado, luvas, papel laminado, proveta e espátula. DESCRIÇÃO DA PRÁTICA Ler o rótulo e observar as proporções de acordo com o fabricante, calcular as proporções e adicionar água destilada (a água precisa está em temperatura e ph corretos), pesar, dissolver, esterilizar ( 1° controle de qualidade ), fertilidade ( 2° controle de qualidade ) RESULTADOS ESPERADOS Sucesso na realização do preparo, o meio de cutura ficou propício para os microorganismos se desenvolverem. REGISTRO E IMAGENS BIBLIOGRAFIA MARIANGELA, CR., et al. Microbiologia Prática – Roteiro e Manual – Bactérias e Fungos. Ed. Atheneu, 2011. RELATÓRIO AULA PRÁTICA 3: PROMOÇÃO DO CRESCIMENTO MICROBIANO/SEMEADURA POR ESTRIAS OBJETIVOS Promover crescimento de bactérias, por meio de estriação, a partir do meio de cultura na placa de Petri MATERIAIS UTILIZADOS Meio de cultura preparado, placa de Petri, alça inoculadora, bico de bunsen DESCRIÇÃO DA PRÁTICA Preparar o material dentro da alça de segurança, flambar a alça inoculadora (não descartável), mergulhar a ponta da alça inoculadora dentro do meio que foi cultivado no tudo de ensaio, pegar a placa de Petri (dentro da área de segurança), abrir e estriar de 10 a 15 vezes continuamente de ponta a ponta no interior da placa, fechar a placa e flambar a alça caso não seja descartável. RESULTADOS ESPERADOS: Após o cultivo ter sido armazenado em local adequado pelo monitor da disciplina , foi possível observa o crescimento e isolamento de colonias bacterianas. REGISTROS E IMAGENS BIBLIOGRAFIA: MARIANGELA, CR., et al. Microbiologia Prática – Roteiro e Manual – Bactérias e Fungos. Ed. Atheneu, 2011. RELATÓRIO AULA PRÁTICA 4: PREPARO DAS LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO E VISUALIZAÇÃO NO MICROSCÓPIO/ COLORAÇÃO DE GRAM OBJETIVOS: Preparar a lâmina para coloração de gram e após observação no microscópio diferenciando se bactéria gram positiva ou gram negativa. MATERIAIS UTILIZADOS Placa de Petri já preparada com cultivo, alça inoculadora, pipeta de pasteur, lâmina, bico de bunsen, suporte para coloração, água destilada, cristal violeta, lugol, descolorante e fucsina básica e óleo de imersão. DESCRIÇÃO DA PRÁTICA Pegar a placa de Petri, captar os microorganismos já cultivados com a alça inoculadora descartável, fazer o esfregaço captado na lâmina, fixar a lâmina no bico de bunsen (passando 3x). Apoiar a lâmina do suporte de coloração, aplicar o cristal violeta (aguardar 1 minuto) e lavar com água destilada, aplicar o lugol (aguardar 1 minuto) escorrer, aplicar descolorante (aguardar 30 segundos) e aplicar a fucsina básica e lavar com água destilada. Deixar a lâmina secar. Colocar no microscópio, colocar óleo de imersão (caso queira visualizar no aumento de 100x) e observar no microscópio. RESULTADOS ESPERADOS: A lâmina obteve sucesso em todas as suas etapas e conseguiu-se observar a Bactéria Cocos Gram Negativa. Gram Negativa de cor rosa e Gram Positiva de cor roxa. REGISTROS E IMAGENS BIBLIOGRAFIA:TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, L.C. Microbiologia. Artmed, São Paulo, 12 ed. 2017. RELATÓRIO AULA PRÁTICA 5: TESTES BIOQUÍMICOS PARA CARACTERIZAÇÃO METABÓLICA OBJETIVO Através dos testes bioquímicos determinar as características metabólicas das bactérias para fins de identificação observando as reações químicas que elas realizam em relação a diferentes compostos. MATERIAIS UTILIZADOS Tubo de ensaio com meio de