AULA 6 e 7 - CONTROLE DA POPULAÇÃO MICROBIANA

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<p>CONTROLE DA POPULAÇÃO</p><p>MICROBIANA</p><p>PROF ENFª LARA BARRETO</p><p>Controle de microrganismos: conceitos básicos</p><p>• Conjunto de medidas utilizadas para prevenir a</p><p>contaminação microbiana num material (vivo ou não) ou reduzir o</p><p>número dos microrganismos já presentes.</p><p>• O controle microbiológico pode ser realizado :</p><p>➢INIBIÇÃO: Bloqueio da multiplicação – ação microbiostática (MO vivo</p><p>não multiplica – morte lenta)</p><p>➢MORTE: Perda irreversível da capacidade de reprodução – ação</p><p>microbiocida (morte rápida do microrganismo)</p><p>Condições que influenciam o controle</p><p>microbiano</p><p>• Levar em conta a natureza dos microrganismos presentes no</p><p>material;</p><p>• O efeito normalmente não é instantâneo (tempo de</p><p>exposição – número de microrganismos);</p><p>• O agente deve afetar diretamente o microrganismo</p><p>(presença de matéria orgânica dificulta a penetração do</p><p>agente</p><p>AGENTE QUIMICOS</p><p>• DESINFETANTE é um agente que mata as formas vegetativas,</p><p>mas não, necessariamente as formas esporuladas dos micro-</p><p>organismos patogênicos.</p><p>• Desinfecção é o processo de destruição dos agentes</p><p>infecciosos, pelo uso de substância química, radiação ultra-</p><p>violeta, água fervente ou vapor para tratar objetos</p><p>inanimados</p><p>AGENTE QUIMICOS</p><p>• ANTISSÉPTICO: semelhante ao desinfetante, previne o</p><p>crescimento ou ação de micro-organismos, pela destruição</p><p>dos mesmos ou pela inibição de seu crescimento ou</p><p>atividade.</p><p>• Usualmente está associado com substâncias aplicadas aos</p><p>seres vivos, pessoas ou animais</p><p>AGENTE QUIMICOS</p><p>• Assepsia: Conjunto de medidas utilizadas para prevenir a</p><p>contaminação microbiana num material (vivo ou não) ou</p><p>reduzir o número dos microrganismos já presentes.</p><p>• A assepsia pode ser feita de diversas formas, entre elas a</p><p>esterilização, a desinfecção, que é realizada mediante a</p><p>aplicação de substâncias que ajudam a destruir os agentes</p><p>infecciosos.</p><p>AGENTE QUIMICOS</p><p>• SANEANTE é um agente que reduz a população microbiana até níveis consideráveis,</p><p>de acordo com as exigências de saúde pública.</p><p>• GERMICIDA é o agente que mata os microorganismos, são chamados de microbicida.</p><p>Bactericida, viricida e fungicida indicam o tipo de micro-organismo destruído.</p><p>• MICROBIOSTÁTICO apenas inibe o crescimento dos micro-organismos (fungistático ou</p><p>bacteriostático)</p><p>• ESTERILIZAÇÃO é o processo pelo qual os micro-organismos são mortos, inativados</p><p>irreversivelmente ou retirados de um material ou suspensão, inclusive as formas</p><p>esporuladas (Óxido de Etileno (ETO), Peróxido de Hidrogênio,Ácido Peracético,</p><p>Formaldeído,Glutaraldeído).</p><p>O uso de agentes químicos tem se tornado um método bastante conveniente</p><p>e efetivo de esterilização e desinfecção.</p><p>Usados na desinfecção de pisos e superfícies.</p><p>Também são utilizados quando equipamentos de operações unitárias ou</p><p>componentes de uma instalação industrial não admite esterilização pelo</p><p>vapor de água saturado.