TOXOPLASMA VIRCLIA IgG AVIDITY IFU Medivax PT Rev 01 PDF bula toxo

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TOXOPLASMA VIRCLIA® IgG AVIDITY MONOTEST 
Para uso diagnóstico in vitro 
VCM025: Imunoensaio quimioluminescente (CLIA) indireto para testar a 
avidez dos anticorpos IgG contra o citomegalovírus no soro/plasma 
humano. 12 testes. 
 
INTRODUÇÃO: 
O Toxoplasma gondii é um protozoário parasita intracelular obrigado de 
distribuição mundial. Os humanos podem adquirir a infecção por ingestão 
de ooquistos desde as fezes de gato, ou por ingestão de carne infectada, 
ou então por infecção intrauterina, transfusão ou transplante de órgãos. 
Apesar de que a maior parte das infecções são assintomáticas, a doença 
pode ser grave em imunodeprimidos ou na infecção congênita. 
Em mulheres infectadas durante o primeiro trimestre da gravidez, pode 
dar origem a um aborto espontâneo ou provocar hidrocefalia no feto. 
Quando a doença se adquire mais tarde na gravidez, a afetação do feto 
costuma ser menos importante. 
Os anticorpos IgM aparecem 5 dias após da infecção e descem a níveis 
baixos ou indetectáveis em semanas ou meses na maior parte dos 
doentes. Os anticorpos IgG aparecem semanas após da infecção e 
persistem o resto da vida. Uma vez que a IgM pode persistir durante 
meses, os testes de avidez IgG poderão ser úteis para o diagnóstico 
sorológico de infeções primárias. A avidez da IgG é reduzida no início da 
infecção, sendo que a avidez dos anticorpos IgG aumenta ao com o 
tempo. A avidez reflete a força agregada com que a IgG policlonal se liga 
aos antígenos, medida pelo efeito que um desnaturante químico tem 
sobre essa ligação. 
Os métodos de detecção baseados na quimioluminescência têm recebido 
bastante atenção devido ao seu baixo ruído de fundo, linearidade e 
amplo alcance dinâmico. Quando aliados aos imunoensaios enzimáticos, 
o efeito de amplificação do sinal proporcionado pela enzima permite que 
os imunoensaios quimioluminescentes (CLIA - ChemiLuminescent 
ImmunoAssay) tenham tempos de incubação mais curtos, ao mesmo 
tempo que a sua sensibilidade é mantida ou melhorada. 
 
PRINCÍPIO DO TESTE: 
Método de CLIA baseado na reação dos anticorpos da amostra com o 
antígeno fixo à superfície de poliestireno, ensaiado paralelamente em 
duas tiras. As imunoglobulinas não ligadas pela reação com o antígeno 
são eliminadas durante o processo de lavagem. Uma vez adicionada uma 
solução de ureia a uma das tiras, apenas os anticorpos de elevada avidez 
permanecem ligados ao antígeno na placa. A outra tira recebe solução de 
lavagem normal durante este passo. Depois de um novo passo de 
lavagem, o conjugado ligado desenvolve-se com a ajuda de uma solução 
de substrato quimioluminescente que irá gerar uma luminescência 
incandescente que pode ser lida com um luminômetro. A avidez é 
expressa como um índice calculado com as RLU medidas em ambas as 
tiras. 
 
CARACTERÍSTICAS: 
Todos os reagentes fornecidos estarão prontos para uso. As soluções de 
diluição das amostras e o conjugado são corados, para auxílio na 
realização da técnica. 
Não é necessário proceder a uma diluição prévia da amostra. 
Os reagentes necessários à execução do teste estão incluídos na 
embalagem de monodoses. 
A solução de dissociação é dividida em vários frascos. 
 
CONTEÚDO DO KIT: 
1 VIRCLIA® TOXOPLASMA IgG AVIDITY A MONODOSE: Azul. 12 
monodoses compostas por 3 poços de reação e 5 poços de reagente com 
a seguinte composição: 
Poços A, B, C: Poços de reação; poços revestidos com antígeno de T. 
gondii, cepa RH (ATCC 50174). 
Poço D: Conjugado: laranja; contendo uma diluição do conjugado de 
peroxidase anti-IgG humana e Neolone e Bronidox como conservantes. 
Poço E: Solução de diluição de soro: azul; tampão de fosfato contendo 
estabilizadores proteicos e Neolone e Bronidox como conservantes. 
Poço F: Calibrador de avidez reduzida: límpido; diluição de murino IgG de 
avidez reduzida contendo Neolone e Bronidox como conservantes. 
Poço G: Componente de substrato B: transparente; contendo peróxido. 
Poço H: Componente de substrato A: transparente; contendo luminol. 
2 VIRCLIA® TOXOPLASMA IgG AVIDITY B MONODOSE: Preto. 12 
monodoses compostas por 3 poços de reação e 5 poços de reagente com 
a seguinte composição: 
Poços A, B, C: Poços de reação; poços revestidos com antígeno de T. 
gondii, cepa RH (ATCC 50174). 
Poço D: Conjugado: laranja; contendo uma diluição do conjugado de 
peroxidase anti-IgG humana e Neolone e Bronidox como conservantes. 
Poço E: Conjugado: laranja; contendo diluição de conjugado de 
peroxidase antimurino IgG e Neolone e Bronidox como conservantes. 
Poço F: Calibrador de avidez elevada: límpido; diluição de soro de avidez 
elevada contendo Neolone e Bronidox como conservantes. 
Poço G: Componente de substrato B: transparente; contendo peróxido. 
Poço H: Componente de substrato A: transparente; contendo luminol. 
3 VIRCLIA® DISSOCIATING SOLUTION: 3 frascos com 3 ml cada de tampão 
tris salino contendo ureia e Tween 20. 
 
