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Microbiologia Caderno de estudos de bacteriologia 3 Esterilização e desinfecção Esterilização o Agente esterilizante: usa sufixo Cida. o Destruição ou remoção completa de todos os microorganismos. o Aquecimento método mais comum. o Líquidos ou gases podem ser esterilizados por filtração. o Mata os microrganismos especificados pelo prefixo: microbicida, bactericida, fungicida, esporicida. o Mata todas as formas vivas, inclusive esporos. → Esterilização comercial: Alimento submetido a determinados valores de temperatura a fim de matar os microorganismos patogênicos, sem alterar as características do alimento. Assepsia o Sem sepsia, ausência ou exclusão de sepsis. o Tem por objetivo evitar a contaminação. o Consiste em um conjunto de métodos e processos de higienização de determinado ambiente, com a finalidade de evitar a contaminação do mesmo por agentes infecciosos e patológicos. Anti-sepsia o Uso de anti-séptico. o Contra sepsia. o Aplicação de agentes não quimioterapêuticos em tecidos vivos com o objetivo de pelo menos previnir a multiplicação de microorganismos patogênicos. o Não matam esporos. o É utilizada em locais onde há a presença de microorganismos indesejados. Desinfecção o Agente: desinfetante ou sanitizante. o Não matam esporos destrói os microorganismos da forma vegetativa. o Previne a infeccção. o É um controle direcionado à destruição de microorganismos nocivos. o Ocorre sobre objetos inanimados objetivo de matar, ao menos, os microorganismos patogênicos. o Agentes químicos desinfetantes. o Agentes físicos fervura, pasteurização. → Características de um desinfetante ideal: Poder germicida em altas diluições – não precisa ser muito concentrado para matar → altas concentrações podem não ser favoráveis aos humanos Estabilidade; Homogeneidade; Solúvel em água; Atóxico; Biodegradável; Não corrosivo; Penetração rápida e eficiente; Econômico; Poder atuar sobre matéria orgânica; Poder desodorizante. Agentes físicos o Calor úmido age desnaturando as proteínas. Ex.: autoclave, fervura e pasteurização. o Calor seco ele age por dessecação, oxidação e pressão osmótica. Ex.: forno. o Raios ionizantes: age a partir de lesões de DNA. Ex.: raios X, Co60, Cs136. o Filtração: age a partir da retenção de microorganismos na membrana. Ex.: membrana semipermeável. o Refrigeração: age na diminuição do metabolismo. Ex.: geladeira, freezer. → A maioria desses agentes químicos promove a desnaturação irreversível de proteínas. Calor úmido Faz a desnaturação das proteínas. Ocorre a quebra das ligações de hidrogênio que mantêm as proteínas em sua estrutura tridimensional. Não esteriliza desinfecta. Um dos mais usados para fervura (100°C, não esteriliza → desinfecção) e pasteurização (desinfecção de alimentos – emprego de uma temperatura pouca drástica para manter as características dos alimentos). Autoclave pode ir além dos 100° (apenas calor úmido não faz, precisa de um equipamento que aumente a pressão). Análogo à panela de pressão. Recipiente vedado. Pressão de 1 atm. 121°C. 10 min. Atinge a esterilidade. Tem que permitir a passagem de vapor. Necessita dos procedimentos operacionais por escrito, com treinamento e autorização. Visual: checar as borrachas e para possíveis vazamentos de vapor antes do início do ciclo. Uso de roupas protetivas: avental, luvas, roupas e sapatos apropriados. Autoclavagem de materiais limpos e sujos devem ser feitas separadamente. Certificar que o vapor penetre em todo o material; Certificar que o material não é resistente ao processo; Não é permitido autoclavar matérias que são radioativos. A autoclave é um método usado para esterilizar meios de cultura, instrumentos, vestimentas, equipamentos intravenosos, aplicadores, soluções, seringas, equipamentos de transfusão e diversos outros itens que suportam altas temperaturas e pressões. Indicadores de autoclavagem: Química: As fitas mudam de cor quando chegam nos 121°C. Fitas, strips. Biológicos: Presença de esporos de B stearothermophilus. Calor seco Tem que ser mais alto para atingir uma desinfecção desejada e leva mais tempo. 180°. 1 hora. A transferência de calor com a umidade é muito mais eficiente. Dessecação, oxidação e pressão osmótica. Exemplo: forno/chama direta. Ex: esterilização de alças de inoculação. Vidrarias e materiais cirúrgicos de inox. Um tempo maior e uma temperatura mais alta (relativos ao calor úmido) são necessários, pois o calor na água é conduzido mais rapidamente para um corpo frio do que o calor no ar. Por exemplo, imagine os diferentes efeitos da imersão de sua mão em água fervente a 100°C e de mantê-la em um forno de ar quente na mesma temperatura pela mesma quantidade de tempo. Radiações não ionizantes Quanto maior o comprimento da onda menor a energia → menos danosas. Promove lesões de DNA – luz UV → lesão extensa. Não esteriliza. Radiações ionizantes Altamente danosas. Possuem menores comprimentos de onda, assim, transportam mais energia. Esterilização de produtos farmacêuticos e materiais descartáveis dentários e médicos. Lesões de DNA e proteína. Raios X, Co60, Cs136. Esteriliza eficientemente. Filtração Consegue esterilizar soluções e ar. Não promove a morte. É utilizada para esterilizar materiais sensíveis ao calor, como alguns meios de cultura, enzimas, vacinas e soluções antibióticas. Gera a retenção de microrganismos na membrana. Exemplo: membranas Filtros HEPA (filtros de ar particulado de altaeficiência) em ar condicionado. Refrigeração Não promove a morte → promove a diminuição do metabolismo. Não é eficiente para desinfectar ou esterilizar. Agentes químicos o Álcoois: é um potente solvente lipídico e atua na desnaturação proteica. Ex: álcool etílico, álcool isopropílico. Ex: álcool 70% para COVID. O 70% é mais eficaz, pois o 100%. o Fenóis: agem na destruição de membrana. Ex: cresol (creolina), hexaclorofeno. o Metais pesados: fazem desnaturação proteica. Ex: mercúrio, AgNO3. o Peróxidos e halogênicos: Fazem desnaturação proteica (-SH tirosina). Ex: água oxigenada, ozônio, hipoclorito, iodo. o Agentes alquilantes: fazem desnaturação proteica. Ex: formol, gás eto, glutaraldeído. o Detergentes aniônicos, catiônicos (amônia quaternária): fazem interação com fosfolipídios de membrana. Ex: sabão, detergentes, cloreto de benzalcônio o Bisguaninas: agem na membrana plasmática. Ex: clorexidina. → Apenas os agentes alquilantes são capazes de promover esterilização.