Aula 02 _ Coleta de Material Biológico _ Sangue

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<p>Coleta de Sangue</p><p>Exames Laboratoriais</p><p>Análises Clínicas</p><p>Coleta</p><p>• IMPORTANTE:</p><p>“A atividade laboratorial requer procedimentos</p><p>interligados, interatuantes e interdependentes, onde</p><p>A participação de todos</p><p>é importante e indispensável para a obtenção da</p><p>qualidade consistente, esta imprescindível para</p><p>assegurar laudos fidedignos em prazos adequados”.</p><p>Sistema de Coleta de sangue</p><p>•Sistema aberto.</p><p>•X</p><p>•Sistema fechado.</p><p>Sistema de Coleta de sangue</p><p>• Sistema aberto: Coleta de sangue com seringa e agulha.</p><p>Por ser a técnica mais antiga desenvolvida para coleta de sangue</p><p>venoso, enraizou-se em algumas áreas de saúde, pois o mesmo produto é</p><p>usado para infundir medicamentos.</p><p>Apesar de seringas e agulhas hipodérmicas serem materiais essenciais</p><p>para o funcionamento de uma instituição de saúde e terem baixo custo, muitas</p><p>vezes, a coleta com seringa e agulha pode apresentar alguns impactos</p><p>negativos e acarretar diversos problemas pré-analíticos:</p><p>• Risco de acidente com o material perfurocortante no momento de transferir</p><p>o sangue para o frasco a vácuo e descarte do material.</p><p>• Comprometimento da qualidade da amostra devido à proporção correta de</p><p>sangue/aditivo.</p><p>• Comprometimento da amostra devido a hemólise, liberação dos</p><p>constituintes intracelulares para o plasma ou soro, quando ocorre a ruptura das</p><p>células do sangue. A hemólise é a principal causa de rejeição de amostras em</p><p>laboratórios.</p><p>• Formação de micro coágulos e fibrina.</p><p>• Incômodo para o paciente em casos de múltiplas coletas.</p><p>Sistema de Coleta de sangue</p><p>• Sistema fechado: Coleta de sangue a vácuo.</p><p>Em 1943, a Cruz Vermelha Americana fez uma solicitação a uma</p><p>empresa de materiais hospitalares para que desenvolvesse um jogo descartável</p><p>e estéril para coleta. Uma vez embalado, o material deveria manter a</p><p>esterilidade para uso em campos de guerra.</p><p>O resultado foi a criação de um dispositivo que permitia a aspiração do</p><p>sangue diretamente da veia, através de vácuo, utilizando uma agulha de duas</p><p>pontas que se conectava diretamente ao tubo de análise, constituindo o sistema</p><p>para coleta de sangue a vácuo.</p><p>Desde então, aprimoramentos e inovações foram agregados a estes</p><p>dispositivos, transformando o sistema para coleta de sangue a vácuo num</p><p>procedimento seguro e prático, proporcionando maior qualidade do espécime</p><p>diagnóstico. Além de atender as normas e ser recomendação da CLSI (Clinical</p><p>and Laboratory Standards Institute) - (Instituto de Padroes Clinicos e Laboratoriais).</p><p>Sistema de Coleta de sangue</p><p>• Sistema fechado: Coleta de sangue a vácuo.</p><p>A principal característica da coleta de sangue a vácuo é a possibilidade</p><p>da coleta múltipla de tubos de forma rápida, segura e com uma única punção,</p><p>proporcionando maior conforto ao paciente.</p><p>Atualmente é usada na maioria dos laboratórios mundialmente e, pois</p><p>proporciona ao usuário inúmeras vantagens:</p><p>• Qualidade do material examinado: as propriedades do sangue continuam</p><p>estáveis e isso faz com que os resultados sejam mais confiáveis e assertivos.</p><p>• Por conta do vácuo calibrado, a amostra garante o volume de sangue</p><p>necessário ao exame e a qualidade do mesmo.</p><p>• A quantidade de anticoagulante/ativador de coágulo é proporcional ao</p><p>volume de sangue a ser coletado, gerando uma amostra de qualidade para ser</p><p>processada ou analisada.</p><p>• Segurança para o profissional: impede o contato direto com a amostra,</p><p>além do fácil manuseio.</p><p>• Em pacientes que apresentam acessos venosos difíceis como crianças,</p><p>pacientes de quimioterapia, entre outros, esse método de coleta oferece</p><p>facilidade, pois existem diferentes calibres de agulhas e tubos.</p><p>Tubos para Coleta de sangue</p><p>• Os tubos de coleta a vácuo são utilizados devido</p><p>a facilidade e segurança.</p><p>• São projetados para fins de coleta, transporte e</p><p>processamento da amostra.