Conservar entre 2 e 8°C e respeitar o prazo de validade. 
 
Material necessário mas não fornecido com o kit: 
-VIRCLIA® AUXILIARY REAGENTS (REF:VCMAR) 
-Pipeta de precisão para dispensar 5 e 100 μl. 
-Pipeta multicanal de precisão para dispensar 100 μl. 
-Aparelho de lavagem de microplacas adaptado. 
-Incubador/banho com termostato. 
-Luminômetro de microplacas. 
-Em alternativa, processador automático de CLIA. 
 
CONSERVAÇÃO: 
Conservar entre 2 e 8°C. Não utilizar os componentes do kit uma vez 
ultrapassada a data de validade. O prazo de validade indicado será válido 
sempre que os componentes se mantenham embalados e conservados 
entre 2 e 8°C. 
 
CONSERVAÇÃO E ESTABILIDADE DOS COMPONENTES APÓS ABERTOS: 
Componente Estabilidade 
VIRCLIA MONODOSE Uma vez aberto, utilize no mesmo dia 
Demais componentes Prazo indicado na embalagem a 2-8°C 
 
ESTABILIDADE E UTILIZAÇÃO DOS REAGENTES: 
Utilizar todos os reagentes em condições de assepsia, de modo a evitar 
contaminações microbianas. 
Não permitir que a placa seque entre as lavagens e a adição dos 
reagentes. 
Componente de substrato A é fotossensível. Evitar a exposição direta à 
luz. As soluções de substrato não devem entrar em contato com ácidos, 
materiais combustíveis nem agentes oxidantes ou redutores fortes. 
Certifique-se de que nenhum componente metálico entra em contato 
com o substrato sem ter primeiro testado a sua compatibilidade. 
VIRCELL, S.L. não se responsabiliza pela utilização inadequada dos 
reagentes contidos no kit. 
 
RECOMENDAÇÕES E PRECAUÇÕES: 
1. Este produto destina-se ao diagnóstico in vitro, sendo indicado para 
utilização por profissionais de saúde qualificados. 
2. Utilizar apenas componentes do kit. Não misturar componentes de kits 
de fabricantes diferentes. Apenas os componentes do kit AUXILIARY 
REAGENTS são compatíveis com todas as referências e lotes VIRCLIA®. 
3. Utilizar pontas de pipeta diferentes e limpas para cada uma das fases 
do teste. Utilizar exclusivamente material limpo e, de preferência, 
descartável. 
4. Utilizar luvas protetoras descartáveis, jaleco e proteção ocular quando 
se manipular as amostras. Lavar as mãos adequadamente após a da 
manipulação das amostras. Além disso, siga todos os protocolos de 
segurança em vigor no seu laboratório. 
5. Não utilizar as soluções, em caso de deterioração do recipiente. 
6. Não pipetar com a boca. 
7. O diluente para as amostras, poços de reação, o conjugado e calibrador 
deste kit contém material de origem animal. O calibrador também 
contém material de origem humana. Embora os soros de controle do kit 
sejam objeto de controles relativamente à ausência de HBsAg e de 
anticorpos anti-HIV e de Hepatite C, é necessário manipular os controles e 
as amostras do paciente como potencialmente patogênicos. Os poços de 
reação contêm antígeno inativado. Deverão, contudo, ser manipulados 
com precaução. Nenhum método atual pode oferecer total garantia de 
ausência de agentes infecciosos. Todo o material deverá ser tratado e 
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eliminado comosendo potencialmente infeccioso. Cumpra as normas 
locais relativamente à eliminação resíduos clínicos. 
8. Não utilize este produto em processadores automatizados, a menos 
que estes tenham sido previamente validados para o efeito. 
9. Este produto não está fabricado para diagnosticar Toxoplasma IgG, 
pelo que apenas se devem usar amostras conhecidas como positivas 
 