</p><p>Exemplos: filtros, bombas, centrífugas, válvulas;</p><p>Poucos obtém a esterilidade, a maioria tem ação desinfetante.</p><p>Nenhum desinfetante isolado é apropriado para todas as circunstâncias.</p><p>A ação depende de fatores como: temperatura, pH, presença de sais,</p><p>presença de proteínas e o tempo de contato</p><p>Ordem de resistência à exposição aos agentes</p><p>químicos.</p><p>Tipo de Microrganismo Nível de atividade requerida</p><p>Bactéria esporulante ALTO</p><p>Micobactéria e Vírus pequenos</p><p>ou não lipídicos</p><p>ALTO OU INTERMEDIARIO</p><p>Fungos INTERMEDIARIO A BAIXO</p><p>Bactéria vegetativa Vírus</p><p>médios ou lipídicos</p><p>BAIXO</p><p>Avaliação de um Desinfetante</p><p>• Método de Disco-difusão</p><p>Agentes químicos utilizados no controle</p><p>microbiano</p><p>• Fenol e agentes fenólicos:</p><p>– Antisséptico ou desinfetante</p><p>– Promovem ruptura de membrana plasmática, desnaturação</p><p>de enzimas. Fenol é raramente usado (padrão de</p><p>comparação).</p><p>– Hexaclorofeno: derivado do fenol. Ativo em presença de</p><p>matéria orgânica</p><p>• Biguanidas:</p><p>– Ruptura de membrana plasmática;</p><p>– Antissepsia da pele e mucosas (clorexidina);</p><p>– Bactericida, fungicida, não esporocida, atóxico.</p><p>Agentes químicos utilizados no controle</p><p>microbiano</p><p>• Iodo e cloro: agentes oxidantes</p><p>– Iodo: Antisséptico efetivo – tintura e iodóforos</p><p>(bactericida, fungicida e irritante das mucosas).</p><p>– Cloro: desinfetantes de cloro na forma de hipoclorito</p><p>(NaOCl) e cloraminas (cloro e amônia). Desinfecção de</p><p>água e utensílios.</p><p>• Álcoois (antisséptico ou desinfetante):</p><p>– Ruptura da membrana, desnaturação de proteínas e</p><p>dissolução de lipídeos. Mais efetivo em 70%. Ação</p><p>depende da retirada da sujidade. Efetivo contra</p><p>bactérias, fungos e alguns vírus, não efetivo contra</p><p>esporos.</p><p>Agentes químicos utilizados no controle</p><p>microbiano</p><p>Agentes de superfície: – Sabões e detergentes não</p><p>iônicos:</p><p>• Remoção mecânica dos microrganismos</p><p>• Alguns podem ter antimicrobianos (Triclosan) –</p><p>Detergentes aniônicos:</p><p>• Lauril sulfato de sódio, inativação ou ruptura de</p><p>enzimas</p><p>Detergentes catiônicos:</p><p>• Quaternário de amônio, inibição enzimática,</p><p>desnaturação protéica e ruptura da membrana</p><p>plasmática. Cepacol- cloreto de cetilpiridínio /cloreto de</p><p>benzalcônio</p><p>Agentes químicos utilizados no controle</p><p>microbiano</p><p>Aldeídos: – Desnaturação protéica;</p><p>• Gluteraldeído e formaldeído => desinfecção de</p><p>equipamentos médicos (2 % por 30 min).</p><p>Esterilizantes gasosos:</p><p>• Desnaturação protéica;</p><p>• Óxido de etileno (gás penetrante/carcinogênico)</p><p>Peroxigênios:</p><p>• O3 usado para auxiliar na cloração</p><p>• H2O2 – antisséptico fraco, bom desinfetante</p><p>Agentes químicos utilizados no controle</p><p>microbiano</p><p>Metais e seus compostos:</p><p>– Desnaturação protéica, bactericidas</p><p>– antissépticos ou desinfetantes;</p><p>– AgNO3: pode ser usado para prevenir infecções</p><p>gonocócicas oculares.</p><p>– Cloreto de mercúrio: ação lenta. Antissepsia de</p><p>pele e mucosas. Não é mais utilizado porque é</p><p>tóxico.