</p><p>• Alguns contêm aditivos que acelera a coagulação</p><p>do sangue, outros contêm aditivos para evitar a</p><p>coagulação e há tubo que não contém aditivo, que</p><p>também permite a coagulação do sangue.</p><p>Tubos para Coleta de sangue</p><p>• Isso preserva a amostra garantindo o</p><p>processamento adequado para cada exame.</p><p>• Os tubos que não contêm anticoagulante ou com</p><p>ativador de coagulo, Após centrifugação</p><p>produzirá uma amostra de soro.</p><p>Tubo sem</p><p>Anticoagulante</p><p>Tubo após</p><p>coleta e</p><p>triagem Processo de</p><p>Centrifugação</p><p>Separação do</p><p>Sobrenadante</p><p>Soro</p><p>Transferência</p><p>para outro</p><p>Tubo</p><p>Tubos para Coleta de sangue</p><p>• Os tubos que contêm anticoagulante irá produzir</p><p>uma amostra de plasma, após processo de</p><p>centrifugação.</p><p>Tubo com</p><p>Anticoagulante</p><p>Tubo após</p><p>coleta e</p><p>triagem Processo de</p><p>Centrifugação</p><p>Separação do</p><p>Sobrenadante</p><p>Plasma</p><p>Transferência</p><p>para outro</p><p>Tubo</p><p>Tubos para Coleta de sangue</p><p>• Alguns testes exigem sangue total, outros soro e</p><p>há aqueles que necessitam de plasma.</p><p>O Citrato de Sódio é o anticoagulante utilizado nos exames que avaliam</p><p>a coagulação e que necessitam do uso do plasma do paciente, ele é Tamponado</p><p>e utilizado para prova de coagulação em amostras.</p><p>Diferentes concentrações de Citrato de Sódio podem ter efeitos</p><p>significativos nas análises terapias antitrombóticas, Tempo de Protombina (TP) e</p><p>Tempo de Tromboplastina ativada (TTPa).</p><p>Seu papel principal é formar um quelato com o cálcio, ou seja, ele irá se</p><p>ligar aos íons cálcio da amostra e a cascata da coagulação será interrompida.</p><p>Um quelato é a associação de um íon metálico (no nosso caso o cálcio),</p><p>com cadeias orgânicas (no nosso caso o citrato de sódio) através de ligações</p><p>covalentes na forma de uma estrutura heterocíclica, que neutralizam a</p><p>reatividade química do íon metálico.</p><p>Agente quelante= citrato de sódio</p><p>Íon metálico= cálcio</p><p>Quelato= citrato de sódio + cálcio</p><p>Esse tubo pode possuir ou não aditivo, temos como exemplo o tubos</p><p>de vidro, totalmente seco, sem qualquer aditivo, chamados rotineiramente de</p><p>tubo seco. Atualmente temos o com ativador de coágulo (sílica) jateado</p><p>na parede do tubo, fazendo com que o processo de coagulação da</p><p>amostra seja acelerado. Utilizados para determinação em soro nas</p><p>áreas de Bioquímica, Imunologia e Sorologia. Podem ser utilizados</p><p>para tipagem ABO, RH, pesquisa de anticorpos, fenotipagem</p><p>eritrocitária e teste de antiglobulina direta.</p><p>Após, aproximadamente, 60 minutos de descanso é possível</p><p>observar a coagulação do sangue (retração do coágulo) e prosseguir</p><p>com a centrifugação para separar o coágulo do soro.</p><p>Contém ativador de coágulo jateado na parede do tubo que faz</p><p>com que o processo de coagulação seja acelerado e gel separador,</p><p>para obtenção de um soro com melhor qualidade. Utilizados em</p><p>rotinas de bioquímica, sorologia, imunologia, marcadores cardíacos</p><p>(Ex.: Troponina) e tumorais.</p><p>Após, aproximadamente, 60 minutos de descanso é possível</p><p>observar a coagulação do sangue (retração do coágulo) e prosseguir</p><p>com a centrifugação para separar o coágulo do soro.</p><p>Possui EDTA jateado na parede do tubo e são utilizados em</p><p>bancos de sangue. O EDTA (ácido etilenodiaminotetracético) é o</p><p>anticoagulante recomendado para rotinas de hematologia por ser o</p><p>melhor anticoagulante para a preservação da morfologia celular.</p><p>O EDTA reage através de seus dois radicais ácidos com o cálcio</p><p>plasmático, formando um quelato, tornando-se um sal insolúvel, ou</p><p>seja, ele irá se ligar aos íons cálcio da amostra e a cascata da</p><p>coagulação será interrompida.</p><p>Existem três tipos de EDTA: dissódico (Na2EDTA), dipotássico</p><p>(K2EDTA) e o tripotássico (K3EDTA). Sendo o tripotássico mais utilizado</p><p>(forma líquida) por ser mais solúvel e menos tóxico.