COLETA DA AMOSTRA: 
O sangue deve ser extraído em condições assépticas através de técnicas 
de venipuntura por pessoal com experiência. É recomendável o uso de 
técnicas estéreis ou assépticas para evitar a contaminação da amostra. Os 
soros/plasmas deverão ser conservados a temperaturas entre 2 e 8ºC 
caso se preveja o seu manuseio nos 7 dias posteriores à colheita. 
Contudo, no caso de prolongar-se o seu manuseamento deverão 
congelar-se á -20ºC, evitando congelamentos e descongelamentos 
desnecessários. Não utilizar amostras hiperlipêmicas, hemolisadas ou 
contaminadas. A turvação de amostras que apresentem partículas pode 
ser eliminada por centrifugação. Amostras de soro ou plasma podem ser 
usadas indistintamente. 
 
PREPARO PRELIMINAR DOS REAGENTES: 
Todos os reagentes fornecidos estarão prontos para uso. 
Apenas a VIRCLIA® WASHING SOLUTION, incluída no kit de componentes 
auxiliares VIRCLIA® AUXILIARY REAGENTS, tem de ser preparada de 
antemão. Para tal deve-se, encher um frasco com 50 ml de VIRCLIA® 
WASHING SOLUTION (20x) acrescentando-lhe água destilada perfazendo 
um total de 1 litro. Caso se desenvolvam cristais durante a conservação 
da solução concentrada, deve-se aquecer a 37ºC antes de se proceder à 
sua diluição. Após a sua preparação deve-se conservar entre 2 e 8ºC. 
 
PROCEDIMENTO DE ENSAIO: 
 AUTOMATIZADO 
1. Antes do uso, deixe a VIRCLIA® WASHING SOLUTION (diluída de acordo 
com as instruções) atingir a temperatura ambiente (cerca de 1 hora). 
2. Siga o Manual do Operador do Processador Automatizado. 
 
 MANUAL 
Para realizar o procedimento manual consultar o fabricante. 
 
CONTROLE INTERNO DA QUALIDADE: 
Cada lote encontra-se sujeito a um controle de qualidade interno, 
anteriormente ao seu envio, de forma a garantir o cumprimento do 
protocolo de validação do teste. Os resultados finais do controle de 
qualidade para cada lote particular encontram-se disponíveis. 
O material de controle é correlacionado aos painéis dos soros validados 
internamente. 
 
VALIDAÇÃO DO TESTE: 
1. Cada monodose inclui um calibrador de avidez reduzida (poço A) e um 
calibrador de avidez elevada (poço C). Permite a validação do ensaio e do 
kit. 
RLU e avidez dos calibradores têm de recair dentro dos seguintes limites. 
Caso contrário, o teste deverá ser anulado e repetido. 
Cálculo de índices de avidez para os calibradores: 
Índice de avidez = (RLU do calibrador na monodose A / RLU do 
calibrador na monodose B) 
 
CONTROLE RLU 
CALIBRADOR DE AVIDEZ ELEVADA 2-7 
CALIBRADOR DE AVIDEZ REDUZIDA 2-7 
 
CONTROLE AVIDEZ 
CALIBRADOR DE AVIDEZ ELEVADA > 0,60 
CALIBRADOR DE AVIDEZ REDUZIDA 40, repetir o teste com uma diluição de 
1/100 da amostra. 
 
 
 
INTERPRETAÇÃO DE RESULTADOS: 
Índice de anticorpos=(RLU amostra/RLU calibrador) 
 
Índice Interpretação 
0,5 Avidez elevada 
 
Os índices de avidez inferiores a 0,40 são mais a favor de primoinfecção 
recente há menos de 4 meses. Contudo, esses resultados não permitem a 
confirmação deste diagnóstico com certeza absoluta. 
Os índices entre 0,40 e 0,50 não permitem distinguir uma infeção recente 
de uma infeção anterior. Para estas amostras, deverão ser usados outros 
marcadores e/ou métodos de determinação de avidez, ou uma nova 
amostra de soro (colhida 3 ou 4 semanas mais tarde). 
Os índices de avidez superiores ou iguais a 0,50 são mais a favor de 
infeção anterior há mais de 5 meses. Contudo, tais resultados não 
permitem excluir uma primoinfecção recente de há menos de 4 meses 
com certeza absoluta. 
 