</p><p>– CuSO4: algicida; ativo mesmo em baixa</p><p>concentração de matéria orgânica</p><p>AGENTES FÍSICOS</p><p>• TEMPERATURA: O calor é o método mais eficiente para matar micro-</p><p>organismos. Pode ser calor: seco ou úmido.</p><p>➢Calor Seco: • Age promovendo uma oxidação de componentes do</p><p>protoplasma.</p><p>• Tem baixa capacidade de penetração.</p><p>• Menos eficiente que o calor úmido.</p><p>• As temperaturas necessárias para a esterilização são 160-180°C por uma ou</p><p>duas horas.</p><p>• Emprega-se para vidraria, óleos ou pós.</p><p>• A flambagem é a mais usual</p><p>AGENTES FÍSICOS – CALOR SECO</p><p>AGENTES FÍSICOS</p><p>Calor Úmido:</p><p>• Age promovendo a desnaturação de proteínas e dissolução dos lipídeos.</p><p>• É mais eficiente que o calor seco.</p><p>• A condição mais usada para esterilização é vapor de água aquecido à</p><p>120°C, sob pressão de 1 atmosfera durante 15-20 minutos (autoclave).</p><p>• A pasteurização consiste no aquecimento a 60°C por 30 minutos,</p><p>seguido de resfriamento brusco (não é esterilização).</p><p>• A fervura não mata esporos de bactérias (não é esterilização).</p><p>AGENTES FÍSICOS - AUTOCLAVE</p><p>• A autoclave é um dispositivo selado</p><p>(semelhante a uma panela de pressão)</p><p>que mata microrganismos usando</p><p>vapor saturado sob pressão.</p><p>TEMPERATURA ENTRE 121ºC E 135�� C</p><p>• A autoclave, graças à sua estrutura,</p><p>permite que o processo de</p><p>esterilização seja realizado por meio</p><p>de alta pressão e vapor, que matam</p><p>microrganismos, incluindo vírus e</p><p>bactérias perigosos e todas as suas</p><p>formas de esporos.</p><p>AGENTES FÍSICOS - FERVURA</p><p>• TEMPERATURA DE ATÉ 100º C</p><p>• MATA FORMAS VEGETATIVAS DE BACTERIAS,</p><p>QUASE TODOS OS VIRUS,FUNGOS E SEUS</p><p>ESPOROS EM ATÉ 10 MIN.</p><p>AGENTES FÍSICOS - PASTEURIZAÇÃO</p><p>• processo de esterilização de alimentos (leite, queijo, iogurte, cerveja</p><p>ou vinho) que consiste em expô-los a uma temperatura inferior a seu</p><p>ponto de ebulição e submetê-los em seguida a resfriamento súbito, a</p><p>fim de eliminar certos microrganismos nocivos.</p><p>• “Esterilização” parcial de produtos alimentícios facilmente perecíveis</p><p>(p.ex., frutos, pescado) por meio de radiação (p.ex., raios gama).</p><p>• De modo geral, os micro-organismos são mais resistentes ao frio do que ao</p><p>calor.</p><p>• Temperaturas de 0 a 7ºC: a taxa metabólica da maioria dos microorganismos</p><p>é reduzida – efeito microbiostático</p><p>• Com algumas exceções, a temperatura de geladeira (4°C) pode ser para</p><p>conservação de culturas.</p><p>• O congelamento lento promove a formação de cristais de gelo, que perfuram</p><p>a membrana e a parede celular.</p><p>• O congelamento brusco a temperaturas inferiores a -30°C seguido de</p><p>dessecamento à vácuo – liofilização – é usada na conservação de micro-</p><p>organismos</p><p>AGENTES FÍSICOS - RADIAÇÕES</p><p>Possuem atividade letal sobre os</p><p>microrganismos. Podem ser:</p><p>• Ionizantes – comprimento de</p><p>onda menor que 1 nm (raios</p><p>gama, raio X e feixes de elétrons</p><p>de alta energia)</p><p>• Não Ionizantes (UV) – de 1 a 350</p><p>nm (luz ultravioleta (UV)</p><p>AGENTES FÍSICOS - RADIAÇÕES</p><p>Ultravioleta</p><p>• A luz UV danifica o DNA das células expostas.