</p><p>Agente quelante= EDTA</p><p>Íon metálico= cálcio</p><p>Quelato= EDTA + cálcio</p><p>Possuem Heparina de Lítio jateada na parede do tubo. São utilizados</p><p>quando é necessário o uso de plasma para determinações Bioquímicas. Estes</p><p>aditivos são anticoagulantes que ativam as enzimas antiplaquetárias, bloqueando</p><p>a cascata de coagulação, in vitro, A heparina é usada na forma de sais de sódio,</p><p>potássio, lítio e amônia.</p><p>No laboratório a forma recomendada e mais comumente</p><p>utilizada é a heparina de lítio.</p><p>Existem alguns parâmetros que necessitam ser dosados em amostra</p><p>anticoagulada de sangue total (Ex.: pH, pCO2, pO2 e alguns eletrólitos). Sendo</p><p>assim, a heparina é o anticoagulante de escolha da gasometria.</p><p>O uso do sangue heparinizado não é indicado para realização de</p><p>hemograma, pois altera a morfologia e coloração dos leucócitos com os corantes</p><p>de rotina e ainda permite a formação de agregados plaquetários.</p><p>Utilizados na dosagem de glicose, lactato e hemoglobina glicada no plasma.</p><p>O Fluoreto de Sódio é utilizado como inibidor glicolítico e o EDTA como</p><p>anticoagulante, preservando a morfologia celular.</p><p>O Fluoreto de Sódio é o anticoagulante de escolha para os exames de</p><p>dosagem da glicemia. Ele é capaz de prevenir que hemácias e leucócitos</p><p>metabolizem a glicose. A enzima enolase (fosfopiruvato hidratase), da via glicolítica,</p><p>é inibida. Ela é responsável pela conversão de 2-fosfoglicerato em fosfoenolpiruvato,</p><p>o nono e penúltimo passo da glicólise.</p><p>O fluoreto de sódio é considerado um anticoagulante fraco, e muitas vezes</p><p>está associado ao oxalato ou ao EDTA, por isso tem a capacidade de quelar o cálcio</p><p>e interromper as vias da coagulação.</p><p>As amostras com o anticoagulante permanecem estáveis por 8 horas a</p><p>25°C, e por 28 horas entre 2 a 8°C. Sem o fluoreto de sódio a concentração da</p><p>glicose decresce em torno de 10 mg/dL por hora a 25°C.</p><p>O plasma sanguíneo é um líquido de composição</p><p>complexa. Ele é composto, em sua maioria,</p><p>por água (cerca de 92%). Além da água, estão presentes</p><p>componentes orgânicos e inorgânicos e lipídeos.</p><p>Dentre esses, as proteínas são os componentes mais</p><p>importantes, representando uma mistura complexa de mais</p><p>de 100 tipos diferentes. A albumina é uma das</p><p>importantes, pois atua na manutenção da pressão osmótica</p><p>coloidal.</p><p>Estão presentes também os fatores da coagulação e</p><p>fibrinogênio, importantes na hemostasia.</p><p>IN VIVO</p><p>No laboratório, é possível obter o plasma da</p><p>amostra através da adição de um anticoagulante no tubo</p><p>de coleta.</p><p>Existem vários tipos de anticoagulantes, como por</p><p>exemplo o EDTA, o citrato de sódio, a heparina etc.</p><p>IN VITRO</p><p>IN VITRO</p><p>Vários exames no laboratório clínico, por exemplo os de</p><p>bioquímica, imunologia e sorologia, são realizados utilizando</p><p>o soro. Muitos podem ser feitos utilizando o plasma mas, pela</p><p>praticidade e qualidade (líquido livre de células), a maioria</p><p>dos laboratórios utilizam o soro.</p><p>O soro é obtido após a coleta, coagulação da amostra e</p><p>posterior centrifugação, sendo que nenhum anticoagulante é</p><p>utilizado. O objetivo é que haja a formação de coágulo, e nesse</p><p>processo os fatores da coagulação, plaquetas e fibrinogênio são</p><p>consumidos.</p><p>Então, de forma simplificada, o soro é o plasma sem</p><p>fibrinogênio e fatores da coagulação.</p><p>Para a obtenção do soro, atualmente são utilizados</p><p>tubos que contêm ativador de coágulo jateado na parede do</p><p>tubo, que acelera o processo de coagulação, e gel</p><p>separador para obtenção de soro com a mais alta</p><p>qualidade, proporcionando melhor eficiência no processo de</p><p>trabalho dentro do laboratório.</p><p>IN VITRO</p><p>Se homogeneizar</p><p>o Tubo novamente,</p><p>teremos sangue total,</p><p>afinal todas as fases</p><p>estão liquidas.</p><p>Nesse caso a única</p><p>fase liquida é o soro,</p><p>porque as outras duas</p><p>é gel e coagulo</p><p>ACESSO</p><p>Sangue venoso: locais de punção</p><p>• Sangue de eleição para coleta em geral</p><p>• (veias mais superficiais, mais visíveis);</p><p>• Coleta mais fácil;</p><p>• Fossa ante cubital (local de escolha): veias cubital mediana e cefálica (mais</p><p>usadas) ou basílica.</p><p>• Outras opções: dorso da mão, dorso do pé, jugular externa, mediana.</p><p>Grato pela Atenção!</p>