LIMITAÇÕES DO MÉTODO: 
1. Este método foi concebido para ser utilizado com soro/plasma 
humano. 
2. A utilização deste kit exige uma leitura cuidadosa e compreensão do 
folheto informativo. É necessário seguir com rigor as indicações para se 
obter resultados fiáveis, sobretudo na pipetagem correta das amostras e 
reagentes, lavagens tempos de incubação. 
3. Os resultados das amostras deverão ser valorizados em conjunto com a 
sintomatologia clínica e com outros procedimentos de diagnóstico. O 
diagnóstico definitivo deverá ser estabelecido mediante o isolamento. 
4. O teste não indica o lugar da infecção. Não pretende substituir a 
técnica de isolamento. 
5. O resultado do teste de avidez não constitui prova suficiente para o 
diagnóstico de uma infeção recente por T. gondii. 
6. Certos indivíduos exibem persistência de anticorpos de baixa avidez no 
soro durante meses. 
7. Os resultados obtidos na detecção de IgG em recém-nascidos deverão 
ser interpretados com precaução, dado que as IgGs maternas são 
transferidas passivamente da mãe para o feto antes do nascimento. 
8. Os resultados da determinação de anticorpos de uma única amostra 
não devem ser utilizados para o estabelecimento do diagnóstico de uma 
infecção recente. Deverão ser colhidas duas amostras (fase aguda e 
convalescente), de modo a serem testadas em paralelo e determinar se 
se trata de uma soroconversão ou de aumento significativo do nível de 
anticorpos. 
9. Em doentes imunossuprimidos uma resposta negativa não exclui a 
presença de infecção. 
10. Os resultados relativos ao desempenho decorrem dos estudos 
comparativos realizados com dispositivos de precisão em amostras 
selecionadas da população. Podem ser encontradas pequenas diferenças 
em diferentes populações ou com diferentes dispositivos. 
 
DESEMPENHO: 
 SENSIBILIDADE E ESPECIFICIDADE: 
123 amostras de soro/plasma foram ensaiadas contra o um kit 
ELISA comercial. 
Foram obtidos os seguintes resultados: 
 
 N° Amostras Sensibilidade(%) Especificidade(%) 
 123 100 91 
95% C.I. 92-100 80-96 
C.I.: Intervalo de Confiança 
Os valores indeterminados foram suprimidos dos cálculos finais 
 
 PRECISÃO INTRA-ENSAIO: 
3 soros foram processados individualmente 10 vezes, cada soro num 
ensaio automatizado único, em condições essencialmente inalteradas. 
Foram obtidos os seguintes resultados: 
 
 
Soro N % C.V. 
Amostra + 10 9 
*LAvC 10 11 
**HAvC 10 14 
C.V. Coeficiente de variação 
*LAvC: Calibrador de avidez reduzida 
**HAvC: Calibrador de avidez elevada 
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 PRECISÃO INTER-ENSAIO: 
3 soros foram processados individualmente em 5 dias consecutivos e em 
2 processadores automáticos diferentes. Foram obtidos os seguintes 
resultados: 
Soro N % C.V. 
Amostra + 10 8 
*LAvC 10 19 
**HAvC 10 12 
C.V. Coeficiente de variação 
*LAvC: Calibrador de avidez reduzida 
**HAvC: Calibrador de avidez elevada 
 
 
REAÇÕES CRUZADAS E INTERFERÊNCIAS: 
Procedeu-se ao teste* de 8 amostras caracterizadas positivas em relação 
com outros vírus do grupo sindrômico (vírus Epstein-Barr, citomegalovírus 
e rubéola) e outros protozoários (Leishmania). Procedeu-se ao teste* de 2 
amostras positivas para anticorpos antinucleares. 
Nas amostras testadas* obtiveram-se resultados negativos, demostrando 
a reação específica do teste sem reações cruzadas ou interferências 
ocasionadas pelos agentes descritos. 
*Estes resultados foram obtidos com o kit de TOXOPLASMA VIRCLIA® 
IgG MONOTEST, Ref. VCM087. 
 
SÍMBOLOS USADOS NO PRODUTO: 
 
 
Uso exclusivo para diagnóstico in vitro 
 
Usar até (data de validade) 
 
Armazenar a x-y°C 
 
Contém suficiente paratestes 
 
Lote 
 
Número de catálogo 
 
Consultar instrução de uso 
 
 Poços 
 
 
Data de vencimento, N° de Lote, N° de Registro do Ministério da Saúde 
e Responsável Técnico: VIDE EMBALAGEM 
Produzido por: Vircell Microbiologists 
Parque Tecnológico de la Salud. 
Avicena 8, 18016 Granada, Espanha. 
http://www.vircell.com 
Importado e distribuído por: Medivax Indústria e Comércio Ltda. 
CNPJ: 68.814.961/0001-73 
Rua Almirante Teffé 645/1001 - Centro - Niterói / RJ 
CEP: 24030-085 
Atendimento ao Cliente - Tel.: (0xx21) 3628-9900 
email: medivax@medivax.com.br 
www.medivax.com.br 
 
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