cultura preparado, alça inoculadora, tiras para reação de oxidase, tubos de ensaio, caldo de ureia, caldo de glicose, agar citrato e catalase. OBJETIVOS Identificar e caracterizar organismos, especialmente bactérias, com base em suas atividades metabólicas. Os testes vão avaliar a capacidade do organismo em utilizar diferentes substratos, produzir certas enzimas, ou crescer em condições específicas, fornecendo informações cruciais para sua identificação e diferenciação. DESCRIÇÃO 1° Teste de Fermentação da Lactose foi utilizado, com caldo lactose (geralmente vermelho de fenol), para avaliar se a bactéria fermenta lactose produzindo ácido e/ou gás láctico. Interpretação: Cor amarelo: fermentação da lactose (produziu ácido) Bolhas no tubo Durham: Produção de gás láctico Cor vermelha: Sem mudança, bactéria não fermentadora. 2° Teste: Oxidase(fita), utilizado para identificar bactérias que produzem a enzima citocromo oxidase. Interpretação: Azul/roxo escuro em ate 10 segundos: positivo. Sem coloração ou após 30 segundos: negativo. 3° Teste: Catalase ( teste das bolhas ) utlizado para verificar a presença da enzima catalase, que quebra o peróxido de hidrogênio (H²O²). Colocando uma gota de H²O² na lâmina, adicinando uma pequena porção da colônia com alça estéril. 4° Teste: UVP utilizado para avaliar vias fermentativas ( ácido misto ou butilenoglicol ) com caldo MR-VP. Interpretação: Adicionar 5 gotas de Vermelho de Metila: Vermelho intenso: positivo (ácido misto ) Amarelo/palha: negativo Teste VP: Adicionat 15 gotas de alfa-naftol e 5 gotas de KOH. Agitar e deixar repousar de 15-30 min. Anel ou coloração rosa/vermelha: VP positivo. Sem mudança: VP negativo. 5° Teste – Citrato de Simmons foi utilizado para identificar bactérias capazes de usar citrato como única fonte de carbono. Interpretação: Azul: Positivo ( uso do citrato, libereção de álcali ) Verde: Negativo ( sem crescimento ) Verde claro: ( resultado duvidoso , pode indicar inicio de reação ). 6° Teste: Urase ( teste da ureia ) foi utilizado para detectar produção da enzima urease Interpretação: Rosa Fluorecente/fúcsia: Positivo ( liberação de âmonia, ph aumentado ) Laranja pu sem mudança: Negativo REGISTRO DE IMAGENS REFERÊNCIAS: TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, C.L. MICROBIOLOGIA, 12ª Ed. Artmed, 2017. RELATÓRIO AULA PRÁTICA 6: CULTIVO DE FUNGOS PARA CARACTERIZAÇÃO MORFOLÓGICA/ TÉCNICA DA FITA ADESIVA OBJETIVO Cultivar fungos em condições controladas (em câmara úmida) para observar e caracterizar suas estruturas morfologicamente através da técnica da fita adesiva. MATERIAIS UTILIZADOS Câmara úmida feita em casa, arroz, feijão, ração e macarrão, fita adesiva, azul de algodão, lâmina, bico de bunsen pra zona de segurança. DESCRIÇÃO DA PRÁTICA Elaboração da câmara úmida envolvendo um pote, papel toalha úmida tampa e elementos orgânicos. Após o crescimento dos fungos, colocar uma gota de azul de algodão na lâmina, aplicar a técnica da fitaadesiva para extrair o fungo e fixar na lâmina em cima da gota de azul de algodão. Fungo pronto para ser vizualizado no microscópio. RESULTADOS ESPERADOS Lâmina preparada com sucesso, foram identificados as estruturas do fugo cultivado como, micro conídeos, hifas septadas e corpos de frutificação. REGISTROS E IMAGENS BIBLIOGRAFIA: TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, L.C. Microbiologia. Artmed, São Paulo, 12 ed. 2017.