</p><p>Inibem a replicação correta do DNA durante a</p><p>reprodução celular.</p><p>• Os comprimentos de onda mais eficazes estão</p><p>entre 240-280 nm.</p><p>• São usadas na desinfecção de ambientes e</p><p>materiais cirúrgicos.</p><p>• A radiação não é muito penetrante.</p><p>• Pode lesar os olhos humanos, causar queimaduras</p><p>e câncer de pele</p><p>AGENTES FÍSICOS - RADIAÇÕES</p><p>Radiações Ionizantes</p><p>• Os raios gama, raios X, ou feixes de elétrons de alta energia.</p><p>• Ionizam a água, formando radicais reativos, que reagem com os</p><p>componentes celulares.</p><p>• São muito mais penetrantes que as radiações UV.</p><p>• Usado para esterilizar produtos farmacêuticos e suprimentos</p><p>médicos.</p><p>AGENTES FÍSICOS - FILTRAÇÃO</p><p>• A passagem de soluções ou gases através de filtros de poros</p><p>suficientemente pequenos é usada para reter bactérias e fungos (não</p><p>vírus).</p><p>• É utilizada na esterilização de materiais sensíveis ao calor, como meios de</p><p>cultura, enzimas, vacinas e soluções antibióticos.</p><p>• É comum a utilização na entrada de ar para os biorreatores.</p><p>• Baixo custo</p><p>• confiável</p><p>• Mais utilizadas nas instalações industriais para esterilização do ar</p><p>• Podem ser de carvão, algodão, papel, lã de vidro e membrana poliméricas</p><p>AGENTES FÍSICOS - FILTRAÇÃO</p><p>Filtros de Membrana</p><p>• Apresentam poros de dimensões menores do que os microrganismos</p><p>a serem retirados (0,2- 0,45 μm).</p><p>Pressão osmótica</p><p>• USO DE ALTAS CONCENTRAÇÕES DE SAIS E AÇUCARES, CRIANDO UM</p><p>AMBIENTE HIPERTÔNICO QUE OCASIONA A SAIDA DE AGUA DA</p><p>CELULA MICROBIANA.</p><p>• PRESSÃO OSMÓTICA: ESSE PRINCÍPIO É UTILIZADO NA CONSERVAÇÃO</p><p>DOS ALIMENTOS EM GERAL, FUNGOS SÃO MUITO MAIS CAPAZES DE</p><p>CRESCER EM MATERIAIS COM BAIXA UMIDADE QUE BACTÉRIA.</p><p>Slide 1: CONTROLE DA POPULAÇÃO MICROBIANA</p><p>Slide 2: Controle de microrganismos: conceitos básicos</p><p>Slide 3: Condições que influenciam o controle microbiano</p><p>Slide 4: AGENTE QUIMICOS</p><p>Slide 5: AGENTE QUIMICOS</p><p>Slide 6: AGENTE QUIMICOS</p><p>Slide 7: AGENTE QUIMICOS</p><p>Slide 8</p><p>Slide 9: Ordem de resistência à exposição aos agentes químicos.</p><p>Slide 10: Avaliação de um Desinfetante</p><p>Slide 11: Agentes químicos utilizados no controle microbiano</p><p>Slide 12: Agentes químicos utilizados no controle microbiano</p><p>Slide 13: Agentes químicos utilizados no controle microbiano</p><p>Slide 14: Agentes químicos utilizados no controle microbiano</p><p>Slide 15: Agentes químicos utilizados no controle microbiano</p><p>Slide 16</p><p>Slide 17: AGENTES FÍSICOS</p><p>Slide 18: AGENTES FÍSICOS – CALOR SECO</p><p>Slide 19: AGENTES FÍSICOS</p><p>Slide 20: AGENTES FÍSICOS - AUTOCLAVE</p><p>Slide 21</p><p>Slide 22: AGENTES FÍSICOS - FERVURA</p><p>Slide 23: AGENTES FÍSICOS - PASTEURIZAÇÃO</p><p>Slide 24</p><p>Slide 25</p><p>Slide 26</p><p>Slide 27: AGENTES FÍSICOS - RADIAÇÕES</p><p>Slide 28</p><p>Slide 29: AGENTES FÍSICOS - RADIAÇÕES</p><p>Slide 30: AGENTES FÍSICOS - RADIAÇÕES</p><p>Slide 31: AGENTES FÍSICOS - FILTRAÇÃO</p><p>Slide 32: AGENTES FÍSICOS - FILTRAÇÃO</p><p>Slide 33: Filtros de Membrana</p><p>Slide 34: Pressão osmótica</p>